利用共焦镜检测凋亡早期巨噬细胞内pH的变化

用激光扫描共聚焦显微镜和ｐＨ荧光探针ＳＮＡＲＦ－１／ＡＭ实进检测地塞米松处理茂噬细胞胞浆－ＰＨ的动态变化。结果显示，加入地塞米松，巨噬细胞胞浆发生快速，短期碱化，随后胞浆ＰＨ缓慢降低。结果表明，胞浆酸化是细胞凋亡发展的必然过程，胞浆碱化则很可能与细胞凋亡的发生相关。     

电泳技术结合计算机凝胶图像系统检测细胞凋亡

目的 探讨检测细胞凋亡的新方法。方法 利用常规电泳技术结合计算机凝胶图像分析系统对经地塞米松处理的巨噬细胞做细胞凋亡的定性定量检测。结果 经地塞米松处理的巨噬细胞发生细胞凋亡，用1%琼脂糖凝胶电泳出现典型梯状条带，同时用流式细胞术检测出现凋亡峰，计算机凝胶图像光密度分析电泳结果，地塞米松处理0、0.5、1.0、2.0、4.0h巨噬细胞的凋亡率分别为0%、16.37%,30.72%,35.87%,56.60%。与流式细胞术的检测结果基本一致。结论 琼脂糖凝胶电泳结合计算机凝胶图像分析系统是一种简便，低耗，准确的细胞凋亡定性定量检测新方法。     

电泳技术结合计算机凝胶图像系统检测细胞凋亡

目的探讨检测细胞凋亡的新方法。方法利用常规电泳技术结合计算机凝胶图像分析系统对经地塞米松处理的巨噬细胞做细胞凋亡的定性定量检测。结果经地塞米松处理的巨噬细胞发生细胞凋亡,用1%琼脂糖凝胶电泳出现典型梯状条带,同时用流式细胞术检测出现凋亡峰,计算机凝胶图像光密度分析电泳结果,地塞米松处理0、0.5、1.0、2.04.0h巨噬细胞的凋亡率分别为0%、16.37%、30.72%、35.87%、56.60%,与流式细胞术的检测结果基本一致。结论琼脂糖凝胶电泳结合计算机凝胶图像分析系统是一种简便、低耗、准确的细胞凋亡定性定量检测新方法。     

胚胎发育中的编程性细胞死亡与先天畸形

细胞死亡为发育生物学的重要方面 ,发育性细胞死亡通常是程序化的 ,即在特定的时间和部位发生控制性细胞死亡即编程性细胞死亡 (PCD) ,又称为细胞凋亡 (Apoptosis)。其形态特征主要表现为细胞收缩变小 ,细胞连接及质膜微绒毛丧失 ,胞膜鼓泡或出芽 ,胞浆浓缩 ,核染色质密度增高并呈颗粒状或半月形凝聚于核膜周边 ;进而细胞膜内陷 ,将胞浆和染色质等成分分割形成凋亡小体 ;最后凋亡小体被周围的上皮细胞、内皮细胞或单核 -巨噬细胞所吞噬、清除 ,或自然脱落离开生物体。在PCD过程中 ,不发生溶酶体、线粒体、细胞膜破裂及细胞内容物外漏 ,故…     

鸡有核红细胞凋亡的电镜观察

利用透射电镜观察了正常成年鸡脾内红细胞的凋亡现象。结果显示，鸡脾内凋亡红细胞核染色质先呈现网眼样变化，后浓缩、边聚。凋亡红细胞整个被巨噬细胞吞噬，在其中分解变小成为凋亡小体。凋亡小体电子密度有的升高，有的降低，最后均被巨噬细胞消化清除。结果表明，有核的红细胞发生细胞凋亡，并借助于巨噬细胞的膜系统完成凋亡过程。     

鸡有核红细胞凋亡的电镜观察

利用透射电镜观察了正常成年鸡脾内红细胞的凋亡现象。结果显示，鸡脾内凋亡红细胞核染色质先呈现网眼样变化，后浓缩、边聚。凋亡红细胞整个被巨噬细胞吞噬，在其中分解变小成为凋亡小体。凋亡小体电子密度有的升高，有的降低，最后均被巨噬细胞消化清除。结果表明，有核的红细胞发生细胞凋亡，并借助于巨噬细胞的膜系统完成凋亡过程。     

地塞米松对实验性光损伤大鼠视细胞凋亡的防治作用

目的：研究地塞米松对光损伤及视细胞凋亡的防治作用，以探讨光损伤视细胞凋亡的发生机制。方法：所有SD大鼠经循环光环境适应7天，实验前暗适应36小时。实验A组的大鼠只光照。实验B组的大鼠光照6小时后在暗箱中喂养。实验a组的大鼠在暗适应后腹腔注射地塞米松再光照。实验b组的大鼠光照6小时后在暗箱中喂养，且每天应用地塞米松。经以上处理过的大鼠灌流固定，摘除眼球。光镜标本在常规脱水、透明、石蜡包埋切片后，行HE、TUNEL法染色。光镜观察。应用CIAS－1000图像分析系统定量检测外核层面积和视细胞凋亡指数，所得数据作统计学分析。结果：在实验A组中，随着光照时间的增加，视网膜光损伤逐渐加重，视细胞凋亡逐渐增多，外核层面积逐渐减少。而在实验a组中，出现如实验A组的规律性变化，但应用地塞米松后，视网3膜光损伤程度减轻，发生视细胞凋亡的时间延迟3小时。两实验组定量检测结果作统计学分析表明，地塞米松对视网膜光损伤及视细胞凋亡有明显的预防作用。实验B组和实验b组的定量检测结果作统计学分析表明，地塞米松对视网膜光损伤及视细胞凋亡有明显的治疗作用。结论：地塞米松对实验性大鼠视网膜光损伤及视细胞凋亡有较好防治作用。     

肿瘤坏死因子致巨噬细胞凋亡分子机制的研究

肺泡巨噬细胞是尘肺发病的主要靶细胞，通过凋亡来完成其吞噬凋亡细胞、介导或抑制其自身凋亡的生理功能。巨噬细胞的凋亡过程是多样性、偶联性、多途径的信号转导过程，其间涉及许多信号分子，相互联系构成信号网络。肿瘤坏死因子（TNF-α）是二氧化硅刺激肺泡巨噬细胞释放出的主要促炎性细胞因子，它通过与其相应的细胞表面受体结合，激活受体偶联的G蛋白信号转导途径，将凋亡信号向下游传导。TNF-α也可以通过影响细胞内核转录因子（NF-κB）的产生或失活，进一步活化巨噬细胞凋亡相关的信号转导通路，促进巨噬细胞凋亡，促进了尘肺病的发生。     

凋亡小体形成的组织化学分析

本文采用地塞米松磷酸钠诱导小鼠胸腺细胞发生凋亡为模型，通过浮尔根染色，以及电镜方法，观察了凋亡细胞的凋亡小体的形成过程。光镜下凋亡细胞内形成致密的被染色红色的ＤＮＡ成份，逐渐断裂，分离。电镜下可见凋亡细胞染色质浓缩，凝聚，被双层核膜所包绕，逐渐断裂后，向细胞外移动，最后形成由细胞膜包绕的凋亡小体，并与细胞分离，形成的凋讯小体可与巨噬细胞相结合，并被巨噬细胞所吞噬，本文从形态学上连续地观察了凋亡小体     

冷休克诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的电镜观察

利用透射电铣观察了冷休克诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的形态学变化。观察显示，凋亡细胞核和细胞质发生一系列形态学变化，产生凋亡小体。结果表明，冷休克诱导小鼠腹腔巨噬细胞发生凋亡。低温处理使细胞内的细胞骨架解聚。提示参与细胞质转运的细胞器（如溶酶体、高尔基体等）的异常变化与低温诱导的细胞凋亡有关。     

清热养阴药作用后的脐血细胞浆逆转白血病细胞表型研究

在对急性白血病(AL)中医发病机制探讨基础上,认为清热养阴中药可以对抗AL细胞形成的基础。让人脐血造血细胞在清热养阴药作用下发育,建造与AL细胞表型相反的细胞,再以其胞浆逆转AL细胞表型。实验结果表明：清热养阴药能使造血细胞增殖能力下降而分化能力加强,造血调控因子发生重新调整与组合;中药作用后的脐血细胞浆能够逆转HL60细胞表型,表现为向成熟单核巨噬细胞分化,分裂能力下降,增殖抑制,出现凋亡。     

氧化修饰低密度脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡

通过观察凋亡细胞的核形态及特征DNA梯形图谱（DNAladder）．研究了氧化修饰低密度脂蛋白（Ox－LDL）诱导的巨噬细胞凋亡。结果显示：Ox－LDL可引起明显的巨噬细胞凋亡，表现在Ox－LDL处理的细胞核发生固缩，染色体DNA断裂的凝胶电泳图谱呈典型的梯形，正常和乙酰化LDL（N－LDL和AC－LDL）未引起明显的巨噬细胞凋亡。Ox－LDL引起的巨噬细胞凋亡具有浓度和时间效应且与其修饰程度有关，修饰程度越高，引起凋亡越明显．     

糖皮质激素对脓毒症大鼠肾细胞凋亡的影响

目的探讨糖皮质激素对脓毒症大鼠肾细胞凋亡的影响。方法将30只大鼠随机分为对照组、脓毒症组和地塞米松组,每组10只。其中脓毒症组和地塞米松组采用盲肠结扎穿孔术(CLP)致脓毒症模型,地塞米松组行盲肠结扎穿孔术后即给予地塞米松,测定各组大鼠肾功能及肾细胞凋亡的情况。结果与对照组相比,CLP术后血清尿素氮、肌酐水平及肾脏细胞凋亡指数明显升高(P<0.01);地塞米松组与脓毒症组比较血清尿素氮、肌酐水平以及肾脏细胞凋亡指数均降低(P<0.01)。结论在CLP所致的脓毒症早期,应用地塞米松对肾脏有一定的保护作用,其作用机制可能与其抑制肾细胞凋亡的发生有关。     

FK506促进异体神经匀浆激活的巨噬细胞凋亡的实验研究

目的研究FK506促进外周血来源的异体神经匀浆激活的巨噬细胞的凋亡。方法取1月龄SD幼鼠，腹腔抽取法培养异体神经匀浆激活的巨噬细胞。按不同浓度的FK506分组：A组空白对照组、B组0．25ng／ml、C组0．5ng／ml、D组1．0ng／ml。将4组处理因素分别加入长有巨噬细胞的96孔板中，用MTT法检测巨噬细胞的活力情况．用倒置显微镜和荧光显微镜及透射电镜对巨噬细胞的凋亡进行形态学上的观察与鉴定。流式细胞仪检测巨噬细胞凋亡情况。结果B组和C组均可见异体神经匀浆激活的巨噬细胞的活性减弱及细胞凋亡发生，D组可见巨噬细胞发生坏死性改变。透射电镜和荧光显微镜可观察到巨噬细胞的凋亡前期和凋亡小体出现。流式细胞仪检测B和C组凋亡率为24．6％和26．5％，均高于对照组，D组发生坏死。结论FK506可以在早期促进异体神经匀浆激活的巨噬细胞的凋亡．从而减少或抑制周围神经异体移植后巨噬细胞所介导的免疫排斥反应。     

X射线全身照射对小鼠脾细胞和腹腔巨噬细胞凋亡的影响

目的：观察不同剂量 X 射线全身照射对小鼠脾细胞和腹腔巨噬细胞凋亡的影响。方法：Annexin-V和PI双染后，采用流式细胞术检测小鼠脾细胞和腹腔巨噬细胞在照射后不同时间的细胞凋亡变化。结果：2 Gy X 射线全身照射与假照射组比较，小鼠脾细胞 凋亡百分率在照射后24 h明显升高（Ｐ< 0.05），腹腔巨噬细胞凋亡百分率从照射后4 h开 始明显升高（Ｐ< 0.05，Ｐ< 0.01），持续到48 h（Ｐ< 0.001）；0.075 Gy X 射 线全身照射与假照射组比较，小鼠脾细胞凋亡百分率在照射后24 h明显降低（Ｐ< 0.05）， 腹腔巨噬细胞凋亡百分率从照射后2 h开始至照射后16 h均有显著降低（Ｐ< 0.05）。 结论：较高剂量辐射促进小鼠脾细胞和腹腔巨噬细胞凋亡，而低剂量辐射对小鼠脾细胞和腹腔巨噬细 胞凋亡没有促进作用，并且能降低免疫细胞凋亡。     

黄芪在幼鼠肠缺血再灌注损伤下对免疫器官凋亡的作用及意义

目的：探讨黄芪在预防幼鼠肠缺血再灌注下(iscbemia／／reperfusion，I／R)免疫器官凋亡的发生的作用及机制。方法：在幼鼠肠I／R早期，电镜观察免疫器官的细胞凋亡，DNA原住末端标记法检测细胞凋亡，免疫组化法检测Fas／Fas-L蛋白的表达。结果：黄芪在幼鼠肠I／R早期明显抑制脾、肠系膜淋巴结的淋巴细胞、巨噬细胞凋亡。在脾脏，明显下调巨噬细胞Fas蛋白的表达；在淋巴结，明显下调巨噬细胞Fas-L蛋白的表达。结论：黄芪注射液在幼鼠肠I／R早期，可能通过影响外周免疫器官Fas／Fas-L蛋白表达，引发细胞凋亡减少，直接影响免疫功能。     

阿司匹林对脂多糖、地塞米松分别诱导巨噬细胞凋亡中TNF-α表达的影响

目的本实验旨在观察阿司匹林对脂多糖和地塞米松分别诱导的小鼠腹腔巨噬细胞凋亡中TNF-α表达的影响.方法小鼠腹腔巨噬细胞培养成功后,分别以脂多糖(LPS)和地塞米松(Dex)为诱导剂进行凋亡的诱导,在出现凋亡的基础上,给予不同剂量的阿司匹林分别分5组给药,放射免疫分析法检测TNF-α表达情况.结果阿司匹林对脂多糖和地塞米松诱导的凋亡中TNF-α的表达均有抑制作用.结论阿司匹林在炎症和非炎症情况下,都可以降低TNF-α水平.     

昆明山海棠碱诱导Jurkat淋巴瘤细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻及瘤细胞超微结构改变的研究

目的 检测昆明山海棠碱(THH碱)诱导Jurkat T淋巴瘤细胞的凋亡效应。方法 THH碱多剂量多时间点诱导Jurkat T淋巴瘤细胞细胞后，采用Annexin-V-Fluorescence标记膜外翻磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine，PS)的凋亡细胞，同时荧光素PI标记坏死细胞，流式细胞术检测分别检测其阳性细胞率。同时采用判断凋亡发生的“金标准”——形态学观察方法观察其超微结构的改变。结果 THH碱诱导后磷脂酰丝氨酸外翻的细胞显著增加，有明显的时间和剂量相关性，超微结构观察可见大量细胞明显发生细胞体积缩小、核固缩、胞浆浓缩、凋亡小体形成等凋亡典型的形态特征。结论 THH碱能非常显著地诱导Jurkat T淋巴瘤细胞发生凋亡。     

催乳素保护人B淋巴细胞免其凋亡的实验研究

目的:研究人催乳素(PRL)在B淋巴母细胞系IM-9细胞凋亡中的保护作用。方法:在地塞米松诱导IM-9细胞凋亡的实验体系中加入PRL(10ng/ml),DNA琼脂糖凝胶电泳观察PRL对地塞米松诱导IM-9细胞凋亡的保护。结果:地塞米松组诱导的IM-9细胞在48h后出现细胞凋亡,DNA琼脂糖凝胶电泳显示有大量小分子DNA片段形成,呈典型的细胞凋亡DNA梯形带,地塞米松-PRL组的IM-9细胞的DNA经电泳后未出现凋亡的DNA条带。结论:地塞米松能诱导IM-9细胞的凋亡,PRL能保护IM-9细胞,免其凋亡。     

小鼠胸腺组织细胞凋亡DNA电泳特征的观察

为了观察细胞凋亡后细胞基因组的特征性变化及其特点，应用地塞米松制备了在体小鼠胸腺组织细胞凋亡的模型，结果显示细胞ＤＮＡ经电泳后出现典型的梯形条带，尤以在地塞米松诱导６ｈ最为典型，且结果稳定，个体差异小。