白花蛇舌草抑制Hela细胞肿瘤活性的体外实验研究

目的探讨中药白花蛇舌草抑制人宫颈癌Hela细胞肿瘤活性的作用及分子生物学机制。方法MTT法检测白花蛇舌草对宫颈癌Hela细胞生长的影响,采用倒置显微镜观察细胞形态学变化,化学比色法测定Hela细胞活性氧（ROS）产生状态,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫组化染色并用计算机图像分析观察p53基因表达。结果白花蛇舌草可抑制Hela细胞的生长,其效果与药物的浓度和作用的时间相关,倒置显微镜下Hela细胞出现细胞凋亡的形态学改变,流式细胞仪检测到凋亡峰,白花蛇舌草作用后细胞内ROS水平下降,而突变型p53表达降低。结论一定浓度的白花蛇舌草对人宫颈癌Hela细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用,其机制可能与细胞内ROS水平和p53基因调控有关。     

花边莲提取液对人肺癌SPC-A-1细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨花边莲提取液对人肺癌SPC-A-1细胞增殖和凋亡的影响.方法 采用体外培养,细胞毒（MTT法）实验、荧光显微镜观察细胞形态变化、DNA琼脂糖凝胶电泳测定DNA ladder及流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期变化.结果 花边莲提取液能够抑制SPC-A-1细胞增殖,且呈剂量依赖性;观察到凋亡细胞典型的形态和生化特征,花边莲提取液作用48 h,SPC-A-1细胞均呈现凋亡细胞所特有的亚二倍体峰（sub-G1）,凋亡率随药物浓度增加而增高,并使细胞生长停滞在S期,从而阻滞细胞周期的进行.结论 花边莲提取液对SPC-A-1细胞具有增殖抑制作用,并可诱导SPC-A-1细胞凋亡,其机制可能与细胞周期的S期阻滞有关.     

白花蛇舌草体外诱导人肝癌HEPG2细胞凋亡的初步研究

目的：初步探讨白花蛇舌草对人肝癌HEPG2细胞的增殖抑制作用。方法：制备白花蛇舌草水提取液，体外培养人肝癌HEPG2细胞，MTT法体外细胞毒实验，琼脂糖凝胶电泳方法检测细胞凋亡。结果：白花蛇舌草浓度在10-80mg／mL时，抑制人肝癌HEPG2细胞生长，且随着剂量的增加抑制作用增强，电泳图片显示DNA梯形降解带纹。结论：白花蛇舌草通过诱导细胞凋亡对人肝癌HEPG2细胞具有增殖抑制作用。     

白花蛇舌草提取物对结肠癌HT-29细胞bcl-2和bax表达的影响

目的 观察白花蛇舌草提取物在体外对结肠癌HT-29细胞株增殖和bcl-2和bax表达的影响.方法 采用人结肠癌细胞HT-29细胞常规体外培养,随机设空白组和不同浓度白花蛇舌草提取物组,干预24 h,倒置显微镜观察细胞形态变化;MTT法测定不同浓度药物对HT-29细胞增殖的影响;RT-PCR检测药物作用后的bax和bcl-2的表达.结果 白花蛇舌草提取物干预后,HT-29的细胞密度明显减少,细胞变小;抑制HT-29细胞增殖,并呈现出量-效作用;bax的表达随药物剂量增加而增加,bcl-2的表达随药物剂量增加而减少.结论 白花蛇舌草提取物能显著抑制人结肠癌HT-29细胞的增殖,通过上调bax和下调bcl-2的表达来诱导细胞凋亡,起到抗HT-29细胞的作用.     

乙醇诱导人体外培养K562细胞系凋亡的研究

目的：探讨乙醇对人K562细胞的细胞毒作用机制。方法：采用不同浓度乙醇加入体外培养的K562细胞中,用荧光显微镜和倒置光显微镜观察细胞形态学变化,用琼脂糖凝胶电泳的方法检测细胞DNA裂解。结果：1％乙醇能有效诱导K562细胞凋亡,且随剂量增大凋亡时间缩短。5％乙醇作用30h则可引起细胞坏死。结论：长期饮酒者血液中有核细胞数量减少,可能与其促凋亡作用有关。     

体外瞬时转染野生型PTEN过表达对乳腺癌MCF-7细胞的影响

目的：研究野生型FTEN基因过表达对乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用。方法：应用携带野生型FTEN的真核表达载体pEGFP-C1-FTEN,以脂质体介导的方法体外瞬时转染乳腺癌MCF-7细胞,利用流式细胞术检测抗凋亡蛋白bcl-2的表达,通过相差显微镜、细胞生长曲线、MTT、DNA琼脂糖凝胶电泳等方法,观察FTEN基因过表达对MCF-7细胞生物学特性的影响。结果：荧光显微镜观察、免疫细胞化学和RT-PCR检测证实,转柒后MCF-7细胞中PTEN呈高水平表达;相差显微镜观察到MCF-7／FTEN细胞出现典型的凋亡形态学改变;细胞生长曲线低平;流式细胞检测显示,G-期细胞比例比空载体组增加14.79％,并出现凋亡峰;DNA琼脂糖凝胶电泳可见梯状条带;同时还检测到转染PTEN后细胞bcl-2表达下降。结论：外源性FTEN基因过表达可显著抑制MCF-7细胞的周期进程并诱导细胞凋亡。     

生长抑素类似物诱导人胆管癌SK-ChA-1细胞调亡及调亡相关基因表达的研究

目的：探讨生长抑素类似物SMS201－995（SMS）抑制人胆管癌生长时对SK－ChA-1细胞凋亡调控基因bcl-2和bax的作用。方法：用DNA凝胶电泳和流式细胞仪检测Annexin V标记凋亡细胞技术研究SMS诱导细胞凋亡的情况;用免疫组化和原位杂交分析SMS凋亡调控基因bcl-2和bax的影响。结果：SMS处理SK－ChA-1细胞后,Annexin V标记的凋亡细胞增多,DNA凝胶电泳显示典型的凋亡和梯状图谱,同时SMS可使细胞bcl-2蛋白表达下降,使bax蛋白和mRNA表达升高。结论：SMS能诱导SK－ChA-1细胞发生凋亡,bax和bcl-2凋亡基因介导了SMS对SK－ChA-1细胞凋亡的发生。     

梁金菇多糖诱导肝癌细胞凋亡及对bcl-2表达的影响

目的 :探讨梁金菇多糖诱导人肝癌细胞株 SMMC-772 1凋亡作用的机制。方法 :采用电镜、DNA电泳、免疫组化以及流式细胞仪分析法 ,对 SMMC-772 1细胞凋亡以及凋亡抑制基因 bcl-2在肿瘤细胞内的表达进行检测。结果 :经梁金菇多糖处理的 SMMC-772 1细胞出现核固缩 ,凋亡小体形成 ,琼脂糖凝胶电泳呈现出细胞凋亡特征性的 DNA梯状带。凋亡细胞发生率与药物浓度和作用时间呈正相关 ,凋亡细胞的发生率从 3 .5%上升至3 6 .4%。经梁金菇多糖处理的 SMMC-772 1细胞内 bcl-2表达较对照组降低。结论 :梁金菇多糖对肿瘤细胞的杀伤主要是通过诱导细胞凋亡 ,其抑制细胞内 bcl-2的表达是诱发肿瘤细胞凋亡的主要机制之一     

10羟基喜树碱诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡及其机制的初步研究

目的 :研究 10 羟基喜树碱 (10 HCPT)诱导人肝癌细胞凋亡的作用。方法 :用 10 HCPT以不同终浓度、不同作用时间诱导SMMC 772 1人肝癌细胞。分别以倒置相差显微镜、电镜、荧光显微镜观察其形态学改变 ,提取细胞内小分子DNA进行琼脂糖凝胶电泳 ,并对这些细胞的P5 3蛋白进行免疫组织化学染色。结果 :当 10 HCPT终浓度 >2 .0 μmol·L-1时 ,部分细胞可见典型的凋亡特征 :核固缩、凋亡小体、梯状电泳带。随着 10 HCPT浓度或作用时间增加 ,凋亡率逐渐升高。各组细胞P5 3蛋白免疫组化染色均为阴性。结论 :10 HCPT可诱导SMMC 772 1细胞凋亡 ,其作用效果呈剂量、时间依赖性     

土槿乙酸体外诱导K562细胞凋亡的研究

目的研究土槿乙酸体外对人白血病细胞(K562)凋亡的诱导作用,探讨其抗癌作用机制.方法以不同浓度土槿乙酸分别处理K562细胞,用琼脂糖凝胶电泳、荧光显微镜和倒置光显微镜、MTT法观察K562细胞DNA带型、形态和抑制率的变化.结果1×10-5mol/L土槿乙酸作用30 h能有效诱导K562细胞凋亡,凋亡细胞有典型的形态学改变及DNA梯形带形成.MTT法测定不同浓度土槿乙酸明显抑制K562细胞系的生长,其IC50值为2×10-6mol/L.结论土槿乙酸能成功诱导K562细胞凋亡,此种诱导作用呈药物作用浓度及时间依赖性.