胰岛移植的现状与未来(文献综述)

阻碍胰岛移植的关键因素仍是 :供体数量的不足 ,自体、同种异体间及异种间的免疫排斥、随时间而呈现的移植物功能的退化。基因工程技术、异种移植以及胰岛干细胞移植等将可能有效地解决供体数量的不足和功能的减退 ,本文仅就胰岛移植在上述领域的现状及发展作一简要的综述。     

异种胰岛移植

胰岛移植可以使糖尿病患者血糖稳定并能预防严重并发症,由于人类同种胰岛移植存在着供体不足,大量糖尿病患者因此得不到及时治疗。在实验研究基础上,国内外均进行了异种胰岛移植的临床研究,证实了胰岛移植在血糖控制及延缓并发症的发生发展是有效的,但是异种移植的排斥、长期应用免疫抑制剂的安全性、仍是干扰此项研究的障碍。尽管异种移植面临众多困难,但对供体器官和组织的极大需求促使克服种间移植的组织特异性不断取得进展。     

异种胰岛移植近展

异种胰岛移植近展张伟杰实验研究已证明，胰岛移植不仅能逆转糖尿病动物的高血糖状态，而且能防止糖尿病慢性并发症的发生、发展。但供体的严重短缺大大阻碍了临床胰岛移植的发展。不论是胎儿还是成人供体，其来源均十分有限，故选择动物供胰、发展异种移植很有必要。目前...     

罗非鱼作为异纲胰岛移植供体的研究进展

胰岛移植已经成为胰腺移植中具有广泛应用前景的重要组成部分,现有异种胰岛移植研究多集中在小鼠、大鼠、豚鼠、犬和猪等哺乳纲动物之间,仅少量文献报道了异纲动物间的胰岛移植。本文着重对异纲来源的罗非鱼作为胰岛移植供体时面临的挑战及其对策作一简略综述。     

免疫隔离技术与胰岛异种移植

综述了免疫隔离技术与胰岛异种移植的进展。对免疫隔离技术的研究显示，选择猪胰岛作为糖尿病患者的供体最有前途。但是，异种移植的胰岛细胞生存活力和功能仍然有限，这可能与移植物慢性排斥反应、细胞因子、一氧化氮等细胞毒性物质和胰岛组织中心区缺氧有关。     

免疫隔离技术与胰岛异种移植(文献综述)

综述了免疫隔离技术与胰岛异种移植的进展。对免疫隔离技术的研究显示 ,选择猪胰岛作为糖尿病患者的供体最有前途。但是 ,异种移植的胰岛细胞生存活力和功能仍然有限 ,这可能与移植物慢性排斥反应、细胞因子、一氧化氮等细胞毒性物质和胰岛组织中心区缺氧有关     

微囊包膜猪胰岛异种移植的实验与临床研究

目的 探讨微囊化新生猪胰岛作为临床异种胰岛移植供体来源治疗Ⅰ型糖尿病的可能性。方法 利用微囊技术包膜新生猪胰岛细胞后体外培养，比较微囊化及未微囊化新生猪胰岛细胞的胰岛素分泌能力和胰岛素刺激释放试验。采用腹腔镜技术，对３例Ⅰ型糖尿病患者进行微囊新生猪胰岛异种移植治疗，观察移植前后空腹血糖、Ｃ肽和胰岛素用量的变化。结果 微囊与未微囊化新生猪胰岛在体外培养中各项检测指标差异无显著意义，两者均具有良好的生物活性。临床移植术后，２例受体的Ｃ肽峰值较移植前分别升高１１及２３倍，其中１例胰岛素用量减少６３％，１例完全停用胰岛素，成为胰岛素不依赖者。此２例的移植胰岛在受体内保持有功能存活已达８０ｄ。结论 海藻酸钠－聚赖氨酸－海藻酸钠微囊化新生猪胰岛生物活性良好，能在人体内功能存活并产生疗效，将可能是临床上异种胰岛移植的一个较好     

异种胰岛细胞移植的研究进展

随着对糖尿病治疗方法的研究进展,异种胰岛移植已被重新认识。笔者综述异种胰岛移植的发展简史、异种胰岛来源、胰岛移植物的制备及鉴定、主要的免疫排斥反应及其防治措施以及展望异种胰岛移植的前景。     

异种胰岛移植治疗Ⅰ型糖尿病的观察及护理

异种胰岛移植治疗Ⅰ型糖尿病的观察及护理同济医科大学附属同济医院肖春梅胰岛移植是８０年代兴起的一种治疗Ⅰ型糖尿病的新方法，有效的胰岛移植面临的重要问题之一是难以获得大量功能良好的胰岛。不论是成人还是胎儿来源均有限，且受热缺血时间、分离方法、胎儿引产方法...     

紫外线对大鼠胰岛树突状细胞的影响

目的探讨紫外线对大鼠胰岛树突状细胞(Dendriticcell,DC)结构和功能的影响.方法分离大鼠胰岛经紫外线照射后利用免疫组织化学(ABC)方法显示胰岛Ia+DC,透射电镜观察其超微结构,同时将处理的胰岛移植于糖尿病小鼠模型.结果分离胰岛经紫外线照射后内分泌细胞变化不明显,Ia+DC的突起缩短,着色变浅,电镜观察胞质中形成抗原肽-MHCⅡ复合物的小泡状结构及吞饮小泡减少,异种移植实验胰岛移植存活期10.54±2.06天,紫外线照射组存活期17.58±1.88天,差异有显著性(P＜0.05).结论适量的紫外线照射对胰岛内分泌细胞无明显损伤,DC结构受损,功能受到抑制.异种移植实验表明紫外线照射后胰岛移植物存活期延长.     

免疫缺陷树突状细胞诱导异种胰岛细胞移植耐受

目的　研究受体来源免疫缺陷树突状细胞(dendriticcell, DC)诱导异种胰岛细胞移植的免疫耐受作用及其机制。方法　从BALB/C小鼠骨髓干细胞诱导分化免疫缺陷DC,负载Wistar大鼠MHC抗原。将上述DC通过尾静脉回输糖尿病小鼠体内(预处理组), 7d后分别将Wistar或SD大鼠胰岛细胞移植于受体鼠肾包膜下。观察移植物存活时间,检测T细胞增殖及TH1 /TH2细胞因子的表达。结果　与对照组相比,预处理组胰岛细胞存活时间明显延长(P < 0. 0 5 ),而以SD大鼠胰岛细胞作为供体的移植物存活时间无明显改变。免疫缺陷DC预处理受体鼠T细胞增殖反应微弱,且TH1 /TH2细胞因子表达明显下降。结论　负载异种MHC抗原的免疫缺陷型DC预处理受体可诱导抗原特异性T细胞无能,以及TH1 /TH2细胞因子的低表达,从而有效地延长异种胰岛细胞存活时间。     

胰腺干细胞和胰岛移植

胰岛移植是治疗糖尿病行之有效的方法，但是胰岛移植需要解决两大难题：首先，每位受体需要移植大约10万个胰岛，所以要有足够量的胰岛供体，而目前胰腺供体相当匮乏；其次是免疫排斥问题，当前所采用的免疫移植剂治疗都有严重的副作用。     

微囊化新生猪胰岛细胞体外培养的研究

目的 探讨海藻酸钠－聚赖氨酸－海藻酸钠生物微胶囊（ＡＰＡ微胶囊）微囊化新生猪胰岛细胞作为异种移值供体来源的可能。方法 利用微囊技术包膜新生猪胰岛细胞本外培养，放免疫法检测培养液中胰岛素含量，比较微囊化及未微囊化新生猪胰岛素分泌能力和胰岛素刺激释放试验、组织学检查。结果 二者差异无显著意义，均具有良好的生物活性。结论 微囊包膜后胰岛细胞的生物活性和分泌功能良好，微囊包膜新生猪胰岛细胞可能是临床异种胰     

供者肝脾细胞输注与改良的微囊法联合应用延长异种胰岛移植的存活

目的探讨改良的微囊胰岛和肝脾细胞输注联合应用,对异种胰岛细胞移植的影响。方法以新生杜洛克小猪为供者,糖尿病SD大鼠为受者。将受者随机分为6组:第1组为肝脾细胞输注移植组;第2组为微囊胰岛细胞移植组;第3组为联合应用移植组;第4组为裸胰岛细胞移植组;第5组为空囊移植对照组;第6组为生理盐水对照组。各组经尾静脉输注肝脾细胞或生理盐水,再将相应的移植物植入大鼠腹腔。术后观测血糖、血清C肽变化、移植胰岛的功能存活期及糖尿病大鼠的生存期。结果第3组控制血糖水平和血清C肽释放量比第1、2组更为平稳而持久,并明显延长移植胰岛的功能存活期和糖尿病大鼠的生存期(P<0.01)。结论异种胰岛细胞移植中,肝脾细胞输注与静电改良微囊法联合应用可诱导免疫耐受,能有效地延长移植胰岛的功能存活期。     

激活型Akt1转染大鼠胰岛联合应用细胞毒T淋巴细胞相关抗原4免疫球蛋白延长异种胰岛移植存活

目的 观察激活型Akt1基因转染大鼠胰岛对异种胰岛移植功能和存活的影响.方法 提取大鼠胰岛培养转染,AO/EB和Tunel染色检测存活和凋亡;BALB/C糖尿病小鼠肾被膜下胰岛移植.分4组,实验组:Akt1转染胰岛联合应用细胞毒T淋巴细胞相关抗原4免疫球蛋白(CTLA-4Ig);Akt1组:移植Akt1转染的胰岛;未转染组:单纯胰岛移植,CTLA-4Ig组:单纯胰岛联合应用CTLA-4Ig;观察胰岛移植后功能存活时间和平均生存时间.结果 Akt1转染胰岛体外细胞抗凋亡生存率提高了25%;实验组移植物功能存活(32.5±6.6)d,平均生存时间(39.6±5.9)d比Akt1组(15.4±3.5)、(22.5±1.7)d和CTLA-4Ig组(18.7±4.5)、(21.7±3.5)d未转染组(4.5±2.8)、(6.8±3.1)d明显延长(P<0.05).结论 激活型Akt1转染大鼠胰岛联合应用CTLA-4Ig,可减少移植胰岛凋亡,延长异种胰岛移植物存活时间.     

激活型Akt1转染大鼠胰岛联合免疫抑制剂在异种胰岛移植中的应用

目的 探讨腺病毒载体介导激活性Akt1基因(Adv-CA-Akt1)转染大鼠胰岛对异种移植胰岛功能和存活的影响.方法 以BALB/C糖尿病小鼠为受体,分离纯化雄性Wistar大鼠胰岛,体外培养,Adv-CA-Akt1转染后异种胰岛移植.受体小鼠分3组,实验组:Adv-CA-Akt1转染的大鼠胰岛体外培养24 h,小鼠肾被膜下移植,并口服环孢素A(CsA)30 mg·kg-1·d-1;CsA组:未转染胰岛移植,同剂量环孢素口服;对照组:单纯胰岛移植.每只接受300胰岛当量(IEQs)移植.检测术后血糖,移植物存活时间及组织病理学.结果 实验组和CsA组术后2 d血糖即降至正常,胰岛功能存活时间分别为(21.0±3.65)d和(9.0±2.54)d,而对照组血糖短暂下降后再次升高,胰岛功能存活时间(4.2±2.6)d.实验组小鼠生存时间为(31.0±5.67)d比CsA组(17.0±3.35)d和对照组(10.0±1.52)d明显延长,三组比较差异有统计学意义(P<0.05);胰岛素免疫组化染色实验组.肾被膜下见较多有功能胰岛细胞团,而CsA组和对照组胰岛素染色阳性细胞数减少.结论 Adv-CA-Akt1转染大鼠胰岛联合应用免疫抑制剂,可提高胰岛功能,延长异种胰岛移植物存活时间.     

胰岛移植的新进展

胰岛移植具有创伤小、风险低、可阻止或延缓慢性并发症、有望根治糖尿病等优点,但是胰岛的分离、纯化及移植技术含量高,导致胰岛的回收率仍然较低;另外,供体短缺、移植后移植物及其功能的维持、免疫排斥反应等限制了胰岛移植在临床的广泛应用.     

胸腺内胰岛移植实验研究

在小鼠胰岛移植模型上将BALB/c小鼠胰岛移植到C57BL/6小鼠胸腺,同时给予一次性腹腔注射抗胸腺细胞血清,胰岛移植物获得长期存活,而肾被膜下移植胰岛未能长期存活。再次植入供体BALB/c小鼠和NIH小鼠胰岛 到胰岛存活>100天的C57BL/6胸腺外肾被膜下,3周后BALB/c小鼠胰岛不发生排斥而第三者NIH胰岛移植后则发生排斥。证实诱导了对供体特异性无反应性,这表明胸腺作为一移植部位,明显优于肾被膜下(P>0.01)。     

大鼠胰岛与神经生长因子共微囊提高异种移植胰岛存活率的实验研究

目的:探讨神经生长因子(NGF)与大鼠胰岛共微胶囊对提高皮下异种移植胰岛功效的作用.方法:选取C57 BL/6雄性小鼠皮下预血管化糖尿病模型20只,行微胶囊大鼠胰岛皮下移植.随机分为4组,每组5只.①A组:NGF与大鼠胰岛共微囊组;②B组:微胶囊大鼠胰岛组;③C组:大鼠胰岛移植组;④D组:空囊移植组.观察受体小鼠的血糖和体重变化,移植后8周比较微胶囊内胰岛存活数.结果:A组和B组间各时间点小鼠血糖均无显著差异(P>0.05),A组和B组间各时间点小鼠体重均无显著差异(P>0.05).C组和D组移植无效.移植后8周将糖尿病小鼠处死,两组间胰岛存活数有非常显著差异(F=19.84,P<0.01).结论:NGF与大鼠胰岛共微胶囊移植治疗糖尿病小鼠可有效缓解糖尿病小鼠高血糖状态,NGF可显著提高囊内胰岛的功能和胰岛存活数.     

小鼠异种胰岛移植排斥反应研究

目的观察小鼠对肾被膜下异种胰岛移植物的排斥反应规律和免疫病理学特点。方法将大鼠胰岛移植到小鼠肾被膜下,分别于术后当日、第1、2、4、5、6天取出移植物,研究异种胰岛排斥的病理组织学形态特点和过程。结果异种胰岛移植可有功能存活(5.9±1.2)d,在自然情况下,胰岛在术后6d左右完全被排斥,术后4d胰岛形态已不完整,单核细胞浸润明显增多。移植物附近未发现IgG+IgM的免疫沉积。结论异种胰岛的排斥反应是一个以单核细胞浸润为特征的渐进性过程,移植后4~6d达排斥高峰,CD4+T细胞可能在急性细胞性排斥反应中起重要作用,而体液免疫没有或很少参与。