锌对HL-60细胞凋亡及p53等基因表达影响

目的研究微量元素锌在体外对HL-60细胞凋亡的作用机制。方法HL-60细胞常规培养24h，分为对照组、四吡啶甲基乙二胺N，N，N＇，N＇-tetrakis（2-pyridylmethyl）ethylenediamine（TPEN）处理组、TPEN＋ZnSO4组。以细胞形态学改变、流式细胞仪和DNA凝胶电泳分析为凋亡观察指标，并用mRNA狭缝杂交和Western-blot测定细胞凋亡相关基因的改变。结果细胞内Zn^2＋减少可诱导人髓性细胞白血病细胞系HL-60凋亡，引起bcl-2、c-myc mRNA及蛋白的表达降低，补充ZnSO4（终浓度为20μmol／L）可改善上述现象。结论细胞内Zn^2＋减少诱导HL-60细胞凋亡过程与细胞内下调bcl-2、c-mvc基因的表达有关。     

胞外Ca2+浓度对辐射诱导HL-60细胞凋亡的影响

目的探讨胞外不同Ca^2＋浓度对辐射诱导HL-60细胞凋亡的促进作用.方法对体外培养的HL-60细胞经一定剂量的32P辐射后发现加入不同浓度的Ca^2＋继续培养24、48h,流式细胞仪检测凋亡率.结果胞外Ca^2＋作用于HL-60细胞24、48h后发现对辐射诱导细胞凋亡随Ca^2＋浓度的增加细胞凋亡率增大,Ca^2＋有明显的促凋亡作用,相关性很好r24=0.9001（P=0.0145）,r48=0.9343（P=0.0063）.结论胞外不同浓度的Ca^2＋对辐射诱导HL-60细胞有明显的促进凋亡的作用.     

漆姑草醇提物对HL-60细胞诱导分化作用

目的 探讨漆姑草醇提物（HSJ）对人早幼粒白血病细胞（HL-60）的诱导分化作用。方法 实验设漆姑草250.0、125.0、62.5 μg/mL组、阳性对照组（吡柔比星100 μg/mL）、对照组;噻唑蓝（MTT）法检测HL-60细胞增殖抑制率;瑞氏-吉姆萨染色法观察细胞形态;硝基四氮唑蓝（NBT）还原实验法测定细胞分化能力;流式细胞术检测分化相关抗原CD11b、CD14阳性细胞的表达;Western blot法检测c-myc蛋白表达。结果 与对照组比较,漆姑草组HL-60细胞核浆比例减小,核仁变为肾形或蚕豆形,出现明显的细胞分化形态,细胞增殖受到不同程度抑制;对照组HL-60细胞NBT还原率为（0.83±0.29）%,CD11b和CD14阳性细胞表达率分别为（41.13±0.42）%、（53.30±7.23）%,c-myc蛋白表达量为（0.71±0.02）;漆姑草250.0、125.0、62.5 μg/mL组HL-60细胞NBT还原率[分别为（16.67±1.76）%、（10.83±1.26）%、（6.00±0.87）%]升高,CD11b和CD14阳性细胞表达率[分别为（66.77±4.27）%、（52.27±0.95）%、（46.27±0.38）%和（96.63±0.23）%、（85.25±3.80）%、（63.84±0.78）%]增加,c-myc蛋白表达量[分别为（0.38±0.01）、（0.45±0.01）、（0.58±0.02）]降低,差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论 漆姑草醇提物可诱导HL-60细胞向成熟粒细胞、单核细胞方向分化。     

鬼臼毒素衍生物GP-14对HL-60细胞凋亡及端粒酶活性的影响

目的 观察自旋标记鬼臼毒素衍生物4β-N-^[4\     

IFN-γ诱导小鼠颗粒细胞DNA损伤及凋亡的体外研究

目的初步探讨IFN-γ诱导小鼠卵泡颗粒细胞DNA损伤及凋亡的机制。方法体外分离培养小鼠原代颗粒细胞,分为正常对照组、IFN-γ(1 000 U/ml)处理组及NAC(20 mM)+IFN-γ(1 000 U/ml)联合处理组,处理5d后,采用免疫荧光染色、Western blot和流式细胞术检测颗粒细胞的ATM/ATR信号通路中DNA损伤相关蛋白,ROS水平及凋亡相关蛋白的变化。结果 IFN-γ组颗粒细胞表达γ-H2AX,而NAC组未见明显γ-H2AX表达;Western blot发现IFN-γ组颗粒细胞γ-H2AX、Chk2和p-Chk2蛋白以及p53和p-p53、Caspase-3等凋亡相关蛋白水平均明显上调,NAC组中以上蛋白均被抑制;流式细胞术检测发现IFN-γ可诱导颗粒细胞活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平上调,而NAC组颗粒细胞的ROS下降至对照组水平。结论 IFN-γ可通过DNA氧化损伤信号引起颗粒细胞凋亡。     

洛伐他汀对HL-60细胞bcl-2基因表达的影响

目的 观察HMG-CoA还原酶抑制剂洛伐他汀(lovastatin，LOV)对HL-60细胞bcl-2基因表达的影响，进一步探讨其抑制细胞增殖诱导细胞凋亡的可能分子机制。方法 采用生长曲线测定、流式细胞仪分析、DNA片段化百分率检测以及RT-PCR、Western blot等技术方法，观察LOV对HL-60细胞体外增殖和凋亡的影响，以及bcl-2基因表达的改变。结果 LOV能显著抑制HL-60细胞增殖，使细胞周期阻滞于G0／G1期，细胞凋亡率增加，DNA片段化百分率升高；LOV能下调HL-60细胞bcl-2 mRNA及蛋白的表达。结论 LOV对HL-60细胞有增殖抑制和诱导凋亡作用，下调节bcl-2基因表达可能是其分子机制之一。     

苯醌致HL-60细胞增殖方法的研究

目的建立引起该细胞增殖的方法,为以后进一步研究染毒后细胞内结构与功能的变化提供方法基础。方法用苯醌对人早幼细胞系HL-60进行染毒,取对数生长期的HL-60细胞,用不同浓度的苯醌进行染毒,行台盼蓝拒染法测细胞生存率,Alamar blue法测细胞增殖率,流式细胞技术测细胞周期分布。结果苯醌浓度为3μmol/L的剂量组HL-60细胞存活率无明显改变,且增殖率最高,细胞进入S期的比例[(48.23±1.37)%]高于对照组[(42.47±0.45)%]。结论用3μmol/L的苯醌染毒HL-60细胞,可引起该细胞明显增殖。     

蟾酥作用后HL-60细胞基因表达谱变化的研究

目的研究蟾酥作用后HL-60细胞基因表达谱的变化，为蟾酥诱导HL-60细胞凋亡的可能机制提供依据。方法采用细胞形态学观察、DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡；应用DNA芯片技术检测蟾酥作用前后HL-60细胞基因表达谱的变化。结果1％(v／v)的蟾酥可明显诱导HL-60细胞凋亡。细胞凋亡发生前，在检测的1152个基因中共有9个基因表达改变，其中8个基因上调，1个基因下调。结论在蟾酥诱导HL-60细胞发生凋亡过程中有多个基因参与，BCL-2下调以及IL-8上调与凋亡的发生关系密切。     

低强度微波对γ射线致人早幼粒白血病HL-60细胞损伤的影响

[目的]探讨低强度微波辐射对γ射线致人早幼粒白血病HL-60细胞的凋亡率、线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential, MMP）和胞内游离Ca^2＋浓度改变的影响。[方法]将人早幼粒白血病HL-60细胞随机分为对照组、单纯微波组、单纯γ射线组和联合组（微波＋γ射线）。单纯微波组和联合组给予12gW／cm^2微波照射,每天1h,连续辐照3d;第4天给予单纯γ射线组和联合组8Gγγ射线照射。用钙离子依赖性磷脂结合蛋白-异硫氰酸荧光素／碘化丙啶（Annexin V—FITC／PI）双标记法检测细胞凋亡率,流式细胞仪检测线粒体膜电位和胞内游离Ca2＋浓度。[结果]与对照组相比,单纯γ射线组凋亡率明显增加（P〈0．05）;联合组凋亡率与单纯γ射线组相比显著降低（P〈O．05o与对照组相比,单纯γ射线组线粒体膜电位下降明显（P〈0．05）;联合组线粒体膜电位与单纯γ射线组相比显著升高（P〈0．05o与对照组相比,单纯γ射线组胞内游离Ca2＋浓度明显升高（P〈0．05）;与单纯γ射线组相比,联合组胞内游离Ca2＋浓度明显降低（P〈0．05）。[结论]本实验条件下,8Gyγ射线可以引起细胞凋亡率增加、线粒体膜电位下降和胞内游离Ca2＋浓度增高,导致细胞损伤。预先900MHz、12μW／cm^2低强度微波照射能够显著减轻γ射线引起的细胞损伤,表现为细胞凋亡率减少、线粒体膜电位升高和细胞内游离Ca^2＋浓度降低。     

IFN-γ经p21信号通路调节小鼠颗粒细胞凋亡的体外研究

目的探讨IFN-γ经p21信号通路调节小鼠颗粒细胞凋亡机制的初步研究。方法体外分离培养小鼠原代颗粒细胞,给予IFN-γ1000U/mL处理,在第1d和3d时,通过观察细胞形态、Real time PCR和Western Blot检测颗粒细胞p53和p21表达情况。结果镜下观察IFN-γ处理的颗粒细胞形态未见明显变化。Real time PCR和Western Blot结果示1d颗粒细胞p21表达未见明显升高,p53表达显著升高(P<0.05),而3d时颗粒细胞p21和p53表达明显升高(P<0.05)。结论 IFN-γ可能通过p53依赖的方式影响颗粒细胞p21通路的信号转导,从而导致颗粒细胞凋亡。     

9-羧酸蒽对人白血病细胞株HL-60增殖的影响

9-羧酸蒽anthracene-9-carboxylic acid，(9-AC)属于芳香族单羧酸类物质。以往9-AC研究往往局限在电生理和免疫组化方面。本实验采用体外细胞培养法，结合DNA凝胶电泳法观察9-AC对人髓性白血病细胞株HL-60细胞增殖作用的影响。     

雄黄对白血病HL-60细胞的生长抑制及其机制

以不同浓度（7.5～60 mmol/L）的雄黄（As4S4）作用于体外培养HL-60细胞12～48 h,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪法观察细胞凋亡率,免疫组化法检测bc1-2,突变型p53蛋白表达,应用RT-PCR法检测HL-60细胞中突变p53 mRNA表达。结果不同浓度的雄黄作用不同时间后,可显著抑制HL-60细胞的生长,呈时间-剂量依赖性,并诱导细胞发生凋亡,凋亡率为30.18%～70.98%（P〈0.01）。雄黄作用24 h后,下调突变型p53 mRNA的表达,且bc1-2、突变型p53蛋白表达逐渐降低,并呈浓度依赖性。这可能是其重要机制之一。     

黄芩提取物联合顺铂对人卵巢癌细胞株SKOV-3凋亡的研究

目的:探讨黄芩提取物(Scutellaria Baicalensis)与顺铂(cisplatin,DDP)联合应用对卵巢癌细胞系SKOV-3增殖及凋亡的影响。方法:采用MTT比色法检测S.Baicalensis与DDP联合应用对SKOV-3细胞增殖的影响,吖啶橙染色观察诱导细胞凋亡情况,流式细胞仪分析细胞周期及凋亡并计算细胞平均凋亡率,Westernblot技术观察细胞内p53、ERK1/2、p-STAT3的表达。结果:300μg/mlS.Baicalensis联合5μg/ml DDP给药:①48h后可使肿瘤细胞抑制率由单独应用DDP的15.8%提高到37.3%;②吖啶橙荧光染色可见细胞呈现明显凋亡形态,其凋亡率与10μg/ml DDP组相当;③流式细胞检测结果显示,可使细胞凋亡率从15.1%提高到42.2%(P<0.05);④westernblot结果显示,p53、ERK1/2、p-STAT3表达较5μg/ml DDP组单独给药组降低(P<0.05)。结论:S.Baicalensis与DDP联合应用增强对卵巢癌细胞株SKOV-3的致凋亡效应,联合应用可达到减毒增效的效果。     

汉黄芩素增敏TNF促肿瘤细胞凋亡的实验研究

摘要:目的　研究JNK通路在汉黄芩素增敏TNF促进肺癌干细胞凋亡的作用机制。方法　采用汉黄芩素和TNF单独或联合用药,LDH检测细胞凋亡,免疫蛋白印记（Western Bloting,WB）检测JNK磷酸化水平和凋亡蛋白的表达。结果　汉黄芩素显著增强TNF诱导的抗肿瘤作用,并且这个作用通过促进TNF诱导的JNK 通路的磷酸化来实现。同时伴随潜在的TNF诱导的caspase 8活化,引起凋亡的启动。凋亡抑制因子zVAD-fmk和JNK通路抑制因子SP600125均可以扭转这种凋亡。更为重要的是,汉黄芩素对于正常的支气管上皮细胞则不会出现增敏TNF诱导细胞凋亡的作用。结论　汉黄芩素可能通过促进JNK通路磷酸化增敏TNF抗肺癌作用。     

二十碳五烯酸联合视黄酸对HL-60细胞株N-ras基因表达的影响

目的 :　研究二十碳五烯酸 (Eicosapentaenoicacid,EPA )是否协同视黄酸 (retinoicacid,RA)影响 HL-60细胞的增殖与分化功能及相应分子机制。方法 :　流式细胞仪 (FCM)测定细胞增殖功能 ;NBT还原实验鉴定 HL-60细胞分化 ;Western blot法分析 p2 1 N- ras表达。结果 :　EPA和 RA联合应用能增强 HL-60细胞的增殖抑制和分化效应 ,同时细胞内 p2 1 N- ras表达降低。结论 :　 EPA和 RA可能通过下调节 N-ras基因的蛋白质表达 ,发挥它们对 HL-60细胞增殖与分化功能的联合效应     

c-myc基因在HL60细胞增殖中的作用

c-myc基因是myc癌基因家族的重要成员,其编码的核蛋白定位于细胞核内,属DNA结合蛋白。c-myc作为促进细胞分裂的基因和决定细胞从G0/G1期进入S期的开关,是细胞恶化过程中较早出现的分子改变,与肿瘤启动、恶性增生密切相关。正常情况下,c-myc基因不显示转录活性或低水平表达;受某些因子激活(如有生长因子存在)时,c-myc基因大     

齐墩果酸对白血病HL-60细胞cav-1表达的影响

目的：研究齐墩果酸（oleanolic acid,OA）对白血病HL-60细胞窖蛋白-1（Caveolin-1,CAV-1）表达的影响。方法：OA作用HL-60细胞后,倒置显电镜观察细胞形态;RT-PCR检测HL-60细胞cav-1的mRNA表达;Western blot检测CAV-1蛋白水平。结果：OA作用HL-60细胞后,RT-PCR检测cav-1mRNA表达上调（P〈0.01）;Western blot检测CAV-1蛋白水平升高（P〈0.01）。结论：OA通过上调CAV-1的表达,抑制HL-60细胞增殖。     

干扰素-γ、干扰素-α2b联合应用诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡及机制

目的 研究干扰素-γ、干扰素-α2b联合应用对MCF-7乳腺癌细胞的诱导凋亡作用及其机制.方法 流式细胞仪（FCM）检测处理后细胞凋亡及Fas/FasL蛋白表达情况.结果 处理后凋亡细胞百分率及FasL的表达增加,随着处理时间的延长,表达有增加趋势,差异有统计学意义（P〈0.05）;Fas的表达无明显变化.结论 干扰素-γ、干扰素-α2b联合应用可诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡,机制可能与上调FasL的表达,加强Fas/FasL之间的交联及使Fas/FasL通路敏感性增加有关.     

黄芩素联合左氧氟沙星对金黄色葡萄球菌生物膜的体外作用

目的 探讨黄芩素协同左氧氟沙星对金黄色葡萄球菌生物膜的影响,为临床用药提供参考.方法 构建生物膜体外模型;分为空白组、黄芩素组、阳性对照克拉霉素组、左氧氟沙星组、克拉霉素+左氧氟沙星组、黄芩素+左氧氟沙星组;两倍稀释法测定药物的最低抑菌及杀菌浓度;连续稀释法行活菌计数;激光扫描共聚焦显微镜及扫描电镜观察生物膜形态.结果 17 546株金黄色葡萄球菌经培养3d和7d后可形成早期及成熟期的生物被膜;早期活菌计数结果显示,无论是早期或成熟期各组单独作用时与空白组相比差异均无统计学意义,而早期的黄芩素+左氧氟沙星组(7.19±0.12)log10 CFU/ml、克拉霉素+左氧氟沙星组(7.25±0.13)log10 CFU/ml,与空白组(7.88±0.10)log10 CFU/ml或左氧氟沙星(7.81±0.07)log10 CFU/ml单独作用组相比,活菌计数明显减少(P＜0.05);成熟期的黄芩素+左氧氟沙星组(7.29±0.09) log10 CFU/ml、克拉霉素+左氧氟沙星组(7.36±0.11)log10 CFU/ml与空白组(7.89±0.12)log10 CFU/ml或左氧氟沙星(7.87±0.08)log10 CFU/ml单独作用组相比,活菌计数也明显减少(P＜0.05);激光扫描共聚焦显微镜观察发现无论是早期或成熟期药物组合作用组与单独作用组相比,死菌均明显增多.结论 黄芩素对金黄色葡萄球菌生物膜具有破坏作用,与左氧氟沙星联合应用,可显著增强左氧氟沙星对金黄色葡萄球菌生物膜的杀菌作用.     

三叶青提取物对白血病HL60细胞增殖抑制作用研究

目的探讨三叶青提取物对白血病HL60细胞的增殖、凋亡的影响。方法将不同浓度的受试物作用于体外培养的HL60细胞,用四氮唑蓝比色法（MTT）检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪观察细胞凋亡。结果受试物处理24 h后6.25、12.50、25.00、50.00、100.00μg/m l组,受试物处理48、72 h后所有浓度组HL60细胞的增殖率和凋亡率均呈不同程度的下降或上升,差异均有统计学意义。结论三叶青提取物能有效抑制体外HL60细胞的增殖,诱导HL60细胞凋亡。