γ-氨基丁酸A受体对新生大鼠基本节律性呼吸的调节作用

目的 探讨γ-氨基丁酸A(GABAA)受体对新生大鼠基本节律性呼吸的产生和调节作用.方法 制备新生大鼠离体延髓脑片标本,包括面神经后核内侧区(mNRF),并保留舌下神经根,予灌流改良Kreb's液(MKS),记录舌下神经根的呼吸相关节律性放电活动(RRDA).实验分为3组,每组分别使用6只脑片标本.GABA量效关系组:以10、20、40、60 μmol/L的GABA灌流脑片,加药前神经放电为对照组,观察RRDA的变化,描记量效曲线,选择最适质量浓度;荷包牡丹碱(bicuculline)组:以10 μmol/L bieuculline灌流脑片,观察RRDA的变化;GABA和bicuculline组:联合应用40 μmol/L GABA和10 μmol/L bicuculline灌流脑片,观察RRDA的变化.结果 GABA对延髓脑片RRDA有抑制作用,使用含GABA的MILS灌流脑片标本可使RRDA的吸气时程(TI)缩短、放电积分幅度(IA)下降、呼吸周期(RC)延长、呼气时程(TE)延长.40μmol/L的GABA对TI、LA、RC、TE等呼吸指标综合效果最显著.GABA可使RRDA的TI缩短、IA下降、RC和TE延长.bieuculline使TI延长、IA增加、RC和TE缩短,对RRDA有兴奋作用.联合使用GABA和bieuculline对RRDA无明显作用.结论 生理条件下内源性GABA通过GABAA受体对新生大鼠的基本呼吸节律的产生和调节发挥重要作用.     

5-羟色胺2A受体对新生大鼠离体延髓脑片吸气神经元放电的调制

目的 探讨5-羟色胺2A(5-HT2A)受体对新生大鼠延髓脑片吸气神经元放电的调制作用.方法 制作新生大鼠离体延髓脑片标本,给予灌流恒温改良Kreb's液(MKS),使用内含银一氯化银电极的吸附电极吸附舌下神经根,稳定记录舌下神经根呼吸相关节律性放电活动(RRDA)后,使用微电极以细胞外记录方式在面神经后核内侧区同步记录吸气神经元放电.同步记录舌下神经根RRDA和吸气神经元放电后,用含40μmol/L 5-HT2A受体特异激动剂2,5-二甲氧基-4-碘苯基丙烷-2胺盐酸盐(DOI)的MKS充分灌流延髓脑片,记录吸气神经元放电活动变化,冲洗至RRDA和吸气神经元放电基本恢复,用含5-HT2A受体特异拮抗剂酮舍林的MKS灌流脑片,记录吸气神经元放电活动变化.结果 使用DOI激活5-HT2A受体后,吸气神经元放电时程(TI)为(0.86±0.07)s,呼气时程(TE)为(10.78±1.06)s,呼吸周期(RC)为(11.79±1.64)s,吸气神经元放电积分幅度(IA)为(357.98±37.21)(μV·s),放电峰频率(PF)为(37.83±3.66)Hz,对照组分别为(0.68±0.06)s、(13.89±2.14)s、(14.77±1.92)s、(273.57±24.39)(μV·s)和(29.92±4.50)Hz, DOI组与对照组比较均有显著差异(Pa＜0.01).对吸气神经元放电有兴奋作用.应用酮舍林后,缩短TI为(0.55±0.07)s,延长TE为(18.43±3.28)s, RC为(20.17±2.91)s, IA减为(214.37±33.52)(μV·s),PF为(22.17±3.92)Hz,与对照组和DOI组比较均有显著差异(Pa＜0.01).对吸气神经元放电有抑制作用.结论 5-HT2A受体参与调节新生大鼠延髓脑片吸气神经元放电活动.     

新生儿机械通气时呼吸性碱中毒多因素分析

目的了解影响新生儿呼吸性碱中毒(呼碱)的发生因素并探讨解决方法。方法通过比较47例不同年份、孕周、体质量、肺部疾病、转归、上机时间新生儿呼碱发生率;呼碱和非呼碱时呼吸机参数,以发现影响呼碱发生因素。并对这些因素进行Logistic回归分析。结果不同孕周、原发病、通气方式之间,呼碱的发生率有显著性差异;呼碱组与非吸碱组呼气末正压(PEEP)、吸气时间(TI)有显著差异。经多因素回归分析显示,TI延长、PEEP提高和原发病是影响呼碱发生的重要因素。结论正确调节呼吸机参数并考虑不同疾病的性质,可减少呼碱发生。     

新生小鼠巨细胞病毒肝炎模型的建立

目的 探讨建立鼠巨细胞病毒(MCMV)感染致新生小鼠肝炎模型的可行性.方法 48只日龄24 h内新生BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,实验组每只小鼠腹腔注射MCMVSmith株20μl TCID50(104.31/0.1 ml),对照组注射无菌生理盐水20μl,注射第3、7、14天取血清和肝脏,检测血清ALT水平,肝脏组织HE染色后用光镜检查组织病理损害,同时提取肝脏组织的DNA,应用MCMV及β-actin引物行PCR扩增,然后跑电泳和测序.结果 实验组小鼠ALT水平(U/L)在3天时即明显升高,7天达高峰,14天时有所下降,与对照组比较,差异均有统计学意义[3天:(58.7±11.5)比(25.0±10.6),7天:(169.6±57.4)比(25.1±8.4),14天:(157.3±15.5)比(26.5±9.4),P均＜0.01].实验组小鼠肝组织内均可见肝细胞气球样变性,点灶状坏死,门管区炎性细胞浸润,肝细胞核内病毒包涵体,7天时最严重;对照组肝细胞无相似病理变化.实验组MCMV-DNA PCR电泳全部出现阳性条带,阳性条带测序结果与MCMV基因序列的同源性完全相符.结论 MCMV能侵袭BALB/c新生小鼠引起肝炎,这种模拟人类巨细胞病毒肝炎的新生小鼠模型的建立为该病动物实验研究提供了可能.     

β-胡萝卜素对坏死性小肠结肠炎新生小鼠肠道氧化应激的保护作用

目的运用坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis, NEC)新生小鼠模型,探讨β-胡萝卜素对NEC新生小鼠肠道损伤的作用。方法选用5日龄C57BL/6新生小鼠15只,按随机数字法分为三组,每组5只。对照组:母鼠哺乳喂养,无其他任何干预;NEC组:通过对新生小鼠缺氧刺激,人工喂养及脂多糖干预诱导产生NEC;β-胡萝卜素干预组:在诱导产生NEC的同时,给予新生小鼠胃管灌注β-胡萝卜素(1 mg/kg)。于生后第9日收集各组新生小鼠末端回肠组织,分析比较NEC病理评分,肠道炎症反应,肠上皮细胞增殖、凋亡及氧化应激水平。结果与对照组相比,NEC组肠道出现明显损伤(0/5比5/5,P<0.05),炎症反应(1.0122±0.03比9.5367±3.025,P<0.01)及氧化应激水平(TBARS 6.9292±0.129比11.4420±0.074,P<0.01; GPx 25.21±7.113比17.5674±5.769,P<0.01)明显升高,肠上皮细胞增殖能力下降(5.36±0.308比1.48±0.212,P<0.01),且凋亡增...     

Ⅲ型 B族链球菌结合疫苗对新生小鼠致死性感染的保护作用

目的研究B族链球菌(GBS)荚膜多糖-破伤风类毒素结合疫苗主动免疫孕鼠产生型特异性IgG抗体对新生小鼠致死性GBS感染的保护作用.方法以Ⅲ型GBS荚膜多糖-破伤风类毒素结合物免疫孕鼠,用ELISA法测定母鼠型特异性IgG抗体的产生情况及新生鼠体内抗体水平,然后以同型GBS诱导新生鼠致死性感染,观察其死亡率.孕鼠注射生理盐水,新生鼠以致死剂量GBS 攻击组作为感染对照组,孕鼠及新生鼠不给任何处理组作为正常对照组.结果 接受免疫的孕鼠在临产前型特异性抗体水平大幅度升高,几何均数由0.039 mg/L 升至0.728 mg/L (P＜0.001),其所产新生鼠体内抗体含量显著高于感染对照组,二者的几何均数分别为0.538 mg/L、0.043 mg/L (P＜0.001) ; GBS致死性感染后死亡率显著低于感染对照组,分别为37%、97% (P＜0.001).正常对照组中新生鼠存活率为100%.结论 GBS荚膜多糖蛋白结合物疫苗主动免疫孕鼠能诱导型特异性抗体大量产生,新生小鼠从母体获得的特异性抗体能保护其免受同型GBS致死性感染,体液免疫在新生小鼠的抗GBS感染免疫中起重要作用.     

新生儿呼吸窘迫综合征的挽救性治疗策略

目的 通过回顾性总结分析本院新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)的救治情况,探讨肺表面活性物质(PS)挽救性治疗策略的疗效.方法 回顾性分析46例NRDS患儿的临床资料.男33例,女13例;年龄40 min~6 h;胎龄32+5周;出生体质量(2 022±779) g.按照是否应用PS分为2组:使用PS组(n=32)与未使用PS组(n=14).比较2组呼吸支持时间和吸入吸氧体积分数(FiO2)、氧疗时间、住院天数、治愈率、病死率、并发症等情况.结果 使用PS组和未使用PS组患儿的呼吸支持时间[17.5 h(0~120.0 h) vs 0.5 h(0.5~24.0 h),P<0.05]、FiO2[32.5%(22%~90%) vs 85.0%(40%~100%),P<0.05]比较有统计学差异.而2组氧疗时间[24 h(2~240 h) vs 48 h(2~408 h),P>0.05]比较未见统计学差异.但与使用PS组比较,住院天数明显缩短.2组患儿并发症发生情况无明显差异.使用PS组患儿的治愈率为81.3%、病死率为18.8%,未使用PS组NRDS患儿的治愈率为35.7%、病死率为64.3%,2组治愈率比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 挽救性应用PS可以显著提高NRDS的治愈率,降低病死率.     

不同日龄新生小鼠视网膜血管对氧疗的敏感性

目的观察不同日龄新生小鼠对氧疗的敏感性,研究视网膜血管的发育程度与新生血管形成的关系。方法选择4、7、9、11日龄C57BL/6J新生小鼠各48只,分为高氧组和空气组,通过视网膜铺片(ADP酶染色)和视网膜切片(HE染色),定性和定量观察视网膜血管的增生情况。结果与各空气组相比,4、7、9日龄高氧组小鼠吸高氧5d,返回空气第5天时,大量新生血管形成。而11日龄高氧组小鼠在返回空气第5天未见新生血管形成。4、7、9、11日龄高氧组小鼠出氧箱第5天突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数目分别为25.0±3.7、47.7±5.0、18.7±2.0、2.6±1.4个,4、7、9、11日龄空气组分别为0.7±1.1、1.2±1.2、0.8±1.0、1.6±1.0个,4、7、9日龄高氧组细胞核数目明显增多,与相应的空气组比较,差异有显著性(P<0.001);11日龄高氧组细胞核数无明显增多,与11日龄空气组比较,差异无显著性。结论视网膜血管的发育程度与新生血管形成有关,视网膜血管发育越不成熟越易发生视网膜病变,而发育成熟的视网膜则不会发生视网膜病变。     

晚期应用肺表面活性物质治疗对呼吸窘迫综合征新生儿呼吸功能的影响

目的观察晚期（出生24h后）应用肺表面活性物质（PS）对呼吸窘迫综合征新生儿（NRDS）肺功能和呼吸机参数的影响,探讨其临床应用价值。方法对28例NRDS患儿晚期通过气管插管一次性分左侧、右侧、头低脚高、平卧4个不同体位注入PS,100～150mg/（kg.次）,每一体位缓慢注人所需药量的1/4,抽出细管,手控通气,为减少药液损失,除有明显的呼吸道阻塞外,用药后6h不进行拍背吸痰,注药后机械通气。检测用药前后NRDS患儿动脉血氧分压[pa（O2）]、动脉血二氧化碳分压[pa（CO2）]、动脉氧分压与肺泡氧分压的比率[a/Ap（O2）]、氧合指数（OI）等肺功能指标和吸氧体积分数、吸氧峰压、呼气末正压（PEEP）、平均呼吸道压等呼吸机参数,观察NRDS患儿用药前后临床表现、胸部X线片变化及存活率和并发症发生率。结果用药后NRDS患儿的pa（O2）、a/Ap（O2）较用药前显著上升,OI较用药前显著下降,呼吸机参数（PEEP除外）较用药前明显下降,差异均有显著意义（Pa〈0.05）。给药后2h临床观察,发绀减轻20例,发绀消失8例;26例血氧饱和度由70%～80%上升至〉90%;听诊双肺呼吸音增强24例。24h后观察胸片,病变明显改善21例,好转5例;存活率85.7%;并发症发生率：肺炎25%、动脉导管未闭10.7%、肺出血7.1%、脑室内出血3.6%。结论晚期应用PS对新生儿NRDS呼吸功能有明显改善,且疗效显著。     

HIF-1α干扰RNA抑制早产儿视网膜病小鼠模型视网膜新生血管形成的研究

目的：探讨特异性抑制缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达对早产儿视网膜病变（retinopathy of prematurity,ROP）小鼠模型视网膜新生血管的抑制作用。方法：新生C57BL/6J小鼠48只,随机分为实验组和对照组（每组24只）,采用Smith方法制备ROP模型。生后12 d 时实验组玻璃体腔注射HIF-1α特异性小片段干扰RNA 表达载体pSUPERH1-siHIF-1α,同时对照组玻璃体注射空载体。Western blot检测两组小鼠视网膜HIF-1α和血管内皮生长因子（VEGF）的表达,FITC-Dextran荧光照影视网膜铺片和组织切片观察两组小鼠视网膜新生血管和新生血管内皮细胞核数目的差异。结果：实验组小鼠HIF-1α和VEGF的表达较对照组明显下降（P<0.01）;实验组突破视网膜内界膜血管内皮细胞核数较对照组明显减少（P<0.01）。结论：特异性抑制HIF-1α能有效抑制ROP视网膜新生血管的形成。     

三碘甲状腺原氨酸对兴奋毒性脑损伤新生鼠游泳行为的影响

目的探讨三碘甲状腺原氨酸(T3)对兴奋毒性脑损伤新生鼠游泳行为的影响。方法出生5d(P5)新生小鼠71只随机分为对照组、模型组和治疗组,脑内注射兴奋性脑毒素——鹅膏蕈氨酸(IA)建立兴奋毒性脑损伤模型。治疗组再分为低剂量组、中剂量组和高剂量组,并分别于造模后1h、24h、48h、72h、96h腹腔注射2μg·kg-1、5μg·kg-1、10μg·kg-1左旋三碘甲状腺原氨酸(L-T3)。设对照组,PBS替代IA和L-T3,方法同模型组和治疗组。于出生10d、12d(P10、P12)进行游泳实验,比较各组之间的差别。结果P10游泳实验总分:低剂量组、中剂量组及高剂量组与模型组比较均差异无统计学意义(Pa>0.05);P12游泳实验总分:低剂量组及中剂量组与模型组比较差异无统计学意义(Pa>0.05),但高剂量组评分高于模型组(P<0.05);P10四肢运动评分:低剂量组、中剂量组及高剂量组与模型组比较均差异无统计学意义(Pa>0.05);P12四肢运动评分:低剂量组与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05),但中剂量组高于模型组(P<0.05),高剂量组明显高于模型组(P<0.01)。结论高剂量T3促进了兴奋...     

The Effect of Glucocorticosteroids on the Neonatal Blood Count

ABSTRACT. To investigate the influence of glucocorticosteroid therapy on the neonatal blood count, the haematologic data of 68 preterm and term infants, who had received single dose of 1 mg dexamethasone i.v., were reviewed. White blood cell (WBC) count and platelet count increased after steroid therapy. The increase in WBCs was associated with an increase in the number of neutrophilic granulocytes, whereas the number of eosinophils decreased. We conclude that glucocorticosteroids alter the neonatal blood count and influence its value as diagnostic marker for bacterial infections.     

促红细胞生成素在缺氧缺血性脑病新生鼠模型中的神经保护作用

目的探讨促红细胞生成素（EPO）在缺氧缺血性脑病（HIE）新生鼠模型中的神经保护作用。方法新生鼠HIE模型为7日龄新生鼠，结扎右侧颈总动脉，在缺氧环境下（氧体积分数为80mL／L）放置2h。实验分为假手术组、对照组和EPO组。从手术前2d开始，对照组注射磷酸盐酸缓冲液（PBS），EPO组注射EPO4000U／（kg·d），持续注射9～16d。通过测脑质量、脑损伤比率、姿势反射实验观察EPO疗效。体外实验利用神经干细胞系C17．2，在无血清条件下培养，体外模拟缺血环境，诱导细胞凋亡，利用流式细胞技术检测Anexin V，研究EPO对C17．2的保护作用。结果对照组脑质量、脑损伤比率明显大于假手术组（Pa〈0．05）。姿势反射实验对照组明显低于假手术组（P〈0．05）。EPO处理后，脑质量明显提高，脑损伤比率明显减小，姿势反射实验正常百分率提高（Pa〈0．05）。体外实验，用流式细胞技术检测Anexin V，发现EPO可有效减少神经细胞凋亡（P〈0．05）。结论EPO在HIE中具有神经保护作用，且有抗神经于细胞凋亡作用。     

格列苯脲对4例永久性新生儿糖尿病的疗效

目的 探讨格列本脲治疗永久性新生儿糖尿病( PNDM)的疗效.方法 选取2008年2月- 2009年5月本院收治并确诊的PNDM患儿4例,应用格列本脲对患儿进行试验性治疗2～3周,对格列本脲治疗有效的患儿进行长期随访,并对其疗效进行分析.结果 4例PNDM患儿中例1对格列本脲治疗有效,完全用格列本脲取代了胰岛素治疗.例4部分有效,运用格列本脲和胰岛素联合进行治疗.例2和例3对格列本脲治疗无效.对格列本脲有效及部分有效的患儿进行长期随访,血糖控制良好,未发现明显不良反应.结论 部分PNDM患儿对格列苯脲治疗有效.对临床考虑为PNDM的患儿应尽早进行遗传学分析,以利于临床治疗方案的选择.     

Parent Support of Feeding in the Neonatal Intensive Care Unit

To examine the perceptions of parent education and support of feeding in the neonatal intensive care unit (NICU), a survey was conducted with occupational therapists (OTs) and parents of infants in the NICU. Data were collected from 32 OTs and 11 parents. The results showed that OTs used a variety of teaching methods to convey information about feeding to parents, that parents felt “very confident” and OTs felt “confident” in the parents' understanding of the material, and that different types of equipment and follow-up services were offered to parents following their child's discharge from the NICU.     

川芎嗪对幼鼠缺血-再灌注视网膜超氧化物歧化酶、丙二醛水平的影响

目的探讨川芎嗪对幼鼠视网膜缺血-再灌注损伤后的保护作用及机制,评估其在幼龄视网膜缺血性疾病中的应用价值。方法32只3周龄幼鼠随机分为正常组、阴性对照组、缺血-再灌注组、川芎嗪治疗组。采用眼内灌注法前房灌注9g/L盐水制成视网膜缺血-再灌注模型。川芎嗪治疗组于缺血前30min与再灌注2h按10mg/kg腹腔内注射川芎嗪注射液;阴性对照组于缺血前30min和缺血后2h分别腹腔注射等体积9g/L盐水。各组分别于再灌注4h后空气栓塞法处死大鼠。取视网膜组织,用硫代巴比妥法测定丙二醛(MDA)水平,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果1.再灌注4h缺血再灌注组视网膜MDA水平较正常组显著增高(t=4.80P<0.01),治疗组视网膜MDA水平均低于缺血-再灌注组(t=8.20P<0.01),阴性对照组高于正常组(t=4.21P<0.01),缺血-再灌注与阴性对照组无明显差异(t=1.85P>0.05);2.再灌注4h,缺血-再灌注组视网膜SOD活性较正常组显著降低(t=4.58P<0.01),治疗组视网膜SOD活性均高于缺血-再灌注组(t=5.24P<0.01),阴性对照组低于正常组(t=7.12P<0.01),缺血-再灌注与阴性对照组无明显差异(t=2.11P>0.05)。结论川芎嗪可降低幼鼠视网膜组织MDA水平,提高SOD活性,对其视网膜缺血-再灌注损伤起保护作用。     

黄芪甲甙对病毒性心肌炎小鼠心肌组织蛋白酶B mRNA表达的影响

目的探讨黄芪活性成分黄芪甲甙对病毒性心肌炎(VM)小鼠心肌中组织蛋白酶B(cathepsinB,CB)mRNA表达的影响。方法Balb/c小鼠100只随机分为6组。非感染小鼠腹腔无菌注射病毒培养液,分为正常对照组(A组10只,以羧甲基纤维素钠0.1mL灌胃7d)、9%黄芪甲甙对照组(B组10只,9%黄芪甲甙0.1mL灌胃7d);余80只小鼠以柯萨奇病毒(CVB3)腹腔无菌注射制作VM模型,VM小鼠随机分为VM对照组和1%、3%、9%黄芪甲甙干预VM组,分别以生理盐水、1%、3%、9%黄芪甲甙0.1mL灌胃7d(分别为C、D、E、F组,每组20只)。14d后处死全部小鼠并取其心脏。采用RT-PCR半定量检测心肌CBmRNA表达水平。结果F组小鼠较C组死亡率明显降低[10%(2/20)vs45%(9/20),χ2=6.14P<0.05],B组无小鼠死亡;与C组比较CBmRNA表达水平及心肌病变积分在F组显著下降,而1%、3%黄芪甲甙对VM小鼠CBmRNA表达及心肌病变积分无明显影响。结论黄芪甲甙可能通过抑制CB表达,对Balb/c小鼠CVB3心肌炎具有良好的治疗作用。     

黄芪甲甙对病毒性心肌炎小鼠心肌柯萨奇病毒受体基因表达的影响

目的　探讨黄芪活性成分黄芪甲甙对病毒性心肌炎 (VM)小鼠心肌柯萨奇 腺病毒受体 (CAR)基因表达影响。方法　Balb/c小鼠 1 0 0只 ,分为 6组。非感染小鼠腹腔无菌注射病毒培养液 ,分为正常对照组 (A组 ,1 0只 ,以羧甲基纤维素钠 0 .1mL灌胃 7d)、9%黄芪甲甙对照组 (B组 ,1 0只 ,9%黄芪甲甙 0 .1mL灌胃 7d) ;余 80只小鼠以柯萨奇病毒 (CVB3)腹腔无菌注射制作病毒性心肌炎模型 ,VM小鼠随机分为心肌炎对照组和 1 %、3 %、9%黄芪甲甙干预心肌炎组 ,分别以生理盐水、1 %、3 %、9%黄芪甲甙 0 .1mL灌胃 7d(分别为C、D、E、F组 ,每组 2 0只 )。 1 4d后处死一小部分鼠并取其心脏。采用RT PCR检测心肌CARmRNA表达水平。结果　F组小鼠死亡率较C组明显降低 (1 0 %与 45 %比较 ) ,(χ2 =6 .1 4　P <0 .0 5) ,B组无小鼠死亡 ;与C组相比较 ,CARmRNA表达水平以心肌病变积分在F组显著下降 ,而 1 %、3 %黄芪甲甙对心肌炎小鼠CARmRNA表达及心肌病变积分无明显影响。结论　 9%黄芪甲甙可抑制CAR表达 ,提高心肌炎小鼠生存率 ,减轻心肌损害 ,安全有效 ,对VM有良好的治疗作用。