木犀草素对大鼠肠系膜上动脉舒张作用的影响

目的 观察木犀草素对大鼠肠系膜上动脉的舒张作用并探讨其作用机制。方法 采用离体血管环实验方法，1×10^-6.1、1×10^-5.6、1×10^-5.1、1×10^-4.6、1×10^-4.1、1×10^-3.6、1×10^-3.1 mol·L^-1木犀草素加药组为实验组，同时设立等体积累加生理盐水组为对照组。使用Myograph动态描记系统分别记录高K⁺、苯肾上腺素(PE)对大鼠离体血管环的收缩作用；观察不同浓度木犀草素对高K⁺、PE预收缩血管环的舒张作用；同时采用多种工具药干预，探讨木犀草素舒张血管作用与内皮、钾通道及钙通道的相关性。结果 木犀草素对高K⁺和PE预收缩的内皮完整的微动脉血管最大舒张率分别为(42.75±3.13)%和(82.64±1.80)%;其对去内皮微动脉血管环的最大舒张率为(94.52±0.76)%;在灌注压力存在的条件下，其对高K     

雷诺定受体介导的BK通道开放在他克莫司对大鼠胸主动脉舒张中的作用

目的:探究他克莫司对大鼠胸主动脉的舒张作用及其机制.方法:采用多道生理记录仪测定大鼠胸主动脉环张力,观察他克莫司对去甲肾上腺素诱导收缩的胸主动脉血管环的舒张作用,并观察伊比蝎毒素(选择性大电导钙离子激活的钾离子通道抑制剂)和雷诺定(Ryanodine,肌浆网钙离子释放抑制剂)对他克莫司舒张曲线的影响.结果:他克莫司对去甲肾上腺素(NE 1.0×10^-6 mol·L^-1)预收缩有内皮和去内皮大鼠胸主动脉环均有显著地舒张作用,且非内皮依赖性途径在他克莫司对血管的舒张作用中起着重要作用,他克莫司对NE预收缩的去内皮大鼠胸主动脉环的舒张作用,可被雷诺定(10 μmol·L^-1)和iberiotoxin(100 nmol·L^-1)抑制,分别从(17.41±1.94)%降至(12.38±1.17)%(雷诺定孵育前后比较,P< 0.05,n=7)和(16.69±2.66)%降至(10.46±1.17)%(iberiotoxin孵育前后比较,P< 0.05,n=7).结论:他克莫司对血管的舒张作用主要是通过雷诺定受体引起钙火花的释放,从而激活大电导钙离子激活的钾离子通道(BK通道)开放引起的.     

高效液相色谱-串联质谱法同时测定大鼠血浆中阿托伐他汀钙和非洛地平的浓度

目的：建立快速灵敏高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）法同时测定大鼠血浆中阿托伐他汀钙和非洛地平的浓度,并研究其单用及联用时在其体内的药动学特征。方法：色谱柱：Diamonsil ODS C₁₈（150 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相：甲醇-0.1%甲酸水溶液（70∶30,V/V）;流速：0.8 mL·min^-1,进样量10 μL。采用ESI+源,选择性离子检测方式（SIM）,对离子反应m/z 559.2（阿托伐他汀钙）,m/z 406.0（非洛地平）,m/z 325.2（内标为甲基睾酮）进行检测。结果：阿托伐他汀钙和非洛地平在0.01~0.8 μg·mL^-1范围内线性关系良好,定量下限0.01 μg·mL^-1,精密度、稳定性均符合要求。与单用组相比,药物联用组阿托伐他汀钙的最大血药浓度由（677.74±100.86）μg·L^-1增加到（789.80±12.16）μg·L^-1,血浆药物-时间曲线下面积由（5 755.90±1 210.84）h·μg·L^-1增加到（6 931.74±228.11）h·μg·L^-1,半衰期由（3.77±0.89）h变为（3.60±0.36）h;联用组中非洛地平的最大血药浓度由（492.40±69.30）μg·L^-1上升到（751.50±26.12）μg·L^-1,血浆曲线下面积由（4 150.66±725.61）h·μg·L^-1增加到（6 854.87±725.61）h·μg·L^-1,半衰期由（2.64±0.20）h延长至（2.88±0.23）h。结论：该方法灵敏、准确、可靠,专属性强,适用于阿托伐他汀钙和非洛地平在大鼠体内的药动学研究。     

辛二酰苯胺异羟肟酸舒张大鼠离体胸主动脉作用和机制

目的研究辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)对大鼠离体胸主动脉环的作用和舒张机制。方法采用离体大鼠胸主动脉环灌流,观察累积浓度SAHA(0.3、1、3、10和30μmol·L^-1)对基础状态、KCl和NE预收缩的大鼠离体胸主动脉环的作用,同时使用工具药L-NAME、Indo、PMA和SP来研究其舒张血管的可能机制,并探讨SAHA在舒张血管过程中对Ca²⁺的作用。结果SAHA能够舒张KCl和NE预收缩的大鼠离体胸主动脉(P<0.01),且对完整内皮胸主动脉作用强于去内皮胸主动脉(P<0.01),但对基础状态无明显影响;L-NAME、Indo和PMA可抑制SAHA的血管舒张作用(P<0.05),而SP能够促进其舒张血管(P<0.01);SAHA可抑制外钙内流和内钙释放而减弱CaCl 2和NE诱导的血管收缩作用(P<0.01)。结论SAHA舒张血管可能与增加内皮舒张因子NO和PGI 2生成,抑制PKC及外钙内流和内钙释放有关。     

心脉隆对离体人脐动脉血管张力的影响及其机制

目的：探讨心脉隆对离体人脐动脉血管张力的影响,并分析其机制。方法：运用离体血管张力测定实验方法,累积加入不同浓度的心脉隆,观察其对静息人脐动脉的张力影响;加入60 mmol·L^-1 KCl、1 μmol·L^-1苯肾上腺素（PE）使血管收缩、张力平稳后,观察不同浓度心脉隆对预收缩的人脐动脉张力的影响;同时观察细胞外Ca²⁺浓度、L-型钙通道阻滞剂维拉帕米（VEP）对心脉隆血管效应的影响。结果：心脉隆能浓度依赖性收缩静息状态下内皮完整的离体人脐动脉,对KCl、PE预收缩的离体人脐动脉有进一步增加张力的作用,在无钙灌流液中诱发的血管收缩效应明显减弱,随着细胞外Ca²⁺浓度增加其致血管收缩张力增加,维拉帕米能显著抑制心脉隆对人脐动脉的收缩反应。结论：心脉隆可促进细胞外Ca²⁺内流和细胞内Ca²⁺释放,从而具有浓度依赖性地收缩离体人脐动脉的作用。     

乙酰异羟肟酸的舒张血管作用及其机制

目的研究乙酰异羟肟酸(AHA)降血压和舒张胸主动脉血管的作用及其机制。方法 (1)动物实验:8周龄SD雄性大鼠,ip给予AHA 50和100 mg·kg-1,每5 d给药1次,共5次。分别在给药前1 d、给药第13天和给药第26天测收缩压(SBP)和舒张压(DBP);HE染色观察大鼠胸主动脉血管组织形态变化。(2)离体实验:①累积浓度AHA(0.1,1,3,10,30和100μmol·L^-1)处理大鼠离体胸主动脉内皮完整血管环,检测血管环张力。②大鼠离体胸主动脉内皮完整和去内皮血管环用去甲肾上腺素(NE,1μmol·L^-1)和KCl(60 mmol·L^-1)预收缩,稳定后每10 min累积加入AHA(0.1,1,3,10,30和100μmol·L^-1),计算血管舒张百分比。③内皮完整血管环分为AHA组、AHA+左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)组和AHA+吲哚美辛(Indo)组。L-NAME(0.1 mmol·L^-1)或Indo(0.01 mmol·L^-1...     

地尔硫卓对血管紧张素Ⅱ损伤内皮细胞的保护作用研究

目的观察地尔硫卓对血管紧张素Ⅱ损伤的人脐静脉内皮细胞的保护作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,用1×10^-6mol·L^-1的血管紧张素Ⅱ作为损伤因子模拟体内损伤模型。用3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2（MTT）法检测细胞活力,用流式细胞术检测细胞凋亡率,对细胞上清液乳酸脱氢酶活力进行检测。观察地尔硫卓对血管紧张素Ⅱ损伤的人脐静脉内皮细胞的保护作用。结果与对照组相比,血管紧张素Ⅱ(1×10^-7,1×10^-6,1×10-5mol·L^-1)呈浓度依赖性及时间依赖性降低细胞活力和细胞凋亡率。地尔硫卓能够呈浓度依赖性提高细胞活力和凋亡率,且与血管紧张素Ⅱ相比,地尔硫卓能够呈浓度依赖性的减少细胞上清液乳酸脱氢酶活力。结论地尔硫卓对血管紧张素Ⅱ损伤的人脐静脉内皮细胞具有保护作用。     

尼索地平对大鼠离体肺动脉和肺动脉高压的影响

目的 观察尼索地平(nifedipine,NIS)对KCl和去氧肾上腺素(phenylephrine,PHE)所致离体大鼠肺动脉收缩的作用,同时研究其对野百合碱诱导的肺动脉高压(pulmonary hypertention,PH)大鼠的影响。方法 ①采用离体血管实验法,以KCl和PHE在含钙离子和不含钙离子的K-H液中预收缩离体大鼠肺动脉环,观察NIS对血管收缩的影响。②取40只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、NIS组和硝苯地平(NIF)组,每组10只,采用野百合碱(50 mg·kg^-1)皮下注射建立大鼠PH模型,连续灌胃给药21 d。采用右心导管法测定mPAP、mRVP、maxPAP和maxRVP,并计算各组大鼠的RVHI和LI。结果 ①在含钙离子的K-H液中,NIS抑制KCl(20,40,60 mmol·L^-1)和PHE(1×10^-7,5×10^-7,1×10^-6 mol·L^-1)所致血管收缩的IC₅₀分别为0.87×10^-8,1.41×10^-8,8.32×10^-8 mol·L^-1和0.56×10^-7,4.27×10^-7,1.28×10^-6 mol·L^-1。在无钙离子K-H液中,NIS无抑制离体血管收缩的作用。②模型组大鼠mPAP、mRVP、maxPAP、maxRVP、RVHI和LI均显著高于正常组(P<0.01),NIS组和NIF组大鼠的上述指标均显著低于模型组(P<0.05)。结论 NIS有抑制大鼠肺动脉收缩的作用,对野百合碱诱导的大鼠PH有治疗作用。     

118例肾移植患者他克莫司血药谷浓度与肝肾功能及血常规指标的关系

目的:分析肾移植患者他克莫司(FK506)血药浓度的监测情况,探讨FK506血药浓度与肝肾功能及血细胞之间的关系,为临床的合理用药提供依据。方法:收集某院2011年9月-2013年9月118例肾移植患者FK506血药浓度的数据,及血药浓度测定当天的生化、血常规检测结果。根据FK506血药浓度分为6组(1μg·L^-1≤Ⅰ组≤4μg·L^-1,4μg·L^-1<Ⅱ组≤7μg·L^-1,7μg·L^-1<Ⅲ组≤10μg·L^-1,10μg·L^-1<Ⅳ组≤12μg·L^-1,12μg·L^-1<Ⅴ组≤15μg·L^-1,Ⅵ组>15μg·L^-1),对6组中的肝肾功能及血常规指标进行统计分析。结果:肾移植术后患者的FK506血药谷浓度有78.40%在5~15μg·L^-1,其中有68.33%在目标浓度范围内。不同浓度组间,肾功能指标UREA、CREA、eGFR及血常规中RBC、Hb、Hct和GLU均存在显著差异(P<0.01),Ⅵ组的eGFR明显低于其他组,而GLU明显高于其他组;肝功能组合中TP、ALB、GLB和AST、TBIL虽然存在统计学差异但并无明显临床意义。结论:该院肾移植术后患者的FK506血药谷浓度基本控制在5~15μg·L^-1;FK506对肝功能影响较小,临床药师需提醒医师FK506血药浓度过高可能容易引起高血糖和肾毒性。     

二苯乙烯苷对骨髓间充质干细胞增殖和分化的影响及其机制研究

目的：探究二苯乙烯苷（TSG）对体外骨髓间充质干细胞（BMSCs）增殖和分化的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法：利用全骨髓培养法从1月龄SD大鼠中提取BMSCs进行体外培养,然后给予药物干预。采用MTT法检测药物对BMSCs体外增殖的影响;PNPP法检测碱性磷酸酶（ALP）活性;ELISA法检测细胞培养上清液中骨钙素（OCN）含量;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）观察Col1a1、Runx2和β-catenin的mRNA表达情况。结果：TSG在1×10^-6,1×10^-5,1×10^-4 mol·L^-1浓度下对BMSCs的增殖有明显的促进作用;经1×10^-6,1×10^-5,1×10^-4 mol·L^-1 TSG处理3 d后,BMSCs中ALP的表达增加;经1×10^-6,1×10^-5,1×10^-4 mol·L^-1 TSG处理7 d后,OCN表达也明显升高;此外,与对照组相比,经Wnt3a和TSG处理后,BMSCs中Col1a1、Runx2和β-catenin的mRNA表达上调。结论：TSG能在一定程度上促进BMSCs的增殖和成骨分化能力,其机制可能与提高Col1a1、Runx2和β-catenin相关成骨分化基因的表达有关。     

复方小檗碱鞣酸蛋白胶囊的质量控制研究

目的：建立测定复方小檗碱鞣酸蛋白胶囊中4种成分含量及马来酸氯苯那敏与硝酸硫胺含量均匀度的方法。方法：采用均匀实验优选复方小檗碱鞣酸蛋白胶囊中4种成分含量测定提取方法,采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以磷酸盐缓冲液[0.05 mol·L^-1磷酸二氢钾溶液和0.05 mol·L^-1庚烷磺酸钠溶液（1：1）,含0.2%三乙胺,并用磷酸调节至pH 3.0]-甲醇（43：57）为流动相;检测波长262 nm;进样量10 μL,测定复方小檗碱鞣酸蛋白胶囊中盐酸小檗碱、马来酸氯苯那敏、硝酸硫胺和乳酸依沙吖啶含量及马来酸氯苯那敏与硝酸硫胺含量均匀度。结果：硝酸硫胺在25.02~200.2 μg·mL^-1、马来酸氯苯那敏在6.555~78.66 μg·mL^-1、盐酸小檗碱在12.01~96.06 μg·mL^-1和乳酸依沙吖啶在2.491~24.91 μg·mL^-1范围内呈良好的线性关系。回收率分别为104.19%、98.41%、100.48%和98.72%,RSD（n=9）分别为0.56%、1.16%、1.72%和1.67%。结论：建立了简便、快速、准确测定复方小檗碱鞣酸蛋白胶囊中4种成分含量及马来酸氯苯那敏与硝酸硫胺含量均匀度的方法,为复方小檗碱鞣酸蛋白胶囊质量标准的完善提高提供依据。     

亚胺培南血药浓度测定方法改进及其在血浆中稳定性考察

目的:建立高效液相色谱法测定人血浆中亚胺培南浓度,并重点考察亚胺培南血浆样品的稳定性。方法:采用Venusil XBP C₁₈ (5μm,4.6mm×250 mm)色谱柱,以10 mmol·L^-1磷酸二氢钾-含四丁基溴化铵(0.3 mmol·L^-1)甲醇液(96:4,V:V)为流动相,调节pH至7.2,柱温为30℃,内标为5-羟基吲哚-3-醋酸,检测波长300 nm。稳定剂0.5mol·L^-1 3-吗啉丙磺酸缓冲液(pH6.8)-乙二醇-水,体积比2:1:1。结果:低、中、高3个浓度提取回收率分别为(89.6±1.7)%,(93.9±2.2)%,(91.4±0.4)%,批内、批间RSD均小于15%;血浆中亚胺培南在0.1~100 μg·ml^-1浓度范围内线性关系良好(r=0.995~0.996),定量下限为0.1μg·ml^-1;不加稳定剂时,含亚胺培南的血浆样品在室温、4℃、-30℃条件下分别可以稳定2,6,8 h,加入稳定剂后分别为6,12,48 h。结论:本试验建立的分析方法线性范围宽,操作简便,准确度高,可用于亚胺培南血药浓度的测定,适用于重症感染患者治疗药物监测。     

GGH基因多态性与非霍奇金淋巴瘤患者甲氨蝶呤血药浓度关系

目的:研究γ-谷氨酰水解酶(GGH)-401C>T基因多态性与非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者甲氨蝶呤(MTX)血药浓度关系。方法:收集29例使用大剂量MTX化疗的NHL患者血样,应用高效液相色谱法检测MTX血药浓度,应用直接测序法检测GGH-401C>T基因多态性。结果:CC、CT和TT基因的分布频率分别为47.2%、50%和2.78%;C和T等位基因的分布频率为72.22%和27.78%。携带野生基因型(CC)和突变基因型(CT+TT)患者的24 h剂量校正MTX血药浓度值分别为(0.18±0.16) μmol·L^-1/(g·m^-2)和(0.30±0.19) μmol·L^-1/(g·m^-2),2组间差异有统计学意义(P=0.030)。结论:GGH-401C>T基因多态性可能影响NHL患者MTX血药浓度,有待进一步研究证实。     

恩替卡韦治疗对乙肝肝硬化患者肝功能及肝硬化指标的影响

目的：探讨恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎肝硬化患者对其肝功能及肝硬化指标的影响及其临床意义。方法：回顾性收集118例连续应用恩替卡韦抗病毒治疗的慢性乙型肝炎肝硬化患者治疗前（0周）、治疗后26周、52周及78周的HBV DNA,血生化（白蛋白、前白蛋白、ALT、AST等）及肝纤维化（肝纤维化四项、APRI、FIB4）指标,并对抗病毒治疗过程的临床指标进行分析比较。结果：随着服用恩替卡韦抗病毒药物,治疗78周后,在HBeAg阳性组有98.46%的患者,阴性组100.00%的患者HBV DNA低于检测值下限。乙肝肝硬化患者前白蛋白0周到78周有不同程度的升高（HBeAg⁺：93.50（57.50~152.25） mg·L^-1 vs.171.00（128.00~201.50） mg·L^-1;HBeAg^-：126.50（70.25~186.25） mg·L^-1 vs.192.00（124.00~215.00） mg·L^-1）,差异有显著性（P<0.05）;患者总胆红素、直接胆红素、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、r-谷氨酰胺转肽酶0周到78周均有不同程度的降低,且基本恢复至健康人水平。同时,肝硬化指标也得到明显改善,APRI、FIB-4,0周到78周的变化分别为HBeAg⁺：1.48（0.58~3.42）vs.0.36（0.35~0.57）,3.32（1.30~7.23）vs.1.11（0.71~1.27）;HBeAg^-：1.09（0.44~2.15）vs.0.53（0.36~0.72）,3.34（1.35~7.30）vs.2.00（1.28~4.08）。结论：应用恩替卡韦抗病毒治疗可使乙肝肝硬化患者肝功能及肝硬化程度得到改善,乙肝肝硬化患者应在临床医生指导下接受长期规范抗病毒治疗。     

基于网络药理学及分子对接分析丹参黄芪配伍治疗冠心病和心绞痛的活性成分及作用机制

目的：从分子水平研究丹参黄芪配伍抗冠心病和心绞痛的分子机制。方法：采用中药系统药理学数据库和分析平台（Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology，TCMSP）获取丹参和黄芪活性成分，基于CTD （Comparative Toxicogenomics Database，比较毒物基因组学数据库）筛选冠心病和心绞痛的关键靶标。借助STRING软件对心绞痛和冠心病的靶标基因进行相互作用分析，基于分子对接（Sybyl2.1）对筛选所得的丹参、黄芪的活性成分与心绞痛及冠心病靶点进行分子对接验证。借助Cytoscape3.5.1构建"活性成分-靶点"网络模型。结果：丹参黄芪共筛选出61个活性成分，其中丹参44个，黄芪17个。筛选出冠心病靶标25个，心绞痛靶标7个，通过靶蛋白PPI网络分析，肿瘤坏死因子、基质金属蛋白酶-9、Toll样受体4、载脂蛋白E、脂肪酸转运蛋白、血管紧张素Ⅰ转化酶、基质金属蛋白酶-3、尿激酶为冠心病和心绞痛疾病的关键靶标蛋白。分子对接发现黄芪单味药、丹参单味药、黄芪丹参配伍用药可能通过调节尿激酶（PLAU）、载脂蛋白E （APOE）、血管紧张素I转化酶（ACE）发挥抗冠心病及心绞痛的作用。结论：从分子层面筛选丹参黄芪配伍治疗冠心病、心绞痛疾病的关键活性成分及靶点，为其配伍后实验研究和临床应用提供合理解释。     

反相高效液相色谱法测定人血清中替考拉宁的浓度及其应用

目的：建立测定复杂用药环境下人血清中替考拉宁浓度的反相高效液相色谱法。方法：色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-0.02 mol·L^-1的NaH₂PO₄溶液（24：76,H₃PO₄调pH值为2.02）,流速1.0 mL·min^-1,检测波长240 nm,柱温28℃。结果：替考拉宁在2.01~80.67 μg·mL^-1（r=0.998 9,n=7）范围内浓度与校正因子f（替考拉宁峰面积/哌拉西林的峰面积）成良好的线性关系,定量限为50.5 ng,替考拉宁平均提取回收率为87.17%,方法平均回收率为100.7%,（RSD=1.93%,n=9）。结论：该法操作简便、灵敏、准确,适用于替考拉宁血药浓度的测定。     

香青兰总黄酮对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞黏附分子及基质金属蛋白酶表达的影响

目的：研究香青兰总黄酮对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞（VSMC）黏附分子及基质金属蛋白酶（MMPs）表达的影响。方法：采用贴壁法培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞,以AngⅡ为诱导剂,建立VSMC细胞增殖的模型,分别应用10^-7 mol·L^-1AngⅡ以及AngⅡ+不同浓度香青兰总黄酮组（25,50,100 μg·mL^-1）作用24 h,并设空白对照组进行比较。采用免疫组化法检测细胞中细胞间黏附分子（ICAM-1）、血管间黏附分子（VCAM-1）的表达水平。RT-PCR方法检测细胞MMP-2、MMP-9的mRNA表达水平。结果：与对照组比较,AngⅡ组能显著刺激大鼠VSMC细胞内ICAM-1、VCAM-1、MMP-2、MMP-9的表达,香青兰总黄酮不同剂量组联合AngⅡ可在一定程度上抑制AngⅡ诱导的VSMC细胞内ICAM-1、VCAM-1、MMP-2、MMP-9的表达,且呈现一定的剂量依赖关系趋势。结论：香青兰总黄酮具有抑制AngⅡ诱导VSMC黏附分子及基质金属蛋白酶表达的作用。