艾灸对溃疡性结肠炎大鼠结肠TLR4和TNF-α蛋白及其mRNA表达影响的研究

目的：观察艾灸对溃疡性结肠炎大鼠结肠Toll样受体4（TLR4）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）蛋白及其mRNA表达的影响,进一步探讨艾灸治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法：将40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、隔药灸组和柳氮磺胺吡啶（Sulfasalazine,SASP）组。采用隔药灸天枢和气海穴及SASP灌胃进行干预。干预结束后,应用HE染色光镜下观察各组大鼠结肠病理学变化,分别采用Western blot法和FQ-PCR法检测大鼠结肠TLR4和TNF-α蛋白及其mRNA表达。结果：造模大鼠存在结肠组织病理学损伤,隔药灸组和SASP组大鼠结肠病理学与模型组相比均有一定的改善;与正常组比较,模型组大鼠结肠TLR4和TNF-α蛋白及其mRNA表达均显著增加（P<0.05）;经隔药灸和SASP干预后,大鼠结肠TLR4和TNF-α蛋白及其mRNA表达均显著降低（P<0.05）。结论：TLR4、TNF-α可能在溃疡性结肠炎中发挥炎症损伤作用,隔药灸能下调溃疡性结肠炎大鼠结肠TLR4和TNF-α的表达,提示其机制可能是通过下调 TLR4和TNF-α表达介导的级联反应达到艾灸治疗溃疡性结肠炎的目的。     

维生素D参与隔药灸对溃疡性结肠炎大鼠结肠的影响研究

目的：从维生素D参与免疫调节作用角度探讨隔药灸治疗UC的作用机制。方法：采用4%葡聚糖硫酸钠制备UC大鼠模型。将动物随机分为：正常组、模型组、隔药灸组和SASP组。观察各组大鼠DAI评分、结肠大体形态损伤评分及结肠组织病理学（HPS）评分、大鼠血清及结肠组织25(OH)D3、VDR浓度;检测大鼠结肠组织炎性细胞因子IFN-γ、TNF-α的表达和大鼠结肠组织VDR、RXRα mRNA的表达;分析25(OH)D3与治疗后DAI评分、结肠IFN-γ、TNF-α表达之间的相关性。结果：隔药灸显著降低UC大鼠DAI评分、结肠大体形态损伤评分及HPS评分（P<0.05）;隔药灸显著升高UC大鼠血清和结肠中25(OH)D3、VDR浓度（P<0.05）,以及结肠组织中VDR、RXRαmRNA表达（P<0.05）;隔药灸降低UC大鼠结肠组织中IFN-γ、TNF-α表达水平（P<0.05）。大鼠血清25(OH)D3浓度与治疗后DAI评分呈负相关,结肠25(OH)D3浓度分别与结肠IFN-γ、TNF-α表达呈显著负相关。结论：隔药灸可抑制UC大鼠结肠IFN-γ、TNF-α的表达,升高其血清和结肠中的维生素D及其受体的浓度;UC大鼠肠道炎症与低浓度的维生素D呈负相关。     

针灸对溃疡性结肠炎小鼠结肠组织中信号转导与转录活化因子3和低氧诱导因子-1α表达的影响

目的:观察针灸对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠组织中信号转导与转录活化因子3(STAT3)和低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响,探讨针灸治疗UC的机制。方法:雄性昆明小鼠采用DSS饮用法复制UC模型,模型成功后随机分为模型组、针刺组、艾灸组,每组8只,另设8只为空白组。选取"关元""足三里"进行针刺或艾灸治疗,每次15 min,每日1次,连续5 d。观察小鼠一般情况、疾病活动指数(DAI),HE染色法观察各组小鼠结肠组织形态学变化,免疫组织化学法、Western blot法检测结肠组织中STAT3和HIF-1α蛋白表达水平。结果:模型组较空白组一般状况差,DAI明显升高(P<0.01),光镜下模型组小鼠出现结肠黏膜破坏缺损、炎性细胞浸润等表现,模型组STAT3、HIF-1α的表达较空白组明显上调(P<0.05)。与模型组比较,针刺组和艾灸组小鼠的一般状况好转,DAI评分明显下降(P<0.05),结肠腺体破坏、黏膜下层水肿程度减轻,炎细胞浸润量减少,STAT3、HIF-1α蛋白表达明显下降(P<0.05)。结论:针刺或艾灸均对U...     

艾灸神阙穴对溃疡性结肠炎小鼠血清促炎性因子及肠黏膜紧密连接蛋白的影响

目的观察艾灸神阙穴对DSS诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠的疗效,探讨艾灸神阙穴对UC小鼠炎性反应及肠黏膜屏障的影响。方法以32只雄性ICR小鼠为研究对象,随机选取8只作为空白对照组,其余24只通过自由饮用3.5%DSS溶液8 d制成UC模型,造模成功后再随机分为模型组、艾灸组和阳性药物组,每组8只。持续干预8 d:艾灸组小鼠每日抓取放入固定器固定,艾灸神阙穴20 min,每日1次;空白对照组和模型组每日进行同艾灸组同样的抓取固定,但不进行其他操作,每日1次;阳性药物组小鼠按0.4 g/kg体质量灌服美沙拉嗪溶液,每日1次。干预结束后取小鼠血清用ELISA法检测促炎性因子白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平,取小鼠结肠组织用Western blotting法检测紧密连接蛋白1(ZO-1)、Occludin蛋白表达水平,采用HE染色法观察结肠组织病理切片,通过疾病活动指数评分(DAI)观测UC小鼠的恢复情况。结果与空白对照组相比,UC模型小鼠体质量减轻,大便稀软并带有脓血便,模型组小鼠DAI评分显著升高(P 0.05),病理组织切片显示结肠黏膜组织严重损伤,有明显炎性反应,促炎性因子IL-6、TNF-α含量明显升高(P 0.05),结肠组织中ZO-1、Occludin蛋白表达均显著降低(P 0.01)。与模型组相比,艾灸组与阳性药物组小鼠结肠组织病理损伤有显著改善,炎性反应下调,DAI评分显著降低(P 0.05),血清中IL-6、TNF-α含量显著降低(P 0.05),结肠组织中ZO-1、Occludin蛋白表达均显著升高(P 0.01)。结论艾灸神阙穴能有效缓解UC症状,升高结肠组织中紧密连接蛋白ZO-1、Occludin的表达,改善结肠组织损伤,降低UC小鼠血清炎性因子IL-6和TNF-α含量,对UC小鼠有治疗作用;提示艾灸对UC的起效机制可能与肠上皮黏膜屏障有关。     

基于p38MAPK/NF-κB信号通路的穴位埋线对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜上皮屏障的影响

目的 观察穴位埋线对溃疡性结肠炎（UC）大鼠肠黏膜上皮屏障的影响,基于p38MAPK/NF-κB信号通路探讨其治疗UC的作用机制。方法 将46只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组10只和造模组36只,采用腺嘌呤、番泻叶分阶段灌胃,再予2,4,6-三硝基苯磺酸与乙醇复合物灌肠制备UC大鼠模型。将成模大鼠随机分为模型组、柳氮磺吡啶（SASP）组和埋线组,埋线组于“足三里”“天枢”“肾俞”“脾俞”“大肠俞”“膈俞”埋线,14 d埋线1次,共3次;SASP组予SASP混悬液灌胃,空白组和模型组予等量生理盐水灌胃,连续42 d。观察大鼠一般情况,进行结肠黏膜损伤指数（CMDI）评分,HE染色观察结肠组织病理变化,ELISA检测血清白细胞介素（IL）-1β、IL-6及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,PCR检测结肠组织p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、核因子（NF）-κB p65、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、咬合蛋白（Occludin）mRNA表达,Western blot检测结肠组织p38MAPK、NF-κB p65、Occludin、ZO-1蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组大...     

艾灸对瞬时受体电位香草酸亚型1基因敲除小鼠局部皮肤中肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的:以肿瘤坏死因子-α(TNF-α)为指标,观察瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV 1)是否参与了艾灸启动穴位局部免疫炎性反应的过程。方法:将C 57BL/6J和TRPV1~(-/-)小鼠分别随机分为空白组、30min艾灸组、72h艾灸组,每组5只。各艾灸组均艾灸"足三里",艾灸温度控制在(46±1)℃,通过HE染色观察局部皮肤的形态结构变化,免疫荧光法观察局部皮肤TNF-α阳性细胞的数量。结果:与C 57BL/6J空白组小鼠比较,30min艾灸组表皮TNF-α阳性细胞数明显增多(P0.05),30min艾灸组、72h艾灸组真皮TNF-α阳性细胞数明显增多(P0.01);30 min艾灸组真皮TNF-α阳性细胞数明显多于72h艾灸组(P0.01)。与TRPV1~(-/-)空白组小鼠比较,30min艾灸组表皮TNF-α阳性细胞数明显增多(P0.01),30min艾灸组、72h艾灸组真皮TNF-α阳性细胞数明显增高(P0.01);30 min艾灸组小鼠表皮、真皮TNF-α阳性细胞数明显高于72h艾灸组(P0.01)。结论:艾灸启动穴位局部免疫炎性反应可能不依赖于TRPV 1通道。     

艾灸对炎症性肠病大鼠结肠黏膜肥大细胞和TRPV1的影响

目的:观察艾灸对炎症性肠病大鼠结肠肥大细胞和TRPV1的影响,探讨肥大细胞和TRPV1在艾灸治疗炎症性肠病中的作用机制。方法:将40只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组、西药组,每组10只。采用TNBs建立炎症性肠病大鼠模型,艾灸组给予天枢穴温和灸治疗,造模10 d后,收集标本.对大鼠行结肠大体形态评分及组织学损伤评分,分别用免疫组织化学法检测大鼠结肠黏膜中TRPV1的表达,采用改良甲苯胺蓝染色和计算机图像处理技术观察各组大鼠结肠肥大细胞形态和功能变化。结果:与正常组相比,艾灸组、模型组、西药组结肠组织学损伤评分均显著增高(P<0.01);而与模型组相比,艾灸组能显著改善组织学损伤评分(P<0.05)。模型组大鼠结肠黏膜肥大细胞脱颗粒率、TRPV1表达水平明显高于正常组(P<0.01);艾灸组结肠黏膜肥大细胞脱颗粒率、TRPV1表达与模型组相比显著降低(P<0.05)。结论:艾灸能够显著改善炎症性肠病大鼠结肠损伤及炎症反应,这可能与其有效抑制结肠黏膜肥大细胞脱颗粒、下调TRPV1的表达有关。     

Clinical research of ulcerative colitis treated with herbal cake-partitioned moxibustion

目的：观察隔药灸、隔麸灸对溃疡性结肠炎（UC）患者症状的改善作用和对结肠黏膜TNF-α及其受体的影响。方法：将67例UC患者随机分为隔药灸组（35例）和隔麸灸组（32例）,对比观察两组患者症状的改善情况,并采用免疫组织化学法观察两组结肠黏膜TNF-α及其受体的变化。结果：隔药灸组在腹泻、矢气、神疲乏力、里急后重、腰酸症状的改善方面优于隔麸灸组;隔药灸组结肠黏膜TNF-α、TNF-αR1、TNF-αR2的表达均较治疗前显著下降,隔麸灸组仅见TNF-αR1较治疗前显著下降。结论：艾灸对UC患者各项症状均有较好的改善作用,在腹泻、矢气等部分症状的改善方面,隔药灸优于隔麸灸;隔药灸能够下调结肠黏膜TNF-α、TNF-αR1、TNF-αR2的表达,隔麸灸仅能下调TNF-αR1表达。     

艾灸不同腧穴对KOA大鼠不同组织TNF-α、MMP-13表达的影响

目的 观察艾灸不同腧穴对膝骨性关节炎（KOA）大鼠血清及关节软骨与滑膜TNF-α、MMP-13表达的影响,探讨艾灸不同腧穴对KOA大鼠的特异性调节作用。方法 将大鼠随机分为空白组（Con）、模型组（KOA）、模型+足三里艾灸组（ST36）、模型+阳陵泉艾灸组（GB34）、模型+犊鼻艾灸组（ST35）,每组8只。选择关节腔注射MIA溶液的方法制备KOA模型。ST36、GB34、ST35组每日艾灸30 min,7天为1个疗程,共3个疗程。分析各组大鼠的机械刺激痛阈值（MWT）,番红固绿染色及OARSI评分,血清、关节软骨与滑膜的TNF-α、MMP-13的表达情况。结果 与Con组比,KOA组足底机械痛阈值下降,OARSI评分、血清与关节软骨和滑膜TNF-α以及血清、关节滑膜MMP-13的表达均明显升高（P<0.001,P<0.05）。与KOA组比,3个治疗组足底机械痛阈值上升,OARSI评分、血清TNF-α和MMP-13、软骨TNF-α均降低（P<0.001,P<0.05）,软骨MMP-13无明显变化（P>0.05）;ST36组滑膜TNF-α和MMP-13低表...     

基于多个miRNAs调节NF-κB信号通路探讨艾灸干预腹泻型肠易激综合征模型大鼠的抗炎机制研究

目的：观察艾灸对腹泻型肠易激综合征（IBS-D）模型大鼠多个微小RNAs(miRNAs)调节核因子-κB(NF-κB)、炎性因子的影响,探讨艾灸干预IBS-D的抗炎机制。方法：从52只初生幼鼠中随机抽取12只作为正常组,剩余大鼠制备IBS-D模型,将36只造模成功的大鼠随机分为模型组、药物组和艾灸组,每组12只。药物组予腹腔注射吡咯烷二硫代甲酸铵盐（PDTC）;艾灸组予“天枢”“上巨虚”艾灸治疗,每次20 min,均每天1次,共干预7 d。于造模前后及干预后测量各组大鼠体质量、稀便率和腹部回缩反射（AWR）最小容量阈值;干预后采用ELISA法检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素（IL）-1β、IL-8含量,HE染色观察各组大鼠结肠组织形态,实时荧光定量PCR法检测大鼠结肠组织miR-155、miR-125b、miR-29b、miR-31、miR-18a及NF-κB p65 mRNA的表达量,免疫荧光法检测大鼠结肠组织NF-κB p65、TNF-α、IL-1β、IL-8的蛋白表达。结果：造模后模型组大鼠体质量、AWR最小容量阈值均低于正常组（P<0.01）,稀便...     

搜风愈喘方基于ERK/p38MAPK 信号通路对支气管哮喘模型大鼠气道炎症的作用机制探讨

目的 探讨祛风、化痰、活血法并施的搜风愈喘方对哮喘大鼠气道炎症的作用机制以及对ERK/p38MAPK信号通路的调节作用。方法 将32只SD大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组、搜风愈喘方组。先以卵蛋白（OVA）致敏及雾化激发制备哮喘大鼠模型。造模成功后,各组大鼠给予相应药物干预治疗21d。ELISA法检测血清及肺泡灌洗液（BALF）中的白细胞介素13(IL-13）、肿瘤坏死因子α(TNF-α）含量;HE染色、PAS染色观察大鼠肺组织病理形态学变化;RT-PCR法检测肺组织匀浆中IL-13、ERK1、ERK2、p38MAPK的mRNA表达;Western Blot法检测肺组织中ERK、p-ERK、p-38MAPK、p-p38MAPK的表达。结果 ELISA法测定结果显示,与正常组比较,模型组血清中IL-13、TNF-α的含量升高（P<0.05）,肺组织中IL-13、ERK1、ERK2、p38MAPK的mRNA表达及p-ERK、p-38MAPK的蛋白表达均明显增强（P<0.05）;与模型组相比,地塞米松组及搜风愈喘方组可降低血清中IL-13、TNF-α的含量、肺组织中I...     

艾灸对慢性心力衰竭大鼠心功能及心肌组织TNF-α、NF-κB表达水平的影响

目的观察艾灸对慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)大鼠心功能及心肌组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA、核因子-κB(NF-κB)表达水平的影响,探讨艾灸对CHF心肌保护作用机制。方法采用盐酸多柔比星隔日腹腔注射的方法构建CHF模型,将造模成功的28只大鼠随机分为模型组、艾灸组、西药组、灸药(艾灸加西药)组,每组7只。艾灸组给予温和灸双侧肺俞、心俞,每日1次,每次15 min;西药组灌服卡托普利混悬液(25 mg/kg),每日1次;灸药组给予卡托普利混悬液(25 mg/kg)灌服结合温和灸双侧肺俞、心俞,每日1次,各组均连续3周。检测大鼠心率(HR)、心输出量(CO)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左室内压最大上升或下降速率(±dp/dtmax)、心肌组织NF-κB活性及TNF-αmRNA表达水平。结果与正常大鼠比较,建模大鼠的行为体征改变明显,心功能指标明显异常(P0.01),心肌组织HE染色结果符合CHF表现。与正常组比较,模型组大鼠HR、LVEDP升高,CO、LVSP、+dp/dtmax和-dp/dtmax降低(P0.01),心肌组织TNF-αmRNA表达及NF-κB蛋白结合活性明显升高(P0.01);与模型组比较,艾灸组、西药组及灸药组CO、LVSP、±dp/dtmax均升高,HR、LVEDP明显降低(P0.01),TNF-αmRNA表达及NF-κB核蛋白DNA结合活性降低(P0.01);与艾灸组和西药组比较,灸药组HR、LVEDP降低,CO、LVSP、±dp/dtmax升高明显(P0.05),且TNF-αmRNA表达降低明显(P0.05)。结论艾灸联合西药改善大鼠心功能指标,降低TNF-αmRNA表达方面优于单用艾灸及西药,可能通过降低TNF-αmRNA表达,抑制心肌组织NF-κB核蛋白的DNA结合活性,抑制免疫炎症反应,从而改善CHF症状。     

电针“内关”对心肌肥厚模型大鼠p38丝裂原激活蛋白激酶信号通路的影响

目的:探讨电针“内关”穴治疗心肌肥厚的作用机制.方法:SD大鼠40只用随机数字表法分为正常组、模型组、模型+p38抑制剂组、模型十电针组,每组10只.采用皮下注射盐酸异丙肾上腺素3 mg/(kg·d)建立心肌肥厚大鼠模型,模型+p38抑制剂组在造模基础上每日皮下注射0.3 mg/kg p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)特异性抑制剂SB 203580;模型十电针组电针“内关”穴,采用连续波,频率2 Hz,强度1 mA,通电20 min,1次/d,共14 d.其他两组不予治疗干预.放射免疫法技术检测心肌组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)含量,免疫印迹法检测p38MAPK、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)含量.观察电针“内关”穴对TNF-α和IL-1β、p38 MAPK、p-p38 MAPK的影响.结果:与正常组大鼠比较,模型组大鼠TNF-α和IL-1β、p38 MAPK、p-p38 MAPK均显著升高(均P＜0.01);经抑制剂和电针处理后,模型+p38抑制剂组和模型十电针组大鼠TNF-α、IL-1β、p38 MAPK、p-p38 MAPK均明显降低,与模型组比较差异有统计学意义(均P＜0.05),与正常组比较差异亦有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);模型+p38抑制剂组和模型十电针组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:电针“内关”可以明显抑制心肌肥厚p38 MAPK的磷酸化,这种保护作用可能通过抑制TNF-α、IL-1β等炎性因子的表达实现对p38 MAPK信号通路调节.     

艾灸对溃疡性结肠炎模型小鼠结肠黏膜损伤及结肠远端黏膜层CGRP阳性神经纤维表达的影响

目的:观察艾灸"足三里"对溃疡性结肠炎(UC)模型小鼠不同时间段结肠远端、中段、近端黏膜损伤及结肠远端黏膜层降钙素基因相关肽(CGRP)阳性神经纤维表达的影响。方法:将51只C57BL/6N小鼠随机分为7 d对照组(8只)、7 d模型组(7只)、7 d艾灸组(7只)、14 d对照组(6只)、14 d模型组(14只)和14 d艾灸组(9只)。模型组和艾灸组均予2%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液自由饮用7 d建立UC模型。造模3 d后,7 d艾灸组及14 d艾灸组予艾灸"足三里"干预,每天1次,每次10 min,分别干预5、12 d。采用HE染色法观察各组小鼠结肠组织形态,计算结肠远端、中段、近端黏膜损伤长度百分比。采用免疫荧光法观察各组小鼠结肠远端、中段、近端损伤部位黏膜层神经纤维及结肠远端黏膜层CGRP阳性神经纤维的表达。结果:造模后小鼠出现多处黏膜损伤,表现为上皮层消失、隐窝结构异常或消失。与7 d对照组比较,7 d模型组小鼠结肠长度更短(P0.001),结肠全段、远端及中段黏膜损伤长度百分比增加(P0.001);结肠远端、中段、近端损伤部位黏膜层神经纤维阳性表达及远端黏膜层CGRP阳性神经纤维表达增加(P0.001,P0.05,P0.01)。与7 d模型组比较,7 d艾灸组小鼠结肠远端及中段损伤部位黏膜层神经纤维阳性表达及远端黏膜层CGRP阳性神经纤维表达减少(P0.05)。与14 d对照组比较,14 d模型组小鼠结肠长度更短(P0.01),结肠全段黏膜损伤长度百分比增加(P0.001)。与14 d模型组比较,14 d艾灸组小鼠结肠长度更长(P0.05),结肠全段黏膜损伤长度百分比减少(P0.05)。结论:艾灸"足三里"可减少UC模型小鼠结肠黏膜层神经纤维及CGRP阳性神经纤维表达,从而改善结肠黏膜损伤程度。     

电针对帕金森病小鼠肠道ERK MAPK/NF-κB通路的影响

目的：探讨电针对帕金森病(PD)小鼠肠道ERK MAPK/NF-κB通路的影响。方法：采用鱼藤酮连续灌胃28 d构造PD小鼠模型,将C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组与电针组。电针组小鼠电针刺激“风府”“太冲”“足三里”穴,30 min/次,1次/d,连续治疗14 d。观察各组小鼠行为学变化;免疫组化法检测黑质及结肠组织中α突触核蛋白(α-synuclein, α-syn)的平均光密度;Western blot法检测结肠组织中目的蛋白表达;实时荧光定量PCR检测结肠组织中TNF-α和IL-1β mRNA的相对含量。结果：与对照组比较,模型组小鼠运动总路程、运动时间、穿过总分区及平均速度均降低,差异具有统计学意义(P<0.01);黑质和结肠组织中α-syn平均光密度升高,差异具有统计学意义(P<0.01);结肠组织中p-ERK MAPK、p-NF-κB蛋白表达及TNF-α和IL-1β mRNA水平显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,电针组小鼠运动总路程、运动时间、穿过总分区及平均速度均增加,差异具有统计学意义(P<0.01);黑质和结肠组织中α-syn平均光密度降低,差异具有统计学意义(P<0.01);结肠组织中p-ERK MAPK、p-NF-κB蛋白表达及TNF-α和IL-1β mRNA水平降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论：电针“风府”“太冲”“足三里”可以改善PD小鼠的运动功能障碍,降低α-syn表达,同时抑制肠道ERK MAPK/NF-κB通路激活。     

基于P38 MAPK信号通路探讨艾灸督脉对APP/PS1双转基因AD小鼠自噬水平的研究

摘要：目的：观察p38丝裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路来探讨艾灸督脉“百会”“大椎”“风池”穴对APPswe/PS1de9（APP/PS1）双转基因阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）小鼠脑内β-淀粉样蛋白（amyloid β-peptide,Aβ）清除功能的影响。方法：将48只APP/PS1双转基因AD小鼠随机分为模型组、艾灸组、西药Ⅰ组、西药Ⅱ组,每组小鼠12只且相同年龄相同条件的C57BL/6J雄性小鼠作为对照组。艾灸组小鼠实按灸“百会”、雀啄灸“大椎”和“风池”,每次灸20min,一天一次,治疗2周;西药Ⅰ组每只小鼠腹腔注射雷帕霉素,2mg?kg-1?d-1,治疗2周;西药Ⅱ组在艾灸组治疗基础上同时给予3-甲基腺嘌呤腹腔注射,1.5mg?kg-1?d-1,治疗2周;模型组和对照组动物不给予任何干预并常规饲养2周。各组小鼠于治疗结束后,用免疫组织法、透射电镜法、Western blot法依次分别检测小鼠皮质和海马脑区Aβ1-42 表达水平、海马区自噬体形成和海马组织p38MAPK、Bcl-2、Beclin-1相关蛋白表达。结果：免疫组织化学结果显示,与对照组相比,模型组小鼠大脑皮质和海马区Aβ1-42 蛋白表达阳性增多（P﹤0.01）;与模型组相比,艾灸组、西药Ⅰ组、西药Ⅱ组小鼠大脑皮质和海马区Aβ1-42 蛋白表达阳性减少（P﹤0.01）;与艾灸组相比,西药Ⅰ组大脑皮质和海马区Aβ1-42 蛋白表达差异无统计学意义（P﹥0.05）,西药Ⅱ组小鼠大脑皮质和海马区Aβ1-42 蛋白表达阳性增多（P﹤0.01）。透射电镜结果显示,模型组海马区可见神经元变形、萎缩或不规则,细胞胞质内自噬泡减少;艾灸组海马区有部分神经元变形、萎缩、不规则,胞质内自噬泡增多;西药Ⅰ组胞质内自噬泡增多,神经元变形;西药Ⅱ组偶见少量自噬泡和较多变形神经元。Western blot结果显示,模型组p38 MAPK、Bcl-2蛋白表达较对照组显著升高（P﹤0.05）,而模型组Beclin-1蛋白表达较对照组显著下降（P﹤0.05）。与模型组相比,艾灸组、西药Ⅰ组、西药Ⅱ组小鼠p38MAPK、Bcl-2蛋白表达均明显下降（P﹤0.05）,但Beclin-1蛋白表达上升（P﹤0.05）。与艾灸组相比,西药Ⅰ组小鼠p38MAPK、Bcl-2蛋白表达稍微升高（P﹤0.05）,而Beclin-1蛋白表达稍微下降（P﹤0.05）;西药Ⅱ组小鼠p38MAPK、Bcl-2蛋白表达显著升高（P﹤0.05）,而Beclin-1蛋白表达显著下降（P﹤0.05）。与西药Ⅰ组相比,西药Ⅱ组小鼠p38MAPK、Bcl-2蛋白表达显著升高（P﹤0.05）,Beclin-1蛋白表达显著下降（P﹤0.05）。结论：通过加速自噬的作用,艾灸督脉可以清除APP/PS1双转基因AD小鼠脑区Aβ1-42 蛋白异常沉积,作用机制与艾灸督脉抑制P38 MAPK信号通路的异常激活可能有关。     

艾灸对克罗恩病大鼠结肠NF-κB p65及TNF-α、IL-1β调节作用的研究

目的：通过观察隔药灸对克罗恩病大鼠结肠NF-κB p65及炎症因子TNF-α、IL-1β表达的影响,探讨艾灸治疗克罗恩病的效应机制。方法：清洁级雄性SD大鼠随机分为4组,分别为正常组、模型组、隔药灸组和西药组,采用三硝基苯磺酸（TN-BS）合乙醇溶液灌肠制备克罗恩病大鼠模型,模型制备成功后,隔药灸组取天枢穴（双）、气海穴进行隔药灸治疗,西药组采用美沙拉秦灌胃治疗。治疗结束后,采用HE染色,光镜下观察各组大鼠结肠组织病理学变化,应用免疫组织化学技术观察各组大鼠结肠NF-κB p65与TNF-α、IL-1β的表达,并进行图像分析。结果：与正常组比较,模型组大鼠结肠组织呈现裂隙状溃疡及炎症表现,部分大鼠结肠在黏膜下层可见肉芽肿形成,结肠NF-κB p65、TNF-α、IL-1β的表达均显著增高（均P〈0.01）;与模型组比较,隔药灸组、西药组大鼠结肠形态结构改善,肠道炎症减轻,结肠NF-κB p65与TNF-α、IL-1β的表达均显著降低（均P〈0.01）;相关性分析结果显示,TNF-α、IL-1β的表达与NF-κB p65的表达均呈正相关性。结论：隔药灸能下调克罗恩病大鼠结肠NF-κB p65、TNF-α、IL-1β的表达;艾灸（隔药灸）可能通过抑制克罗恩病大鼠结肠NF-κB p65的表达,进而减少其下游炎症因子TNF-α、IL-1β的表达,从而减轻肠道炎症,改善结肠组织形态结构,发挥治疗作用。     

艾灸对寒凝血瘀型痛经大鼠子宫瞬时受体电位香草酸亚型1表达的影响

目的观察艾灸神阙穴对寒凝血瘀型痛经大鼠扭体反应及子宫组织瞬时受体电位辣椒素亚型1(TRPV1)表达的影响,并探讨神阙穴肥大细胞发挥的功能。方法将50只雌性Wistar大鼠随机分为5组:对照组、模型组、艾灸组、色甘酸钠+模型组、色甘酸钠+艾灸组,每组10只。除对照组外均构建寒凝血瘀型痛经模型,造模后给予相应治疗。观察评估各组大鼠扭体反应,并采用免疫荧光、Western blot、qRT-PCR技术,检测各组大鼠子宫组织TRPV1在蛋白和mRNA水平的表达。结果艾灸神阙穴对寒凝血瘀痛经大鼠具有明显镇痛疗效;神阙穴皮下注射色甘酸钠具有一定镇痛作用;模型组大鼠子宫TRPV1表达较对照组升高(P<0.01);艾灸可下调痛经大鼠子宫TRPV1高表达(P<0.01)而达到镇痛疗效;色甘酸钠阻断神阙穴肥大细胞使艾灸镇痛效应及对子宫TRPV1表达的调节作用不同程度地削弱。结论艾灸神阙穴通过下调痛经大鼠子宫TRPV1高表达而达到治疗作用;神阙穴区MC在此效应过程中发挥了重要作用。     

龙胆泻肝汤通过H1R/TRPV1、PAR-2/TRPV1和P38MAPK通路干预湿疹大鼠的作用机制研究＊

目的 基于H1R/TRPV1、PAR-2/TRPV1和P38MAPK通路探讨龙胆泻肝汤对湿疹大鼠的保护作用及相关机制。方法 60只大鼠按体质量随机分为正常组、模型组、氯雷他定组（1 mg·kg^-1）和龙胆泻肝汤低、中、高剂量组（6.3g·kg^-1、12.6g·kg^-1、25.2g·kg^-1），每组10只。除正常组外，其余各组大鼠采用二硝基氯苯（DNCB）建立湿疹模型，然后各组大鼠灌胃相应药物干预，1次/天，连续干预21天。末次给药后，测定大鼠耳肿胀度；采用苏木素-伊红（HE）染色法观察各组大鼠背部皮肤病理学变化；采用免疫组织化学法检测大鼠皮肤组织H1R、PAR-2、TRPV1蛋白水平；采用蛋白质印迹（WB）法检测大鼠皮肤组织P38MAPK、P-P38MAPK蛋白水平。结果 与正常组比较，模型组大鼠耳肿胀度显著增加（P<0.05）且背部皮肤出现湿疹病理变化；皮肤组织中H1R、PAR-2、TRPV1水平与p-P38MAPK/P38MAPK比值显著升高（P<0.05）；与模型组比较，氯雷他定组和龙胆泻肝汤低、中、高剂量组耳肿胀度显著减小（P<0.05）且病变程度减轻；皮肤组织中H1R、PAR-2、TRPV1水平与p-P38MAPK/P38MAPK比值显著降低（P<0.05）。结论 龙胆泻肝汤对湿疹大鼠具有保护作用，其机制可能与抑制H1R/TRPV1、PAR-2/TRPV1和P38MAPK通路有关。     

艾灸对腹泻型肠易激综合征大鼠结肠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响

目的:观察艾灸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠血清炎性细胞因子、结肠组织中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核转录因子-κB(NF-κB)的影响,探讨艾灸干预IBS-D的机制。方法:将健康雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组和艾灸组,每组8只。采用慢性束缚联合番泻叶灌胃建立IBS-D大鼠模型。艾灸组大鼠予以艾灸"天枢""上巨虚",30 min/次,1次/d,共干预7 d。观察各组大鼠稀便率和直结肠扩张所引起腹部回缩反射(AWR)的最小容量阈值;ELISA法检测各组大鼠血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6及肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;HE染色观察各组大鼠结肠组织病理改变;免疫组织化学法检测各组大鼠结肠组织中TLR4和NF-κB(p65)的表达;实时荧光定量PCR法检测结肠组织中TLR4、MyD88和NF-κB(p65) mRNA的相对表达量;Western blot法检测结肠组织中TLR4、MyD88和NF-κB(p65)蛋白的相对表达量。结果:与空白组比较,模型组大鼠结肠存在低度炎性反应,AWR的最小容量阈值显著下降(P<0.01),稀便率...