交锁髓内钉与钢板内同定微创治疗胫腓骨多段骨折的病例对照研究

目的 :采用小鼠气囊模型评价柚皮苷对聚甲基丙烯酸甲酯(Polymethylmethacrylate,PMMA)诱发的破骨细胞性骨溶解的作用。方法:选取48只雌性8~10周龄Balb/c小鼠纳入研究,采用背部注入空气法在其中的32只小鼠中建立气囊模型,植入同种系小鼠颅骨(颅骨源自其余的16只小鼠)。实验共分为4组(150 mg/kg柚皮苷治疗组、30 mg/kg柚皮苷治疗组、PBS空白对照组、DMSO载体对照组),每组8只动物。对两个柚皮苷治疗组和DMSO载体对照组的小鼠使用PMMA颗粒刺激,每组8只相应浓度进行处理,颗粒刺激第7天收集囊膜和囊内植入骨进行抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色、Ca2+释放以及改良Masson染色病理分析进行评价,观察柚皮苷的治疗作用。结果:与DMSO载体组相比,柚皮苷治疗组降低了TRAP阳性细胞浸润的数量,差异有统计学意义(P<0.01);其中150 mg/kg浓度优于30 mg/kg浓度(8.90±1.75 vs 15.23±1.86)。在气囊模型骨吸收冲洗液中,柚皮苷能降低钙的释放,特别是150 mg/kg浓度组更为明显(P<0.05)。改良的Masson染色显示柚皮苷可减少PMMA刺激所致的骨胶原的丢失,但150 mg/kg浓度组作用大于30 mg/kg浓度组。大体及病理切片显示两种浓度的柚皮苷显著降低PMMA刺激所致的炎性反应,表现为气囊厚度的减低和炎性细胞浸润数量的减少。结论 :柚皮苷抑制PMMA诱导的破骨细胞形成,有效缓解PMMA诱发的炎性反应以及随后发生的急性骨吸收。     

柚皮苷抑制胶原诱导小鼠关节炎症作用机制的实验研究

目的检测柚皮苷干预后胶原诱导(CIA)小鼠关节炎症相关指标的变化。方法选择雄性DBA1/J小鼠35只,随机分为正常组(5只)和实验组(30只)。实验组炎症评分达2分以上再分为骨碎补组(10只)、CIA模型组(10只)、柚皮苷组(10只)。各组均以灌胃方式给药,每天1次,连续20次。给药20 d后处死小鼠,ELISA方法测定小鼠血清中IL-6、TNF-α的水平,HE染色观察滑膜炎症表达情况,免疫组化法检测小鼠膝关节滑膜组织中HIF-1α、CXCR4蛋白的表达情况。结果给药第11天开始,柚皮苷组炎症评分低于CIA模型组,差异有统计学意义(P0.05);给药第15天开始,柚皮苷组与骨碎补组炎症评分均低于CIA模型组,差异有统计学意义(P0.05);给药第19天,骨碎补组与柚皮苷组炎症评分均有降低表现,且柚皮苷组炎症评分较骨碎补组低,差异有统计学意义(P0.05)。柚皮苷、骨碎补组较CIA模型组的IL-6、TNF-α水平均下降,差异有统计学意义(P0.01)。柚皮苷组的IL-6水平较骨碎补组低,TNF-α水平较骨碎补组高,但差异无统计学意义(P0.05)。柚皮苷组HIF-1α、CXCR4的IOD值低于CIA模型组,差异有统计学意义(P0.05);骨碎补组HIF-1α、CXCR4的IOD值与CIA模型组比较差异无统计学意义(P0.05);骨碎补组与柚皮苷组2组间差异无统计学意义(P0.05)。柚皮苷、骨碎补组染色阳性区域Area值均低于CIA模型组,差异有统计学意义(P0.05);骨碎补组与柚皮苷组2组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论柚皮苷对HIF-1α上游的炎症因子IL-6、TNF-α及下游的CXCR4都具有一定调控作用,显著的降低了CIA小鼠炎症反应。     

柚皮苷联合脉冲电磁场对大鼠股骨骨折愈合的影响

[目的]应用柚皮苷联合脉冲电磁场对大鼠股骨骨折模型进行干预,探讨其对大鼠股骨骨折愈合的影响及其机制。[方法]选用在相同条件下喂养的6~8周清洁级SD大鼠,制作成股骨骨折模型,按照组内均衡一致原则随机分为4组,即对照组(Con组)、脉冲电磁场组(M组)、柚皮苷组(Y组)、柚皮苷联合脉冲电磁场组(Y+M组),每组9只。于造模完成后第2d开始处理,Con组行生理盐水灌胃,M组脉冲电磁场刺激,Y组柚皮苷灌胃,Y+M组柚皮苷灌胃联合脉冲电磁场刺激。观察4种不同处理方法对大鼠股骨骨折愈合的影响。[结果]术后3、6周,DR显示Y+M组骨折愈合快于Con组、M组、Y组,差异具有统计学意义;Micro-CT显示Y+M组骨矿物质含量、骨体积分数高于Con组、M组、Y组,差异具有统计学意义;术后6周,组织学观察显示Y+M组纤维骨痂形成、软骨内成骨优于Con组、M组、Y组,差异具有统计学意义;Real-time PCR显示Y组、Y+M组上调骨痂组织中OPG mRNA表达,抑制RANKL mRNA表达,M组上调OPG mRNA表达增强,而对RANKL mRNA表达无明显影响。[结论]柚皮苷联合脉冲电磁场可显著促进骨折愈合,柚皮苷组促进骨折愈合强于脉冲电磁场组,柚皮苷联合脉冲电磁场可能通过上调OPG mRNA表达,抑制RANKL mRNA表达,促进骨折愈合。     

柚皮苷促进成骨细胞分化并有效改善卵巢切除所致的骨质疏松

目的 评价柚皮苷对成骨细胞增殖与分化的作用,并采用大鼠骨质疏松模型评价柚皮苷的治疗效果.方法 采用不同浓度的柚皮苷处理大鼠骨髓基质细胞,观察其增殖、分化与功能的改变.采用低、中、高三种不同剂量的柚皮苷作为治疗组,磷酸缓冲液(PBS)作为对照组,对卵巢摘除诱发骨质疏松的大鼠灌胃2个月.应用骨质疏松大鼠右侧股骨的X线照片和显微CT扫描测量骨矿密度以及骨体积分数,使用骨质疏松大鼠左侧胫骨的病理切片检测组间骨小梁厚度和骨小梁间隙的变化.结果 体外研究表明柚皮苷可有效增加骨髓基质细胞的增殖和成骨分化,浓度为10 μg/ml时对骨钙素的表达具有最显著的作用.骨髓基质细胞对柚皮苷的治疗呈现一种延迟反应模式.柚皮苷并有效逆转了卵巢切除导致的骨质疏松,增加了骨密度、骨容量和骨小梁厚度.300 mg/kg(中剂量)是具有满意治疗效果的最优剂量.结论 柚皮苷促进骨髓基质细胞的分化与增殖,增加骨钙素的表达,它能有效逆转卵巢切除大鼠的骨质疏松过程.本研究表明柚皮苷是治疗骨质疏松的潜在有效药物.     

柚皮苷通过HIF-1α/VEGF信号促进H型血管抗骨质疏松的研究

目的 观察柚皮苷对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织HIF-1α/VEGF信号通路和H型血管形成的影响,探讨柚皮苷防治骨质疏松症的作用机制。方法 建立去卵巢骨质疏松大鼠模型（随机将36只大鼠分为去卵巢组、假手术组和柚皮苷治疗组）。柚皮苷治疗３个月后,检测血清和骨髓上清骨代谢指标和HIF-1α/VEGF信号通路变化,检测骨密度(bone mineral density, BMD)、骨微结构及H型血管变化。结果 柚皮苷治疗组大鼠血清中成骨代谢指标[骨特异性碱性磷酸酶(BALP)、骨钙素(BGP)、I型原胶原分子N 端前肽(PINP)]升高;而骨吸收标志物血清C端交联肽（CTX）降低;HIF-1α在血清和骨髓上清中表达均升高;VEGF在骨髓上清中表达升高,而血清中无明显改变;BMD和Micro-CT结果显示柚皮苷治疗组大鼠骨密度和骨量增加;同时股骨近端H型血管表达升高。结论 柚皮苷可以调节骨代谢,改善骨质疏松大鼠骨密度,发挥抗骨质疏松作用,其作用机制可能是通过调节HIF-1α/VEGF信号通路、促进H型血管形成来实现的。     

SIRT1/FoxO1信号通路在三叶苷减轻大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用

目的评价沉默信息调节因子1(SIRT1)/叉头框蛋白O1(FoxO1)信号通路在三叶苷减轻大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用。方法清洁级健康雄性SD大鼠80只, 6～8周龄, 体质量230～280 g, 采用随机数字表法分为4组(n=20):假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(CIR组)、三叶苷+脑缺血再灌注组(T组)和三叶苷+脑缺血再灌注+SIRT1/FoxO1信号通路抑制剂EX527组(E组)。采用大脑中动脉栓塞法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。T组和E组大鼠于缺血前3 d时开始灌胃给予三叶苷15 mg/kg, 2次/d, 连续3 d;E组大鼠每次灌胃前腹腔注射EX527 5 mg/kg。于再灌注24 h时采用改良Longa评分评估神经功能, 随后处死大鼠取全脑组织, 采用TTC染色确定脑梗死体积, 流式细胞术检测海马神经元凋亡率和ROS水平, Western blot法检测SIRT1及乙酰化FOXO1(Ac-FOXO1)表达, ELISA法检测SOD和MDA含量, HE染色后光镜下观察海马CA1区病理学结果。结果与S组比较, CIR组Longa评分、脑梗死体积、海马神经元凋亡率、RO...     

虎杖苷通过抑制内质网应激改善蛛网膜下腔出血后早期脑损伤

目的探讨虎杖苷(PD)对蛛网膜下腔出血(SAH)后内质网应激的作用及其机制。方法腹腔注射给予小鼠不同剂量(10、20、30 mg/kg)的PD。检测Sham、SAH、SAH+vehicle、SAH+PD 10 mg/kg、SAH+PD 20 mg/kg、SAH+PD 30 mg/kg各组蛛网膜下腔出血量、神经功能评分、脑含水量和伊文斯蓝渗出。采用蛋白质免疫印迹法检测SIRT1, 内质网应激相关标志物和凋亡相关蛋白的表达水平。同时采用免疫荧光染色和缺口末端标记法(TUNEL)染色评价神经元细胞凋亡。组间比较采用单因素方差分析。结果 PD组SAH评分、脑水肿、伊文斯蓝渗出量低于SAH组[(5.75±0.97)分比(12.25±2.03)分、(74.86±7.94)%比(82.24±5.41)%、(1.11±0.21) μg/g比(1.66±0.24) μg/g, (t=10.83、6.38、6.52, 均P<0.01]。PD组沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)表达高于SAH组(3.96±0.56比1.00±0.04, t=5.80, P<0.01)。结论 PD介导SIRT...     

柚皮苷硬膜外腔注射对髓核致坐骨神经痛大鼠的疼痛行为影响

目的研究柚皮苷硬膜外腔注射对致坐骨神经痛大鼠的疼痛行为学的影响。方法选择雄性SD大鼠28只,制作髓核致坐骨神经痛大鼠模型。随机分为4组,每组7只大鼠。术后第3天开始注药治疗,柚皮苷组每日硬膜外腔注入柚皮苷注射液50μl,地塞米松组每日硬膜外腔注入地塞米松注射液50μl,生理盐水组每日硬膜外腔注入生理盐水50μl,未注药组硬膜外腔无药物注入处理。检测大鼠术前,术后及给药后1、3、7、14d的疼痛行为指标（50％机械性刺激缩足阈值和热刺激缩足反应潜伏期）。结果4组大鼠在术后均对机械刺激产生明显的痛觉过敏,与术前比较差异有显著性（P〈0.05）;柚皮苷组与地塞米松组在提高疼痛行为学指标的作用方面差异无显著性（P〉0.05）。结论硬膜外腔注射柚皮苷可有效改善髓核致坐骨神经痛大鼠的疼痛反应。     

柚皮苷促进人牙周膜成纤维细胞成骨分化能力的研究

目的:研究柚皮苷对体外培养的人牙周膜成纤维细胞(HPDLCs)成骨分化能力的影响。方法:组织块法培养原代HPDLCs,加入含不同浓度柚皮苷的培养液(100、10、1、0.1、0.01 mg/L),用碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测HPDLCs的培养上清液中ALP的活性,用实时定量PCR检测加入柚皮苷后不同时间点(24h、48h、72h),HPDLCs的骨形成蛋白2(BMP2)、I型胶原蛋白(Col I)、骨保护蛋白(OPG)和核因子κb受体活化因子配体(RANKL)的mRNA表达水平的变化。结果:与对照组比较,不同浓度柚皮苷试验组HPDLCs培养上清液中的ALP活性显著增高(P<0.05),其中1mg/L组的ALP活性最高,此浓度柚皮苷作用下,24h后,BMP-2的mRNA表达水平显著升高,并呈时间依赖性,48h后,Col I和OPG的mRNA表达水平也显著上升。结论:柚皮苷促进了HPDLCs细胞向骨细胞分化功能,其作用可能是通过上调Coll I、BMP2和OPG基因的表达。     

艾司氯胺酮通过调控miR-148a-3p/KLF4通路减轻脊髓损伤大鼠的炎症反应

目的 通过构建脊髓损伤大鼠模型,探讨艾司氯胺酮对脊髓损伤和微小RNA-148a-3p(miR-148a-3p)/Kruppel样因子4(KLF4)通路的影响。方法 选择SPF级成年雌性SD大鼠48只,7～9周龄,体重215～255 g。将大鼠随机分为四组：假手术组(S组)、脊髓损伤组(SCI组)、艾司氯胺酮50 mg/kg组(E组)和艾司氯胺酮50 mg/kg+miR-148a-3p抑制剂5 mg/kg组(EI组),每组12只。S组予去除椎板处理,SCI组仅建立脊髓损伤大鼠模型,E组和EI组分别于建模后每日腹腔注射艾司氯胺酮50 mg/kg和艾司氯胺酮50 mg/kg+miR-148a-3p抑制剂5 mg/kg,连续注射7 d。于建模后1、4、7、10 d采用斜板实验计算最大倾斜角度、行为学实验计算运动功能BBB评分评估大鼠脊髓神经功能。建模后10 d BBB评分后处死大鼠,采用ELISA法检测脊髓白细胞介素-1β(IL-1β)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)浓度,qPCR法检测脊髓miR-148a-3p、KLF4 mRNA表达量,Western blot法检测脊髓神经元核...     

负载柚皮苷AKE/GB30网箱在脊柱骨缺损模型修复中的作用及对BMPs-VEGF信号通路的影响

【摘要】 目的：观察负载柚皮苷的AKE/GB30网箱在脊柱骨缺损模型中的修复作用,并基于骨形成蛋白（BMPS）-血管内皮生长因子（VEGF）信号通路探讨该生物材料的作用机制。方法：用牙钻在30只新西兰雄兔L5与L6椎间制作一个7mm×5mm×4mm的缺损,建立脊柱骨缺损模型,制备AKE/GB30网箱。测试负载柚皮苷的AKE/GB30网箱生物力学性能,检测其体外释药行为。将造模成功的新西兰兔随机数字表法分为3组,即空白组、自体骨移植组、骨移植生物材料+柚皮苷联合组,除空白组外分别予以自体骨移植、负载柚皮苷的AKE/GB30网箱进行修复。术后6周、12周每组各取5只兔,微计算机断层扫描（Micro CT）检测骨修复情况[包括骨体积分数（BV/TV）、骨小梁厚度（Tb.Th）和骨小梁数目（Tb.N）];实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测骨形成蛋白2（BMP2）、VEGF、Runt相关转录因子2（RUNX2）、碱性磷酸酶（ALP）、骨钙素（OCN）信使核糖核酸（mRNA）表达;免疫印迹法（WB）检测骨组织BMP2、VEGF、RUNX2、ALP、OCN蛋白表达。结果：AKE/GB30网箱制作成功,且其特性检测结果符合脊柱骨缺损修复要求;负载柚皮苷的AKE/GB30网箱最大抗压强度为28MPa,最大抗压力为15N,6周时其累积释药率达（98.15±1.47）%;各组术后12周时BV/TV、Tb.Th和Tb.N,骨组织BMP2、VEGF、RUNX2、ALP、OCN的mRNA与蛋白表达均高于术后6周时（P＜0.05）,且自体骨移植组、骨移植生物材料+柚皮苷联合组上述指标均高于空白组（P＜0.05）,自体骨移植组、骨移植生物材料+柚皮苷联合组上述指标差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论：负载柚皮苷的AKE/GB30网箱在脊柱骨缺损模型修复的效果等同于自体骨移植,可能是通过促进BMP2、VEGF、RUNX2、ALP、OCN表达实现的。     

艾司氯胺酮对大鼠脓毒症急性肾损伤的影响及自噬在其中的作用

目的评价艾司氯胺酮对大鼠脓毒症急性肾损伤(AKI)的影响及自噬在其中的作用。方法 SPF级健康雄性成年SD大鼠40只, 体重200～240 g, 采用随机数字表法分为5组(n=8):对照组(Con组)、艾司氯胺酮组(Con+Ket组)、脓毒症组(LPS组)、脓毒症+艾司氯胺酮组(LPS+Ket组)和脓毒症+艾司氯胺酮+3-甲基腺嘌呤组(LPS+Ket+3MA组)。采用腹腔注射LPS制备脓毒症大鼠AKI模型, Con组腹腔注射生理盐水10 ml/kg;Con+Ket组腹腔注射生理盐水10 ml/kg, 30 min后尾静脉注射艾司氯胺酮10 mg/kg;LPS组腹腔注射LPS 10 mg/kg;LPS+Ket组腹腔注射LPS 10 mg/kg, 30 min后尾静脉注射艾司氯胺酮10 mg/kg;LPS+Ket+3MA组腹腔注射LPS 10 mg/kg, 30 min后尾静脉注射艾司氯胺酮10 mg/kg和3-MA 15 mg/kg。腹腔注射LPS后24 h时麻醉大鼠, 随后处死取肾组织, 观察病理学结果, 采用ELISA法测定核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑...     

淫羊藿苷上调NRF2改善SHR大鼠勃起功能

目的:研究淫羊藿苷是否通过调节核因子类红细胞2-相关因子2(NRF2)通路改善自发性高血压大鼠(SHR)的勃起功能.方法:随机将10周龄健康雄性WKY大鼠(WKR)与雄性SHR大鼠分为4组(每组6只,共24只):WKY对照组、WKR+淫羊藿苷组[10 mg/(kg·d)灌胃]、SHR对照组,SHR+淫羊藿苷组[10 m...     

毛蕊花苷对小鼠异位心脏移植冷缺血再灌注损伤的影响：与NF-κB/NLRP3信号通路的关系

目的评价毛蕊花苷对小鼠异位心脏移植冷缺血再灌注损伤的影响及其与NF-κB/NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路的关系。方法动物实验:SPF级健康雄性C57BL/6小鼠18只, 6～8周龄, 体质量24～28 g, 采用随机数字表法分为3组(n=6):对照组(C组)、心脏移植冷缺血再灌注组(I/R组)和心脏移植冷缺血再灌注+毛蕊花苷组(I/R+VB组)。采用cuff套管法颈部异位心脏移植的方法制备小鼠心脏移植冷缺血再灌注损伤模型, C组供体心脏取下后立即移植至受体, I/R组供体心脏于4 ℃保存液保存8 h后移植至受体, I/R+VB组供体与受体小鼠分别于术前3 d时腹腔注射毛蕊花苷20 mg/kg。于再灌注24 h时进行移植物跳动评分后取移植心脏心肌组织, 采用ELISA法检测MDA含量和SOD活性;取部分供体心肌组织, 观察病理学结果;采用Western blot法检测NF-κB、p-NF-κB、NLRP3、ACS和caspase-1的表达;RT-PCR法检测IL-1β、TNF-α及IL-6 mRNA的表达。细胞实验:建立大鼠心肌细胞H9c2冷缺氧复氧模型, 采用随机数字表法将细...     

虎杖苷促进大鼠骨质疏松性骨折的作用及对SIRT1/FoxO1信号通路的影响

目的 探究虎杖苷对骨质疏松性骨折大鼠骨折愈合的效果及对沉默信息调节因子1（SIRT1）/叉头状转录因子O1（FoxO1）信号通路的影响。方法 构建骨质疏松性骨折大鼠模型，将建模成功的48只大鼠随机分为模型组、虎杖苷低剂量（30 mg/kg）组、虎杖苷高剂量（60 mg/kg）组、阿仑膦酸钠组（0.5 mg/kg）。另取12只大鼠作为对照组，构建相同部位骨折模型。建模结束后，各组大鼠给予相应药物灌胃，每天1次，连续8周。对大鼠进行骨折愈合程度评分并检测骨折处骨密度（bone mineral density, BMD）；运用酶联免疫吸附法检测大鼠血清中I型胶原交联羧基末端肽（CTX-Ⅰ）、骨钙素（OC）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）水平；通过苏木素-伊红染色观察大鼠骨组织病理学；通过荧光定量PCR法检测大鼠骨组织中SIRT1、FoxO1信使RNA（mRNA）水平；通过蛋白印迹法检测大鼠骨组织中SIRT1、FoxO1蛋白水平。结果 与模型组相比，虎杖苷低、高剂量组大鼠骨组织病理学变化程度依次减轻，骨折愈合程度评分、骨折处BMD、血清中OC、骨组织中SIRT1、FoxO1 mRNA和蛋白水平依次升高，CTX-Ⅰ、TNF-α、IL-1β水平依次降低（P<0.05）；阿仑膦酸钠组和虎杖苷高剂量组大鼠骨组织病理学变化及各项指标比较均无显著差异（P>0.05）。结论 虎杖苷可减轻骨质疏松性骨折大鼠炎症反应，提升BMD，促进骨折愈合，其机制可能与激活SIRT1/FoxO1信号通路有关。     

雷帕霉素联合罗格列酮对脓毒症大鼠肺损伤的影响

目的 评价雷帕霉素联合罗格列酮对脓毒症大鼠肺损伤的影响.方法 健康雄性Wistar大鼠120只,2月龄,体重250～ 300 g,采用随机数字表法,将其分为5组(n=24):假手术组(S组)、盲肠结扎穿孔组(CLP组)、雷帕霉素组(RPM组)、罗格列酮组(RGZ组)和雷帕霉素+罗格列酮组(RPM+ RGZ组).CLP组、RPM组、RGZ组和RPM+ RGZ组采用盲肠结扎穿孔术法制备大鼠脓毒症模型.术前30 min RPM组于皮下注射雷帕霉素0.4 mg/kg,RGZ组股静脉注射罗格列酮0.3 mg/kg,RPM+ RGZ组皮下注射雷帕霉素0.4 mg/kg联合股静脉注射罗格列酮0.3 mg/kg,CLP组给予等容量生理盐水.于术后2、6、24和48 h时分别处死6只大鼠,取肺组织,行HE染色,光镜下观察,进行肺损伤评分;采用分光光度法检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性;采用凝胶阻滞电泳分析法检测肺组织信号转导和转录激活因子3(STAT3) DNA结合活性.结果 与S组比较,CLP组、RPM组、RGZ组和RPM+ RGZ组肺损伤评分、肺组织MPO活性和STAT3 DNA结合活性升高(P＜0.05);与CLP组比较,RPM组、RGZ组和RPM+ RGZ组肺损伤评分、肺组织MPO活性及STAT3 DNA结合活性降低(P＜0.05);与RPM组及RGZ组比较,RPM+ RGZ组肺损伤评分、肺组织MPO活性及STAT3 DNA结合活性降低(P＜0.05).结论 与雷帕霉素或罗格列酮单独用药比较,二者联合应用减轻脓毒症大鼠肺损伤的效应更明显,其机制与抑制STAT3信号通路激活有关.     

维生素C对失血性休克大鼠脏器功能的影响及机制研究

目的:探讨维生素C(Vit C)对失血性休克(hemorrhagic shock,HS)大鼠脏器功能的保护作用。方法:首先对16只雄性SD大鼠随机分为腹腔内注射生理盐水组(空白对照组,n=8)和Vit C组(V2 h组,100 mg/kg,n=8),用免疫组化方法检测空肠、肝脏、肺脏及肾脏中血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)的表达。其次,32只SD大鼠随机分为假手术组(n=8),休克模型组(HS 24 h组,n=8),休克加Vit C组(HSV 24 h组,HS+Vit C,n=8)和HO-1抑制组(HSVZ 24 h组,HS+Vit C+ZnPP,n=8)。HSV 24 h组在造模前30 min腹腔注射Vit C(100 mg/kg),HSVZ 24 h在HSV24 h处理方法的基础上腹腔注射HO-1抑制剂ZnPP(3 mg/kg),各组在造模后24 h取血清,检测器官功能指标丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、尿素氮、肌酐、乳酸脱氢酶及肌酸激酶的表达,取空肠、肝脏、肺脏及肾脏,制作病理切片并行HE染色,进行病理评分。结果:正常SD大鼠注射Vit C 2 h后,空肠、肝脏、肺脏及肾脏HO-1表达明显增高。与假手术组相比,失血性休克大鼠各个器官的组织病理损伤及评分和各器官功能指标均显著增高(P<0.05),预先给予VitC可显著减轻以上病理指标(P     

五味子乙素对胶质瘤大鼠新辅助化疗敏感性的影响

目的评价五味子乙素对胶质瘤大鼠新辅助化疗敏感性的影响。方法健康雄性Wistar大鼠72只,体重180～200 g,采用随机数字表法分为6组(n=12):假手术组(Sham组)、胶质瘤组(G组)、新辅助化疗组(T组)、五味子乙素10 mg/kg+新辅助化疗组(S1+T组)、五味子乙素20 mg/kg+新辅助化疗组(S2+T组)和五味子乙素40 mg/kg+新辅助化疗组(S3+T组)。右侧尾状核区注射10 μl C6胶质瘤细胞悬液,制备胶质瘤模型。T组于造模后10 d时给予替莫唑胺25 mg/kg灌胃,连续6 d;S1+T组、S2+T组、S3+T组于造模后10 d时分别给予五味子乙素10、20、40 mg/kg和替莫唑胺25 mg/kg灌胃,连续6 d。于造模后18 d时,每组取6只大鼠,剥离瘤体并称重;取瘤体核心区组织,采用Western blot法检测基质金属蛋白-2(MMP-2)、MMP-9和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX4)表达水平。其余6只大鼠记录生存时间。结果与Sham组比较,其余5组生存时间缩短,瘤体组织MMP-2、MMP-9和GPX4的表达上调(P<0.05);与G组比较...     

载柚皮苷复合支架对兔骨软骨缺损修复的实验研究

目的探讨载柚皮苷复合支架的性能及其对兔骨软骨缺损修复的效果。方法利用W/O/W方法制备载柚皮苷和无载柚皮苷缓释微球;以凹凸棒石和Ⅰ型胶原蛋白为材料,通过"3层夹心法"分别构建载柚皮苷、无载柚皮苷和载TGF-β_1复合支架。分别利用体外缓释、扫描电镜和细胞计数试剂盒8法评价载柚皮苷微球的缓释效果、支架的形貌和细胞相容性。取40只日本大耳白兔随机分为A、B、C、D4组,每组10只。于兔双侧股骨髁间窝处制备直径4.5 mm、深4 mm的骨软骨缺损模型,A组为缺损组(空白对照),B、C、D组分别于骨软骨缺损处植入无载柚皮苷复合支架(阴性对照组)、载柚皮苷复合支架(实验组)及载TGF-β_1复合支架(阳性对照组)。分别于术后3、6个月时取材,行大体、HE染色、甲苯胺蓝染色,分别观察骨软骨缺损修复效果;Western blot检测新生软骨Ⅱ型胶原蛋白表达水平。结果载柚皮苷微球具有良好的缓释效果;构建的骨软骨复合支架有较好的孔隙;载柚皮苷软骨层支架细胞的增殖率与无载柚皮苷支架比较明显增加,差异有统计学意义(P0.05)。兔体内植入实验大体观察示,术后3个月C、D组缺损范围与A、B组相比明显缩小;术后6个月C组缺损处被新生软骨所覆盖,D组新生软骨与周围正常软骨整合良好。组织学染色示,术后3个月A、B组缺损处被少量纤维组织填充,C、D组可见少量软骨生成;术后6个月C、D组新生骨软骨组织与正常骨软骨类似,A、B组缺损处以大量纤维组织为主。Western blot检测示,术后3、6个月C、D组缺损处新生组织中Ⅱ型胶原蛋白表达量均显著高于A、B组,差异有统计学意义(P0.05);C、D组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论载柚皮苷复合支架具有良好的组织相容性,并对兔关节骨软骨缺损有较好的修复效果。     

基于NLRP3/caspase-1通路研究丹参提取物对系膜增生性肾小球肾炎大鼠的保护作用

目的基于NLRP3/caspase-1通路探讨丹参提取物对系膜增生性肾小球肾炎(mesangial proliferative glomerulonephritis,MsPGN)大鼠的保护作用。方法取48只大鼠建立MsPGN模型,随机分为4组:(1)模型组:不给予药物治疗;(2)丹参提取物组:每日给予丹参提取物(10 mL/kg)灌胃;(3)VX-765组:每日给予VX-765(NLRP3炎性小体抑制剂,50 mg/kg)腹腔注射;(4)丹参提取物+VX-765组:每日给予丹参提取物(10 mL/kg)灌胃,并给予VX-765(50 mg/kg)腹腔注射。另取12只大鼠设为假手术组。各组均持续给药28 d。末次给药结束24 h后,收集各组大鼠24 h尿液,检测24 h尿蛋白含量;检测各组大鼠血清中BUN、Scr、IL-1β、IL-18水平;观察各组大鼠肾组织病理变化,并根据肾小球系膜细胞增殖程度、肾小管-间质病变程度进行病理评分;采用实时荧光定量PCR及免疫印迹法检测各组大鼠肾组织中NLRP3、caspase-1的mRNA和蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠出现肾小球体积变大、内部细胞数量增多,系膜细胞弥漫性增生、细胞基质增多,肾间质有炎性细胞浸润等肾组织病理损伤症状,肾小球系膜细胞增殖程度评分、肾小管-间质病理评分、24 h尿蛋白含量、血清BUN、Scr、IL-1β、IL-18、肾组织NLRP3及caspase-1表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,丹参提取物组、VX-765组、丹参提取物+VX-765组大鼠上述病理损伤症状减轻,肾小球系膜细胞增殖程度评分、肾小管-间质病理评分、24 h尿蛋白含量、血清BUN、Scr、IL-1β、IL-18、肾组织NLRP3及caspase-1表达均显著降低(P<0.05);与丹参提取物组及VX-765组分别比较,丹参提取物+VX-765组大鼠上述病理损伤症状进一步减轻,肾小球系膜细胞增殖程度评分、肾小管-间质病理评分、24 h尿蛋白含量、血清BUN、Scr、IL-1β、IL-18、肾组织NLRP3及caspase-1表达均显著降低(P<0.05)。结论丹参提取物可以减轻MsPGN大鼠炎症反应及系膜增生性病变,保护大鼠肾组织,修复大鼠肾功能,可能通过下调NLRP3/caspase-1通路实现。