LPS对小鼠巨噬细胞HIF-1α表达的影响

目的观察在体外常氧条件下，LPS的刺激是否影响巨噬细胞HIF-1α的表达及其机制。方法收集Balb／c小鼠的腹腔巨噬细胞并分组进行体外培养，刺激组给予LPS、对照组给予PBS并作用10h后。采用RT-PCR法检测HIF-1α、VEGF基因的表达水平，应用细胞免疫化学染色法检测HIF-1α蛋白的表达水平。结果LPS刺激组HIF-1α基因表达无明显改变，但HIF-1α蛋白表达显著增加且VEGF基因表达上调（均P〈0．01）。结论常氧条件下，LPS刺激下的巨噬细胞可以在转录后水平上调HIF-1α蛋白的表达，并可通过上调靶基因VEGF的表达参与急性炎症反应。     

LPS诱导的急性炎性肝损伤中HIF-1α的表达

目的观察急性炎性肝损伤组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及其可能机制。方法采用卡介苗(BCG)配合LPS建立小鼠急性炎性肝损伤模型;肝组织石蜡切片HE染色法观察肝脏炎症反应情况;免疫组化染色法检测HIF-1α和VEGF的表达;ELISA检测小鼠血清中TNF-α的水平。结果炎症组小鼠HIF-1α、VEGF和TNF-α的表达均显著增加(均P<0.01)。结论急性炎性肝损伤时高表达HIF-1α及其靶基因VEGF,炎症组织中VEGF表达水平的上调与HIF-1α表达的增加可能相关,而HIF-1α表达的增加可能与TNF-α的水平升高有关。     

苦参碱对CT26荷瘤小鼠肿瘤组织中VEGF及HIF-1α水平的影响

[目的] 研究苦参碱对CT26荷瘤小鼠肿瘤组织中血管生成的影响及相关作用机制。[方法] 通过建立CT26荷瘤小鼠模型,随机分为模型组、阳性药组、苦参碱低剂量组、苦参碱中剂量组、苦参碱高剂量组,造模后分别灌胃生理盐水,环磷酰胺和不同剂量的苦参碱,连续灌胃14 d,检测给药后各组小鼠肿瘤大小,计算抑瘤率,并进行肿瘤组织苏木精-伊红（HE）染色,考察苦参碱对荷瘤小鼠的治疗作用。此外通过实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）及免疫组化法检测各组小鼠肿瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达,初步探究其作用机制。[结果] 造模给药后,与模型组相比,阳性药组和苦参碱低、中、高剂量组小鼠肿瘤重量均显著降低（P<0.01）。HE染色结果表明,模型组肿瘤组织中可见大量核分裂象,无明显坏死区,而阳性药组和苦参碱低、中、高剂量组肿瘤组织中核分裂象显著减少（P<0.01）,且细胞坏死更为严重。此外,qPCR结果表明,与模型组相比,阳性药组和苦参碱低、中、高剂量组肿瘤组织中VEGF、HIF-1αmRNA表达水平均显著下调（P<0.05）。各实验组免疫组化结果表明,阳性药组和苦参碱低、中、高剂量组肿瘤组织中VEGF、HIF-1α的积分光密度值（IOD）较模型组显著下调（P<0.05）。[结论] 苦参碱可能是通过降低肿瘤组织中VEGF、HIF-1α的表达水平达到抑制CT26荷瘤小鼠移植瘤生长的作用。     

HIF-1α在视网膜母细胞瘤中的表达及意义

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在视网膜母细胞瘤组织中的表达情况及其在肿瘤血管形成、浸润及转移等生物学行为中的作用.方法 应用免疫组织化学方法检测视网膜母细胞瘤组织中HIF-1α蛋白的表达情况,并探讨其表达与肿瘤分级的相关性.结果 HIF-1α蛋白在视网膜母细胞瘤中呈高表达,HIF-1α阳性细胞为肿瘤细胞核染色、部分胞浆染色,HIF-1α表达在不同临床分期间差异有显著性(P<0.05).且其表达和临床分期密切相关(P<0.05);HIF-1α二者表达存在正相关(rs=0.946,P<0.001).结论 HIF-1α的高表达与视网膜母细胞瘤的临床分期呈正相关,在视网膜母细胞瘤新生血管形成、肿瘤的浸润、转移中可能发挥重要作用.     

HIF-1α和VEGF在大肠癌组织中的表达及意义

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(H IF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)在大肠癌组织中的表达及其与大肠癌临床病理特征的关系。方法:免疫组化法检测61例大肠癌组织中H IF-1α及VEGF蛋白表达,并与15例正常大肠组织比较。结果:大肠癌组织中H IF-1α和VEGF的阳性表达率分别为54.10%(33/61)和62.30%(38/61),均明显高于正常对照组(P<0.05);两者呈正相关(r=0.505,P<0.05);Dukes分期中的表达存在显著差异(P<0.05);组织学分级中的表达则无差异性(P>0.05)。结论:H IF-1α及VEGF在肿瘤血管生成和转移中起重要作用,联合检测H IF-1α和VEGF可作为判断大肠癌转移潜能和预后的重要指标。     

Eag1钾离子通道、HIF-1α以及VEGF在子宫颈癌中的表达及其临床意义

目的:探讨Eag1钾离子通道、缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在不同病变宫颈组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化方法(S-P法)检测40例慢性宫颈炎、40例CIN和100例宫颈癌组织中Eag1、HIF-1α及VEGF表达情况,并分析其与宫颈癌临床病理因素的关系。结果:宫颈鳞癌组织内Eag1、HIF-1α与VEGF蛋白的表达明显高于宫颈上皮内瘤变组和慢性炎症组(P<0.01);非角化型宫颈鳞癌组织中Eag1、HIF-1α与VEGF的表达高于角化型宫颈鳞癌(均为P<0.05);Ⅱb期及以上期宫颈癌组织中Eag1、HIF-1α与VEGF表达高于Ⅰ^Ⅱa期(均为P<0.05);伴有淋巴结转移者三者的表达均高于无淋巴结转移(均为P<0.05);放疗前三者的表达高于放疗后(均为P<0.05);Eag1、HIF-1α与VEGF三种蛋白在宫颈鳞癌组织表达呈正相关(均为P<0.05)。结论:Eag1、HIF-1α和VEGF的表达在宫颈鳞癌发生发展过程中起重要作用,与宫颈鳞癌进展密切相关,是宫颈鳞癌早期诊断和治疗的潜在靶点。     

冬虫夏草对糖尿病肾病大鼠肾组织HIF-1α及VEGF表达的影响

目的：观察缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在大鼠糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾组织中的表达及冬虫夏草(Cordyceps sinensis,CS)干预后对其的影响,探讨冬虫夏草的抗缺氧损伤的肾保护机制。方法：健康雄性Wistar大鼠通过一次性腹腔注射链脲佐菌素(60 mg/kg)制作成糖尿病模型,4周时测定24 h尿蛋白>30 mg/d为DN模型大鼠(n=30),随机分为糖尿病肾病组(DN组,n=15)和冬虫夏草组(CS组,n=15),另取15只正常大鼠作为对照组(NC,n=15)。CS组予CS提取原液5.0 g/(kg?d)灌胃,NC和DN组均予以等量饮用水灌胃,分别于灌胃2,4,6周时随机处死三组大鼠各5只,检测24 h尿蛋白定量、尿β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(β-N-acetyl glucosaminidase,NAG酶)、血清肌酐水平;HE及MASSON染色观察肾脏组织形态学变化;反转录PCR方法检测HIF-1α和VEGF mRNA表达;免疫组织化学方法检测肾组织中HIF-1α及VEGF蛋白的表达。结果：与NC组相比较,DN组肾小管空泡变性明显,肾小球系膜区基质增多,24 h尿蛋白排泄量、尿NAG酶、血肌酐显著升高,肾组织HIF-1α和VEGF mRNA及其蛋白表达均显著增加(均P<0.05),两者的表达均随着病程延长而逐渐增强,且两组HIF-1α与VEGF表达呈正相关(r=0.850,r=0.887,均P<0.05);与DN组相比较,CS组大鼠肾小管病变程度减轻,24 h尿蛋白排泄量、尿NAG酶、血肌酐降低,肾组织HIF-1α和VEGF mRNA及其蛋白表达均下调(均P<0.05),但仍明显高于NC组(P<0.05),但CS治疗第4周、第6周HIF-1α的mRNA及蛋白水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论：DN病大鼠肾组织HIF-1α及VEGF表达上调,两者呈正相关,提示DN肾组织存在慢性缺氧。CS可通过下调DN肾组织HIF-1α及VEGF的表达起到抗慢性缺氧损伤的肾保护作用。     

人脑胶质瘤HIF-1α、VEGF表达与肿瘤恶性程度的相关性研究

目的:探讨人脑胶质瘤组织缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达与肿瘤血管生成和恶性程度的相关性。方法:对手术获得的不同恶性程度的人脑胶质瘤标本,应用免疫组化和RT-PCR方法,检测HIF-1α和血管内皮生长因子(VEGF)在蛋白和mRNA水平的表达程度,并进行统计学分析。结果:不同恶性程度人脑胶质瘤HIF-1α的蛋白和mRNA表达有差异,与肿瘤恶性程度呈正相关关系。VEGF表达有相同趋势,并与肿瘤HIF-1α表达呈正相关关系。结论:随人脑胶质瘤恶性程度增高。HIF-1α表达增强,从而促进肿瘤血管生成,促进肿瘤生长。     

HIF-1α与VEGF在肝细胞肝癌中的表达及其临床意义

目的:研究低氧诱导因子-1α(HIF-1α) 、血管内皮生长因子(VEGF)在肝细胞肝癌(HCC)中的表达及其意义.方法:采用免疫组织化学SABC法检测54例HCC组织及14例正常肝组织中HIF-1α、VEGF的表达情况,研究这2个因子与HCC临床病理学资料及生物学行为的关系.结果:HIF-1α、VEGF蛋白在HCC组织及正常肝组织中阳性表达率比较,差异有显著性(P＜0.05).HCC组织中HIF-1α蛋白与VEGF 蛋白的表达呈正相关(P＜0.05).HIF-1α、VEGF的表达与HCC、病理学分级、AFP无明显关系(P＞0.05).而与肿瘤的侵袭转移能力密切相关(P＜0.05).结论:HCC组织中HIF-1α、VEGF呈过量表达.肝癌组织中HIF-1α、VEGF表达可反映肝癌的生物学行为,可作为预测肝癌浸润转移的一项重要指标.     

磷酸肌酸钠对缺氧窒息幼鼠肾组织HIF-1α和VEGF表达的影响

目的:研究磷酸肌酸钠(PCr)对缺氧窒息幼鼠肾组织缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:24只幼鼠随机分为PCr干预组(PCr组)、模型组和正常对照组,每组8只。PCr和模型组幼鼠制作缺氧窒息模型,PCr组幼鼠在制作模型前0.5h和缺氧窒息后即刻腹腔注射1.4mg/g的PCr。模型组在相同时间点腹腔注射等量的生理盐水。正常对照组不作处理。缺氧窒息后6h,切除各组幼鼠肾脏,采用HE染色法观察肾组织病理形态变化,RT-PCR和免疫组织化学法检测肾组织HIF-1α和VEGFmRNA和蛋白的表达。结果:模型组幼鼠肾组织可见肾小管上皮细胞肿胀,大量炎性细胞浸润,部分上皮细胞变性坏死,肾小球出现水肿、甚至固缩;PCr组幼鼠肾小管和肾小球受损状况明显减轻。3组幼鼠肾组织HIF-1α和VEGFmRNA及蛋白的表达比较,差异有统计学意义(F=196.805、484.734、90.410和79.329,P均<0.001),PCr和模型组均较正常对照组升高,PCr组较模型组降低(P<0.05)。结论:PCr可能通过下调HIF-1α、VEGF的表达减轻肾组织的缺氧性损伤。     

c-myc通过提高结肠癌细胞LoVo的HIF-1α表达促进血管生成

目的 研究癌基因c-myc对人结肠癌细胞LoVo中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响及其对血管生成的作用.方法 构建高表达c-myc的质粒pcDNA3.1-c-myc;将构建好的pcDNA3.1-c-myc质粒转染入LoVo细胞系中,通过Western blot检测c-myc在LoVo细胞中的表达情况.应用real-time PCR和Western blot检测常氧和乏氧状态下LoVo细胞系中HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA水平及HIF-1α的蛋白水平.应用条件培养液培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),观察其形成血管的能力.结果 成功构建pcDNA3.1-c-myc质粒;常氧、乏氧状态下转染pcD-NA3.1-c-myc质粒后,LoVo细胞系中HIF-1α的mRNA水平无变化,VEGF的mRNA水平明显升高,HIF-1α蛋白水平明显增高.高表达c-myc的LoVo细胞上清液培养HUVECs细胞后能增强其成管能力.结论 在LoVo细胞系中高表达c-myc,可以促进细胞HIF-1α和其下游的VEGF表达,从而促进血管生成.     

HIF-1α，VEGF的表达及与乳腺癌生物学行为的关系

目的探讨乳腺癌组织中缺氧诱导因子-1α（hypoxia—inducible factor-1 alpha,HIF-1α）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的表达及其与乳腺癌生物学行为之间的关系。方法采用免疫组化SP法检测乳腺纤维腺瘤、癌旁正常乳腺组织和乳腺癌中HIF-1α,VEGF蛋白的表达。结果HIF-1α蛋白在乳腺纤维腺瘤、癌旁正常乳腺组织中几乎无表达,乳腺导管原位癌中阳性率46．67％（14／30）,导管癌早期浸润中63．33％（19／30）,浸润性乳腺癌中76．67％（23／30）;乳腺癌中VEGF阳性率67．78％（61／90）;乳腺癌中HIF-1α表达与VEGF（r=0．64,P〈0．01）呈正相关,与c—erbB-2正相关（r=0．276,P〈0．01）;HIF-1α及其靶基因VEGF在乳腺癌组织中明显上调,HIF—1α表达与淋巴结转移、雌激素受体状态、组织学分级及临床分期相关。结论HIF-1α和VEGF的表达与乳腺癌的生物学行为有关,HIF—1α可能成为早期诊断乳腺癌、预测其转移的重要指标。     

HIF-1α、VEGF表达与脑胶质瘤预后的相关性

目的　探讨缺氧诱导因子 - 1α(HIF - 1α)、血管内皮生长因子 (VEGF)表达对人脑胶质瘤预后的影响。方法　采用免疫组织化学方法检测 6 3例脑胶质瘤HIF - 1α、VEGF的表达状况 ,并将结果与临床预后随访结果进行综合分析。结果　HIF - 1α总阳性表达率为 71.4 % ,其中强表达 16例 (2 5 .4 % ) ,中度表达 14例 (2 2 .2 % ) ,弱表达 15例 (2 5 .4 % ) ,不表达 18例 (2 8.6 % ) ;与正常对照组比较有显著性差异 (P <0 .0 1)。HIF - 1α表达水平与胶质瘤恶性程度相关 (r =0 .4 6 7,P <0 .0 1)。HIF - 1α主要表达于肿瘤边缘或与正常组织交界处的细胞及坏死的肿瘤组织中。不同组织学分级的脑胶质瘤标本肿瘤细胞质均有VEGF表达 ,胶质瘤Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ～Ⅳ级VEGF阳性细胞数分别为 175± 6 6、35 2± 10 0、6 6 2± 12 3(个 ) ,3组比较有显著性差异 (P <0 .0 1)。VEGF与HIF - 1α表达水平有关 (r=0 .817,P <0 .0 1)。患者生存时间与HIF - 1α呈负相关 (r =- 0 .82 4 ,P <0 .0 1)。结论　VEGF与HIF - 1α表达有一定的相关性 ,HIF - 1α与脑胶质瘤新生血管生成有关。HIF - 1α、VEGF联合检测可更准确判断患者的预后。     

巨噬细胞金属弹力酶 缺氧诱导因子-1α及血管内皮生长因子在胃癌中的表达及其意义

目的：探讨巨噬细胞金属弹力酶( HME)、缺氧诱导因子-1α( HIF-1α)及血管内皮生长因子( VEGF)在胃癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测胃癌及癌旁组织各30个标本中HME、HIF-1α及VEGF的表达情况。结果①HME、HIF-1α和VEGF在胃癌组织中表达高于癌旁组织,差异有统计学意义( P<0．05)。②HME的表达与胃癌的血管浸润和分化程度有相关性, HIF-1α的表达与肿瘤的组织学类型、淋巴结转移及TNM分期有相关性,VEGF的表达与浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有相关性。③VEGF分别与HME和HIF-1α在胃癌组织中的表达存在密切的相关性。结论胃癌中 HME、HIF-1α及VEGF的高表达可能为肿瘤侵袭转移的机制之一,且这些指标的检测对于胃癌的早期判断、干预治疗及预测肿瘤的转移预后有重要的临床意义。     

结肠癌患者 HIF-1αVEGF 和 MMP-9表达及临床意义

目的：探讨缺氧诱导因子-1α（ HIF-1α）、血管内皮生长因子（ VEGF ）及基质蛋白酶-9（ MMP-9）在结肠癌患者的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学方法检测56例结肠癌组织及40例癌旁组织HIF-1α、VEGF和MMP-9,比较两组阳性率的差别及HIF-1α、VEGF和MMP-9与结肠癌临床病理特征之间有关系。结果：结肠癌组织HIF-1α、VEGF和MMP-9表达阳性率显著高于癌旁组织（P＜0．05）;HIF-1α和MMP-9与淋巴转移、组织学分化及Duke分期显著相关（P＜0．05）;VEGF与淋巴转移、Duke分期相关（P＜0．05）;HIF-1α、VEGF和MMP-9与年龄、性别及肿瘤大小无关（P＞0．05）。结论：HIF-1α、VEGF和MMP-9与结肠癌的发生、发展关系密切,三者参与了结肠癌的淋巴道转移。     

HIF-1α、VEGF在疣状胃炎中的表达及意义

目的观察疣状胃炎胃黏膜组织中HIF-1α、VEGF的表达,探讨疣状胃炎的可能发生机制及其与癌前病变的关系。方法经胃镜及病理确诊的疣状胃炎94例,其中非成熟型46例,,成熟型48例,在隆起处近中心部位及距隆起病变边缘5cm的平坦胃黏膜处各取胃黏膜组织2块;设同期经胃镜和病理均确诊为慢性浅表性胃炎(慢性轻度、非活动型、Hp阴性)30例作为对照,取胃窦小弯处取胃黏膜组织2块;14C标记尿素呼气试验检测患者幽门螺旋杆菌(Hp)感染情况,免疫组化EnVision二步法检测患者胃黏膜组织中HIF-1α、VEGF的表达情况。结果疣状胃炎患者疣状病灶部位组织HIF-1α、VEGF的表达均较疣状旁5cm平坦处明显增高(P<0.01)。非成熟型和成熟型疣状胃炎患者其胃黏膜疣状病灶部位HIF-1α、VEGF的表达均较对照组明显增高(P<0.01,P<0.05);但两组之间HIF-1α、VEGF的表达差异无显著性(P>0.05)。疣状胃炎患者胃黏膜组织HIF-1α与VEGF的表达水平呈明显的正相关(r=0.729,P<0.01)。结论 HIF-1α及其下游因子VEGF在疣状胃炎患者疣状隆起病灶部位表达增强,可能参与了疣状胃炎的形成和发展。     

蜂毒素对骨肉瘤Saos-2细胞系HIF-1α及VEGF表达的影响

目的：研究低氧条件下蜂毒素（melittin）对骨肉瘤Saos-2细胞缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响,探讨蜂毒素抗骨肉瘤细胞血管生成的机制。方法：分别设空白对照组和低氧对照组,以及加入终浓度为2、4、8μg/ml的蜂毒素组;采用免疫印迹试验（Western—blot）检测细胞HIF-1α蛋白表达,逆转录RT—PCR检测HIF-1α和VEGFmRNA转录水平的变化。结果：与空白对照组比较,低氧对照组细胞中HIF-1α的蛋白表达及VEGF的mRNA表达均明显升高（P〈0．05）;蜂毒素组细胞的HIF-1α蛋白表达明显低于低氧对照组（P〈0．05）,并具有剂量依赖性;蜂毒素组细胞的VEGF mRNA水平明显低于低氧对照组（P〈0．05）,且有剂量依赖性。结论：模拟的低氧条件可以诱导骨肉瘤Saos-2细胞系中HIF-1α通路的激活;蜂毒素通过抑制HIF-1α蛋白水平的表达、影响其通路中下游基因VEGF mRNA水平的表达而抑制骨肉瘤Saos-2细胞中低氧诱导的HIF-1α通路的激活。由此推断蜂毒素可能通过此途径抑制骨肉瘤血管的生成,达到抗肿瘤的效果。     

HIF-1α和 VEGF 在喉癌组织中的表达及其意义

【目的】探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）,血管内皮生长因子（VEGF）在喉癌中的表达及与临床病理特征的关系。【方法】采用免疫组化染色检测62例喉癌组织及46例癌旁组织中HIF-1α和VEGF的表达情况,并结合相关临床病理参数进行分析。【结果】HIF-1α和VEGF在喉癌中阳性表达率分别为67．74％和62．90％,均高于癌旁组织中的表达（ P ＜0．05）,且两者表达呈显著正相关性（ P ＜0．05）。HIF-1α表达与TNM 分期和临床分期相关,VEGF表达则与临床分期和淋巴结转移相关（ P ＜0．05）。生存分析表明 HIF-1α、VEGF阳性和阴性表达患者无瘤生存率和总生存率差异显著（ P ＜0．05）。【结论】HIF-1α和VEGF在喉癌的发生发展中发挥着重要作用,且两者存在相互协同作用。HIF-1α可能通过上调VEGF的表达,促进肿瘤血管生成,并导致肿瘤浸润和淋巴结转移,两者可作为判断喉癌生物学行为和预后的重要指标。