胎肝基质细胞强化骨髓移植治疗急性放射病

目的为进一步提高骨髓移植效果。方法以昆明种小鼠急性放射病为模型，进行了胎肝基质细胞强化同种异基因骨髓移植，观察了小鼠造血重建、急性移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）及小鼠存活率。结果胎肝基质细胞移植可强化骨髓移植效果，与单纯骨髓移植组比较，于照射后第１１天小鼠外周血白细胞、骨髓有核细胞计数，ＣＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｆ、ＣＦＵ－Ｓ回升较快，ＣＦＵ－Ｆ已达正常，于照射后第１７天造血得以重建；ＧＶＨＤ较轻，存活率显著提高，达６０％。结论胎肝基质细胞改善了造血微环境，可能既改善了“龛位”，又增加了“龛位”使干细胞更多的植入，促进了造血重建，提高了骨髓移植效果，是一种“种子与土壤”并重的移植新方法。     

骨髓细胞经酸性成纤维细胞生长因子孵育后程序移植的实验研究

目的　充分利用酸性成纤维细胞生长因子（ａＦＧＦ） 促进造血重建的作用,以进一步完善程序移植新方法。方法　以昆明种小鼠急性放射病为模型,进行了骨髓细胞（ＢＭＣ） 经自牛脑中制备的ａＦＧＦ孵育后程序移植对造血重建、急性移植物抗宿生病（ＧＶＨＤ） 的研究。结果　ａＦＧＦ 孵育后程序移植ＢＭＣ４ ×１０６ ,存活率达４０％ ,比单纯一次移植ＢＭＣ１ ×１０７ 组高（３０％ ）,但不如单纯骨髓程序移植ＢＭＣ４ ×１０６ 组（６０％ ）;另一方面,外周血白细胞、骨髓有核细胞计数、ＣＦＵＥ、ＣＦＵＧＭ、ＣＦＵＳ比一次骨髓移植１×１０７ 组和单纯骨髓程序移植ＢＭＣ４ ×１０６ 回升快,而ＣＦＵＦ回升无差别;ＧＶＨＤ较一次骨髓移植１ ×１０７ 组轻,较骨髓程序移植４ ×１０６ 重。结论　引起ＧＶＨＤ 的主要原因是异基因Ｔ淋巴细胞,通过ａＦＧＦ孵育后程序移植可以更充分地发挥其促进造血重建的作用,而减轻ＧＶＨＤ。     

粒细胞集落刺激因子对骨髓移植及外周血祖细胞保护的骨髓造血重建

１１ 例急性白血病及中－ 高恶性度非何杰金氏淋巴瘤患者，采用自体／异基因骨髓移植和外周血造血祖细胞保护的大剂量化疗。骨髓或外周血造血祖细胞回输后，开始使用Ｇ－ ＣＳＦ ２．５－ ５ μｇ／ｋｇ，１／日。Ｇ－ＣＳＦ使用天数分别为：外周血造血祖细胞保护组１１±２ ｄ；自体骨髓移植组１８±２ ｄ；异基因骨髓移植组２０±２ ｄ。骨髓涂片显示：骨髓增生活跃。外周血象恢复时间缩短，骨髓及外周血ＣＦＵ－ＧＭ ，ＢＦＵ－Ｅ， ＣＦＵ －ｍ ｉｘ 培养和ＣＤ３４＋ ＣＤ３８＋ 、ＣＤ３４＋ ＣＤ３８－ 细胞检测表明造血祖细胞恢复良好。Ｇ－ＣＳＦ能促进骨髓造血重建，缩短骨髓空虚期，减少严重感染的发生     

小鼠15%Ⅲ度烧伤时骨髓基质细胞对粒单系祖细胞生长的影响

目的 研究烧伤情况下骨髓造血基质细胞支持粒单系造血的功能变化。方法 采用体外小鼠骨髓基质细胞融合培养和粒单系祖细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ）培养的方法,动态观察１５％Ⅲ度烧伤时骨髓基质细胞对粒单系祖细胞生长的影响。结果 当在烧伤组基质细胞层上培养正常骨髓细胞的ＣＦＵ－ＧＭ时,其集落生成能力在伤后１,３,５,７,１０天均明显低于正常对照组,而同时培养的烧伤小鼠骨髓细胞ＣＦＵ－ＧＭ时,其集落生成能力在伤后１     

胚胎期胺辐射对子鼠造血基质细胞功能的影响

目的 研究胚胎期２．０Ｇｙ＾１３７Ｇｓγ射线照射后对子鼠造血基质细胞的远期影响。方法 建立胚胎期受辐射小鼠模型；以细胞计数检测股骨骨髓有核细胞（ＢＭＮＣｓ）数；用免疫组化ＡＢＣ法检测基质细胞粒单系集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）和干细胞因子（ＳＣＦ）的表达；用体外小鼠骨髓细胞培养法以粒单细胞系祖细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）为指标观察基质细胞对正常骨髓造血的支持功能。结果 胚胎期受辐射小鼠ＢＭＮＣｓ     

肿瘤坏死因子α对小鼠骨髓型放射损伤的防护作用

目的：研究肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）对受照射小鼠骨髓造血细胞的近期影响和造血重建功能的作用探讨ＴＮＦα对骨髓造血细胞的辐射防护作用。方法小鼠照射前２４ｈ一次性注射ＴＮＦα,２周后检测共外周血ＷＢＣ、骨髓ＭＮＣ、ＣＦＵ－Ｓ和ＣＦＵ－Ｍｉｘ,流式细胞仪分析骨髓ｃ－Ｋｉｔ＋细胞;并进行长期造血重建实验燧注射ＴＦＮα的小鼠,２周后外周血ＷＢＣ、骨髓ＭＮＣ、内源性ＣＦＵ－Ｓ、ＣＵＦ－Ｍｉｘ数量和ｃ－Ｋｉｔ＋     

小鼠脾基质细胞特性与功能研究

作者用体外液体单层和器官培养技术研究了小鼠脾基质细胞某些特性和功能。结果发现，大剂量照射后骨髓细胞与脾基质细胞混输组较单输ＢＭＣ组受体ＣＦＵ－Ｓ及ＣＦＵ－Ｆ数明显增高（Ｐ＜０．０１）；脾ＣＦＵ－Ｆ的Ｄ０值为２．８Ｇｙ；低剂量照射后对基质细胞增殖有刺激效应；基质细胞周围可见有造血免疫细胞生长。     

造血干细胞联合AGM基质细胞移植对骨髓移植小鼠造血重建的影响

目的探讨造血干细胞与主动脉-性腺-中肾（aorta—gonad—mesonephros，AGM）区来源的基质细胞联合移植对同基因骨髓移植（bone marrow transplantation，BMT）小鼠BMT后骨髓造血的影响。方法建立同基因骨髓移植小鼠模型，随机分成4组：空白对照组、BMT组、BMT联合AGM基质细胞移植组（联合移植组）及川芎嗪组，另设正常组。分别于BMT后7、14、21和28d检测外周血细胞、骨髓单个核细胞（bone marrow mono—nuclear cells，BMMNC），3、7、10、14、21和28d检测骨髓组织学变化。结臬联合移植组骨髓单个核细胞较川芎嗪组恢复快，联合移植组及川芎嗪组外周血血细胞、骨髓单个核细胞、骨髓组织恢复均较单纯BMT组快，差异有统计学意义。结论BMT联合AGM基质细胞移植对骨髓移植造血重建具有促进作用。     

脐血与成人外周血,骨髓中造血干／祖细胞数量汲增殖比较

应用免疫磁珠分离法及甲基纤维素体外集落培养法分别观赏了脐血、成人外周血及骨骨右ＣＤ３４＾＋细胞数疸和ＣＦＵ－Ｍｉｘ、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｅ及ＢＦＵ－Ｅ集落形成情况，并进行了比较研究，结果显示脐血造血干／祖细胞数量及增殖能力明显高于成人外周血和骨髓，脐血中ＣＤ３４＾＋细胞数分别是成人外周血和骨髓的２０￣４０倍和４￣５倍，脐血外周血的４倍和３倍，而与骨髓基本相当。     

人正常骨髓CD34~ 造血细胞体外扩增形成红系及混合系造血祖细胞的能力

根据阳性选择策略，采用ＣＩＭＳ－１００免疫磁性无菌分离系统富集人正常骨髓ＣＤ３４＋造血细胞，然后将其在含Ｅｐｏ＋ＧＭ－ＣＳＦ＋ＩＬ－３＋ＩＬ－６＋ＳＣＦ（简ＥＧＩＳ）组合造血生长因子的无基质液培体系中扩增４周，定期进行单个核细胞计数、ＢＦＵ－Ｅ及ＣＦＵ－Ｍｉｘ的培养。经ＦＡＣＳ鉴定所富集的ＣＤ３４＋造血细胞纯度平均＞９０％。人正常骨髓ＣＤ３４＋造血细胞在该条件下均可持续产生大量单个核细胞，最高可扩增１７７０倍。与ＨＰＰ－ＣＦＣ和ＣＦＵ－ＧＭ相反，ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－Ｍｉｘ扩增量较低，最高仅为２．３６和２．４倍，且仅在第１周出现，随后迅速减少至停止。     

人骨髓细胞长期低温保存的研究

目的:探讨人骨髓在液氮长期保存下造血细胞活力.方法:以10%二甲基亚砜、“二步”冻存法在液氮液相中冻存人骨髓细胞,用造血细胞培养的集落形成为指标,定期观察造血细胞活力.结果:20份人骨髓,1～15年CFU-GM回收率由(72.4±10.3)%下降至(40.5±13.2)%,CFU-GM回收率相关公式为:Y=0.7822-0.02573X.15年后BFU-E、CFU-GEMM、LTC-IC形成能力良好.结论:在液氮液相中冻存入骨髓,15年后仍有较好的造血细胞活力.     

来源于骨髓与脐带血的基质细胞基本特性比较研究

目的 比较骨髓与脐带血细胞体外培养基质细胞的基本特性，为基质细胞的选择应用提供依据。方法 用Dexter长期培养体系培养骨髓和脐带血基质细胞，以细胞增殖、细胞形态、细胞化学染色、细胞表面抗原及基质细胞支持另一骨髓细胞形成的鹅卵石造血区、长期培养起始细胞为指标，比较两者的生长特性、成分及功能。结果 生长特性：出现贴壁细胞时间，骨髓细胞为培养3d，脐带血细胞为培养5-6d；细胞融合成片时间，骨髓细胞为培养10～14d，脐带血细胞为培养12—18d；第21天细胞增殖数，骨髓比脐带血细胞增殖少。细胞成分：21d培养后细胞成分，骨髓来源者以成纤维细胞为主，其次是巨噬细胞与内皮细胞，脂肪细胞最少；而脐带血细胞来源者，以巨噬细胞为主，其次是内皮细胞、成纤维细胞，偶见脂肪细胞；细胞化学与上述结果基本一致；细胞表面抗原检测，CD14、CD45的表达骨髓细胞明显低于脐带血细胞。细胞功能：骨髓来源的基质细胞较脐带血细胞的基质细胞支持另一骨髓细胞形成的鹅卵石造血区和长期培养起始细胞明显多。结论 ①生长特性：形成贴壁细胞时间骨髓较脐带血短，骨髓细胞比脐带血细胞有核细胞数增殖快、持续时间相对短。②细胞成分特性：骨髓来源形成的基质细胞以成纤维细胞为主，脐带血来源者以巨噬细胞为主。③细胞功能特性：骨髓细胞形成的贴壁细胞较脐带血细胞形成的贴壁细胞更利于鹅卵石造血区、长期培养起始细胞生长。     

中轴骨骨髓MR成像研究

目的：分析不同年龄正常中轴骨的MR表现以探讨MRI上中轴骨骨髓转化的规律及特点。资料与方法：共搜集460例不同年龄正常中轴骨骨髓MR图像。其中颅骨156例，男，87例，女69例，年龄0－25岁；腰椎231例，男136例，女95例，年龄0－78岁；骨盆及股骨上段73例，男43例，女30例，年龄0－70岁。结果：MRI上不同年龄中轴骨骨髓信号不同，主要表现在信号强度与均匀性两方面，总体上说，随年龄增长，信号强度逐渐增高，不均匀性逐渐显著。结论：中轴骨骨髓转化以局灶不均匀转化为主,不同年龄中轴骨骨髓MRI表面不同，在进行相关疾病诊断时一定要结合患者年龄。     

脐带血清在骨髓造血祖细胞培养中的效应

目的:探讨人脐带血清(CBS)在骨髓造血祖细胞培养中的效应,为脐血的应用提供实验依据.方法:用人骨髓单个核细胞,分别加入CBS或混合脐带血清(MCBS)和细胞因子,进行造血祖细胞(CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-GEMM)培养,观察集落数.结果:10?S能直接刺激骨髓细胞CFU-GM的形成.CBS的刺激活性和骨髓细胞血型相同与否无关.4人份以上的MCBS,刺激产生的CFU-GM显著高于单人份、双人份混合者,活性稳定.在CFU-GM培养时,20%MCBS与100ng/mlGM-CSF、20%马血清具有相同的效果.MCBS可提高CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-GEMM常规体系的集落产率.10%MCBS相当于65.6ng/ml GM-CSF、0.23U/ml、0.3U/ml 0.46U/ml Epo对CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-GEMM所起的作用.20%MCBS可直接刺激CFU-E形成.如培养体系内无BpA(爆式集落活性)存在时,形成 BFU-E、CFU-GEMM较少或几乎为零,当含BpA时,可形成一定量的BFU-E、CFU-GEMM集落.结论:CBS(MCBS)内含有能刺激CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-GEMM的生长活性;同血型或不同血型4人份以上混合,其刺激活性高,且稳定.具有良好的应用前景.     

常见血液病的骨髓磁共振成像

磁共振成像(MRI)以其无创伤性、直接显示骨髓、检测异常骨髓的能力而成为评价骨髓病变的首选影像学检查方法。随着年龄的增长，正常人红骨髓按照一定规律转换为黄骨髓，MRI表现也发生相应的变化。多种原发血液病可引起骨髓MRI信号异常，甚至骨髓T1的变化。白血病骨髓典型表现为弥漫性的T1WI低信号，T1延长；白血病治疗后缓解，T1缩短接近正常范围。淋巴瘤及多发性骨髓瘤的MRI表现多种多样，取决于病变的恶性程度，但骨髓的T1均延长。再生障碍性贫血具有特征性的T1WI、T2WI高信号。增生性贫血由于红骨髓增生，黄骨髓逆转为红骨髓，贫血严重时甚至骨骺内的黄骨髓逆转为红骨髓。     

BMSC对内毒素诱导的肺泡上皮细胞氧化应激的影响

目的 探讨骨髓间充质干细胞（(bone marrow stromal cell,BMSCs）对内毒素（lipopolysaccharide, LPS）诱导的Ⅱ型肺泡上皮细胞（alveolar epithelial cellⅡ,AECⅡ）氧化应激的影响。方法 选用A549细胞代替AECⅡ,将实验分为A549组、A549+LPS组、A549-BMSC+LPS组及A549-BMSC+PBS组,即单独培养A549细胞或将BMSC与A549细胞共培养于Transwell体系,培养过夜后予LPS或等体积的PBS刺激。收集各组A549细胞样本,通过流式细胞仪检测活性氧（reactive oxygen species,ROS）的表达水平,并利用化学检测试剂盒,通过分光光度计检测脂过氧化物（lipid peroxides,LPO）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）及谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH）表达水平。结果 A549细胞在LPS的干预下,细胞内ROS表达水平（658.40±27.89）及其代谢产物LPO（1.46±0.15）、MDA（36.85±2.75）的水平明显升高（P<0.001）,抗氧化因子SOD（13.44±3.32）、GSH（346.56±44.33）的活性明显降低（P<0.001）;与A549+LPS组比较,A549-BMSC+LPS组ROS（544.61±41.30）、LPO（1.05±0.09）、MDA（10.63±0.95）的水平明显降低（P=0.001、P=0.006、P<0.001）,SOD（33.41±3.59）、GSH（447.18±45.56）的活性明显升高（P=0.001、P=0.028）;而与A549组比较,A549-BMSC+PBS组ROS（108.97±17.49）、LPO（0.12±0.03）、MDA（1.23±0.36）的表达水平呈下降趋势（P=0.033、P=0.004、P=0.012）,SOD（68.33±8.01）、GSH（793.89±62.33）的活性进一步升高（P=0.001、P=0.002）。结论 BMSC能显著减轻LPS诱导的AECⅡ细胞的ROS生成,同时能正向调节其抗氧化的能力,可以一定程度上抑制LPS诱导的AECⅡ细胞的氧化应激反应。抑制肺泡上皮细胞氧化应激状态下ROS的产生、增强肺泡上皮细胞抗氧化的能力,或许可以成为治疗急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征的新策略之一。     

短期培养小鼠骨髓细胞的增殖、分化及其移植效果

实验采用添加肌条件培养液方法进行小鼠骨髓细胞短期液体培养,细胞增殖分化十分活跃。2天起细胞总数和CFU-C逐渐增多,6天分别增至原来的4倍和6倍。淋巴细胞在培养4天或3天消失。CFU-S 6天时减至原来的21%。照后1天或3天静脉输注培养6天的CFU-S,提高照射900拉德同系小鼠的活存率82%。照后30天和60天分别活杀,8只受体小鼠的骨髓细胞2只为供体型,5只为以供体型为主的嵌合体,1只为受体型为主的嵌合体。     

髋部骨髓水肿综合征的临床影像学分析

目的探讨髋部骨髓水肿综合征(bone marrow edema syndrome)的临床和影像学表现及其诊断价值。资料与方法回顾性分析7例经临床和MRI随访诊断的髋部骨髓水肿综合征患者的临床和影像学资料,其中男3例,女4例,包括7例MRI检查和5例X线平片检查,同时随访3~7个月。结果 7例患者因无明显诱因出现单侧髋部症状就诊,MRI上均表现为股骨近段较广泛的骨髓水肿信号,其中3例X线平片表现为相应部位的骨质疏松。所有患者保守对症治疗后3~7个月随访,临床症状消失,MRI上骨髓水肿信号消失,但其中1例对侧髋部又出现新的类似病变。结论掌握此病的临床和影像学表现,有助于正确诊断。