特发性血小板减少性紫癜患儿T细胞免疫功能的变化

目的 探讨Ｔ淋巴细胞亚群、白细胞介素１０（ＩＬ－１０）、γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）在特发性血小板减少性紫癜（ＩＴＰ）中的变化及其用地塞米松（ＤＥＸ）治疗的影响。方法 采用ＤＥＸ治疗ＩＴＰ患儿,分别于治疗前后采取静脉血标本,应用改良碱性磷酸酶－抗碱性磷酸酶（ＡＰＡＡＰ）法及酶标记免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）法分别检测Ｔ细胞亚群及血清ＩＬ－１０、ＩＦＮ－γ的含量。结果 ＩＴＰ患儿ＤＥＸ治疗前外周血ＣＤ４＾     

过敏性紫癜白细胞介素2水平及其受体表达

采用￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测急性期过敏性紫癜患儿白细胞介素２（ＩＬ－２）水平，同时用抗Ｔａｃ单克隆抗体以ＡＰＡＡＰ方法检测外周血淋巴细胞中白细胞介素２受体阳性细胞（ＩＬ－２Ｒ￣＊）及用ＥＬＩＳＡ方法检测血清中可溶性白细胞介素２受体（ＳＩＬ－２Ｒ）水平。结果显示急性期过敏性紫癜患儿ＩＬ－２水平和ＩＬ－２Ｒ￣＋细胞均比正常对照组显著降低（Ｐ＜０．０１），血清中ＳＩＬ－２Ｒ水平与正常对照组相比显著升高（Ｐ＜０．０１）。提示，在过敏性紫癜的发病机制中ＩＬ－２和ＩＬ－２Ｒ具有重要意义。     

过敏性紫癜患儿血清IFN-α IL-2IL-4 TNF-α水平的变化

目的 检测过敏性紫癜患儿血清ＩＦＮ－α，ＩＬ－２，ＩＬ－４及ＴＮＦ－α水平的变化，探讨细胞因子在过敏性紫癜发病机制中的作用。方法 采用双抗体夹心法ＥＬＩＳＡ检测上述细胞因子。结果 过敏性紫癜患儿急性期血清中ＩＦＮ－α、ＩＬ－４和ＴＮＦ－α水平均较正常儿高（Ｐ＜０．０５＝，而ＩＬ－２水平无明显差别（Ｐ＜０．０５＝；无肾脏功能改变患儿血清ＩＦＮ－α，ＩＬ－２与正常儿无明显差别，有肾脏功能改变患儿血清ＩＦＮ－α水平较正常儿明显升高，而ＩＬ－２水平则显著降低（Ｐ＜ ０．０５）。结论 过敏性紫癜患儿血清中存在细胞因子紊乱，并可能参与过敏性紫癜发病和肾脏损伤。     

CD40L在川崎病发病机制中的作用探讨

为探讨ＣＤ４０Ｌ在儿童川崎病发病机制中的作用,用流式细胞技术及ＥＬＩＳＡ法检测急性期川崎病（ＫＤ）患儿外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）体外表达ＣＤ４０Ｌ水平、细胞凋亡率及可生ＣＤ４０Ｌ（ｓＣＤ４０Ｌ）对单核细胞株ＴＨＰ－１产生ＴＮＦ－α的影响。结果：ＫＤ表达ＣＤ４０Ｌ明显增高;存在淋巴细胞凋亡延迟;患儿ＰＢＭＣ培养上清（可能含有ｓＣＤ４０Ｌ）可诱导ＴＨＰ－１产生高浓度ＴＮＦ－α。抗ＣＤ４０Ｌ单抗可纠正     

川崎病患儿血清 TNF-α、IL-6 的变化及其与冠状动脉病变之间关系的探讨

为探讨肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）和白细胞介素６（ＩＬ－６）在川崎病（ＫＤ）发病中的作用以及其与ＫＤ冠状动脉病变（ＣＡＤ）之间的关系。采用ＥＬＩＳＡ测定ＫＤ患儿血清ＴＮＦ－α和ＩＬ－６水平,与正常对照组进行比较,并将ＫＤ并ＣＡＤ组与无ＣＡＤ组进行比较,结果ＫＤ患儿血清ＴＮＦ－α和ＩＬ－６皆明显高于正常对照组（Ｐ〈０．０１）,ＴＮＦ－α在ＫＤ并ＣＡＤ组患儿亦高于无ＣＡＤ组患儿（Ｐ〈０．０５）,而ＩＬ－６在两组中无显著差别（Ｐ〉０．０５）,提示ＴＮＦ－α和ＩＬ－６皆参与了ＫＤ的发生,而ＴＮＦ－α在ＫＤ患儿ＣＡＤ中,可能起到比ＩＬ－６更为重要的作用。     

一氧化氮与Ⅰ型辅助细胞因子在过敏性紫癜中的作用

目的观察过敏性紫癜（ＨＳＰ）患儿急性期的一氧化氮（ＮＯ）及Ⅰ型辅助细胞（ＴＨ１）因子水平,以探讨其在该病全身血管炎发病机制中的作用。方法用镉还原法测定血浆ＮＯ水平,用ＥＬＩＳＡ法检测血浆及外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）培养上清中白细胞介素－２（ＩＬ－２）及干扰素－γ（ＩＦＮ－γ）水平。结果ＨＳＰ急性期血浆ＮＯ水平较对照组明显增高（Ｐ＜００５）,血浆ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ与正常对照组比较无显著性差异（Ｐ＞００５）,但患儿的ＰＢＭＣ培养上清的ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ明显低于正常对照组（Ｐ＜００５）。结论ＮＯ及ＴＨ１细胞因子在ＨＳＰ全身血管炎的发生、发展中起作用     

肺炎支原体肺炎患儿细胞免疫的研究

采用ＡＰＡＡＰ法和ＥＬＩＳＡ法对３５例肺炎支原体肺炎（ＭＰＰ）患儿急性期和恢复期外周血Ｔ淋巴细胞亚群（ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８）及血清可溶性白细胞介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）进行测定。ＭＰＰ患儿急性期和恢复期ＣＤ４、ＣＤ４／ＣＤ８比值均明显低于对照组（Ｐ均＜０．０１）；ＣＤ８明显高于对照组（Ｐ均＜０．０５）；ＣＤ３与对照组无显著性差异。在ＭＰＰ的急性期和恢复期，ｓＩＬ－２Ｒ水平明显高于对照组（Ｐ均＜０．０１）。急性期ＣＤ８、ＣＤ４与ｓＩＬ－２Ｒ水平呈高度正、负相关。提示Ｔ淋巴细胞功能的紊乱及ｓＩＬ－２Ｒ水平的改变与ＭＰＰ的发生密切相关。     

合胞病毒感染儿童淋巴细胞多种表面标记及细胞因子的初步研究

呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）感染发病机理的研究一直受到重视，研究者发现ＲＳＶ感染患儿存在着一系列免疫功能紊乱。本文用ＡＰＡＡＰ技术对ＲＳＶ感染患儿淋巴细胞ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２３、ＣＤ２５、ＣＤ５７、ＩＦＮｒ、ＨＬＡ－ＡＢＣ、ＨＬＡ－ＤＰ和ＨＬＡ－ＤＲ等表面标记进行检测，并用ＥＬＩＳＡ技术检测血浆中白细胞介素２（ＩＬ－２）、可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）和呼吸道合胞病毒特异性ＩｇＥ（Ｒ     

病毒性肝炎T细胞亚群和几种细胞因子变化的研究

为了探讨小儿病毒性肝炎发病的细胞免疫机制，应用不标记抗体桥联酶标技术（ＡＰＡＡＰ法）检测了５６例病毒性肝炎患儿的外周血Ｔ细胞亚群及膜性白细胞介素２受体（ｍＩＬ－２Ｒ）表达率。应用酶联免疫吸附（ＥＬＩＳＡ）法分别检测了４９例病毒性肝炎患儿单个核细胞培养上清液（ＰＢＭＣｓ）中肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）、白细胞介素６和８（ＩＬ－６、ＩＬ－８）及α干扰素（ＩＦＮ－α）浓度。结果显示：甲型肝炎（简称甲肝）急性期、慢性乙型肝炎（简称乙肝）及丙型肝炎（简称丙肝）组与正常对照比较，ＣＤ４细胞降低，ＣＤ８细胞升高。用植物血凝素（ＰＨＡ）刺激前，甲肝急性期患儿ｍＩＬ－２Ｒ表达率明显高于其他各组，用ＰＨＡ刺激后，各组ｍＩＬ－２Ｒ表达率均显著高于刺激前，但乙肝及丙肝组ｍＩＬ－２Ｒ表达率与正常对照比较则明显降低。甲肝急性期、乙肝及丙肝患儿ＰＢＭＣｓＴＮＦα、ＩＬ－６、ＩＬ－８均较正常对照组升高，而α干扰素（ＩＦＮ－α）均较正常对照组降低。甲肝恢复期ＣＤ４、ＣＤ８和ＰＨＡ刺激前ＰＢＭＣ上ｍＩＬ－２Ｒ表达率以及上述各细胞因子水平均恢复正常。提示细胞免疫功能紊乱与小儿病毒性肝炎的发病及肝损害过程有关。     

IL-6在系统性红斑狼疮患儿PBMC的过度表达

目的 确定系统性红斑狼疮患儿体内是否存在内源性白细胞介素表达增高及其来源。方法 分别用ＥＬＩＳＡ方法和细胞原位杂交技术检测１８例活动期和１２例非活动期ＳＬＥ患儿血清,外周血单个核细胞内ＩＬ－６含量及ＰＢＭＣ内ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达,并分析三者之间的关系。     

环孢菌素A对儿童过敏性紫癜T细胞功能状态的干预作用

目的观察环孢菌素A(CsA)对儿童过敏性紫癜(HSP)T细胞功能状态的干预作用.方法采用流式细胞技术及ELISA法检测PBMC细胞膜上CD40L表达及PBMC培养上清中细胞因子水平.结果CsA在体外具有纠正HSP患儿PBMC异常表达CD40L的作用(P＜0.05),并抑制TH2类细胞因子(IL-4、IL-5、IL6)的过度产生,使TH1类细胞因子(IL-2、IFN-γ)的释放进一步减少(P＜0.05).结论CsA具有显著抑制HSP患儿T细胞功能作用,尤其是对T细胞亚群(TH1)细胞的功能抑制更强.     

过敏性紫癜T淋巴细胞功能状态的研究

目的观察过敏性紫癜（HSP）患儿是否存在T淋巴细胞功能紊乱,以探讨其发病原理。方法分别采用单向免疫扩散法、酶联免疫吸附实验（ELISA）和流式细胞技术,检测HSP患儿血清、外周血单个核细胞（PBMC）培养上清液中免疫球蛋白的浓度、细胞因子水平及PBMC细胞膜上CD     

哮喘发作患儿CD30分子表达及与Th2源细胞因子和血浆免疫球蛋白E水平的相关性研究

目的　探讨CD3 0 在哮喘发病中的作用。方法　随机选择哮喘急性发作期患儿 2 7例 ,急性上呼吸道感染 (上感 )患儿 16例 ,对照组 19例。采用直接免疫荧光流式细胞术检测外周血单核细胞 (PBMC)中CD4 细胞表达CD3 0 百分率 ,采用ELISA法检测培养上清IL 4、IL 13及血浆IgE水平。 结果　 1.哮喘患儿PBMC中CD4 细胞表达CD3 0 百分率较对照组和上感组明显增高 ,差异有显著性 (P均 <0 .0 5) ;2 .哮喘患儿PBMC培养上清IL 4、IL 13和血浆总IgE水平均较对照组和上感组增高 ,上感组血浆IgE水平亦较对照组增高 ,差异均有显著性 ;3 .哮喘组CD4 细胞表达CD3 0 百分率与培养上清IL 4、IL 13和血浆IgE水平呈显著正相关。 结论　分泌IL 4和IL 13的Th2类细胞活化、增殖的克隆可能主要是由CD3 0 阳性细胞克隆组成 ,Th2细胞表面CD3 0 与CD3 0 L结合后导致Th2细胞分化成熟及释放Th2源细胞因子 ,IL 4和IL 13增加可诱导B细胞分泌较多的IgE。说明CD3 0 信号传导在哮喘发生发展过程中起重要作用     

儿童过敏性紫癜与T-细胞亚群研究

目的探讨T-细胞亚群与过敏性紫癜（HSP）及其各临床亚型的关系以明确T-细胞亚群在HSP发病机制中的作用,并通过对HSP各临床亚型患儿的血清补体系列、免疫复合物和免疫球蛋白水平进行对比分析以了解HSP各临床亚型是否在发病机制上存在差异。方法对32例未接受过糖皮质激素及其他免疫抑制治疗的初发HSP患儿用流式细胞仪检测其外周血CD3、CD4、CD8值,并与正常儿童进行对照,同时检测HSP患儿血清补体系列（C3、C4、CH50）、免疫复合物（CIC）和免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM、IgE）。结果HSP患儿CD4及CD4／CD8值明显低于正常儿童（P均〈0．05）,而HSP各临床亚型患儿的CD3、CD4、CD8、CD4／CD8、C3、C4、CH50、CIC、IgG、IgA、IgM、IgE等水平差异无显著性。结论T细胞免疫功能紊乱与HSP发病可能存在某种联系。     

儿童激素敏感性肾病综合征CD30~+细胞及TH2类细胞因子研究

目的　了解糖皮质激素敏感性肾病综合征 (SSNS)患儿CD30阳性细胞及分泌白细胞介素 4(IL 4) ,5 ,6的TH2细胞活化状态 ,进一步证实SSNS免疫异常模式。方法　流式细胞仪 (FACS)检测SSNS与健康儿童CD30阳性细胞百分率、ELISA检测外周血单个核细胞 (PBMC)培养上清中IL 4,5 ,6及血清IgE浓度 ;用SSNS患儿CD30细胞百分率与PBMC培养上清中IL 4,5 ,6及血清IgE作直线相关分析。 结果　SSNS患儿CD30阳性细胞率、IL 4及血IgE( 11.96 %lg 2 .11pg/ml,2 99IU/ml)显著高于健康儿童 ( 2 .81%lg 1.37pg/ml,110IU/ml) (P均 <0 .0 1) ,但IL 5 ,6水平与健康儿童比较则未见显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;SSNS患儿CD30阳性细胞百分率与IL 4及血IgE水平相关有显著性 (r =0 .94,P <0 .0 1,r=0 .74,P <0 .0 1) ;与IL 5、IL 6水平无显著性相关 (P <0 .0 5 )。结论　SSNS患儿CD30阳性细胞增加并不意味着存在TH2类细胞全面活化 ,SSNS患儿既有某些TH2类细胞因子 (IL 4)升高 ,又有一些TH2细胞因子的降低 (IL 5 )或无变化 (IL 6 ) ,本文资料不能证明SSNS发病与TH1/TH2失衡有直接关联     

Expression of and responses to CD2 and CD3 in 18‐month‐old children with and without atopic dermatitis

We hypothesize that atopy is associated with a reduced T‐cell function early in life and an imbalance in cytokine production. The purpose of this study was to investigate the expression of and responses to CD2 and CD3 in children who did or did not develop atopic dermatitis early in life. The expression of CD2 and CD3 was analyzed by flow cytometry, and proliferation of CD2 and CD3 was studied by ³H‐thymidine incorporation in phytohaemagglutinin (PHA)‐ and anti‐CD3‐stimulated peripheral blood mononuclear cells (PBMC) of 18‐month‐old children, 25 with and 29 without atopic dermatitis. Exogenous interleukin (IL)‐2 was added to compensate for possible functional differences in accessory cells. Anti‐CD3‐induced secretion of IL‐4, IL‐5, IL‐6, IL‐10, IL‐13, and interferon‐γ (IFN‐γ) was analyzed by enzyme‐linked immunosorbent assay (ELISA). Atopy was associated with a low proportion of CD2⁺ lymphocytes. Responsiveness to PHA, which activates lymphocytes partly via the sheep erythrocyte receptor, CD2, was reduced in the allergic children. The anti‐CD3‐induced proliferation declined more rapidly with antibody dilution in the allergic than in the non‐allergic children. Atopic dermatitis was associated with high levels of anti‐CD3‐stimulated IL‐5 secretion. The IL‐4/IL‐10 and IL‐4/IFN‐γ ratios were higher in children with elevated total immunoglobulin E (IgE) levels. Skin prick test‐negative children with eczema produced higher levels of IL‐10 than skin prick test‐positive children. In conclusion, atopic children have a reduced T‐cell function. Atopic dermatitis is associated with increased IL‐5 production, while high total IgE levels are associated with high IL‐4/IFN‐γ and IL‐4/IL‐10 ratios.     

肺炎支原体感染患儿外周血单个核细胞CD40L的表达及其临床意义

目的 了解CD40L在肺炎支原体(MP)肺炎及支气管哮喘患儿致病中的作用。方法 采用流式细胞仪对26例MP肺炎患儿、24例支气管哮喘合并MP感染患儿、23例支气管哮喘非MP感染患儿和25例正常对照组儿童外周血单个核细胞CD40L的表达进行了研究。结果 所有MP肺炎组和支气管哮喘组患儿CD40L表达在PMA和离子霉素(ionomycin)刺激前后均显著高于正常对照组。结论 外周血单个核细胞表面CD40L的表达与支气管哮喘的发病有重要关系，MP感染后外周血单个核细胞高表达CD40L可能促进支气管哮喘的发病。     

过敏性紫癜患儿外周血CD40L mRNA表达及其与血清IL-6和IL-8的关系

目的 探讨过敏性紫癜患儿外周血单个核细胞(PBMC)中CD40L mRNA的表达及其与血清中IL-6和IL-8的关系.方法 应用逆转录一聚合酶链式反应(RT-PCR),从转录水平检测30例过敏性紫癜(HSP)患儿和20例正常儿童(对照组)PBMC中CD40L mRNA的表达,并应用ELISA双抗体夹心法检测血清中细胞因子IL-6和IL-8的水平.结果 HSP患儿(PBMC)中CD4JDL mRNA的表达明显高于对照组(P<0.05);HSP患儿血清中IL-6和IL-8水平明显高于对照组(P<0.05),加入抗-CD40L mAb后恢复正常.结论 HSP患儿PBMC中CD40L的表达异常增高,且CD40L的表达与血清中IL-6和IL-8呈正相关.     

CD4~+CD25~+调节性T细胞及其转录因子FoxP3在儿童过敏性紫癜发病机制中的作用

目的探讨CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)及其转录因子FoxP3在儿童过敏性紫癜(HSP)发病机制中的作用。方法研究对象为我院儿科2009年2月-2010年2月收治的急性期HSP患儿46例(HSP组)以及健康对照儿童30例(对照组)。采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法检测外周血单个核细胞FoxP3 mRNA的表达。运用流式细胞术检测外周血中CD4+CD25+Treg的表达。结果 HSP组患儿外周血单个核细胞FoxP3 mRNA相对表达水平(32.17±23.04)低于对照组(147.91±99.15)(P<0.01)。CD4+CD25+Treg占淋巴细胞比例HSP组[(5.34±2.51)%]低于对照组[(7.85±1.97)%],两组比较差异有显著性(P﹤0.01)。CD4+CD25+Treg与FoxP3 mRNA的表达呈正相关(r=0.502,P=0.01)。结论 HSP患儿急性期存在CD4+CD25+Treg的表达降低,其特异性的转录因子FoxP3 mRNA表达下调。Treg的减少以及由此引发的免疫抑制效应不足,可能是HSP急性期免疫失衡的重要原因之一。     

儿童激素敏感性肾病综合征CD30~+细胞及TH2类细胞因子研究

目的:了解糖皮质激素敏感性肾病综合征(SSNS)患儿CD30阳性细胞及分泌白细胞介素4(IL-4),5,6的TH2细胞活化状态,进一步证实SSNS免疫异常模式。方法:流式细胞仪(FACS)检测SSNS与健康儿童CD30阳性细胞百分率、ELISA检测外周血单个核细胞(PBMC)培养上清中IL-4,5,6及血清IgE浓度;用SSNS患儿CD30细胞百分率与PBMC培养上清中IL-4,5,6及血清IgE作直线相关分析。结果:SSNS患儿CD30阳性细胞率、IL-4及血IgE(11.96% lg2.11 pg/ml,299 IU/ml)显著高于健康儿童(2.81% lg 1.37 pg/ml, 110 IU/ml)(P均0.05);SSNS患儿CD30阳性细胞百分率与IL-4及血IgE水平相关有显著性(r=0.94,P<0.01,r=0.74,P<0.01);与IL-5、IL-6水平无显著性相关(P<0.05)。结论:SSNS患儿CD30阳性细胞增加并不意味着存在TH2类细胞全面活化,SSNS患儿既有某些TH2类细胞因子(IL-4)升高,又有一些TH2细胞因子的降低(IL-5)或无变化(IL-6),本文资料不能证明SSNS发病与TH1/TH2失衡有直接关联。