过氧化氢体外诱导人血管内皮细胞损伤与人参皂苷Ｒｂ１的保护效应★

目的: 内皮细胞损伤可以导致心血管疾病及经皮冠状动脉介入术后再狭窄的发生。实验以过氧化氢（H2O2）体外诱导的人脐静脉损伤内皮细胞为对象，观察人参皂苷Rb1的保护作用，并探讨其可能的作用途径。 方法：实验于2006-09/11在扬州大学医学院中西医结合肿瘤研究所完成。①实验材料：人脐静脉血管内皮细胞（武汉大学培养物保存中心）；人参皂苷Rb1(含量>95%，HPLC；由吉林大学化学学院提供)。②实验过程及分组：在体外培养的人脐静脉内皮细胞上建立H2O2损伤模型，实验分为正常对照组； H2O2损伤对照组：在培养基中加入2 mmol/L的H2O2诱导损伤4 h；人参皂苷Rb1 50，100，200 μmol/L组：分别在培养基中先加入终浓度为50，100，200 μmol/L的人参皂苷Rb1孵育24 h，再加入相同的H2O2诱导损伤。试验重复6次。③实验评估：采用四甲基偶氮唑盐比色法测定各组细胞活力；硫代巴比妥酸法测定丙二醛含量；黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶活性；酶联免疫吸附法检测血管内皮生长因子蛋白表达。 结果：①与损伤对照组比较，不同剂量组人参皂苷Rb1可以提高H2O2诱导损伤的人脐静脉内皮细胞活性（P < 0.01），并随着浓度的增高，细胞活力（A值）也增高，呈一定的剂量相关性。②与损伤对照组比较，不同剂量组人参皂苷Rb1可以降低H2O2诱导损伤的人脐静脉内皮细胞丙二醛含量、增加超氧化物歧化酶活性，随着浓度的增高，丙二醛含量降低，超氧化物歧化酶活性升高呈一定的剂量相关性。③与损伤对照组比较，不同剂量组人参皂苷Rb1可以促进H2O2诱导损伤的人脐静脉内皮细胞血管内皮生长因子蛋白的分泌，且随着人参皂苷Rb1浓度的增高，血管内皮生长因子蛋白表达也增高，呈一定的剂量相关性。 结论：人参皂苷Rb1对氧化损伤的内皮细胞具有保护作用，其作用途径可能与保护了细胞的线粒体，提高了该细胞的抗氧化酶活性，上调了血管内皮生长因子的表达有关。     

人脐静脉血管内皮细胞缺氧复氧损伤时黏结合蛋白多糖1及细胞外信号调节酶表达与肝素酶Ⅰ的调节

背景：研究发现肝素酶可以促使肿瘤细胞的syndecan-1脱落,而且低氧增加的巨噬细胞运动也可能与硫酸已酰肝素蛋白多糖的生物合成调节相关。 目的：观察肝素酶Ⅰ对缺氧复氧损伤人脐静脉血管内皮细胞黏结合蛋白多糖1及细胞外信号调节酶的调节作用。 方法：采用缺氧复氧处理肝素酶Ⅰ预培养的人脐静脉血管内皮细胞,用免疫组织化学、RT-PCR及western blot检测人脐静脉血管内皮细胞细胞黏结合蛋白多糖1、ERK2的表达。 结果与结论：单纯缺氧复氧后人脐静脉血管内皮细胞的黏结合蛋白多糖1和ERK2表达轻度上调。缺氧复氧处理肝素酶Ⅰ预培养人脐静脉血管内皮细胞的黏结合蛋白多糖1和ERK2明显上调,与单纯缺氧复氧处理人脐静脉血管内皮细胞相比差异有显著性意义。黏结合蛋白多糖1与ERK2上调表达成正相关。结果表明,黏结合蛋白多糖1和细胞外信号调节酶参与了人脐静脉血管内皮细胞缺氧复氧损伤的病理生理过程,肝素酶Ⅰ可能通过调节黏结合蛋白多糖1来影响细胞外信号调节酶的表达。     

灯盏花乙素干预缺血再灌注损伤人脐静脉内皮细胞血管内皮生长因子与蛋白激酶Cε的表达*☆◆

背景：有关灯盏花乙素的研究多集中在神经细胞、神经元及平滑肌细胞上，但对血管内皮细胞的作用研究尚少。 目的：观察灯盏花乙素预处理后对人脐静脉内皮细胞缺血再灌注损伤后血管内皮生长因子与蛋白激酶Cε表达的影响。 方法：体外培养的人脐静脉内皮细胞，分别设立对照组，模型组和及灯盏花乙素高、中、低剂量组。将人脐静脉内皮细胞予缺氧缺糖3 h/复氧糖5或24 h；灯盏花乙素高、中、低剂量组分别加1×10-5，1×10-6，1×10-7 mol/L灯盏花乙素孵育30 min，然后予缺血再灌注处理。实验结束后取细胞裂解液用Western blot检测血管内皮生长因子、蛋白激酶Cε的蛋白表达。 结果与结论：缺血3 h再灌注5及24 h，较对照组，模型组血管内皮生长因子的表达降低，细胞颗粒部分蛋白激酶Cε的表达明显增加。灯盏花乙素能促进缺血3 h再灌注5 h人脐静脉内皮细胞血管内皮生长因子的表达，尤其以灯盏花乙素高剂量和中剂量组明显，但对蛋白激酶Cε的表达没有影响。     

重组人促红细胞生成素对氧化损伤的血管内皮细胞的保护作用

目的观察重组人促红细胞生成素对氧化损伤的血管内皮细胞的保护作用以及其机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞建立过氧化氢诱导的内皮细胞氧化应激损伤模型,不同重组人促红细胞生成素预处理组,用噻唑蓝(MTT)比色检测细胞活力,黄嘌呤氧化法和硫代巴比妥法分别测定细胞上清的超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 H2O2对人脐静脉内皮细胞有损伤作用。rhEPO可增加细胞活性,抑制H2O2诱导人脐静脉内皮细胞的MDA的产生,增加SOD的活力及抑制细胞凋亡。结论重组人促红细胞生成素对氧化损伤的血管内皮细胞具有保护作用,其作用机制可能与抗氧化有关。     

三七总皂苷对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞血管细胞黏附分子1表达的影响*☆◆

背景：氧化低密度脂蛋白能诱导血管内皮细胞活化和黏附分子表达,在动脉粥样硬化形成早期起重要作用。三七总皂苷在心血管系统方面具有保护血管内皮细胞、显著改善动脉粥样硬化病变程度的药理作用。 目的：验证三七总皂苷对氧化型低密度脂蛋白损伤内皮细胞后血管细胞黏附分子1的表达及与人单核细胞黏附的影响。 设计、时间及地点：体外实验,分组对照,于2007-03/2008-05 在北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室完成。 材料：原代人脐静脉内皮细胞为美国Cascade Biologics公司产品;三七总皂苷(血塞通冻干粉针)为黑龙江珍宝岛制药有限公司产品,成分为三七总皂苷,批号：20040207。 方法：以培养原代人脐静脉内皮细胞作为靶细胞, 用氧化型低密度脂蛋白造成人脐静脉内皮细胞损伤模型。将培养的人脐静脉内皮细胞分为5组：氧化型低密度脂蛋白组(100 mg/L)、氧化型低密度脂蛋白 + 三七总皂苷组(终浓度分别为200,100, 50 mg/L)、正常对照组。 主要观察指标：光镜下观察细胞形态变化, 四甲基偶氮唑盐法检测细胞活性;采用蛋白定量法检测人脐静脉内皮细胞与单核细胞的黏附率;用流式细胞仪测定人脐静脉内皮细胞的血管细胞黏附分子1的蛋白表达。 结果：氧化型低密度脂蛋白作用人脐静脉内皮细胞后12,24 h时,人脐静脉内皮细胞损伤明显,细胞活性显著降低,人单核细胞与人脐静脉内皮细胞的黏附率显著升高, 人脐静脉内皮细胞的血管细胞黏附分子1的蛋白表达水平也均明显升高,均明显高于正常对照组(P < 0.05,P < 0.01),而三七总皂苷能使氧化型低密度脂蛋白损伤的人脐静脉内皮细胞形态趋于正常,活性增强,并明显降低人单核细胞与人脐静脉内皮细胞的黏附率,以及显著降低血管细胞黏附分子1的蛋白的表达水平,与氧化型低密度脂蛋白组相比均有显著性差异(P < 0.05,P < 0.01),这种作用随着剂量的增加而增强。 结论：三七总皂苷能通过下调血管细胞黏附分子1的表达抑制单核-血管内皮细胞黏附, 从而发挥对血管内皮细胞的保护作用,这可能是其治疗动脉硬化闭塞症的机制之一。     

组织工程化类金刚石膜复合材料与人血管内皮细胞的相容性研究

目的：验证纳米相类金刚石薄膜复合材料与人血管内皮细胞相容性,为组织工程化机械瓣膜材料的构建提供依据。 方法：利用脉冲激光沉积法在人工心脏机械瓣膜上沉积纳米相类金刚石薄膜,将人脐静脉血管内皮细胞与纳米相类金刚石薄膜复合材料体外复合培养。倒置显微镜及扫描电镜观察细胞在材料表面的生长、附着情况;MTT 法检测细胞在材料上增殖情况;同时分别测定人脐静脉血管内皮细胞在类金刚石薄膜材料和空白对照组中一氧化氮及前列环素分泌水平,以评价其活性。 结果：人脐静脉血管内皮细胞能在纳米相类金刚石薄膜复合材料上良好地黏附、增殖、生长。人脐静脉血管内皮细胞分泌一氧化氮和前列环素水平在类金刚石薄膜材料和空白对照组没有显著性差异(P > 0.05),说明纳米相类金刚石薄膜材料对人脐静脉血管内皮细胞的活性没有影响。 结论：纳米相类金刚石薄膜复合材料具有良好的细胞相容性,有可能作为组织工程化机械瓣膜材料。     

川芎嗪对血管内皮细胞抗缺氧损伤保护作用的实验观察

缺血缺氧均能使血管内皮细胞受损.本研究采用新生儿脐静脉血管内皮细胞体外原代培养方法,并施加缺氧条件,观察细胞培养上清液和细胞匀浆中丙二醛(MDA)含量变化及中药川芎嗪对其的影响.结果显示:血管内皮细胞在缺氧环境中,上清液和细胞匀浆中MDA含量明显增加(P<0.001),加入不同浓度川芎嗪后均可阻止上述现象的发生.表明:川芎嗪可明显抑制自由基的产生及细胞的脂质过氧化作用,对血管内皮细胞抗缺氧损伤具有保护作用.     

淫羊藿苷对神经细胞缺血再灌注损害的保护作用及其机制研究

目的 探讨淫羊藿苷对神经细胞缺血再灌注损害的保护作用及其机制.方法 对胎鼠脑皮质原代培养的神经元进行缺糖缺氧(OGD)和复糖复氧,制作拟缺血再灌注损害细胞模型;在OGD和复糖复氧时分别给予低、中、高剂量的淫羊藿苷干预.于复糖复氧24 h后检测细胞生存率、细胞外液乳酸脱氢酶(LDH)和细胞活性氧(ROS)水平.并与OGD模型组进行比较.结果 各淫羊藿苷剂量组的细胞存活率均明显高于OGD模型组(P＜0.05 ～0.01);淫羊藿苷中、高剂量组的细胞存活率又明显高于低剂量组(均P＜0.05);中、高剂量组间细胞存活率的差异无统计学意义.各淫羊藿苷剂量组细胞外液LDH及细胞ROS水平均明显低于OGD模型组(P ＜0.05 ～0.01),淫羊藿苷中、高剂量组这两项指标的水平又明显低于低剂量组(P＜0.05),中、高剂量组之间两项指标的差异无统计学意义.结论 淫羊藿苷对神经细胞的缺血再灌注损害有保护作用,尤其以中、高剂量显著.其机制可能是通过抑制ROS的产生,减轻氧化应激损伤实现的.     

缺氧与复氧对星形胶质细胞水通道蛋白-9表达的影响

目的探讨体外培养星形胶质细胞缺氧及复氧后水通道蛋白-9(AQP9)表达的变化特点及其所起的作用。方法取生后2d的Wistar大鼠大脑皮层进行星形胶质细胞纯培养,缺氧时间分别为:12、24、48h,并取缺氧24h后复氧12、24、48h的细胞进行存活率、乳酸脱氢酶活性的测定,采用免疫细胞化学方法检测细胞AQP9的表达。结果缺氧组及复氧组的星形胶质细胞死亡数与对照组相比无明显变化,缺氧和复氧后乳酸脱氢酶活性亦无明显改变(P(0.05),缺氧组细胞AQP9表达较对照组增高,并随缺氧时间延长而明显增高(P<0.05),复氧后24h内AQP9表达逐渐下降,24h后AQP9表达仍未恢复正常水平。结论星形胶质细胞对缺氧较为耐受,缺氧对星形胶质细胞存活能力无明显影响,缺氧引起AQP9的表达上调,而复氧使其表达明显下降。     

异甘草素对PC12细胞缺氧前后LDH和SOD活性的影响

目的观察异甘草素对缺氧诱导神经细胞损伤过程中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)的影响。方法采用体外培养PC12细胞;建立细胞缺氧损伤模型。将细胞分为C(对照组)、H(模型组,即单纯缺氧组)、H1(异甘草素低剂量组)、H2(异甘草素中剂量组)、H3(异甘草素高剂量组)。即H1、H2、H3加入对应浓度的异甘草素后与H一同放入缺氧环境中,培养时间结束后,再进行统一处理。光学显微镜观察PC12细胞形态;测定上清液中LDH、SOD的含量。结果 PC12细胞在缺氧后乳酸脱氢酶(LDH)显著升高,超氧化物歧化酶(SOD)明显减低,而经异甘草素(ISL)干预后,细胞上清液中LDH水平明显下降,SOD含量有所提高。结论缺氧对PC12细胞的增殖具有一定的抑制作用,使超氧化物歧化酶(SOD)活性降低,乳酸脱氢酶(LDH)漏出增加。异甘草素(ISL)能够逆转缺氧对PC12细胞的抑制作用,可能通过提高培养液中SOD活性,防止脂质过氧化,稳定细胞膜,降低LDH的释放,而起到细胞保护作用。     

p38MAPK在体外培养星形胶质细胞缺氧/复氧损伤中的表达

目的 建立SD大鼠星形胶质细胞缺氧复氧损伤模型,探讨p38MAPK活性变化与星形胶质细胞损伤的关系.方法 体外培养新生SD大鼠星形胶质细胞,实验设正常对照组（N）、SB203580组（SB组,10 μmol/L）、缺氧/复氧组（H/R组）和缺氧/复氧组＋SB203580阻断p38MAPK组（H/R＋SB组）.应用MTT法、WB法、ELISA法检测缺氧4 h、8 h、复氧6 h、12 h、24 h、48 h时细胞存活率,p38MAPK、p-p38（磷酸化p38MAPK）及TNF-α的变化.结果 培养星形胶质细胞GFAP阳性表达率大于97%.缺氧/复氧使星形胶质细胞活力降低,SB203580阻断p38MAPK细胞活力高于H/R组,各组星形胶质细胞总p38MAPK水平无显著变化,缺氧复氧干预后p-p38表达上调,TNF-α水平显著增高.用SB203580阻断p38MAPK通路后,SB＋H/R组较H/R组p-p38、TNF-α水平降低.SB组总p38MAPK、p-p38、TNF-α水平与N组比较无显著变化.结论 p38MAPK信号通路参与了星形胶质细胞缺氧复氧损伤过程.     

低氧预适应小鼠脑匀浆液提取液对大鼠鼠胚海马神经元缺氧复氧后神经细胞的影响

目的 探讨低氧预适应小鼠脑匀浆液提取液对大鼠鼠胚海马神经元缺氧复氧后神经细胞活性和凋亡的影响. 方法在96孔培养板中将大鼠鼠胚海马神经细胞原代培养至8 d,将培养细胞按照处理的不同分为以下5组:(1)正常对照组(仅加入PBS)、(2)H<,4>R<,48>组(缺氧4 h/复氧48h后加PBS)、(3)H0组(缺氧4 h/复氧48 h前加正常小鼠脑匀浆提取液)、(4)H1组(缺氧4h/复氧48h前加急性低氧对照小鼠脑匀浆提取液)、(5)H4组(缺氧4 h/复氧48 h前加低氧预适应小鼠脑匀浆提取液),分别用酶标仪和流式细胞仪测定神经细胞活性和凋亡情况.结果 正常对照组细胞活性明显高于H<,4>R<,48>组,H0、H1和H4组分别与H<,4>R<,48>组相比,细胞活性明显增加,且H4组细胞活性又明显高于H0、H1组;正常对照组仅有极少量的凋亡细胞,而H<,4>R<,48>组凋亡细胞显著增多,H0、H1和H4组分别与H<,4>R<,48>组相比凋亡细胞明显减少,且H4组又分别明显少于H0、H1组.结论低氧预适应小鼠脑匀浆液提取液可能通过增加大鼠鼠胚海马神经元缺氧复氧后神经细胞活性和减少神经细胞凋亡起到抗缺氧性损伤作用.     

Panax notoginseng saponin attenuates hypoxia/ reoxygenation-induced oxidative stress in cortical neurons

The present study monitored the effect of 2, 10, and 50 mg/L of Panax notoginseng saponin exposure following hypoxia-reoxygenation injury in fetal rat cortical neurons. Results showed that varying doses of Panax notoginseng saponin significantly enhanced the cell viability of neurons, reduced malondialdehyde content, increased superoxide dismutase activity, inhibited mRNA and protein expression of inducible and neuronal nitric oxide synthase, and decreased the release of nitric oxide in hypoxia/reoxygenation injured cells. In particular, 50 mg/L of Panax notoginseng saponin was the most effective dose. These findings suggest that Panax notoginseng saponin can attenuate neuronal oxidative stress injury caused by hypoxia/reoxygenation in a dose-dependent manner.     

地黄多糖调控环状RNA0010729/miR-326通路对海马神经元缺氧复氧损伤的影响

目的 探讨地黄多糖对海马神经元缺氧复氧损伤的影响及其保护机制是否与调控环状RNA 0010729(circ_0010729)和微小RNA-326(microRNA-326,miR-326)表达有关。方法 体外培养大鼠海马神经元建立缺氧复氧损伤模型; 将大鼠海马神经元分为对照组、模型组、模型+地黄多糖低剂量组、模型+地黄多糖中剂量组、模型+地黄多糖高剂量组、模型+小干扰RNA阴性对照(Small interfering RNA negative control,si-NC)组、模型+si-circ_0010729组、模型+地黄多糖高剂量+空载质粒(Empty plasmid,pcDNA)组、模型+地黄多糖高剂量+pcDNA-circ_0010729组; 流式细胞术检测细胞凋亡; 试剂盒检测丙二醛(Malonaldehyde,MDA)水平和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活性; 实时定量聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)检测circ_0010729,miR-326表达水平; 荧光素酶报告实验确定circ_0010729和miR-326靶向关系。结果 与对照组比较,模型组细胞凋亡率、MDA水平、circ_0010729表达水平升高(P<0.05),SOD活性、miR-326表达水平降低(P<0.05); 与模型组比较,模型+地黄多糖低剂量组、模型+地黄多糖中剂量组、模型+地黄多糖高剂量组细胞凋亡率、MDA水平、circ_0010729表达水平降低(P<0.05),SOD活性、miR-326表达水平升高(P<0.05); 与模型+si-NC组比较,模型+si-circ_0010729组细胞凋亡率、MDA水平降低(P<0.05),SOD活性升高(P<0.05); 与模型+地黄多糖高剂量+pcDNA组比较,模型+地黄多糖高剂量+pcDNA-circ_0010729组细胞凋亡率、MDA水平升高(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05)。结论 地黄多糖能够有效抑制缺氧复氧诱导的大鼠海马神经元凋亡和氧化损伤,其机制可能与抑制circ_0010729/miR-326通路有关。     

海洛因依赖者记忆力与氧化应激的关系

目的：探讨男性海洛因依赖者（MPHD）记忆力改变及其与氧化应激的关系。方法：对140例MPHD及75名健康者对照进行韦氏记忆量表（WMS）评估和氧化应激指标血清一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、维生素C（VC）及总抗氧化能力（T-AOC）的检测。结果：MPHD组WMS的测验成绩显著差于对照组（P〈0．05）;MPHD组血清MDA水平高于对照组（P〈0．05）,T-AOC、VC、SOD水平低于对照组（P〈0．05或P〈0．01）;随戒断时间延长,MPHD组的记忆商数（MQ）有升高的趋势（P〉0．05）,血清MDA含量有下降的趋势（P〈0．01）,T-AOC、SOD含量有升高的趋势（P〈0．05）。MPHD组血清NO及MDA水平与WMS多个因子呈负相关（P〈0．05或P〈0．01）,T-AOC、VC及SOD水平与WMS多个因子呈正相关（P〈0．05或P〈0．01）。结论：海洛因依赖者存在明显的记忆力损害与氧化抗氧化反应失衡;其记忆力损害可能与氧化应激有关,血清NO、MDA、SOD、VC、T-AOC可能是与记忆力密切相关的氧化应激指标。     

厄贝沙坦对溶血磷脂酰胆碱所致人静脉内皮细胞损害的影响

目的 观察厄贝沙坦（Irbesartan,Irb）对由溶血磷脂酰胆碱（Lysophosphatidyl choline,LPC）所致人脐静脉内皮细胞（Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）损害的影响。方法 体外培养HUVECs,分为（1）正常对照组;（2）低浓度LPC组（10μg/L）;（3）中浓度LPC组（20μg/L）;（4）高浓度LPC组（40μg/L）;（5）Irb对照组（含LPC20μg/L）;（6）低浓度Irb组(10-7μmol/L+LPC20μg/L);（7）中浓度Irb组(10-6μmol/L+LPC20μg/L);（8）高浓度Irb组(10-5μmol/L+LPC20μg/L)。采用放免及RT-PCR法分别观测LPC对HUVECs血管紧张素II(Angiotensin II,ATII)蛋白及AT1型受体（Angontensin II 1 receptor,AT1R）、AT2型受体（Angontensin II2 receptor,AT2R）mRNA（messenger Ribonucleic Acid）的表达的影响;采用化学比色法测定一氧化氮（NO）含量,一氧化氮合酶（NOS）及超氧化物歧化酶（SOD）活性;并观测使用Irb干预后的效果。结果 与正常对照组相比,LPC使HUVECs ATII蛋白及AT1RmRNA的表达显著增加,使NO含量、NOS及SOD活性显著下降;经Ibr干预后显著增加了HUVECs NO含量、NOS及SOD的活性。结论 Irb可以对LPC所致的内皮细胞损害发挥部分保护作用。     

氢气预处理对乳鼠海马神经元细胞缺氧/复氧损伤后细胞活力的影响

目的探讨氢气对乳鼠海马神经元细胞缺氧/复氧损伤后细胞活力的影响。方法原代培养的SD乳鼠海马神经元细胞,随机分成对照组,缺氧/复氧组和氢气预处理组。对照组常规培养;缺氧/复氧组在100%N2中培养15min后复氧30min;氢气预处理组在2%H2+98%N2中培养15min后复氧30min。采用MTT法检测乳鼠海马神经元细胞活力。结果氢气预处理能够增强细胞活力(P<0.05)。结论氢气预处理对海马神经元细胞缺氧/复氧损伤具有保护作用,可能与提高细胞活力有关。     

罗格列酮抑制同型半胱氨酸诱导内皮细胞凋亡

目的 探讨罗格列酮(Rosiglitazone,Ros)对同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)所致的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的影响.方法 将原代培养的HUVECs分为对照组、Hcy刺激组和Ros干预组,MTT检测细胞存活率.免疫细胞化学方法检测Bax,Bcl-2,Caspase-3蛋白表达水平.采用Annexin V/PI染色加流式细胞仪检测细胞凋亡.比色法检测细胞培养上清液MDA和SOD含量.Western blot检测PPARγ蛋白表达水平.结果 与对照组比较,Hcy组细胞存活率下降;Bax和Caspase-3表达上调,Bcl-2 和PPARγ表达下调,MDA含量增加和SOD活性降低(P<0.05),而罗格列酮逆转上述变化(P<0.05).结论 罗格列酮可抑制Hcy所致的HUVECs凋亡.     

细胞周期蛋白D1在环加氧酶-2诱导的大鼠神经细胞死亡中的作用

目的探讨环加氧酶-2诱导的大鼠神经细胞死亡的分子发病机制。方法原代培养大鼠胎鼠皮质神经细胞,给予缺氧再加氧处理;实验随机分为对照组、缺氧再加氧组及选择性抑制剂 缺氧再加氧组;用噻唑蓝比色法测定神经细胞生存率,用Western印迹法检测蛋白质的表达。结果环加氧酶-2及细胞周期蛋白D1(Cy-clinD1)在缺氧再加氧后神经细胞表达呈平行性、一致性增高;COX-2选择性抑制剂NS398能明显降低CyclinD1的表达;而CyclinD1选择性抑制剂flavopiridol对COX-2的表达则没有影响;flavopiridol还能明显改善缺氧再加氧后神经细胞的生存率(P<0.001)。结论COX-2诱导的缺氧性神经细胞死亡的分子发病机制可能是通过CyclinD1表达的增加使成熟神经细胞重新进入细胞周期而实现的。     

Effects of transection of cervical sympathetic trunk on cerebral infarct volume and oxygen free radical levels in rats with focal cerebral ischemia/reperfusion injury

BACKGROUND: Stellate ganglion block (SGB) plays a protective role on the brain, but the precise mechanism of action is not clear.OBJECTIVE: To simulate SGB by transection of the cervical sympathetic trunk (TCST) and to investigate the TCST effects on changes in cerebral infarct volume and oxygen free radical levels in rats with focal cerebral ischemia/reperfusion injury.DESIGN, TIME AND SETTING: A complete randomized control animal experiment was performed at the Institute of Neurological Diseases of Taihe Hospital, Yunyang Medical College from February to December 2005.MATERIALS: A total of 101 healthy Wistar rats, weighing 280-320g, of both genders, aged 17-18 weeks, were used in this study. 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) was purchased from Changsha Hongyuan Biological Company. Superoxide dismutase (SOD), malondialdehyde (MDA) and nitric oxide (NO) assay kits were provided by Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute.METHODS: Rats were randomly divided into a TCST group, a model group and a sham operation group. Successful models were included in the final analysis, with at least 20 rats in each group. After TCST, rat models of focal cerebral ischemia/reperfusion injury were established in the TCST group by receiving middle cerebral artery occlusion (MCAO) by the intraluminal suture method for 2 hours, followed by 24 hours of reperfusion. Rat models of focal cerebral ischemia/reperfusion injury were made in the model group. Rats in the sham operation group underwent experimental procedures as for the model group, threading depth of 10mm, and middle cerebral artery was not ligated.MAIN OUTCOME MEASURES: Brain tissue sections of ten rats from each group were used to measure cerebral infarct volume by TTC staining. Brain tissue homogenate of another ten rats from each group was used to detect SOD activities, MDA contents and NO levels. Rat neurological function was assessed by neurobehavioral measures.RESULTS: Cerebral infarct volume was bigger in the model group than in the TCST group (P<0.05). Twenty four hours after cerebral ischemia/reperfusion, SOD activities were lower, whereas MDA contents and NO levels were higher in the TCST and model groups, compared with the sham operation group (P<0.05 or P<0.01). Compared with the model group, SOD activities were higher, whereas MDA contents and NO levels were lower in the TCST group (P<0.05).CONCLUSION: After TCST, cerebral infarct volume is reduced, SOD activities are increased, and MDA contents and NO levels are decreased compared to the model group in rats with focal cerebral ischemia/reperfusion injury. These changes may be associated with TCST.