2型糖尿病患者外周血miRNA表达谱差异研究

目的 对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者外周血血清miRNA差异表达分析,为筛选出T2DM发生发展有关的miRNA分子标记物奠定基础,从而为T2DM预防、早期诊断和治疗方案提供指导。方法 采用GeneChip^TM miRNA 4.0 Array筛选3组受试者外周血血清(T2DM组、T1DM组、对照组)的差异miRNA,并对差异miRNA进行靶基因预测和靶基因信号通路富集分析(KEGG)。结果 T2DM组分别与对照组,T1DM组相比,hsa-miR-505-3p和hsa-miR-548an均上调,hsa-miR-296-3p,hsa-miR-3160-5p,hsa-miR-33a-5p,hsa-miR-572和hsa-miR-96-5p均下调。通过靶基因预测和Pathway分析,筛选出5个miRNA(hsa-miR-505-3p,hsa-miR-548an,hsa-miR-296-3p,hsa-miR-3160-5p,hsa-miR-33a-5p,hsa-miR-572和hsa-miR-96-5p)、7个基因(MTOR,SLC2A2,PRKCE,IRS2,IRS1,MAPK8,MAPK10)可能与2型糖尿病胰岛素抵抗相关。结论 该研究筛选出的5个miRNA和7个基因,可为2型糖尿病胰岛素抵抗的研究提供理论基础。     

HBV相关慢加急性肝衰竭患者血清miRNA表达谱及临床预测价值

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)与慢性乙型肝炎(CHB)患者血清中微小RNA(miRNA)差异表达谱,寻找HBV-ACLF具有预测价值的miRNA标志物。方法采用miRNA芯片技术检测10例HBV-ACLF患者和5例CHB患者血清中miRNA的差异表达,筛选出差异明显的miRNA,应用受试者工作特征曲线(ROC曲线)进一步评价其在HBV-ACLF中的预测价值。结果与CHB组相比,HBV-ACLF组中17种miRNA表达下调,两组之间差异有统计学意义(P0.05),9种miRNA表达上调,差异有统计学意义(P0.05)。HBV-ACLF组表达上调超过2倍的miRNA有hsa-miR-4281、hsa-miR-6126、hsa-miR-1275,表达下调超过2倍的miRNA有hsa-miR-15a-5p、hsa-miR-92b-3p、hsa-miR-25-3p、hsa-miR-92a-3p、hsa-miR-106b-5p、hsa-miR-140-3p、hsa-miR-16-5p、hsa-miR-451a、hsa-miR-486-5p。ROC曲线分析结果表明,hsa-miR-4281、hsa-miR-6126、hsa-miR-16-5p、hsa-miR-25-3p等4种miRNA在ROC曲线下面积超过0.800,其中hsa-miR-4281对HBVACLF预测的灵敏度及特异度最高。结论HBV-ACLF与CHB患者血清中miRNA谱存在表达差异,hsa-miR-4281在预测HBV-ACLF严重性方面有一定价值。     

男性不育症患者精浆外泌体miR-202-5p水平变化及临床意义

目的探讨男性不育症患者精浆外泌体微小RNA-202-5p(miR-202-5p)水平变化及其在男性生殖中的临床意义。方法选取于解放军东部战区总医院、江苏省中医院及温州医科大学附属第一医院就诊的男性不育症患者107例为研究对象,其中无精症患者53例,弱精症患者54例;另选取同期招募的53例正常生育的健康男性为对照组。采用实时荧光定量PCR技术检测精浆外泌体miR-202-5p水平,分析其在男性不育症中的诊断价值及与精液参数的相关性,采用生物信息学分析软件预测其靶基因、相关通路及靶蛋白相互作用网络。结果与对照组比较,弱精症患者精浆外泌体miR-202-5p水平明显增加(P0.05),无精症患者精浆外泌体miR-202-5p水平明显降低(P0.05);无精症患者精浆外泌体miR-202-5p水平较弱精症患者明显降低(P0.05)。受试者工作特征曲线分析结果显示,精浆外泌体miR-202-5p诊断弱精症的曲线下面积(AUC)为0.664,诊断无精症的AUC为0.785,对弱精症和无精症鉴别诊断的AUC为0.878。弱精症患者精浆外泌体miR-202-5p水平与a+b级前向运动精子比例呈负相关(r=-0.312,P0.05),与不动精子比例呈正相关(r=0.308,P0.05)。精浆外泌体miR-202-5p是弱精症和无精症发生的危险因素(P0.05)。生物信息学分析发现,miR-202-5p的靶基因明显富集于生殖和精子功能密切相关的蛋白调控通路。结论男性不育症患者精浆外泌体miR-202-5p水平与正常生育的健康男性存在明显差异,且与精子活力密切相关,可能参与了男性不育症的发生、发展过程。     

男性不育患者精浆miR-135a-5p 和miR-135b-5p水平检测的价值*

摘要:目的探讨精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p表达特征及其在男性不育患者精浆中变化和价值。方法选取2019年1月至2021年12月于江苏省中医院检验科留存的血清、晨尿胸水、脑脊液和精浆标本各30例;进一步选取2010年至2019年江苏省中医院和南京大学医学院附属金陵医院冻存的非梗阻性无精子症患者精浆标本、弱精子症患者精浆标本及正常对照精浆标本各54例。实时荧光定量PCR( RT-qPCR)检测不同体液、不育患者精浆和正常对照精浆中miR-135a-5p 和miR-135b-5p表达。ROC曲线分析精浆miR-135a-5p、miR-135b-5p水平区分男性不育患者及对照的ROC曲线下面积(AUCROC);相关性分析精浆miR-135a-5p . miR-135b-5p水平与精液参数的相关性。结果5 种不同体液间miR-135a-5p和miR-135b-5p水平差异具有统计学意义(H=64.88 ,P<0.01和H=64.7,P<0.01),二者在血清和精浆中水平均最高,在尿液中水平均最低。无精子症组、弱精子症组及正常对照组精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平差异具有统计学意义(H=32.14, P<0.01;H=21.37 ,P<0.01)。与正常对照组相比,无精子症组2种miRNA水平均显著降低( U= 687 ,P<0.01;U=843,P<0.01);弱精子症组与正常对照组差异无统计学意义(P均>0.05);无精子症组与弱精子症组精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平具有显著差异(U=635,P<0.01;U= 779, P<0.01)。精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p区分无精子症与正常对照及弱精子症患者AUCROC 分别为0.764(95%CI:0.675~ 0.854) ,0.711( 95%CI:0.612~0.810)和0.782( 95%C1:0.695 ~0.869) ,0.733(95% CI:0.637-0.829)。相关性分析结果显示,精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平与精子浓度、精子活动率、前向运动精子百分率和非前向运动精子百分率均呈正相关(P均<0.01)。结论miR-135a-5p 和miR-135b-5p 为精浆高表达miRNA,在无精子症患者中显著降低,二者与男性不育发生关系密切。     

氧化低密度脂蛋白诱导人脐静脉内皮细胞凋亡中microRNA表达谱分析

目的:研究氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡过程中micro-RNA(miRNA)表达谱的变化,对差异miRNA调控的靶基因进行初步预测。方法:建立体外ox-LDL诱导HUVECs凋亡模型,采用miRNA芯片技术筛选表达变化显著的miRNA,实时荧光定量PCR验证结果,并对差异miRNA调控的靶基因进行生物信息学分析。结果:miRNA芯片检测发现,在ox-LDL诱导HUVECs凋亡过程中有4个表达上调和11个表达下调的miRNA。实时荧光定量PCR对其中2个上调(hsa-miR-142-3p、hsa-miR-365)和2个下调(hsa-miR-590-5p、hsa-miR-33a)miRNA的验证结果与芯片检测所示有较好的一致性。生物信息学分析发现,差异miRNA调控的靶基因与细胞增殖、凋亡、代谢及原癌基因表达等生物学功能相关。结论:经ox-LDL诱导凋亡的HUVECs其miRNA表达谱发生明显改变,提示miRNA可能参与内皮细胞功能障碍和动脉粥样硬化的发生。     

特应性皮炎患者血清microRNA的差异性表达

目的探讨深圳地区特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)患者血清microRNA(miRNA)表达差异,为AD的早期诊断提供生物标志物。方法提取500例AD患者(AD组)和200例正常人(正常对照组)血清总RNA并进行miRNA测序,用实时荧光定量PCR验证差异表达的miRNA。结果与正常对照组相比,AD组患者血清中发现28个具有2倍以上差异的miRNA,其中21个miRNA在外周血血清中含量升高,7个miRNA在外周血血清中含量降低;对28个差异表达的miRNA采用实时荧光定量PCR进行验证,发现hsa-miR-186-5p、hsa-miR-409-3p、hsa-miR-423-5p、hsa-miR-6852-5p表达在AD患者外周血血清中升高。结论hsa-miR-186-5p、hsa-miR-409-3p、hsa-miR-423-5p、hsa-miR-6852-5p在AD的发病过程中可能起关键作用,对AD早期临床诊断有重要意义。     

丙型肝炎病毒调控ADAR1逃避先天免疫的机制研究

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)调控ADAR1逃避先天免疫的潜在机制。方法通过siRNA敲低ADAR1(敲低组)或GFP(对照组)后,检测炎症因子和干扰素的mRNA水平、IFNγ的分泌水平和HCV的复制水平。HCV感染Huh7细胞(HCV组)或不感染Huh7细胞(MOCK组)后,检测ADAR1的mRNA水平和蛋白水平,以及ADAR1的启动子活性。通过miRDB在线预测ADAR1的miRNA。HCV感染Huh7细胞后,检测上述miRNA的表达水平。过表达差异miRNA或negative control(对照组)后检测ADAR1的表达水平。结果与对照组比较,敲低组炎症因子和干扰素的mRNA水平均上升,IFNγ的分泌水平上升,HCV的复制水平下降(P0.05)。与MOCK组比较,HCV组ADAR1在mRNA水平和蛋白水平均明显上升(P 0.05),但是,ADAR1的启动子活性没有明显变化(P0.05)。miRDB在线分析发现有多种潜在靶向ADAR1的miRNA。HCV感染Huh7细胞后,通过实时荧光定量PCR检测上述miRNA,与对照组比较,hsa-miR-613、hsa-miR-206、hsa-miR-135b-5p、hsa-miR-135a-5p、hsa-miR-6803-5p、hsa-miR-4530、hsa-miR-3915的表达水平均下降,差异有统计学意义(P0.05)。过表达上述miRNA后,与对照组比较,hsa-miR-135b-5p和hsa-miR-135a-5p能够在mRNA水平减少ADAR1的表达(P0.05)。与对照组比较,过表达hsa-miR-135a-5p或miR-135b-5p后,ADAR1的表达水平均下降(P0.05)、IFNγ的分泌水平上升(P0.05)、HCV的复制水平下降(P0.05);与对照组比较,敲低hsa-miR-135a-5p或miR-135b-5p后,ADAR1的表达水平均上升,IFNγ的分泌水平下降,HCV的复制水平上升(P0.05)。结论 HCV感染后,Huh7细胞中hsa-miR-135a-5p和miR-135b-5p的表达水平下降,其靶向ADAR1mRNA的3′端非编码区的水平下降,随后ADAR1的表达水平上升,抑制了宿主的先天免疫,促进了HCV的复制。     

青少年肥胖非酒精性脂肪肝患者血清外泌体源性miRNA表达谱的初步研究

目的分析非酒精性脂肪肝(NAFLD)与单纯肥胖对照者血清外泌体微小RNA(miRNA)表达谱的差异,为筛选外泌体源性miRNA作为NAFLD早期诊断标记物提供依据。方法选择5例NAFLD患者(NAFLD组)和5例单纯肥胖患者(对照组),采集外周血血清,使用高通量测序方法测定外泌体源性miRNA表达谱,并通过实时荧光定量PCR验证部分差异性表达的miRNA,预测靶基因及功能分析。结果NAFLD组与对照组相比差异表达的外泌体源性miRNA共30种(P<0.05),当倍比值>2且P<0.05的差异性miRNA有9种,其中5种表达上调(miR-122-5p,miR-3591-3p,miR-335-5p,let-7g-3p和miR-27a-5p),4种表达下调(miR-6753-3p,miR-129-2-3p,miR-6760-5p,miR-6516);对miR-122-5p、miR-335-5p、miR-27a-5p进行实时荧光定量PCR,结果与测序结果一致。差异表达miRNA的功能分析结果提示涉及葡萄糖稳态、脂质代谢、肝脏发育等。结论NAFLD组血清外泌体源性miRNA表达谱与对照组有明显差异,miR-122-5p、miR-335-5p、miR-27a-5p可能参与了NAFLD的发病机制,可以作为NAFLD早期诊断的标记物。     

氯化锂-匹罗卡品诱导癫痫大鼠海马组织差异表达 circRNA的筛选及功能分析

目的：探究氯化锂-匹罗卡品诱导癫痫大鼠海马组织差异表达共价闭合、单链环状RNA(circRNA)及功能分析。方法：通过构建氯化锂-匹罗卡品癫痫大鼠模型,取癫痫大鼠及对照大鼠海马组织通过Illumina高通量测序平台进行转录组测序,并通过EdgeR包对circRNA进行差异分析、通过R语言进行GO及KEGG信号通路富集分析,通过Targetscan与miRanda软件进行circRNA与miRNA互作分析寻找circRNA核心调控靶标。结果：对照组及癫痫组大鼠海马的circRNA进行差异分析获得的262个差异表达circRNA,信号通路富集分析发现与胞蛋白修饰过程、蛋白质变性过程、树突形态调控、神经元分化调节、离子跨膜转运的调节等生物过程相关。并进一步确定了可能与circRNA存在互作的核心调控miRNA,包括miR-322-5p、miR-322-3p、miR-323-5p、miR-323-3p、miR-301a-5p、miR-301a-3p、miR-324-5p、miR-324-3p等。结论：本研究筛选了氯化锂-匹罗卡品点燃癫痫大鼠与正常大鼠脑组织差异circRNA,系统地分析了其可能...     

隐匿性乙型肝炎病毒感染相关miRNAs筛选及其生物信息学分析

目的研究OBI患者血浆特征性miRNA表达谱,为进一步明确miRNAs在其发生和发展中相关分子机制奠定基础。方法收集2017年11月—2018年9月在本站初筛HBsAg-/HBV-DNA+并经随访确诊为OBI的无偿献血者血浆,同时收集年龄、性别相匹配的23名健康献血者血浆。从中分别选取3例应用miRNA测序技术进行miRNA表达谱分析;随后采用qRT-PCR对有显著差异表达的miRNAs进行验证;最后通过TargetScan7.1和miRDB v5对筛选出的miRNAs的靶基因进行预测,并对靶基因进行KEGG通路和GO功能富集分析。结果与健康献血者相比,OBI患者血浆中有32个miRNAs表达存在统计学差异(FC≥1.5,P0.1,CPM≥1),包括16个上调的hsa-miR-7706,-511-5p,-1299,-3913-5p,-99b-3p,-503-5p,-296-3p,-501-3p,-3158-3p,-3615,-15b-5p,-451a,-486-5p,-25-3p,-106b-3p,-92a-3p,和16个下调的hsa-miR-187-3p,-219a-5p,-491-5p,-514a-3p,-221-5p,-132-5p,-203a-3p,-3168,-206,-218-5p,-1224-5p,-1-3p,-9-5p,-30a-5p,-30c-5p,let-7f-2-3p。生物信息学分析表明,这些差异表达的miRNAs主要参与基因表达和转录、细胞发育和代谢、蛋白修饰和激酶活性调控等相关的多种生物学过程,以及包括PI3K/Akt在内的多条信号通路。最后,qRT-PCR验证结果显示,在OBI患者血浆中hsa-miR-486-5p,-25-3p和-92a-3p表达量显著高于健康献血者,hsa-miR-1-3p显著低于健康献血者(P均0.05),与测序结果相符合;尽管hsa-miR-206表达量也低于健康献血者,但无统计学意义。结论在OBI患者血浆中同样存在特征性miRNA表达谱,其在HBV感染的特定过程中可能起到重要作用,将其筛选鉴定出有助于对OBI的病理机制的阐述和将来在临床辅助筛查诊断中的应用。     

基于TCGA数据的黑色素瘤预后相关miRNA模型

目的对黑色素瘤患者进行精准的分组以提高治疗的针对性,建立与患者预后密切相关的mi RNAs风险评分模型。方法通过收集TCGA数据库中黑色素瘤患者的mi RNA表达谱和临床资料相关数据,并采用单因素和多因素COX比例风险回归模型进行分析并构建风险评分模型。结果通过单因素和多因素COX比例风险回归分析筛选出6个与黑色素瘤预后密切相关的mi RNA分子,分别为hsa-mi R-7702,hsa-mi R-4442,hsa-mi R-4444-2,hsa-mi R-4461,hsa-mi R-203b和hsa-mi R-1910,经多因素COX比例风险回归分析后建立风险评分值的风险评分公式:Risk-Score=(0.245 2×mi R-4461)-(0.101 8×mi R-7702)-(0.197 5×mi R-4442)+(0.108 3×mi R-203b)+(0.133 3×mi R-1910)-(0.173 3×mi R-4444-2)。结论风险评分模型可以有效的根据患者的预后将黑色素瘤患者进行分组,具有较高的可信度,或可以成为指导黑色素瘤精准治疗的新方法。     

Upregulation of miR-23a∼27a∼24-2 Cluster Induces Caspase-Dependent and -Independent Apoptosis in Human Embryonic Kidney Cells

miRNAs have emerged as important players in the regulation of gene expression and their deregulation is a common feature in a variety of diseases, especially cancer. Currently, many efforts are focused on studying miRNA expression patterns, as well as miRNA target validation. Here, we show that the over expression of miR-23a~27a~24-2 cluster in HEK293T cells induces apoptosis by caspase-dependent as well as caspase-independent pathway as proved by the annexin assay, caspase activation, release of cytochrome-c and AIF (apoptosis inducing factor) from mitochondria. Furthermore, the over expressed cluster modulates the expression of a number of genes involved in apoptosis including FADD (Fas Associated protein with Death Domain). Bioinformatically, FADD is predicted to be the target of hsa-miR-27a and interestingly, FADD protein was found to be up regulated consistent with very less expression of hsa-miR-27a in HEK293T cells. This effect was direct, as hsa-miR-27a negatively regulated the expression of FADD 3′UTR based reporter construct. Moreover, we also showed that over expression of miR-23a~27a~24-2 sensitized HEK293T cells to TNF-α cytotoxicity. Taken together, our study demonstrates that enhanced TNF-α induced apoptosis in HEK293T cells by over expression of miR-23a~27a~24-2 cluster provides new insights in the development of novel therapeutics for cancer.     

乙型肝炎伴早期肝硬化microRNA表达谱及其诊断价值

目的探讨乙型肝炎伴早期肝硬化和乙型肝炎microRNA(miRNA)差异表达谱,寻找具有诊断价值的miRNA标志物。方法利用miRNA芯片技术检测7例乙型肝炎伴早期肝硬化患者和11例乙型肝炎患者肝组织中miRNA的表达水平。应用ROC曲线评价各miRNA的诊断价值。结果与单纯肝炎组织相比,伴早期肝硬化的肝炎组织中表达上调超过1.5倍的miRNA有miR-625-3p、miR-325、miR-596等5种,表达下调超过1.5倍的miRNA有miR-365、miR-362-5p、miR-139-5p等10种。ROC曲线分析结果表明,miR-139-5p诊断乙型肝炎伴早期肝硬化的特异性和敏感性最高。结论乙型肝炎伴早期肝硬化组织和乙型肝炎组织相比有其特异的miRNA表达谱,miR-139-5p可能是诊断乙型肝炎伴早期肝硬化的一个标志物。     

lncRNA RPL34-AS1调控miR-670-5p/SMAD4对胃癌细胞生物学行为的影响

目的探讨lncRNA RPL34-AS1对胃癌细胞生物学行为的影响及其对miR-670-5p/SMAD4分子轴的调控作用。方法回顾性收集2018年5月至2019年6月期间临沂市肿瘤医院收治的33例胃癌患者的癌组织及其癌旁组织标本。QRT-PCR检测RPL34-AS1、miR-670-5p的表达量,蛋白质印迹法检测SMAD4表达。体外培养人胃癌细胞HGC-27,实验分组:pc DNA组(转染RPL34-AS1过表达载体的阴性对照)、pc DNA-RPL34-AS1组(转染RPL34-AS1过表达载体)、anti-miR-NC组(转染miR-670-5p特异性寡核苷酸抑制剂的阴性对照)、anti-miR-670-5p组(转染miR-670-5p特异性寡核苷酸抑制剂)、pc DNA-RPL34-AS1+miR-NC组(共转染pc DNA-RPL34-AS1与阴性对照mimic NC序列)、pc DNA-RPL34-AS1+miR-670-5p组(共转染pc DNA-RPL34-AS1与miR-670-5p寡核苷酸模拟物)。MTT与平板克隆形成实验检测细胞增殖与克隆形成数,流式细胞术检测细胞凋...     

男性不育症患者精浆中miR-145 的表达水平及其临床意义

目的　探讨男性不育症患者精浆中miR-145 的表达水平及其临床意义。方法　招募2017 年1 月~ 2018 年9 月 男性不育症患者130 例和同期体检正常的生育男性50 例为正常对照组。采用实时荧光定量PCR 检测精浆中miR-145 的 表达水平,精液常规参数采用WLJY-9000 伟力彩色精子检测系统进行分析。应用ROC 曲线分析miR-145 对男性不育症 的诊断价值,采用Pearson 相关分析精浆中miR-145 表达水平与精液参数的相关性。结果　男性不育症组精浆中miR- 145 表达水平明显高于对照组（3.92±0.86 vs 1.16±0.35）,而男性不育症组精子浓度（70.24±28.60 vs 112.50±46.35） ×106/mL、精子存活率（38.40±7.60 vs 73.84±5.82）%、前向运动精子百分率（17.52±9.73 vs 46.20±5.30）% 及正常 精子形态百分率（2.60±1.42 vs 9.25±1.70）% 明显低于对照组,差异均有统计学意义（t=4.852~11.238,均P<0.01）。 ROC 曲线分析显示,精浆中miR-145 表达水平诊断男性不育症的曲线下面积（AUC）为0.864（95%CI:0.807~0.925）, 其最佳诊断截断值为2.15,敏感度和特异度分别为92.8% 和75.0%。相关分析显示,男性不育症患者精浆中miR-145 表 达水平与精子浓度、精子存活率、前向运动精子百分率均呈正相关（r=0.427,0.604,0.538,均P<0.01）。结论　精浆 中miR-145 表达水平在男性不育症患者中明显上调,且精子浓度、精子存活率、前向运动精子百分率呈正相关,有望 作为男性不育症的辅助诊断指标。     

利用芯片技术筛选肝癌早期复发密切相关的microRNA

目的:应用miRNA芯片技术筛选肝癌早期复发密切相关的miRNA,为进一步深入探讨miRNA在介导肝癌高侵袭性及术后早期复发中的作用打下基础。方法:从本院肝癌标本库中选取10例肝癌患者进入本研究,其中早期复发组(术后第1年出现肝内复发病灶)和非早期复发组(术后2年以上未出现肝癌复发或转移)各5例,抽提总RNA并分离出小分子RNA进行Cy3荧光标记,将标记的小分子RNA与miRNA芯片进行杂交反应,分析差异表达的miRNA。结果:相对于非早期复发组,早期复发组肿瘤标本中有miR-602、miR-451、miR-144和miR-486-5p等4个miRNAs表达显著上调(上调倍数>2.0);有miR-551b、miR-96和miR-502-3p等3个miRNAs表达显著下调(下调倍数<0.5)。结论:筛选得到肝癌早期复发的miRNA差异表达谱,其可能与肝癌的早期复发发生发展有关。     

Expression profile of plasma microRNAs in nonsyndromic cleft lip and their clinical significance as biomarkers

ObjectiveThe aim of this study was to determine the expression profile of plasma microRNAs in nonsyndromic cleft lip (NSCL) and their clinical significance as biomarkers.MethodsAgilent human miRNA microarray chips were used to analyze three NSCL plasma samples (mixed as CL group) and three normal plasma samples (mixed as Control group). Six selected plasma miRNAs were validated using qRT-PCR between another 13 CL and 11 healthy children. The receiver operating characteristic (ROC) curve analysis was applied for three elevated miRNAs, miR-16-2-3p, miR-365a-3p and miR-877-5p. Their target genes were further assessed using gene ontology and pathway analysis.ResultsThe plasma miRNA differentially expressed (fold change ≥2) amounted to 305. In particular, it had been validated that miR-16-2-3p, miR-365a-3p and miR-877-5p were elevated in NSCL plasma samples. ROC curve analysis revealed that each microRNA was able to significantly discriminate NSCL subjects from normal controls. Gene ontology and pathway analysis revealed that many processes over-represented in CL are related to system development process, regulation of nitrogen compound metabolic process, FoxO signaling pathway and the ErbB signaling pathway.ConclusionOur study demonstrated that plasma miR-16-2-3p, miR-365a-3p and miR-877-5p might become biomarkers to diagnose NSCL and dysregulation of these miRNAs might be involved in the progression of NSCL.     

Synergistic effects of miR-708-5p and miR-708-3p accelerate the progression of osteoporosis

BackgroundBone homeostasis is a tightly orchestrated process maintained by osteoblasts and osteoclasts, and a disruption of their steady-state equilibrium can lead to the occurrence of osteoporosis (OP).MethodsWe investigated the differential expression of micro (mi)RNAs in the bone tissues of a postmenopausal osteoporosis rat model induced by ovariectomy (OVX). Real-time PCR was used to verify the differentially expressed miRNAs in bone samples from OP patients and controls. The specific targets of two differentially expressed miRNAs in osteogenic or osteoclast differentiation were determined by bioinformatic prediction, and mRNA and protein detection.ResultsmiR-708-5p and miR-708-3p were highly expressed in the bone tissue of OVX rats and OP patients. miR-708-5p negatively regulated osteoblast differentiation in bone marrow mesenchymal stem cells by targeting SMAD specific E3 ubiquitin protein ligase 2, while miR-708-3p positively regulated osteoclast differentiation in bone marrow monocytes by targeting cerebellar degeneration associated protein 1 antisense RNA. miR-708-5p and miR-708-3p were shown to originate from the same precursor miRNA and to have a synergistic effect on the development of osteoporosis with different temporal and spatial patterns.ConclusionOur findings provide a referential theoretical basis and targets for the prevention and treatment of osteoporosis.