LC-MS/MS法同时测定中药白及中militarine、原儿茶酸和咖啡酸的含量

目的:采用Q-TRAP LC-MS/MS测定中药白及中活性成分militarine、原儿茶酸和咖啡酸的含量。方法:采用Supelco Discovery C-18(150 mm×2.1 mm,3μm)色谱柱,以乙腈和水(含体积比0.1%甲酸)为流动相,梯度洗脱,流速为0.25 ml·min-1,AB Sciex 4000 Q-TRAP型质谱仪多重反应监测(MRM)扫描模式对白及对照药材和白及样品分别进行检测。结果:白及对照药材中militarine、原儿茶酸和咖啡酸的含量分别为1.167 5,0.062 6,0.001 0 mg·g-1.白及供试品药材中militarine、原儿茶酸和咖啡酸的含量分别为0.708 8,0.001 1,0.000 4 mg·g-1(n=3)。结论:该方法简便、准确、重现性好,可用于对中药白及中militarine、原儿茶酸和咖啡酸这三个成分进行定量分析。     

HPLC法测定胃康灵胶囊中militarine的含量

目的：建立高效液相色谱法测定胃康灵胶囊中1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯(militarine)的含量。方法：采用Waters SunFire C18色谱柱(250 mm × 4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液(22:78)为流动相,检测波长为223 nm,流速为1.0 mL·min-1,柱温为35 ℃。结果：militarine在0.194 4～3.888 8 μg范围内峰面积对进样量线性关系良好(r = 0.998 4);回收率(n = 6)为100.8% (RSD = 1.1％)。通过测定白及药材中militarine的含量,拟定胃康灵胶囊中militarine的含量限度。分析测定38家生产企业211批样品,合格率仅31.8％,不同生产企业样品间测定结果差异显著,同一企业不同批次样品间含量亦差异较大,多数企业存在明显违规生产行为。结论：本研究建立的方法简便、准确、重复性好,极大地提高了现行质量标准,可用于胃康灵胶囊中白及的质量控制。     

基于液质联用法对白及中2-异丁基苹果酸葡萄糖氧基苄酯类成分的定性定量分析

目的： 建立白及中2-异丁基苹果酸葡萄糖氧基苄酯类成分的UPLC-ESI-Q/TOF-MS快速识别鉴定方法,以及主成分militarine的UPLC测定方法。方法： 液质联用方法采用Waters Acquity UPLC BEH C₁₈（1.7 μm,2.1 mm×100 mm）色谱柱,乙腈-0.1%甲酸溶液梯度洗脱,检测器为高分辨四极杆飞行时间质谱,ESI离子源,MS^E（^E代表碰撞能量）采集方式,采集质量数范围m/z 100~1 000。含量测定采用UPLC法,以乙腈-0.1%磷酸溶液（22：78）为流动相;检测波长为223 nm;柱温：35℃;流速：0.2 mL·min^-1。结果： 利用建立的白及化学成分数据库,结合2-异丁基苹果酸葡萄糖氧基苄酯类成分的诊断离子、准确分子量、质谱碎片及对照品信息,快速分析鉴定21个目标化合物。主成分militarine在19.059 0~381.180 8 μg·mL^-1范围内线性关系良好（r=0.998 6）。加样回收率为100.9%,RSD为1.5%。36批白及中militarine的含量范围是1.5%~4.6%。结论： UPLC-Q/TOF-MS法能快速、准确地鉴定白及中的化学成分,为其药效物质基础研究提供科学依据。建立的UPLC含量测定方法操作简便、准确可靠,可用于白及的质量控制。     

HPLC法同时测定苦木注射液中3种活性成分的含量

目的:建立同时测定苦木注射液中3种活性成分3-甲基-铁屎米-2,6-二酮、4-甲氧基-5-羟基铁屎米酮、4,5-二甲氧基-铁屎米酮含量的分析方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Phenom enex Gem in i C18(150 mm×4.6 mm,5μm)柱,流动相为pH 7.5的0.2 mol.L-1磷酸氢二钠及磷酸二氢钠缓冲液(A)?甲醇(B),梯度洗脱,流速1 mL.m in-1,检测波长254 nm,柱温30℃。结果:苦木注射液中3-甲基-铁屎米-2,6-二酮、4-甲氧基-5-羟基铁屎米酮、4,5-二甲氧基-铁屎米酮线性范围分别为0.0380~0.7600μg(r=0.9999),0.0450~0.9000μg(r=0.9999),0.0287~0.574μg(r=0.9999);平均加样回收率(n=9)分别为99.3%,101.4%,101.8%。结论:该方法操作简单,重复性好,为评价和监控苦木注射液的质量提供可靠的方法。     

HPLC法测定参芪鸡精中2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量

采用HPLC法测定参芪鸡精中2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量。色谱条件用十八烷基烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.1%(V/V)磷酸(25∶75)为流动相；检测波长320nm;8～40μg/ml范围内呈良好的线性关系(r=0.9996);平均回收率93.5%，RSD=3.5%(n=5)。     

从D-葡萄糖合成(3S,4S,5R)-4-O-苄基-3-表莽草酸甲酯

本文报道用D-葡萄糖为原料,经九步反应,对映选择地合成了标题化合物(10),从而为制备新抗生素二(口恶)霉素及类似物提供了对映选择合成的途径。     

HPLC法测定参芪鸡精中2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量

采用HPLC法测定参芪鸡精中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量。色谱条件：用十八烷基烷键合硅胶为填充剂;乙腈-0.1%(V/V)磷酸(25∶75)为流动相;检测波长320nm;8～40μg/ml范围内呈良好的线性关系(r=0.9996);平均回收率93.5%,RSD=3.5%(n=5)。     

一测多评法测定槐花中3种黄酮类成分的含量

目的建立一测多评法(QAMS)用于测定槐花中芦丁,山柰酚?3?O?芸香糖苷及槲皮素 3种黄酮类成分的含量。方法芦丁作为内标物,计算芦丁与槲皮素和山柰酚 ?3?O?芸香糖苷的相对校正因子,分别采用 QAMS和外标法测定 40批槐花药材中以芦丁,山柰酚 ?3?O?芸香糖苷和槲皮素的含量,比较两种测定方法之间的差异。结果 QAMS与外标法所测得的槐花中芦丁、山柰酚 ?3?O?芸香糖苷和槲皮素的含量分别为(9.98±1.39)%、(10.08±1.38)%,差异无统计学意义(t＝0.324,P＝0.747)。结论 QAMS准确可行,可用于槐花中 3种黄酮类成分测定。     

反相高效液相色谱法测定复方参仲口服液中2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷的含量

目的探索复方参仲口服液的质量控制方法。方法采用反相高效液相色谱法测定复方参仲口服液中2,3，5，4＇-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量。结果2,3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷在0．0456～0．2736μg之间有良好的线性关系，回收率为97．55％，RSD为1．25％。结论所建方法可用于复方参仲口服液的质量控制。     

HPLC法测定制首乌药材中羟芪衍生物的含量

采用高效液相色谱法测定制首乌药材中 2 ,3,5 ,4’ -四羟基二苯乙烯 - 2 -O - β -D -葡萄糖苷的含量。DiamonsilC18色谱柱 (5 μm ,4 6× 2 5 0mm) ,流动相 :乙腈 -甲醇 -水 (10∶2 0∶70 ) ,流速 :1 5ml·min- 1,检测波长 :32 0nm。结果 2 ,3,5 ,4’ -四羟基二苯乙烯 - 2 -O - β -D -葡萄糖苷在 0 0 2 5 3～ 0 35 42 μg范围内线性关系良好 ;平均回收率为 99 34% ,RSD为 0 4 9%。方法简便、快速 ,灵敏度高。     

手掌参多糖延缓衰老作用的研究

目的观察手掌参多糖对D-半乳糖诱导的亚急性衰老小鼠的作用。方法 60只昆明种小鼠,雌雄各半,随机分为6组:空白对照组、衰老模型组、阳性对照组(21.6mg·kg~(-1))和手掌参多糖高、中、低剂量组(0.20,0.10和0.05g·kg~(-1))。除空白对照组外,其余各组小鼠每日颈背部皮下注射0.5g·kg~(-1) D-半乳糖溶液。60d后,测定小鼠血清、肝组织和脑组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性以及丙二醛(MDA)的含量,称量小鼠体质量和计算肝脏指数。结果手掌参多糖高剂量组能提高衰老小鼠血清、脑组织和肝组织中T-SOD、CAT和GSH-PX活性(P<0.01,P<0.05),降低MDA含量(P<0.01,P<0.05),还能显著增加衰老小鼠体质量(P<0.01),提高衰老小鼠肝脏指数(P<0.05)。结论手掌参多糖具有一定的延缓衰老作用,其机制可能与提高机体抗氧化酶活性和抑制脂质过氧化物的产生有关。     

Antiallergic phenanthrenes and stilbenes from the tubers of Gymnadenia conopsea

The methanolic extract from the tubers of Gymnadenia conopsea showed an antiallergic effect on ear passive cutaneous anaphylaxis reactions in mice. From the methanolic extract, three new dihydrophenanthrenes, gymconopins A ( 1), B ( 2), and C ( 3), and a new dihydrostilbene, gymconopin D ( 4), were isolated together with 10 known phenanthrene and stilbene constituents. The structures of the new compounds were determined on the basis of physicochemical evidence. Next, the inhibitory effects of the principal constituents on the release of beta-hexosaminidase, as a marker of degranulation, in RBL-2H3 cells were examined and five phenanthrenes, gymconopin B ( 2), 4-methoxy-9,10-dihydrophenanthrene-2,7-diol ( 6), 1-(4-hydroxybenzyl)-4-methoxyphenanthrene-2,7-diol ( 7), 1-(4-hydroxybenzyl)-4-methoxy-9,10-dihydrophenanthrene-2,7-diol ( 8), and blestriarene A ( 9), and six dihydrostilbenes, gymconopin D ( 4), batatacin III ( 10), 3'- O-methylbatatacin III ( 11), 3,3'-dihydroxy-2-(4-hydroxybenzyl)-5-methoxybibenzyl ( 12), 3',5-dihydroxy-2-(4-hydroxybenzyl)-3-methoxybibenzyl ( 13), and 3,3'-dihydroxy-2,6-bis(4-hydroxybenzyl)-5-methoxybibenzyl ( 14) were found to inhibit the antigen-induced degranulation by 65.5 to 99.4 % at 100 microM in RBL-2H3 cells.     

UPLC测定手参中的6种天麻素类成分

目的 采用UPLC法测定手参中6种天麻素类成分的含量.方法 色谱柱为Waters BEH C18柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.1％磷酸,梯度洗脱,流速0.4 mL· min-1,检测波长222 nm,柱温35℃.结果 天麻素、天麻苷元、dactylorhin B、loroglossin、dactylorhin A、militarine的线性范围分别为0.99 ～ 21.80、0.57 ～ 12.59、1.90 ～41.92、1.37～30.10、1.99 ～ 43.72、3.00 ～ 16.50 ng,r分别为0.9998、0.9998、0.9997、0.9997、0.9999、0.9998;平均回收率分别为99.3％、96.8％、97.7％、96.1％、97.3％、95.8％,RSD分别为1.20％、2.72％、2.86％、1.67％、2.61％、2.40％(n=6).结论 所用方法准确、简便、重复性好,可快速测定手参中天麻素类成分的含量.     

Effect of three xenobiotic compounds on Glutathione S-Transferase in the clam Ruditapes decussatus

The effects of 4,4'DDE, methoxychlor and imidazole were studied on glutathione S-transferase activities in the gills and hepatopancreas of the clam Ruditapes decussatus. The contamination doses were 0.14 microM for 4,4'DDE, 0.14 microM for methoxychlor and 25 microM for imidazole. GST activities were spectrophotometrically measured. SDS-PAGE and isoelectric focusing (IEF) were used to separate the different GST isoforms in control and treated animals, followed by Western blotting performed with anti-alpha, anti-mu and anti-pi GST anti-sera. In the hepatopancreas, GST-CDNB activities were always two to five-fold lower than in the gills where the activities were significantly increased after exposure to 4,4'DDE (ca. 1.6-fold) and to methoxychlor (ca. 1.3-fold) compared to the controls (ca. 3 micromolmin(-1)mg(-1)protein) whereas they remained unchanged after treatment with imidazole. When using glutathione S-transferase anti-alpha, anti-mu and anti-pi anti-sera, a single 26 kDa polypeptide was observed in the hepatopancreas and in the gills in all the tested conditions. Five GST subunits were observed after IEF showing greater immuno-reactivity with the anti-pi mammalian class antiserum than with the anti-alpha or anti-mu mammalian anti-sera. One isoform of pI 5.77 was particularly induced by 4,4'DDE and methoxychlor; it was recognized by the three anti-sera tested and seemed to be more efficient in the gills than in the hepatopancreas. This isoform may play a role in organochlorine detoxication.     

炮制方法对木瓜中齐墩果酸和熊果酸含量的影响

目的考察炮制方法对木瓜中齐墩果酸和熊果酸含量的影响。方法采用高效液相色谱法测定不同炮制品中两者的含量。结果齐墩果酸和熊果酸分别在0.019 8～0.594 0 mg.mL-1和0.020 8～0.624 0 mg.mL-1范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.08%和99.37%,RSD分别为0.99%和1.36%(n=6);齐墩果酸含量依次为盐炙品>炒黄品>酒炙品>生品>炒焦品;熊果酸含量依次为炒黄品>盐炙品>酒炙品>生品>炒焦品。结论炮制温度和时间对齐墩果酸及熊果酸含量均有影响。     

不同炮制工艺对何首乌中二苯乙烯苷含量的影响

目的 考察炮制工艺和炮制时间对何首乌中2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(二苯乙烯苷)含量的影响.方法 将何首乌分别采用黑豆汁拌蒸0、2、4、6、8、10 h和传统工艺(九蒸九晒)炮制后,用HPLC测定炮制饮片中二苯乙烯苷的含量.结果 不同炮制工艺的饮片中二苯乙烯苷含量顺序为传统工艺炮制品＞生品＞黑豆汁拌蒸品.用黑豆汁拌蒸,二苯乙烯苷的含量先逐渐上升而后下降,以6 h为峰.结论 应规范何首乌饮片的炮制时间.     

不同炮制方法对藤茶中双氢杨梅素含量的影响

目的:通过测定不同炮制方法制备的藤茶中双氢杨梅素的含量,探讨不同炮制方法对藤茶主要活性成分的影响。方法:分别采用微波炮制、传统炒制、水煮法对采自3个不同产地的新鲜藤茶进行加工炮制处理,制得藤茶不同炮制品;用自然晾干法处理得藤茶生品。采用高效液相色谱法测定不同藤茶炮制品和藤茶生品中双氢杨梅素的含量。结果:不同炮制方法对藤茶中主要活性成分含量有较大影响,其中微波炮制法所制备的藤茶中双氢杨梅素含量最高,传统炒制法含量与其相近;其次为水煮法;藤茶生品中双氢杨梅素的含量最低。结论:炮制可提高藤茶叶中双氢杨梅素含量,且以微波法炮制为佳。     

HPLC法同时测定旋覆花属植物中5种倍半萜内酯成分的含量

目的建立同时测定旋覆花属植物中5种倍半萜内酯含量的方法。方法采用HPLC法。色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱,A相的含量体积分数随时间变化为0 min 30%、20 min 40%、25 min 55%、40 min 65%、45～55 min95%;流速1.2 mL.min-1;检测波长205 nm;柱温25℃。结果 5种倍半萜内酯类化合物旋覆花次内酯、1β-羟基-土木香内酯、ivangustin、japonicone A及inulanolide A在55 min内基线分离,其质量浓度分别在13.4～402 mg.L-1、6.53～196 mg.L-1、6.85～206 mg.L-1、10.4～312 mg.L-1、6.65～200 mg.L-1内与峰面积呈良好的线性关系,R2分别为0.999 8、0.999 8、0.999 9、0.999 8、0.9997。平均加样回收率分别为99.0%、97.6%、99.3%、97.9%、100.8%,RSD分别为1.0%、0.68%、2.1%、0.97%、1.9%。结论该方法可用于旋覆花属植物中5种倍半萜内酯的含量测定;不同种旋覆花属植物倍半萜内酯含量有显著差异。