供体角膜内皮细胞活性的快速鉴定

角膜的透明性是维持角膜正常功能的重要因素,而要维持角膜的透明必须使角膜内皮细胞保持正常的生理功能,因此角膜内皮细胞活性的好坏,直接影响角膜移植手术的成功率.所以,角膜移植术前要求供体角膜内皮细胞必须保持一定的活性.目前眼库中角膜内皮细胞活性的检测方法多用于离体角膜的检查,花费时间长,操作复杂,而且检查后有的不能用于临床,造成不必要的浪费.我们拟选择检查完整供体眼球的简便方法,通过角膜内皮显微镜观察内皮细胞,快速准确评价内皮细胞的活性,以筛选合适的供体材料,提供临床应用或眼库保存.     

深低温角膜长期保存的实验研究

角膜移植术是治疗角膜病盲的重要手段，而角膜材料的获得、保存是开展此手术的重要条件。本研究采用液氮对获得的人及兔角膜行深低温冷冻长期保存，对保存后的角膜活性进行鉴定，结果是2只人体角膜在保存3个月后其内皮细胞成活率达gO％以上。4只正常兔角膜保存162天后经光镜和扫描电镜观察，内皮细胞活性在96％以上。此实验研究证明所选用的冷冻保护剂，降温速率，复温等技术是安全可靠的，所保存的角膜同新鲜的角膜相接近，可用于临床。1材料和方法1．1材料。健康暴死人角膜2只，此角膜在人死后lh内在无菌操作下摘除眼球，4C湿房保存备用…     

甘油保存角膜应用于治疗性穿透性角膜移植的临床分析

Kiilingsworth[1]等在角膜近穿孔甚至穿孔等危重角膜病中,运用保存角膜植片进行治疗性穿透性角膜移植取得良好效果.现在,因为角膜材料稀缺,如何挽救危重角膜病患者的眼球,已成为我们面临的一个难题.治疗性穿透性角膜移植是一种为了挽救眼球、去除病灶、恢复角膜的完整性,运用非活性角膜进行穿透性角膜移植的一种手术     

角膜中期保存液的研究进展

角膜保存液成分的改良是提高角膜内皮细胞活性的关键 ,并且直接影响着角膜移植手术的疗效。本文对角膜中期保存液的研究发展进行综述 ,重点介绍各种保存液的成分及其保存效果。角膜移植手术的不断开展和完善对供体角膜的保存提出了更高的要求。角膜保存的技术经过了一个半世纪的发展 ,已经取得了很大的进步 ,尤其是对角膜内皮细胞活性的研究 ,已成为衡量角膜保存方法可行与否的关键。依据角膜内皮细胞活性的有效时间 ,可将角膜保存技术分为短期、中期和长期。本文就角膜中期保存液的研究和发展作一综述。1　角膜保存技术的历史回顾184 7年 ,…     

器官培养角膜保存法保存兔角膜的观察研究

目的观察器官培养角膜保存法保存角膜活性的效果,探讨该方法临床应用的可行性.方法兔角膜28只,分为两组,实验组16只眼,对照组12只眼.实验组用31℃器官培养液保存,对照组用K-液4℃保存.两组中每4只角膜分别保存3、7、14 d.实验组4只角膜保存14 d后移入运输液中培养3 d.保存前测角膜厚度,做内皮细胞形态学检查和台盼蓝染色.保存后不同时间做相同检查和茜素红染色, 并用透射电镜观察角膜内皮细胞超微结构.在取出角膜前从所有保存瓶抽取保存液样本做细菌和真菌的培养. 临床应用器官培养保存1周的角膜行穿透性角膜移植术1例.结果实验组和对照组角膜内皮细胞形态、活性率1周后差异有显著性.2组角膜厚度差异有显著性.透射电镜检查, 实验组7 d和14 d角膜内皮细胞超微结构完整.对照组7 d后线粒体肿胀,14 d可见细胞结构破坏.穿透性角膜移植术临床病例随访2年,角膜移植片基本透明.结论器官培养液保存角膜的效果确切,活性保存时间明显长于K-液保存.     

硫酸软骨素在甘油冷冻保存角膜中对内皮细胞活性的影响

目的：探讨硫酸软骨素对甘油长期冷冻保存角膜内皮细胞（CEC）保护作用的机制,并与透明质酸钠进行比较,改进和创新角膜长期保存方法。方法： 60只wistar大鼠角膜片随机分为A、B、C、D四组（A组：对照组;B组：甘油冷冻保存液中加入硫酸软骨素;C组：甘油冷冻保存液中加入透明质酸钠;D组：单纯甘油冷冻保存液）。A组不保存,后三组保存2个月。所有经保存角膜片均行CEC台盼蓝-茜素红活性染色检查,HE染色检查。取40只SD大鼠建立Wistar-SD大鼠同种异体穿透性角膜移植模型,裂隙灯显微镜观察角膜排斥反应发生情况,测定移植术后不同时间点植片内TNF-α和IFN-γ免疫组化表达水平,检验保存效果。结果：CEC台盼蓝-茜素红活性染色及HE染色检查结果显示,B组与C、D组比较,差异有显著性（P<0.05）;行角膜移植术后,B组和C组较D组出现排斥反应的时间晚、发展慢且反应轻。B组保存效果和角膜移植术后效果均优于C组（P<0.05）,且角膜植片中TNF-α和IFN-γ的免疫组化表达水平低于C组和D组（P<0.05）,接近A组水平（P>0.05）。C、D组间差异有显著性（P<0.05）。结论：甘油冷冻能够保持CEC的活性,硫酸软骨素和透明质酸钠能减少甘油冷冻直接保存时对CEC造成的损害,且硫酸软骨素能进一步增进保存效果。     

甘油保存角膜治疗角膜穿孔18例

目的:探讨甘油保存角膜治疗角膜穿孔的安全性及疗效。方法:对18例(18眼)角膜穿孔患者,使用甘油保存的角膜材料行角膜移植手术治疗,观察3～6个月。结果:18例患者15例保持角膜透明,3例角膜出现排斥反应而发生植片混浊或融解。结论:小范围角膜穿孔者,使用甘油保存角膜移植术治疗角膜穿孔是一种安全有效的手术。     

硫酸软骨素在长期甘油冷冻保存角膜中对内皮细胞活性的影响

目的 探讨硫酸软骨素对长期甘油冷冻保存角膜内皮细胞(CEC)保护作用的机制,并与透明质酸钠进行比较,改进角膜长期保存方法.方法 60只Wistar大鼠角膜片随机分为A、B、C、D 4组,A组不保存,后3组经不同方法保存2个月.所有经保存角膜片均行CEC台盼蓝-茜素红活性染色及HE染色检查.取40只SD大鼠与保存后角膜片建立Wistar-SD同种异体穿透性角膜移植模型,裂隙灯显微镜观察角膜排斥反应,测定术后不同时间点植片内TNF-α和IFN-γ表达水平,检验保存效果.结果 染色结果显示,B组与C、D组比较,差异有显著性(P<0.05).B组保存效果和角膜移植术后效果均优于C组(P<0.05),且植片中TNF-α和IFN-γ的表达水平低于C组和D组(P<0.05),接近A组水平(P>0.05).C、D组间TNF-α、IFN-γ水平差异有显著性(P<0.05).结论 甘油冷冻能够保持CEC的活性,硫酸软骨素和透明质酸钠能减少甘油冷冻直接保存时对CEC造成的损害,且硫酸软骨素能进一步增进保存效果.     

异种角膜移植的动物实验和初步临床观察

角膜位于眼球前部,容易患病和受外伤,角膜发病率之高超过眼的任何部位,对于这类疾病及其后遗症的治疗,有很多办法,其中有一部分可用板层角膜移植来治疗。可是材料来源是个问题,虽然近年来对同种异体角膜材料的保存方法有了很大进展,但仍然处于供不应求的状态。在角膜移植的初期,Ohisholm(1988)就曾试用异种角膜移植,但未能成功。以后     

三种不同方法保存的兔角膜内皮细胞形态学观察

目的 通过观察兔角膜内皮细胞形态,了解不同保存方法和不同保存时期及时间点对角膜内皮细胞活性和密度的影响.方法 采用短期湿房4 ℃保存6 h、D-X角膜中期保存液4 ℃保存3 d、长期深低温保存3个月,取3组各自限定时间的保存角膜片进行检测,分别行角膜内皮细胞茜素红和台盼蓝活性染色、光学显微镜观察及图像分析.结果 长期深低温保存后的兔角膜内皮细胞活性率、细胞密度及六边形细胞率低于前两组,细胞面积高于前2组,均具有统计学差异.结论 正确掌握3种方法,维持角膜内皮细胞生物活性,虽然深低温保存方法对角膜内皮细胞活性和密度有一定影响,但其活性率在80%以上,仍在角膜移植手术可接受的范围内.     

改良K液保存人眼角膜的临床应用研究

目的我们曾在改良K液的动物试验中获得良好的效果，现在将其用于临床是想进一步获得有关改良K液的临床疗效。方法将收集7对（14眼）不适于穿透角膜移植的角膜为一配对，一只浸入K液，另一只侵入改良K液，分别于保存10d后取出，行1％茜素红和0.25%台盼蓝联合染色，另收集了5对（10只眼）适用于穿透角膜移植的角膜浸入改良K液，置4℃冰箱保存，供穿透角膜移植用。结果保存在改良K液中的角膜内皮细胞质量明显优于保存在K液者，保存在10d内的供体角膜透明度好。结论改良K液配方合理，性质稳定，不仅具有比K液配置简单、经济、安全可靠等优点，更主要的是延长了角膜保存时间，提高了角膜保存质量。     

内皮面冲切取角膜移植片在湿房保存眼球的应用

内皮面冲切取角膜移植片在湿房保存眼球的应用廖荣丰朱美玲张晓峰作者单位：安徽医科大学第一附属医院眼科２３００２２穿透性角膜移植术的成功与否及手术效果与移植片制作的质量有直接关系，而移植片的质量好坏取决于角膜内皮细胞活性情况及切口是否垂直、整齐。我科自１...     

穿透性角膜移植术的临床观察

角膜疾病是眼部常见病，据统计约15％～20％的盲人是由角膜病引起的。随着眼科手术技术的提高和眼科仪器的改良以及眼科免疫学，药理和角膜材料保存技术的发展与完善，穿透性角膜移植(PKP)已成为迄今为止人类在组织器官移植方面最成功的手术。我院自2000年以来，对14例患者行穿透性角膜移植术，其中5例联合白内障摘除，4例植入人工晶体，1例未植入人工晶体，现报告如下。     

核转录因子-kB在同种异基因小鼠角膜移植排斥反应中的表达

目的：检测小鼠角膜移植后核转录因子KB（NF-kB）活性变化。方法：建立以C57BL／6小鼠为供体，以BALB／c小鼠为受体角膜移植实验模型，随机分为A、B、C三组，A组为正常小鼠组，B组为自体角膜移植作为对照组，C组同种异基因角膜移植作为实验组，ELASA方法检测小鼠角膜移植后3d、5d、7d角膜NF-kB的活性变化。结果：组织学检查证实，同种异基因小鼠角膜移植后14d见明显淋巴细胞浸润。3d、5d角膜NF-kB的活性升高，7d达到高峰，与原位移植组有显著差异（P〈0．01）。结论：小鼠同种异基因角膜移植后，角膜NF-kB的活性升高，可能参与移植排斥。     

角膜移植术治疗角膜溃疡穿孔和角膜瘘30例临床分析

角膜移植术治疗角膜溃疡穿孔和角膜瘘３０例临床分析李航，董东生北京同仁医院（１００００５）编者按角膜移植术并不是难得高不可攀，关键是角膜材料。希望大家都来关心角膜移植术与贡献材料，造福病人。角膜溃疡穿孔及角膜瘘是眼外伤后常见的严重并发症之一。眼外伤后继...     

快讯

角膜病为致盲主要原因之一,其治疗法以角膜移植较有效。目前供体角膜材料既短缺,保存方法又不当,以致腐烂浪费,广州医学院科研处将于1985年元月7日举办第一期“角膜移植及眼库学习班”。届时将有来自全省各地、市医院眼科医生参加训练。本次学习班均由讲师、专家、教授主讲。通过学习、培训,我省各地将出现一批既能进行角膜移植,又懂供体材料保存方法,返回当地即可开展工作的眼科医生。使更多的盲人重见光明。这是广州医学院科     

板层角膜移植临床分析

对某些顽固性角膜疾病,采用板层角膜移植术,除达到治疗目的外,还可增进视力改善外貌。板层角膜移植术尚有较穿透移植术安全、材料易保存等优点,故受到眼科界普遍重视。     

角膜保存技术研究进展

角膜病是当今世界主要致盲眼病之一,角膜移植是脱盲、恢复视力的最有效的方法。角膜保存和建立眼库是开展角膜移植的基础,可以充分利用有限的角膜资源。1906年ZIRM人新鲜供体角膜移植成功后,角膜移植技术得到了迅猛发展,但新鲜角膜来源有限,无法满足临床需求。     

穿透性角膜移植术植片内皮细胞活性标准的研究报告

穿透性角膜移植术时,供体角膜内皮细胞是否具有良好的活性,是决定术后能否获得透明愈合并保持其持久透明的关键因素之一,因此,术前对供体植片内皮细胞的活性评价,是眼库的一项重要技术。目前,对供体角膜内皮细胞活性的评价检查方法有;     

保存液中添加bFGF对中期保存角膜细胞活性的影响

目的:研究bPGF对中期保存角膜细胞活性的影响.方法:配制保存液保存新西兰大白兔角膜,对照组为配制保存液保存,实验组为配制保存液加入bFGF(10ng/ml),两组在30～34℃恒温条件下保存16～18h后转入4℃低温保存,在保存3、5、7d分别取保存角膜片行30～34℃ 2h复温,台盼蓝-茜素红联合染色检测角膜内皮细胞活性、电镜检测细胞超微结构和PCNA检测细胞增殖情况.结果:加入bFGF实验组保存角膜,角膜水肿较轻、皱褶较少、透明度较高,角膜内皮细胞形态结构和活性较好(P＜0.05);并且角膜上皮、基质和内皮层有PCNA阳性细胞,与对照组比较差异有显著性(P＜0.05).结论:bFGF在中期角膜保存中有促进细胞增殖、保持角膜细胞活性的作用,可应用于中期角膜保存.