锗—132对氧自由基清除作用的研究

用ＦｅＳＯ４－ＮＡＤＰＨ引发大鼠肝微粒体产生羟自由基（ＯＨ），用黄嘌呤／黄嘌呤氧化酶（Ｘ／ＸＯ）系统产生超氧阴离子自由基（Ｏ２），分别用电子自旋共振技术（ＥＳＲ）和比色法研究了羧乙基锗倍半氧化物（锗—１３２）对ＯＨ和Ｏ２产生量的影响。结果表明分别向产生ＯＨ和Ｏ２的反应体系中加入锗—１３２后，可使ＯＨ和Ｏ２的产生量显著减少，且随加入锗—１３２剂量的增加，ＯＨ和Ｏ２的产生量减少也越显著。本研究结果说明锗—１３２对ＯＨ和Ｏ２具有直接清除作用。     

褐藻硫酸多糖清除活性氧自由基作用及动力学的ESR研究

利用ＥＳＲ和自旋捕集技术，首次观察了不同方法提取的两种褐藻硫酸多糖（ＳＰ）对Ｆｅｎｔｏｎ反应和光照Ｈ２Ｏ２两个体系产生的·ＯＨ清除作用，及对次黄嘌呤／黄嘌呤氧化酶和光照核黄素两个体系产生的Ｏ－．２（ＨＯ·２）清除作用，并且对其清除·ＯＨ和Ｏ－．２的动力学进行了研究。结果表明，热提取物（ＳＰｈ）和冷提取物（ＳＰｃ）均有明显清除ＯＨ和Ｏ－．２作用，且呈量效关系。对Ｏ－．２的清除率高于对·ＯＨ的清除率（８４．７％ｖｓ６９．２％）。ＳＰｈ对两种自由基的清除效果比ＳＰｃ好。在光照核黄素体系中ＳＰｈ３０ｇ／Ｌ几乎完全清除Ｏ－．２，ＳＰｃ可清除６８．９％，而在次黄嘌呤／黄嘌呤氧化酶体系中只需３ｇ／ＬＳＰｈ便可完全清除Ｏ－．２。１５ｇ／ＬＳＰｈ和３０ｇ／ＬＳＰｃ对Ｆｅｎｔｏｎ反应产生的·ＯＨ的清除率分别为７７．７％和６８．７％。动力学研究表明，ＳＰｈ与·ＯＨ和Ｏ－．２反应的表观速率常数分别为７．１×１０９ｍｏｌ－１·ｓ－１和３２３０．５ｍｏｌ－１·ｓ－１。实验提示ＳＰ可作为一种预防性的抗氧化剂。确证ＳＰ清除自由基为研究其抗ＨＩＶ及肿瘤的机理提供了一条新途径。     

4—氧和4羟四甲基哌啶氮氧自由基及衍生物对氧自由基的清除作用

用Ｆｅｎｔｏｎ反应产生羟基自由基（ＯＨ·）,用电子自旋捕集技术（ＥＰＲ）测定了四甲基哌啶氮氧自由基及衍生物（４－ＴＥＭＰＯ）对ＯＨ·的捕获能力。用吩嗪硫酸二甲酯（ＰＭＳ）－ＮＡＤＨ体系产生超氧阴离子自由基（Ｏ—·２）,用ＮＢＴ还原法比较了４－ＴＥＭＰＯ对Ｏ—·２的清除能力。结果显示：①两个四甲基羟哌啶（ＨＴＭＰＯＨ、ＯＴＭＰＯＨ）和两个四甲基哌啶氮氧自由基（ＨＴＭＰＯ、ＯＴＭＰＯ）在４０～１６０μｍｏｌ·Ｌ－１能清除Ｏ—·２。②４－ＴＥＭＰＯ在抗氧化浓度甚至低于此浓度均使ＤＭＰＯ－ＯＨ·（二甲基吡咯啉氮氧化合物与ＯＨ·形成的加合物）的信号明显高于对照。两个阴性对照四甲基哌啶（ＨＴＭＰ、ＯＴＭＰ）对Ｏ—·２·没有清除作用     

双孢菇清除·OH自由基作用及对胸腺嘧啶核苷酸（5＇－TMP）辐射防护作用的ESR研究

本实验利用ＥＳＲ技术研究了双孢菇提取物中大、小分子化合物的清除·ＯＨ作用及辐射对胸腺嘧啶核苷酸间接损伤的防护作用。结果表明，双孢菇提取物中大、小分子均有较好的清除·ＯＨ作用，且呈明显量效关系。通过清除·ＯＨ，双孢菇对辐射导致的胸腺嘧啶核苷酸（５＇－ＴＭＰ）的间接损伤有显著防护作用。     

氧化苦参碱清除·OH自由基作用及对胸腺嘧啶核苷酸辐射防护作用的ESR研究

本实验利用ＥＳＲ技术研究了氧化苦参碱清除·ＯＨ作用及辐射对胸腺嘧啶核苷酸（５′－ＴＭＰ）间接损伤的防护作用。结果表明：氧化苦参碱有较好的清除·ＯＨ作用，且呈明显量效关系。通过清除·ＯＨ，氧化苦参碱对辐射导致的胸腺嘧啶核苷酸（５′－ＴＭＰ）的间接损伤有显著防护作用     

氟与硒对离体大鼠肝酶和氧自由基代谢的影响

观察了０．０５～１０００ｍｍｏｌ／Ｌ氟化钠与０．００１～２０ｍｍｏｌ／Ｌ亚硒酸钠单独或联合对大鼠离体肝匀浆和肝细胞碱性磷酸酶（ＡＫＰ）和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性以及肝细胞内活性氧代谢全过程的影响。结果表明，硒可消除或减轻氟对ＡＫＰ的抑制作用；氟未改变硒对ＧＳＨ－Ｐｘ的激活作用；硒对肝细胞内活性氧代谢的诸多有利作用，如羟自由基（ＯＨ＊）产生量减少、脂质过氧化物（ＬＰＯ）含量下降等，并未因氟的共有而减弱。     

绿茶清除羟自由基作用的实验研究

在Ｆｅ＾２＋－ＥＤＴＡ和Ｈ２Ｏ２发生羟自由基（ＯＨ）的模拟体系中，用电子顺磁共振谱仪（ＥＳＲ）观察了绿茶水溶液对ＯＨ的清除效果。结果显示，ＥＳＲ的ＯＨ峰强随茶汁浓度的增加而减弱，在２５ｍｌ水溶液中绿茶为１、５、１０ｇ时，对ＯＨ的清除率分别为１７．９％、５０．５％、８５．６％。     

胆红素抗间二硝基苯所致氧化作用的研究

目的研究胆红素的抗氧化作用。方法在间二硝基苯（ｍ－ＤＮＢ）诱导大鼠氧化损伤模型的基础上，采用正交试验设计方差分析，观察不同时间、不同浓度的胆红素的抗氧化作用。结果经胆红素预处理后，大鼠肝细胞丙二醛（ＭＤＡ）含量降低，Ｏ－２·、·ＯＨ的产生量减少，差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。结论胆红素有可能通过抑制脂质过氧化、清除自由基和ＧＳＨ发生联合抗氧化作用。     

低剂量γ射线照射后骨髓细胞抗自由基损伤的兴奋效应

２和１０ｍＧｙ６０Ｃｏγ射线对５～６周龄Ｗｉｓｔａｒ品系雄性大鼠进行全身照射后４ｈ，动物骨髓细胞中还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）浓度、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性显著高于平等对照组。１０ｍＧｙγ射线照射后４ｈ，骨髓细胞中谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰｘ）活性显著升高。１００ｍＧｙγ射线照射后４ｈ未发现上述效应。２～１００ｍＧｙγ射线照射后动物骨髓细胞中超氧阴离子自由基（Ｏ－２）浓度、过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性未见显著变化。在首次１０ｍＧｙγ射线对动物全身照射后４ｈ，再次用相同剂量进行重复照射，骨髓细胞中ＧＳＨ浓度、ＧＳＨＰｘ、ＳＯＤ活性立即恢复到对照水平。由于ＧＳＨ、ＧＳＨＰｘ、ＳＯＤ是细胞中抗自由基损伤的重要物质，本研究结果显示动物首次受低剂量γ射线照射后，骨髓细胞抗自由基损伤系统的防御反应增强即兴奋效应，对相继的第二次照射产生了防卫作用。抗自由基损伤系统的兴奋效应可能与细胞遗传学适应性反应存在着相关性。     

羟自由基（OH·）对人胚肺成纤维胞的体外作用

观察了由Ｆｅｎｔｏｎ反应产生的羟自由基（ＯＨ·）对人胚肺成纤维细胞的体外作用。结果表明，ＯＨ·能明显促进成纤维细胞增殖和胶原合成，由此推测，ＯＨ·可能对矽肺的发生起到一定作用。这个结论为矽肺的抗氧化防治提供了进一步理论依据。     

葡多酚对活性氧自由基的清除作用研究

目的 :　探讨葡多酚 ( GPC)对活性氧自由基的清除作用。方法 :　采用电子自旋共振 ( ESR)和自旋捕集技术直接测定不同浓度 GPC对 Fenton反应体系产生的羟自由基 (· OH)、光照核黄素 /EDTA体系产生的超氧阴离子 ( O·2 )及 Fe2 + 启动线粒体膜脂质过氧化产生的脂类自由基 ( LOO· )清除作用。结果 :　 GPC浓度为 1 mg/L、1 0 mg/L、1 0 0 mg/L、1 0 0 0 mg/L对·OH的清除率 ( % )依次为 9.0、2 0 .6、47.7、57.7,对 O·2 的清除率 ( % )分别为 1 0 .9、1 7.0、50 .9、72 .1 ,对LOO·的清除率 ( % )依次为 39.8、49.6、65.9、71 .4。葡多酚对· OH、O·2 及 LOO· 50 %的清除浓度 ( IC50 值 )分别为 1 2 8.9mg/L、89.4mg/L、1 0 .4mg/L。结论 :　葡多酚对三种活性氧自由基均有不同程度的清除作用 ,其中 LOO· >O·2 >· OH。     

纯化前后海藻硫酸多糖体外清除自由基的电子自旋共振技术研究

目的对比研究纯化前后海藻硫酸多糖(sulfated polysaccharide from Laminaria japonica,SP)体外自由基清除作用。方法按照不同反应体系分别产生羟自由基·OH、超氧阴离子自由基O2·-与脂质自由基RO·,分别在各体系中加入纯化前后SP,采用电子自旋共振技术(electron spin resonance,ESR)对比研究其自由基清除作用。结果纯化前SP 1.25mg/ml对·OH的清除率为60.78%,但随浓度增加清除作用明显减小;0.8mg/ml基本能够全部清除O2·-;对RO·清除作用不明显。纯化后,SP在一定浓度范围内对·OH的清除作用呈量效关系,12mg/ml基本能全部清除O2·-,4 mg/ml对RO·的清除率为23.65%。结论纯化前低浓度SP虽表现活性氧(ROS)自由基清除作用,但由于成分复杂,其机制难以解释;纯化后SP成分均一性提高,具有一定的ROS和RO·清除作用。     

枸杞黄酮类化合物清除氧自由基及对小鼠L_(1210)癌细胞能量代谢的抑制作用

采用ＥＳＲ自旋捕捉法和微量量热法能量研究了枸杞总黄酮（ＴＦＬ）对活性氧自由基的清除作用，及对Ｌ１２１０细胞热代谢的影响。结果表明：在Ｆｅｎｔｏｎ体系中，ＴＦＬ７．５～２００ｍｇ／Ｌ对ＯＨ·的清除率为２０％～７２％；在Ｘａｎ／ＸＯ体系中ＴＦＬ０～２１７ｍｇ／Ｌ，Ｏ－·２清除率为０～５１％；ＴＦＬ０．５６ｇ／Ｌ对多形核白细胞ＰＭＮ呼吸爆发的产热峰完全抑制，对Ｌ１２１０细胞的能量代谢有明显抑制作用，对正常大鼠ＰＭＮ能量代谢有促进作用。     

间羟基苯甲酸荧光法测定血清对羟自由基代谢的影响

Fenton反应体系中产生的羟自由基(·OH)攻击苯甲酸后,形成羟基苯甲酸,后者产生荧光并可定量检出。本文对该法进行了系统的条件试验,间羟基苯甲酸的直线线性范围0.0～9.0mg/L,CV<5%,验证了其灵敏度、可靠性和精密度,使其操作技术更符合简便化和规范化要求。首次提出一项可用于评价血清对·OH代谢的。影响能力的新指标—容受单位(X),建立了计算该指标的对数回归方程;(抑制率)=-32.13+52.73 lgX。30份血清样品的初步测定结果表明,正常人血清对·OH代谢的影响能力为9.7～20.7容受单位(95%可信区间)。     

蛋清的蛋白酶解物清除自由基能力的研究

目的研究胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶及Alcalase碱性蛋白酶对蛋清蛋白的水解效果以及其酶解物对自由基的清除能力。方法采用茚三酮法分析五种蛋白酶对蛋清蛋白的水解效果;通过Fenton体系和邻苯三酚自氧化体系测定五种蛋白酶水解产物对羟自由基及超氧阴离子的清除能力。结果五种蛋白酶在其最适反应条件下,水解度大小依次为:alcalase碱性蛋白酶>胰蛋白酶>木瓜蛋白酶>中性蛋白酶>胃蛋白酶;羟自由基清除能力强弱依次为:木瓜蛋白酶>alcalase碱性蛋白酶>胰蛋白酶>中性蛋白酶>胃蛋白酶;超氧阴离子清除能力强弱依次为:木瓜蛋白酶>alcalase碱性蛋白酶>中性蛋白酶>胃蛋白酶>胰蛋白酶。木瓜蛋白酶水解3h的产物对两种自由基清除能力最强,对羟自由基的清除率为65.63%,对超氧阴离子的清除率为38.40%。结论蛋清的蛋白酶解物具有清除羟自由基及超氧阴离子的能力,且对羟自由基的清除能力大于超氧阴离子。     

活性氧对血红蛋白损伤机理的研究

研究了超氧负离子（Ｏ－２）和过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）对血红蛋白（Ｈｂ）的损伤作用。结果表明二者对Ｈｂ的损伤主要集中在血红素辅基部分,但二者损伤途径不同,Ｏ－２是通过电荷中和破坏了辅基与其周围氨基酸残基之间的静电相互作用,从而使辅基完整地脱落;而Ｈ２Ｏ２则是通过Ｆｅｎｔｏｎ反应与血红素辅基中心的Ｆｅ２＋反应产生羟自由基（ＯＨ）,ＯＨ在短距离内定点损伤卟啉环结构,使辅基遭到不可逆转的破坏     

松花粉抗氧化性的体外实验研究

目的:通过体外试验对马尾松花粉的消炎、抗氧化性能进行评价。方法:四个模拟人类疾病过程中的生化反应系统为(1)MPO/H2O2系统主要模拟炎症反应,使中性粒细胞活化产生次氯酸;(2)Xan-XOD系统:模拟缺血再灌注,主要产生过氧化氢,超氧自由基和羟自由基;(3)Fenton系统,模拟体内炎性反应,从转铁蛋白或铁蛋白中释放出铁而产生羟自由基;(4)ABTS系统,用于总抗氧化能力的评估。结果:松花粉对以上反应系统所产生的过氧化氢、超氧自由基、羟自由基和次氯酸等活性氧系具有较好的清除作用,以浓度依赖关系抑制反应的发生并发挥抗氧化作用,对涉及炎症反应的MPO酶活性有一定的抑制作用。     

含硒含硫氨基酸清除超氧阴离子自由基的研究

目的通过硒代胱氨酸、硒代蛋氨酸和胱氨酸对超氧自由基(O_2·)的清除能力对比实验,研究含硒含硫氨基酸的抗氧化作用。方法采用核黄素-蛋氨酸光照法测定含硒含硫氨基酸清除超氧阴离子自由基的能力。结果清除O 2_·能力的强弱顺序为硒代胱氨酸>胱氨酸>硒代蛋氨酸。以硒代蛋氨酸代替核黄素-蛋氨酸光照体系中的蛋氨酸,发现两物质虽然结构相似,但是硒代蛋氨酸供电子能力不如蛋氨酸。结论硒代胱氨酸、硒代蛋氨酸、胱氨酸均能直接清除VB2产生的O_2·。蛋氨酸作为电子供体,可促进VB2光分解产生O_2·,而硒代蛋氨酸则直接清除VB2光分解后产生的O·_2。     

硒、锗对羟自由基的联合清除作用

在以FeSO4 还原型辅酶Ⅱ引发大鼠肝微粒体产生羟自由基体系中 ,加入不同剂量Na2 SeO3、Ge 132和Na2 SeO3与Ge 132混合物 ,以N 特丁基 2 苯硝酮作为捕获剂 ,采用电子自旋共振技术检测羟自由基。结果表明在本实验剂量范围内 ,随着Na2 SeO3,Ge 132和其混合物浓度增加而羟自由基清除率提高 ,且在低剂量条件下 ,Na2 SeO3与Ge 132有协同增效清除作用。