CYP2C9、CYP4F2、GGCX和VKORC1基因多态性对房颤患者华法林使用剂量的影响

目的:探讨CYP2C9、CYP4F2、GGCX和VKORC1基因多态性对房颤患者华法林使用剂量的影响。方法:采用PCR-RFLP法检测157例口服华法林抗凝治疗房颤患者CYP2C9、CYP4F2、GGCX和VKORC1基因多态性,登记并计算患者INR稳定在1.5~3.0时一周的平均日剂量。比较不同基因型房颤患者华法林日用量的差异。结果:INR稳定在1.5~3.0时,CYP2C9*1/*1个体使用华法林剂量[(2.73±0.80)mg·d^-1]显著高于*1/*3使用量[(1.83±0.51)mg·d^-1];VKORC1TT基因型携带者使用剂量[(2.56±0.79)mg·d^-1]显著低于CT基因携带者使用量[(3.31±0.75)mg·d^-1];CYP4F2 CC基因型使用剂量[(2.58±0.78)mg·d^-1]显著低于TT基因携带者使用量[(3.21±1.04)mg·d^-1];GGCX CC基因型使用剂量[(2.49±0.89)mg·d^-1]显著低于GG基因型使用量[(3.04±0.75)mg·d^-1]。多因素回归分析结果显示CYP2C9、VKORC1和GGCX与个体华法林剂量有关。结论:CYP2C9、VKORC1和GGCX基因多态性可能与个体华法林使用剂量差异有关。     

基因检测预测华法林给药剂量准确性的研究

目的：考察华法林IWPC预测剂量与实际剂量的相关性。方法：选取某院2014年11月至2015年8月间住院期间行华法林基因检测的患者97例,记录其基本信息和临床用药情况,利用基因测序的方法检测CYP2C9*2,*3和VKORC1 G>A基因型,并利用IWPC公式预测患者华法林剂量,考察预测剂量与实际剂量相关性。结果：行基因检测的97例患者中,73例服用华法林,42例住院期间INR达标。初始预测剂量中,CYP2C9*3 AA/VKORC1 AA型实际初始剂量在预测剂量范围内的比例为81.13%（43/53例）,CYP2C9*3 AC/VKORC1 AA型实际初始剂量在预测剂量范围内的比例为62.50%（5/8例）,其余的基因型实际初始剂量在预测剂量范围内的比例较小。维持剂量中,预测周剂量的平均值为19.286 mg,实际维持周剂量平均值为19.958 mg,R=0.415,P=0.562>0.05,预测的维持周剂量与实际维持周剂量无显著差异,且VKORC1 AA/CYP2C9*3 AC和VKORC1 AG/CYP2C9*3 AA 2组中预测剂量与实际剂量相关系数分别为0.537和0.916,相关性良好。结论：基因检测预测华法林用药剂量具有一定的准确性,在初始剂量预测中,CYP2C9*3 AA/VKORC1 AA型和CYP2C9*3 AC/VKORC1 AA型预测准确性较高;维持剂量预测中,CYP2C9*3 AC/VKORC1 AA和CYP2C9*3 AA/VKORC1 AG预测准确性较高,具有较高临床参考意义。     

广州地区CYP2C9/VKORC1基因多态性及行个体化治疗患者凝血指标的改变

目的：调查广州地区汉族人群与华法林代谢相关的CYP2C9/VKORC1基因多态性分布特征,并了解经验用药患者与根据基因型进行个体化抗凝治疗患者凝血指标（TT、PT、PT-INR、FIB）的改变。方法：选取2015年1月至12月住院或门诊676例患者,采用基因芯片法进行CYP2C9/VKORC1基因多态性检测,分析基因型频率和等位基因频率,了解广州地区汉族人群CYP2C9/VKORC1基因多态性分布特征和凝血情况。随机选取初期2.5~3 mg·d^-1经验用药组（A组）服用华法林患者91例;经验用药一段时间后进行了CYP2C9/VKORC1基因多态性检测,并根据基因型行个体化用药（B组）。2组患者均按要求定期检测凝血指标。结果：广州地区汉族人群CYP2C9/VKORC1基因型*1*1/AA占74.567%;*1*1/GA占16.57%;*1*3/AA占6.21%;*1*3/GA和*1*1/GG各占1.18%;*1*2/AA和*1*3/AA各占0.15%。凝血指标（TT、PT、PT-INR、FIB）A组依次为（13.97±1.43）s、（16.74±8.34）s、（1.47±0.77）INR、（3.34±0.90）s,B组依次为（13.76±1.17）s、（21.71±11.40）s、（1.96±0.90）INR、（3.63±0.92）s;经配对资料t检验,TT 2组间无显著差异（P>0.05）;PT和PT-INR 2组间均有非常显著差异（P<0.01）;FIB A组与B组间有显著差异（P<0.05）。A组、B组患者在治疗过程中PT-INR控制在2~3 INR抗凝治疗理想范围的分别占13.6%和23.57%,经χ²检验有显著差异（P<0.05）。结论：广州地区汉族人群CYP2C9/VKORC1呈基因多态性,因此华法林按传统经验用药抗凝治疗模式存在一定的盲目性和潜在的危险性,以基因为导向的个体化抗凝治疗为临床在调整华法林抗凝治疗方案提供了科学依据,减少不良事件的发生率。     

CYP1A2、CYP2D6和CYP2C19基因多态性与氯氮平及其代谢物血药浓度的相关性研究

目的：研究CYP1A2、CYP2D6和CYP2C19基因多态性与精神分裂症患者氯氮平（clozapine,CLZ）及其活性代谢物去甲氯氮平（N-desmethy clozapine,N-CLZ）血药浓度的相关性。方法：纳入156例经CLZ单药治疗1个月以上的精神分裂症患者,采集清晨服药前空腹血,采用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法测定CLZ及N-CLZ稳态谷浓度。通过Axiom基因芯片分析技术检测CYP1A2（*1C、*1F）、CYP2D6（*2、*10）、CYP2C19（*2、*3）等6个SNP位点的基因型,比较不同基因型患者CLZ及其代谢物的浓度剂量比（C/D）及代谢物与CLZ血药浓度比值（C_N-CLZ/C_CLZ）的差异。结果：CYP2D6*10基因多态性与N-CLZ C/D具有相关性（P<0.01）。CYP1A2*1C、CYP2D6（*2、*10）基因多态性与C_N-CLZ/C_CLZ具有相关性（P<0.05,P<0.01,P<0.01）。CYP1A2*1F、CYP2C19*2、CYP2C19*3基因多态性与C/D及C_N-CLZ/C_CLZ无相关性（P>0.05）。结论：CYP1A2*1C和CYP2D6（*2、*10）基因多态性对CLZ代谢存在影响,建议临床在使用CLZ治疗前检测患者CYP1A2*1C和CYP2D6（*2、*10）基因型,为CLZ个体化治疗提供参考。     

人体血浆华法林高效液相色谱-质谱联用测定方法的建立及其应用

目的：建立测定人体血浆华法林高效液相色谱-质谱联用（HPLC-MS）测定方法,并用于华法林片的人体药动学研究;同时,考察CYP2C9和VKORC1基因多态性的可能影响。方法：人血浆经乙酸乙酯萃取,以Inertsil^® ODS-3色谱柱（4.6 mm×150 mm,5 μm）为固定相,乙腈-0.5%甲酸水溶液（60∶40,v/v）为流动相,流速为0.8 mL·min^-1,进样量为5 μL,记录华法林经时血浓度,计算其主要药动学参数;采集肘静脉血,提取DNA,采用FISH法检测受试者CYP2C9和VKORC1基因多态性。结果：华法林在0.5~600 ng·mL^-1范围内呈良好线性关系（r>0.99）,最低定量限为5.0 ng·mL^-1,精密度和准确度RSD均小于15%,方法稳定性良好;24例受试者分别有2例CYP2C9和3例VKORC1基因突变个体检出。结论：建立了快速测定血浆华法林HPLC-MS法,方法灵敏、稳定、重现性好、选择性好、准确度高,可用于人血浆中华法林浓度测定及华法林药动学研究;CYP2C9和VKORC1基因多态性对华法林药动学行为有一定影响,为体内过程和效应差异的重要影响因素。     

基因组学个体化给药对心脏瓣膜术后华法林初始抗凝疗效的影响

目的:观察基因组学个体化给药对心脏瓣膜术后华法林初始抗凝疗效的影响。方法:将415例行心脏瓣膜手术患者按随机数字表法分为试验组(203例)和对照组(212例),试验组患者按基因组学个体化给予华法林治疗,对照组患者按体质量给予华法林治疗。记录所有患者CYP2C9*3和VKORC1-1639G/A基因检测结果;观察两组患者在华法林抗凝治疗7 d内每日国际标准化比值(INR)达标率、INR总达标率、INR首次达标时间、华法林累积剂量及不良反应发生情况。结果:CYP2C9*3和VKORC1-1639G/A基因类型的频率与等位基因的频率、两组患者华法林累积剂量及不良反应发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);试验组患者INR总达标率显著高于对照组患者,INR首次达标时间显著短于对照组患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:华法林基因组学个体化给药可提高抗凝初期INR达标率,缩短INR首次达标时间,提高初始抗凝疗效。     

CYP2C9和VKORC1基因多态性对肺栓塞患者华法林初始抗凝疗效的影响

目的评价细胞色素P450酶2C9(CYP2C9)及维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1(VKORC1)基因多态性对中国肺栓塞患者华法林初始抗凝疗效的影响。方法初次服用华法林抗凝的中国肺栓塞患者95例,用TaqMan MGB探针法,检测CYP2C9*2、*3位点和VKORC1-1639A>G位点基因型。记录患者的年龄、性别、体重、身高、服用华法林后每次INR值等指标,并记录患者从服用华法林开始到INR首次达标的时间、INR首次达标时华法林总剂量和日平均剂量等指标。结果 VKORC1-1639AG/GG基因型患者比VKORC1-1639AA基因型患者INR首次达标时间明显延长(P<0.001),且INR首次达标时所服用的华法林总剂量和日均剂量均高于后者(P<0.001);CYP2C9*2或*3变异的患者在初始抗凝阶段发生INR超过治疗窗(INR>3)的比例较高。患者性别、年龄、体重、CYP2C9和VKORC1基因型等因素在内的华法林初始剂量预测模型可解释54.6%左右的华法林剂量个体差异(R2=0.546,P<0.001)。结论 CYP2C9和VKORC1基因型检测对指导中国肺栓塞患者初始抗凝阶段个体化应用华法林有一定的临床意义。     

观察ROC曲线用于评估非瓣膜心房颤动患者华法林抗凝出血风险

目的 观察非瓣膜心房颤动(NVAF)患者华法林抗凝出血风险.方法 回顾性分析2008年1月至2012年6月我科收治的口服华法林抗凝治疗NVAF患者177例,其中抗凝治疗过程中发生出血事件者56例(出血组);未出现出血事件者121(非出血组).比较2组患者华法林用量、国际标准化比值(INR)有无差别.结果 2组患者华法林用量差别无统计学意义(P=0.40);出血组INR显著高于非出血组(P＜0.01);2组患者INR与华法林用量间不存在明显相关性(P =0.062);INR判断出血风险的敏感性为75.4％,特异性为80.2％.结论 INR可作为评估出血风险的重要指标,随INR增大患者出血风险明显增加.     

影响房颤患者华法林抗凝控制质量的因素分析

目的：了解房颤（atrial fibrillation,AF）患者华法林应用情况,探索影响华法林抗凝控制质量的因素。方法：收集2015年某院门诊应用华法林房颤患者信息,计算每位患者抗凝治疗范围内时间百分比[the percentage time in therapeutic International Normalised Ratio（INR）range,TTR]评价抗凝控制质量,应用χ²检验、t检验及logistic多元回归分析,探讨影响TTR的相关因素。结果：71例患者平均TTR为68.97%±12.12%,超过一半患者（53.52%）的TTR≥70%,单变量分析发现TTR≥70%患者与TTR<70%患者在年龄、职业、文化程度、出血风险（HAS-BLED）、INR检测次数、并发症数目方面均有显著差异（P<0.05）,logistic多元回归分析结果显示职业、INR检测次数、并发症数目与抗凝质量控制显著相关（P<0.05）。结论：职业、INR检测次数、并发症数目是影响房颤患者抗凝控制质量的相关因素。临床药师应做好华法林用药患者的随访工作,提高患者抗凝控制质量。     

3种华法林剂量预测模型与汉族人群的维持剂量相关性评价

目的：评价3种不同华法林剂量预测模型对汉族人群华法林每日维持剂量预测的准确性。方法：选取86例行VKORC1、CYP2C9基因多态性检测,华法林抗凝治疗且INR达标患者,收集患者平均每日华法林维持剂量、人口学信息及临床情况等;通过比较患者的实际剂量与预测剂量的差异,评价Gage模型、国际华法林药物基因组协会（IWPC）和药物作用靶点基因检测技术指南（指南）等推荐的华法林剂量预测模型的准确性。结果：Gage模型的预测剂量稍小于患者实际剂量,但没有统计学差异[（3.81±0.95）mg vs.（4.19±1.19） mg,P=0.199],预测准确率61.6%,而IWPC、指南模型的平均预测剂量均低于患者实际剂量[（3.48±0.85）mg,P=0.025和（3.38±0.66）mg,P=0.007）];预测准确率分别为48.8%和41.8%。结论：GAGE模型更适合威海地区汉族人群,但需大样本研究进一步验证其准确性。     

CYP2C19基因多态性对氯吡格雷抗血小板治疗疗效的影响

目的：探讨CYP2C19基因分型对急性冠状动脉综合征（ACS）患者使用氯吡格雷抗血小板的疗效。方法：对某院收治的ACS患者350例,入院时即检测CYP2C19的基因多态性及血小板聚集率,给予负荷量阿司匹林300 mg、氯吡格雷300 mg。之后常规给予患者阿司匹林100 mg·d^-1、氯吡格雷75 mg·d^-1,服用1年。根据基因型将患者分为快代谢型（n=140）、中等代谢型（n=161）和慢代谢型（n=49）。治疗后第7天第2次检测血小板聚集率。采用比浊法检测5 μmol·L^-1二磷酸腺苷诱导的血小板聚集率。对所有患者进行为期1年的随访,比较不同代谢类型患者严重心脏事件和联合心脏事件的发生率。结果：快代谢性CYP2C19*1/*1共140例,占40.0%;中等代谢型CYP2C19*1/*2 146例（41.7%）、CYP2C19*1/*3 15例（4.3%）;慢代谢型CYP2C19*2/*2 35例（10.0%）、CYP2C19*2/*3 14例（4.0%）、CYP2C19*3/*3 0例。服药7 d后,3组血小板最大聚集率均明显下降（P<0.05）。中等代谢型组最大血小板聚集率较快代谢型组高,差异有显著性（P<0.05）。慢代谢型组最大血小板聚集率均较快代谢型组和中等代谢型组高,差异有显著性（P<0.05）。不同代谢类型患者严重心脏事件发生率的比较无显著差异（P>0.05）,慢代谢型患者联合心脏事件的发生率高于快代谢型和中等代谢型患者（P<0.05）。结论：通过研究氯吡格雷对不同CYP2C19分型患者的抗血小板疗效,推荐对ACS患者在使用抗血小板药物时应进行基因多态性和血小板聚集率检测,及时调整抗血小板治疗方案,以预防不良心血管事件的发生。     

抑郁症患者CYP2D6基因多态性与文拉法辛代谢的相关性研究

目的：探讨汉族抑郁症患者CYP2D6基因多态性对文拉法辛体内代谢的影响。方法：以79名抑郁症住院患者为研究对象,采用液相色谱-质谱/质谱联用技术测定患者体内文拉法辛及去甲文拉法辛血药浓度,采用sanger测序对患者CYP2D6*4基因（rs3892097）、CYP2D6*5基因（基因缺失）、CYP2D6*10基因（rs1065852）和CYP2D6*14基因（rs5030865）进行SNPs分型。结果：（1）CYP2D6*4、CYP2D6*5、CYP2D6*14 3个基因的突变检出率为0%。根据CYP2D6*10（rs1065852）基因分型结果将患者分为3组：CC组（15例,19.0%）、CT组（25例,31.6%）和TT组（39例,49.4%）,其中T等位基因突变频率为65.2%;（2）3组间C_VEN、C_ODV、剂量校正前后C_VEN+C_ODV浓度差异无统计学意义;CC、CT和TT组C_ODV/C_VEN分别为6.0、4.0和3.0,其中CC与TT组间差异有高度统计意义（P<0.01）,CC与CT组间差异有统计意义（P<0.05）。（3）不同性别组间C_ODV和剂量校正前后的C_VEN+C_ODV差异有统计意义：女性组C_ODV（368.6 ng·mL^-1）高出男性组（267.0 ng·mL^-1）38.1%;女性组C_VEN+C_ODV（499.3 ng·mL^-1）高出男性组（406.7 ng·mL^-1）22.8%;女性组剂量校正后C_VEN+C_ODV（2.5 ng·mL^-1·mg^-1）高出男性组（2.1 ng·mL^-1·mg^-1）19.0%。结论：研究未发现不同CYP2D6基因型组间药物浓度差异有统计意义,但不同基因型组间文拉法辛代谢率（C_ODV/C_VEN）差异有显著性。文拉法辛体内代谢存在性别差异,但临床疗效是否有差异有待进一步研究;相对于男性患者,女性患者暴露于更高的药物浓度之下,发生药物不良反应的风险更高,因此临床治疗女性患者时剂量调整需更加缓慢和谨慎。     

CYP2C19基因多态性分布及不同治疗方案对心血管不良事件的影响

目的：研究CYP2C19基因多态性及在中国人群中的分布,分析PCI术后不同治疗方案对心血管不良事件发生的影响。方法：用全血直接PCR测定我院311名患者CYP2C19基因分型,分析不同种族CYP2C19基因型的频率以及比较不同治疗方案出现的心血管不良事件。结果：野生型等位基因CYP2C19*1的频率为63.99%,突变型等位基因CYP2C19*2和CYP2C19*3的频率分别为30.87%和5.14%。不同性别对CYP2C19代谢表型分布没有显著差异（P>0.05）。在中代谢和慢代谢型患者中,个体化治疗组出现PCI术后心血管不良事件明显低于常规治疗组（P<0.05）。结论：中国人群CYP2C19*2和CYP2C19*3的突变频率远高于欧洲及美洲国家人群,与其他亚洲国家韩国和日本相近。CYP2C19基因突变使氯吡格雷活性降低,在进行冠心病的治疗时,应根据基因的多态性进行个体化治疗,减少不良反应。     

SAMe-TT2R2评分对非瓣膜性房颤患者应用华法林抗凝控制质量的预测能力评价

目的：评估SAMe-TT₂R₂评分预测非瓣膜性房颤患者应用华法林抗凝控制质量的能力,探索SAMe-TT₂R₂评分与缺血性卒中和严重出血的关系。方法：对某院2014年1月-2015年6月初次应用华法林治疗的非瓣膜性房颤患者进行为期1年的随访,计算患者SAMe-TT₂R₂分数及抗凝治疗范围内时间百分比[the percentage time in therapeutic International Normalised Ratio （INR） range,TTR],运用ANOVA检验,ROC曲线分析评估SAMe-TT₂R₂评分对患者TTR的预测能力。记录随访期间缺血性卒中或严重出血事件发生情况以探寻SAMe-TT₂R₂分数与缺血性卒中和严重出血的关系。结果： 178例患者平均TTR为57.79%±15.53%,随着SAMe-TT₂R₂分数增加,患者TTR逐渐下降（P=0.001）,SAMe-TT₂R₂预测TTR<70%准确性较高（ROC曲线下面积为0.734,P<0.001）,最佳临界值为2,敏感度和特异性分别为95%和36%,Youden指数为最高值0.31,提示当SAMe-TT₂R₂>2时患者抗凝控制质量较差（TTR<70%）。随访期间共有7例患者（3.93%/年）发生缺血性卒中,3例患者（1.69%/年）发生严重出血。Kaplan-Meier生存分析提示SAMe-TT₂R₂评分与患者缺血性卒中年发生率无明显相关（Log Rank=1.653,P=0.647）。结论：在应用华法林抗凝的非瓣膜性房颤患者中,SAMe-TT₂R₂评分具有预测TTR的能力,针对抗凝控制质量较差患者,临床药师应为其制定个体化用药方案,改善抗凝质量。     

基层医院临床药师指导华法林抗凝治疗非瓣膜病心房颤动与传统治疗的差异

目的：探讨基层医院临床药师指导华法林抗凝治疗非瓣膜病房颤与传统治疗的差异,为基层医院临床药师开展临床药学服务提供参考。方法：2010年1月-2014年12月,收治非瓣膜病心房颤动患者58例,随机数字表法分成临床药师指导华法林抗凝治疗组28例（指导组）和非临床药师指导华法林抗凝治疗组30例（传统组）。指导组由临床药师采用药学服务模式指导患者华法林抗凝治疗、INR自主监测与剂量调整;传统组由医师依据INR值调整用药剂量、交代药物用法用量和注意事项的临床常规方式进行华法林抗凝治疗;2组目标国际标准化值（INR）均为2.0~3.0（年龄≥75岁者为1.5~2.5）,治疗开始后每间隔5 d在院监测一次INR值。2组患者开始华法林抗凝治疗的第12个月做一次随访调查。结果：2组患者达目标国际标准化值（INR）的比例有显著性差异（P<0.05）;自我监测与剂量调整能力、用药依从性和安全性方面的随访调查,结果有显著性差异（P<0.05）。结论：临床药师采用药学服务模式指导华法林抗凝治疗非瓣膜病心房颤动患者的方法效果显著。