孕期酒精暴露对新生大鼠延髓基本节律性呼吸放电的作用

目的探讨孕期酒精暴露对子代新生大鼠延髓脑片基本节律性呼吸放电（rhythmic respiratory discharge activity, RRDA）
的作用。方法制作包含面神经后核内侧区（the medial region of the nucleus retrofacialis, mNRF）并保留舌下神经根的新生大鼠
离体延髓脑片标本,给予灌流改良的Kreb’s 液（modified Kreb’s solution, MKS）,使用吸附电极记录延髓脑片腹侧面舌下神经根
RRDA,分析RRDA的变化。实验分为5组：对照组、4%酒精暴露组、6%酒精暴露组、8%酒精暴露组和10%酒精暴露组,研究孕
期不同浓度酒精暴露对RRDA的作用。结果对照组、4%酒精暴露组、6%酒精暴露组、8%酒精暴露组各组组内RRDA在50 min
内吸气时程（TI）、呼吸频率（RF）、放电积分幅度（IA）无统计学差异,10%酒精暴露组RRDA节律不规整;与对照组相比,4%~
10%酒精暴露组的RRDA随酒精浓度增加逐渐降低,TI缩短、RF下降、IA减弱。结论孕期酒精暴露抑制子代新生大鼠延髓脑
片舌下神经根RRDA,这可能是孕期酒精暴露抑制子代呼吸功能的基础。
     

尼莫地平对新生大鼠离体延髓脑片节律性呼吸放电的调节作用

目的 研究尼莫地平(Nimodipine)对新生大鼠延髓脑片基本节律性呼吸放电的作用,为延髓呼吸中枢相关疾病的临床治疗和尼莫地平的使用提供思路和实验依据.方法 制作新生大鼠离体延髓脑片标本,使用95％氧(O2)和5％二氧化碳(CO2)混合气饱和并持续通气的人工脑脊液(artificial cerebrospinal fluid,ACSF)灌流脑片,吸附电极吸附腹侧面舌下神经根,记录节律性呼吸放电(rhythmic respiratory discharge activity,RRDA).稳定记录到RRDA后分别使用含0.000、0.025、0.050、0.100和0.200μ mol/L尼莫地平的ACSF灌流脑片,每个浓度灌流10min,观察RRDA的改变.结果 模型第二组舌下神经根的RRDA的呼吸周期、吸气时称、放电积分幅度等呼吸指标在60 min变化差异无统计学意义;0.025μmol/L和0.050μ mol/L的尼莫地平缩短RRDA的呼吸周期,0.100μmol/L的尼莫地平延长呼吸周期,且0.050μmol/L的尼莫地平能够缩短吸气时称,其余浓度无此作用,而高浓度的尼莫地平会出现过度兴奋或癫痫样放电.结论 低浓度尼莫地平对RRDA有兴奋作用,高浓度则会引起神经元过于兴奋,在临床治疗中要注意药物的配伍和浓度.     

5-羟色胺2C受体对新生大鼠离体延髓脑片基本节律性呼吸放电的调节作用

目的探讨5-羟色胺2C(5-HT2C)受体对新生大鼠离体延髓脑片基本节律性呼吸放电(RRDA)的调节作用。方法取2日龄Sprague-Dawley大鼠18只制备离体延髓脑片标本,使用人工脑脊液(ACSF)灌流脑片,吸附电极记录脑片舌下神经根RRDA。观察使用空白ACSF灌流脑片15、30、45、60 min时RRDA的吸气时程(TI)、呼吸周期(RC)和放电积分幅度(IA)变化情况;使用含1、5、10、20μmol·L~(-1)5-HT2C受体激动剂MK212的ACSF灌流脑片后RRDA的TI、RC和IA变化情况;使用含1、5、10、20μmol·L~(-1)5-HT2C受体阻断剂RS102221的ACSF灌流脑片后RRDA的TI、RC和IA变化情况。结果空白ACSF灌流脑片15、30、45、60 min时RRDA的TI、RC和IA比较差异均无统计学意义(P>0.05)。1μmol·L~(-1)MK212的ACSF灌流脑片后RRDA的TI、IA和RC与给药前比较差异均无统计学意义(P>0.05);5μmol·L~(-1)MK212的ACSF灌流脑片后RRDA表现为TI延长、IA增加、RC缩短(P<0.05);10μmol·L~(-1)MK212的ACSF灌流脑片后RRDA表现较5μmol·L~(-1)MK212的ACSF灌流脑片后TI进一步延长、IA进一步增加、RC进一步缩短(P<0.05);但20μmol·L~(-1)MK212的ACSF灌流脑片后与10μmol·L~(-1)MK212的ACSF灌流脑片后比较,RRDA的TI、IA、RC差异均无统计学意义(P>0.05)。1μmol·L~(-1)RS102221的ACSF灌流脑片后RRDA的TI、IA和RC与给药前比较差异均无统计学意义(P>0.05);5μmol·L~(-1)RS102221的ACSF灌流脑片后RRDA表现为TI缩短、RC延长(P<0.05),IA差异无统计学意义(P>0.05);10μmol·L~(-1)RS102221的ACSF灌流脑片后RRDA表现较5μmol·L~(-1)RS102221的ACSF灌流脑片后TI缩短、IA减少、RC延长(P<0.05);但20μmol·L~(-1)RS102221的ACSF灌流脑片后与10μmol·L~(-1)RS102221的ACSF灌流脑片后比较,RRDA的TI、IA、RC差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 5-HT2C受体对延髓呼吸中枢起着正性调节作用。     

新生大鼠离体延髓—脊髓标本的呼吸节律性放电及微切割延？…

在新生大鼠离体延髓－脊髓标本上，用吸附民极记录膈神经根－颈４、颈５腹根（Ｃ４５ｖ、Ｃ５ｖ）和舌下神经根性放电活动，并观察在对延髓微切割后的ＲＤＡ变化结果 １）新生大鼠离体延髓－脊髓标本在正常灌流条件睛，可存活６－８ｈ，持续４ｈ可稳定记录到Ｃ４ｖ、Ｃ５ｖ和舌下神经根的ＲＤＡ，且两者完全同步，为呼吸节律必班电。２）从头端向尾端切割延髓，切至闩前５００μｍ水平时，ＲＲＤＡ不变，进一步切割，至闩水平，ＲＲ     

甘氨酸对新生大鼠离体延髓脑片呼吸节律性放电活动的调制

目的 探讨甘氨酸(Gly)在延髓基本节律性呼吸放电发生和调节中的作用.方法 以改良Kreb's液恒温灌流新生Sprague-Dawley大鼠离体延髓脑片标本,稳定记录与之相连的舌下神经根的呼吸节律性放电活动(RRDA)后,第1、2组在灌流液中分别单独给予Gly受体的特异性激动剂Gly和特异性拮抗剂士的宁(STR);第3组分别先后给予Gly和Gly+STR,观察舌下神经根RRDA的变化,探讨Gly对其调节作用.结果 给予Gly后,吸气时程和放电的积分幅度显著缩短,呼气时程和呼吸周期无明屁变化;给予STR后,呼气时程和呼吸周期缩短,吸气时程和放电的积分幅度无明显变化,且Gly的作用可部分被STR逆转.结论 Gly参与了哺乳动物基本呼吸节律的调节.     

胶质细胞代谢对新生大鼠离体延髓脑片呼吸节律性放电的影响

目的探讨胶质细胞代谢在延髓基本节律性呼吸放电的作用。方法制备12只新生SD大鼠（0～3d）离体延髓脑片标本,以改良的Kreb＇s液（MKS）恒温灌流,稳定记录到与之相连的舌下神经的呼吸节律性放电活动（RRDA）后,第一组在灌流液中分别单独给予胶质细胞代谢激动剂L-谷氨酰胺（L-GLN）和拮抗剂L-硫酸蛋氨酸（L-MSO）,第二组先后给予L-MSO和L-MSO＋L-GLN,观察舌下神经根RRDA变化。结果给予L-MSO后,呼吸周期（RC）和呼气时程（TE）显著延长,吸气时程（TI）和放电积分幅度（IA）降低;给予L-GLN后RC、TE明显缩短,TI、IA无明显变化,且L-MSO的呼吸抑制作用可被L-GLN逆转。结论胶质细胞代谢在哺乳动物基本节律性呼吸的调节中起着重要的作用。     

新生大鼠离体延髓-脊髓标本的呼吸节律性放电及微切割延髓对其放电的影响

在新生大鼠高体延髓－脊髓标本上，用吸附电极记录膈神经根－颈4、颈5腹根（C4v、C5v）和舌下神经根（Ⅶ）节律性放电活动（Rhythmicaldischargeactivity，RDA），并观察在对延髓微切割后的RDA变化。结果（1）新生大鼠离体延髓－脊髓标本在正常灌流条件下，可存活6～8h，持续4h可稳定记录到C4v、C5v和舌下神经根的RDA，且两者完全同步，为呼吸节律性放电（RespiratoryRDA，RRDA）。（2）从头端问尾端切割延髓（每次100μm），切至闩前500μm水平时，RRDA不变，进一步切割，至闩水平，RRDA消失；从尾端问头端切割，切至舌下神经根下缘水平，RRDA不变；从延髓背侧向腹侧水平切割，切割至背→腹一半水平时，RRDA不变，进一步向腹侧切割，RRDA逐渐消失，说明从闩水平至闩前500μm的延髓腹侧半结构在呼吸节律发生中作用重要。组织学检查证实，从闩水平至闩前500μm的腹侧半结构含面神经后核内侧区（mNRF）；结果进一步提示，mNRF是呼吸节律起源的部位。     

多沙普仑对新生大鼠延髓脑片呼吸节律性放电的调节作用

目的观察多沙普仑对新生大鼠延髓脑片呼吸节律性放电(RRDA)的调节作用。方法制作主要包含延髓面神经后核内侧区(mNRF)的大鼠离体脑片标本,并保留舌下神经根的完整。将36只新生SD大鼠随机分为Ⅰ～Ⅵ组(n=6)。Ⅰ组为对照组;Ⅱ～Ⅳ组为多沙普仑组(浓度分别为2、5、10μmol/L),Ⅴ组给予丙泊酚(20μmol/L),Ⅵ组给予丙泊酚(20μmol/L)+多沙普仑(5μmol/L),观察给药后l、3、5、l0、l5、30min时舌下神经根呼吸节律性放电的变化,并分析吸气时程(TI)、呼气时程(TE)、呼吸周期(RC)、放电积分幅度(IA)的改变。结果Ⅱ组在给药前后脑片RRDA并无明显改变;Ⅲ、Ⅳ组在给药后1min开始,吸气时程明显延长,放电积分幅度增加;呼气时程于第5min时开始缩短(P<0.05),但呼吸周期仅于第10min时缩短,其余时间点无明显改变;Ⅴ组在第3min时开始出现吸气时程缩短、放电积分幅度下降,并伴有呼气时程及呼吸周期延长(P<0.05),第10min时达最大变化值;Ⅵ组RRDA各时间点均无明显改变(P>0.05)。结论5μmol/L多沙普仑可直接兴奋延髓脑片的RRDA,且可完全拮抗丙泊酚对...     

尼可刹米对丙泊酚抑制新生大鼠延髓脑片呼吸放电的拮抗作用

目的:观察尼可刹米对丙泊酚抑制新生大鼠延髓脑片呼吸放电的拮抗作用.方法:制作新生大鼠离体延髓脑片标本(完整保留舌下神经根).取6个稳定记录到呼吸相关节律性放电活动(RRDA)的延髓脑片标本,先用改良的Kreb's液(MKS)灌流脑片15 min(T0),后用含40 p.mol/L丙泊酚的MKS灌流脑片20 min(T1...     

8-OH-DPAT对新生鼠离体延髓脑片呼吸节律性放电的影响

目的 探讨激活5-HT1A受体对延髓基本节律性呼吸放电的影响.方法 制备20只新生SD大鼠(0～3 d)离体延髓脑片标本,以改良的Kreb's液恒温灌流,稳定记录到与之相连的舌下神经的呼吸节律性放电活动(RRDA)后,随机分成Ⅰ～Ⅳ组(每组n=5).Ⅰ～Ⅳ组给予5-HT1A受体的特异性激动剂( /-)-8-hydroxy-2-(di-N-propylamino)tetralin hydrobromide(8-OH-DPAT),浓度分别为1、5、10、20 μmol/L持续灌流10 min,观察给药后1、3、5 min时舌下神经的呼吸节律性放电活动的变化.结果 给药前后不同时间点之间呼吸周期(RC)有显著性差异(F=181.219,P＜0.001),各浓度在给药前RC最小,给药后逐渐延长,5 min时达到最大.各浓度之间有显著性差异(P＜0.001),给药后各时间点1 μmol/L的RC最小,给药浓度增大,RC延长,20 μmol/L时RC最大.给药前后和不同浓度之间存在交互效应(P＜0.001).给药前后不同时间点之间积分幅度(IA)有显著性差异(P＜0.001),在10 μmol/L和20μmol/L浓度组中给药前后不同时间点之间有显著性差异(P=0.017和0.001).各浓度之间有显著性差异(P＜0.001),给药后各时间点1μmol/L的IA最大,给药浓度增大IA减小,20μmol/L的IA最小.给药前后和不同浓度之间存在交互效应(P=0.002).结论 (1)8-OH-DPAT长效抑制吸气活动,对新生大鼠离体延髓脑片标本呼吸周期具有剂量依赖性延长作用,对频率和积分幅度具有剂量依赖性抑制作用.(2)5-HT1A受体参与了哺乳动物基本呼吸节律的产生和调节.     

高浓度氧暴露与新生鼠肺过氧化能力关系的研究

目的研究新生鼠暴露于不同浓度氧时不同时间肺组织脂质过氧化过程和抗氧化能力的变化.方法 4组新生鼠分别暴露于>95%O2、60%O2、40%O2和正常空气(21%O2)中,取暴露于12、24、48h和72h 4个时相点的肺组织,硫代巴比妥酸法检测肺组织匀浆中丙二醛含量(malondiadehyde,MDA),化学比色法检总抗氧化能力(total anti-oxygen capability,TAOC).结果各时相点新生鼠肺组织MDA含量和氧浓度呈显著正相关(P<0.01),TAOC与氧浓度呈显著负相关(P<0.01);随着氧浓度的升高和时间延长,DMA含量逐渐增高,TAOC逐渐降低,任何两组新生鼠肺组织MDA含量和TAOC在部分或全部时相点均存在显著差异(P<0.05,P<0.01).结论新生鼠暴露于＞95%O2、60%O2、40%O2一定时间均可引起肺组织抗氧化能力显著降低,脂质过氧化程度增强,抗氧化能力与氧浓度呈显著负相关,脂质过氧化程度与氧浓度呈显著正相关.     

不同浓度氧暴露不同时间对新生鼠肺组织一氧化氮生成的影响

目的研究新生鼠暴露于不同浓度氧不同时间肺组织一氧化氮(nitric oxide,NO)含量,内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的变化.方法四组新生鼠分别暴露于>95%O2、60%O2、40%O2和正常空气(21%O2)中,取暴露12、24、48和72h的肺组织,硝酸还原酶法检测肺组织匀浆中NO含量,免疫组化研究eNOS和iNOS的表达,并采用MIG2000图像分析测量系统进行半定量分析.结果各时相点新生鼠肺组织NO含量、eNOS和iNOS表达与吸氧浓度呈显著正相关(P<0.01),3个高氧组和正常空气对照组NO含量、eNOS和iNOS的表达在部分或全部时相点有显著差异(P<0.05,P<0.01).结论新生鼠暴露于不同浓度氧不同时间对肺组织NO含量、eNOS和iNOS表达均有影响,过量的内源性NO可能与高氧肺损伤有关.     

常压密闭条件下小鼠的氧耗特征

运用自制的小鼠氧耗检测仪，检查在常压密闭条件下清醒小鼠的氧耗变化。结果表明：在这种条件下，累加时间－氧耗曲线呈对数型变，分钟氧耗曲线则表现出明显的时间应变化，开始的上升相和继这的下降相反映清醒动物的反射活动对氧耗的影响，最后的平缓下降段则可能反映上述调节活动失效动物所处的低氧耗状态。     

电针治疗对缺氧缺血新生大鼠海马组织超微结构的影响

目的：探讨电针治疗对缺氧缺血新生大鼠脑组织超微结构的影响。方法：9只出生7d的Wistar大鼠,随机分为3组。假手术对照组不进行缺氧处理,缺氧缺血组制备成缺氧缺血模型,电针治疗组于缺氧缺血模型制备成功后,电针针刺“百会”、“大椎”两穴。常规饲养22d后,取海马区脑组织制成超薄切片,电镜观察其超微结构变化。结果：缺氧缺血组海马区脑组织神经元及神经胶质细胞损伤明显,缺氧缺血后电针治疗组神经组织超微结构与假手术对照组差异无统计学意义,而受损程度明显轻于缺氧缺血组。结论：电针具有促进缺氧缺血大鼠脑组织损伤修复的作用。     

高压氧对缺氧新生大鼠脑超微结构及细胞凋亡的影响

目的观察高压氧治疗对新生大鼠缺氧损伤后脑超微结构及脑细胞凋亡的影响.方法新生30h的Wistar大鼠制作缺氧性脑损伤模型,随机分为缺氧后24h组、9d组和高压氧治疗组,并设正常对照组,采用流式细胞仪检测脑细胞凋亡率、电镜观察海马区超微结构.结果脑细胞凋亡率缺氧后24h和第9天分别为3.21%和1.32%,均明显高于正常对照组(0.16%)和经高压氧治疗9d组(0.57%).缺氧后24h海马神经细胞线粒体肿胀、脊断裂、高尔基体囊泡扩张,神经毡水肿明显;缺氧后9～18d,神经细胞固缩改变、双核仁,胞浆致密,线粒体肿胀,脑组织点状溶解灶,周围髓鞘变性,胶质细胞增生,微血管腔受压变形.经高压氧治疗9～18d后,海马脑组织除胶质细胞和突起轻微肿胀外,神经元和突触无明显异常.结论高压氧治疗可减轻缺氧所致脑损伤.     

高氧吸入后新生鼠肺组织一氧化氮及氧自由基的动态变化

目的探讨持续吸入高氧后新生大鼠肺组织病理和一氧化氮(NO)及氧自由基的动态变化规律。方法足月新生鼠生后12h内分别持续吸入(90±5)%的高氧和空气,于1、3、7、14、21d,动态观察其肺组织病理学改变以及NO、MDA含量和SOD活性。结果肺形态学:吸高氧3d时炎性细胞渗出,7d时肺间隔增宽,终末气腔明显扩张,小肺泡数量减少,14和21d间质增生、肺泡化降低越来越明显;NO水平:在7、14和21d,高氧组水平高于空气组,数值分别为(99.38±7.80)vs(88.78±8.00),P<0.05;(128.18±33.78)vs(93.30±16.73),P<0.05;(170.66±34.00)vs(106.37±25.11),P<0.01;MDA含量:高氧组在3、7和14d高于空气组,数值分别为(28.10±2.03)vs(22.11±1.25),P<0.05;(30.82±4.17)vs(19.91±2.17),P<0.01;(26.27±3.78)vs(22.56±2.35),P<0.05;SOD的活性,在吸高氧7、14和21d时高于空气组(213.87±18.58)vs(185.55±18.79),P<0.05;(219.81±4.17)vs(19.91±2.71),P<0.01;(251.09±15.10)vs(194.56±8.12),P<0.01。结论持续吸入高氧可致新生大鼠发生与人类BPD类似的病理改变;肺组织的自由基损伤,可能在疾病发生、发展过程中起重要作用。     

慢性缺氧大鼠呼吸肌某些代谢酶活性变化

目的 观察慢性缺氧大鼠呼吸肌氧化和酵解酶活性变化,探讨其在慢性缺氧适应中的意义。方法：建立大鼠慢性常压和减压间断缺氧模型,分别测定肋膈肌已糖激酶（ＨＫ）、柠檬酸合成酶（ＣＳ）、３－羟酰辅酶Ａ脱氢酶（ＨＡＤＨ）和乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活力,并与肢体肌肉比较。结果：肋膈肌氧化酶ＣＳ、ＨＫ和ＨＡＤＫ活性均显著增加,脚膈肌和肋间肌也有不同程度增加,腹直肌和肢体无显著变化。所有肌肉ＬＤＨ活性无显著变化。结论：     

缺氧预处理抑制新生鼠缺氧缺血性脑损伤细胞凋亡的观察

目的观察缺氧预处理(HPC)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)海马区Bcl-2和Bax表达的影响,探讨HPC对新生大鼠HIBD的保护机制。方法7日龄新生SD大鼠40只随机分为空白对照组、假手术组、HIBD组、HPC组。各组实验动物于缺氧缺血后24h处死,用免疫组织化学方法,检测脑组织海马区Bcl-2和Bax表达的变化。结果与空白对照组、假手术组相比,HIBD组和HPC组海马区Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达明显增多(P<0.05);与HIBD组相比,HPC组海马区Bcl-2蛋白表达明显增多,Bax蛋白表达明显减少(P<0.05)。结论促进Bcl-2表达,抑制Bax表达,从而抑制细胞凋亡,是HPC对随后的HIBD的脑保护机制之一。     

氦氖激光穴位照射对缺血缺氧新生大鼠海马组织超微结构的影响

目的：探讨氦氖激光穴位照射对缺血缺氧新生大鼠海马组织超微结构的影响。方法：9只新生Wistar大鼠,随机分为3组：假手术组、缺血缺氧组、激光穴位照射组,每组3只。假手术组仅分离左侧颈总动脉,不结扎,不缺氧,后2组均制作缺血缺氧模型,缺血缺氧组动物不加任何治疗,激光穴位照射组于缺血缺氧后2d,采用氦氖激光穴位照射。常规饲养22d后,取海马区脑组织电镜下观察其超微结构的变化。结果：假手术组海马区神经细胞结构清晰,细胞核膜光滑,胞浆内细胞器丰富,结构完整;缺血缺氧组神经细胞胞体水肿,核膜模糊,细胞器明显减少;激光穴位照射组神经细胞水肿减轻,核膜较清晰,细胞器较丰富。结论：氦氖激光穴位照射具有减轻缺血缺氧对大鼠海马组织超微结构损伤的作用。