人羊膜细胞FL系中细胞色素P450同功酶的诱导

人羊膜细胞FL系含有低水平的基础EROD,ECOD和APND活性,其中EROD活性可被3—MC,β—NF及NE诱导达对照的3.1～6.7倍;ECOD和APND活性则不仅可被上述三种诱导剂还可被PB所诱导,分别增加到2～3和1.5～2倍的活性。当用3—MC与NE同时处理细胞时,EROD和APND活性的升高明显强于3—MC单独处理时。在诱导剂撤除后,细胞内EROD和ECOD的活性维持诱导后的高水平达24～36 h之久。提示诱导后一定时间内细胞对外来化合物的代谢能力明显增强。     

药物代谢酶细胞色素P4501A2的研究

细胞色素P4501A2是肝微粒体药物代谢酶家族的重要一员,它不但参与多种药物代谢,还在肿瘤的发生发展和治疗中起着重要的作用.本文简要综述了CYP4501A2的诱导剂、抑制剂、代谢底物、与疾病的关系及其研究进展.     

吸烟人群细胞色素P4501A1和谷胱甘肽-S-转移酶M1的基因型

采用分子流行病学的方法,研究吸烟人群细胞色素P450 1A1基因(CYP 1A1)和谷胱甘肽-S-转移酶M1基因（GST M1）的多态性特征.吸烟人群与同性别及同年龄（年龄<2周岁）健康人群一对一配对. 提取血液基因组DNA. PCR扩增CYP 1A1 Exon 7位点片段和GST M1部分片段. 限制性酶切片段长度多态性（RELP）分析P450 1A1片段和GST M1片段多态性特点. 结果显示吸烟组人群中CYP 1A1 Exon 7 Val/Val型（mm型）人群数增高,并有统计学差异. 吸烟组人群中：GST M1缺失人群数略有升高;CYP 1A1 wm型人群数略有升高;CYP 1A1 wm型＋mm型人群数略有升高,但这些变化均无统计学意义.     

中药对细胞色素P450酶活性影响的研究进展

中药在体内对代谢酶可产生诱导或抑制等作用,增加或减少不良反应,甚至发生毒性反应。笔者通过检索近年文献,归纳研究方法、相互作用机制,探讨中药对肝药酶活性的影响,预测可能的药物间相互作用,为中药的临床应用提供理论依据及策略。     

甘草与大戟甘遂芫花配伍对大鼠肝脏细胞色素P4501A2酶活性的影响

目的研究甘草与大戟、甘遂、芫花合用对细胞色素P450(CYP)1A2酶活性的影响。方法采用高效液相色谱法测定CYP1A2活性。结果单用甘草诱导CYP1A2的酶活性;大戟、甘遂、芫花单用抑制CYP1A2的酶活性;甘草与大戟、甘遂、芫花合用后抑制了CYP1A2的酶活性。结论甘草与大戟、甘遂、芫花合用对CYP1A2酶活性的抑制作用主要是由大戟、甘遂、芫花引起的。     

漏芦对大鼠原代肝细胞细胞色素P4501A1酶活性及其mRNA表达的影响

目的研究漏芦对细胞色素P450A1酶活性及其mRNA水平的影响。方法以大鼠原代肝细胞为研究对象,实验组分别加入不同浓度(15.6,31.2,62.4 mg/ml)药物处理48小时,用氨基比林N-脱甲基酶(aminopyrence N-demethylase,ADM)活性反映CYP1A1酶活性;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定药物作用前后酶基因mRNA表达的相对水平变化。结果漏芦作用后,CYP1A1酶活性及相应mRNA的表达呈浓度依赖性抑制。药物在15.6,31.2,62.4 mg/ml对CYP1A1酶活性的抑制率分别为18.1%,46.9%,55.1%;对CYP1A1mRNA表达水平的抑制率分别为14.8%,18.1%,31.0%。结论漏芦浓度依赖性抑制CYP1A1酶活性,在转录水平下调大鼠肝细胞CYP1A1的表达。     

苦参对大鼠细胞色素P4501A2体内代谢活性的影响

目的以咖啡因作为探针药物,研究苦参对大鼠细胞色素P450 1A2(CYP1A2)体内代谢活性的影响。方法将Wistar大鼠随机分为4组:空白对照组、苦参组(实验组)、苯巴比妥组(诱导剂阳性对照组)和西咪替丁组(抑制剂阳性对照组)。苦参组,灌胃给予苦参溶液100 mg.kg-1;空白对照组,灌胃给予与苦参组体积相同的生理盐水;苯巴比妥组,腹腔注射苯巴比妥注射液50 mg.kg-1;西咪替丁组,每日腹腔注射西咪替丁注射液50 mg.kg-1,各组均为每日1次,连续5 d。第6 d,各组大鼠均经尾静脉注射咖啡因溶液2.5 mg.kg-1,于给药前及给药后不同时间,眼内眦静脉取血0.8 mL,用高效液相色谱法,测定血浆中咖啡因的浓度。结果给予大鼠苦参5 d后,苦参组的咖啡因AUC、MRT、Cmax明显低于空白对照组和西咪替丁组(P<0.05),明显高于苯巴比妥组(P<0.05);而CL明显高于空白对照组和西咪替丁组(P<0.05)而明显低于苯巴比妥组(P<0.05)。结论苦参可明显诱导大鼠CYP1A2的体内代谢活性;但诱导强度低于苯巴比妥。     

吸烟人群细胞色素P4501A1和谷胱甘肽-S-转移酶M1的基因型

采用分子流行病学的方法 ,研究吸烟人群细胞色素 P450 1 A1基因 (CYP1 A1 )和谷胱甘肽 - S-转移酶 M1基因 (GST M1 )的多态性特征 .吸烟人群与同性别及同年龄 (年龄 <2周岁 )健康人群一对一配对 .提取血液基因组 DNA. PCR扩增 CYP 1 A1Exon7位点片段和 GST M1部分片段 .限制性酶切片段长度多态性 (RELP)分析 P450 1 A1片段和GST M1片段多态性特点 .结果显示吸烟组人群中CYP 1 A1 Exon 7Val/Val型 (mm型 )人群数增高 ,并有统计学差异 .吸烟组人群中 :GST M1缺失人群数略有升高 ;CYP1 A1 wm型人群数略有升高 ;CYP 1 A1 wm型 +mm型人群数略有升高 ,但这些变化均无统计学意义     

细胞色素P4501A1基因Ile/Val位点多态性与中国人群食管癌易感性的Meta分析

目的:采用Meta分析的方法探讨细胞色素P4501A1(CYP1A1)基因Ile/Val位点多态性与中国人群食管癌发病风险的相关性。方法:计算机检索PubMed、中国生物医学文献数据库、中国知网、维普及万方数据库,收集国内外公开发表的探讨CYP1A1基因Ile/Val位点多态性与中国人群食管癌发病风险相关性的病例-对照研究,检索时限均为2013年10月。采用Stata12.0软件对符合纳入标准的研究进行Meta分析。结果:共纳入10个病例-对照研究,包括981例食管癌病人,1327例健康对照。Meta分析结果显示,CYP1A1基因Ile/Val位点多态性与中国人群食管癌发病风险相关性具有统计学意义:显性模型[Ile/Val+Val/Val vs.Ile/Ile:OR=1.34,95%CI(1.02~1.75),P0.05]、隐形模型[Val/Val vs.Ile/Ile+Ile/Val:OR=1.51,95%CI(1.01~2.27),P0.05]、Ile/Val vs.Ile/Ile[OR=1.24,95%CI(1.03~1.50),P0.05]、Val/Val vs.Ile/Ile[OR=1.66,95%CI(1.00~2.75),P=0.048]。结论:基于目前的研究结果,可以认为CYP1A1基因Ile/Val位点多态性可能增加中国人群食管癌发病风险的易感性。受纳入研究数量及质量限制,该结论仍需进一步进行验证。     

细胞色素P4501A1基因mRNA的化学诱导及在人肝中的基础表达

利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交及逆转录聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术研究了几种传代培养细胞和成人肝组织及人胚胎肝组织细胞色素Ｐ４５０１Ａ１（１Ａ１）基础表达水平并观察了几种化学诱导剂对人羊膜细胞ＦＬ系和原代胚肝细胞该基因ｍＲＮＡ水平的诱导．结果显示：３－甲基胆蒽，苯巴比妥，β－萘黄酮在不同程度上能高诱导ＦＬ细胞１Ａ１ｍＲＮＡ表达．ＲＴ－ＰＣＲ结果显示ＣＨＬ细胞及Ｖ７９细胞存在基础表达，但Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交结果提示其表达量极低．成人肝脏中１Ａ１亦存在极低的表达水平，而人胚胎肝脏不能用高灵敏度的ＲＴ－ＰＣＲ检测到痕迹表达，提示胚胎发育时期１Ａ１基因处于完全关闭状态．     

葛根素对人细胞色素P4501D6酶活性的影响及其与基因型关系的研究

目的：研究葛根素对人细胞色素P450（ CYP）1D6酶活性的影响及其与CYP1D6基因型的关系。方法（1）体外试验：取肝内胆管结石患者手术切除标本中正常肝组织制备人肝微粒体孵育体系,加入不同浓度葛根素（0、0.015、0.050、0.100、0.100、0.400、0.800 mmol/L）及美托洛尔,以高效液相色谱法检测美托洛尔代谢产物α-羟基美托洛尔产率,以此反映CYP1D6酶活性。（1）体内试验：以18名健康男性[年龄19~16（11±4）岁,体重61~75（69±7）kg]为对象,其中CYP1D6基因型为＊1/＊1、＊1/＊10、＊10/＊10者各6名。试验分3个阶段进行,采用两阶段交叉试验设计。将受试者按照简单随机化分组方法随机分为1组。第1阶段（第1~11天）：1组连续10 d静脉滴注葛根素注射液400 mg/d,另1组不给药,第11天清晨1组受试者均口服美托洛尔100 mg;第1阶段（第11~17天）：1组均不采取任何措施;第3阶段（第18~18天）：第1阶段未服药组连续10 d静脉滴注葛根素注射液400 mg/d,另1组不给药,第18天清晨1组受试者均口服美托洛尔100 mg。第11和18天口服美托洛尔100 mg后收集受试者连续8 h尿液,采用高效液相色谱法测定尿液中美托洛尔及α-羟基美托洛尔浓度,以二者之比反映CYP1D6酶活性。结果体外试验显示经0、0.015、0.050、0.100、0.100、0.400、0.800 mmol/L葛根素处理的人肝微粒体反应体系α-羟基美托洛尔产率分别为（0.018±0.001）、（0.015±0.001）、（0.015±0.001）、（0.011±0.001）、（0.011±0.001）、（0.010±0.001）、（0.005±0.001）mmol/（mg·h）,α-羟基美托洛尔产率随着葛根素浓度的升高而逐渐降低,总体均数间差异有统计学意义（ F =30.750,P =0.000）。两两比较显示,0.100、0.100、0.400和0.800 mmol/L葛根素组α-羟基美托洛尔产率明显低于0、0.015、0.050 mmol/L葛根素组（ P﹤0.05）,0.100、0.400、0.800 mmol/L 葛根素组明?     

复方曲肽注射液对细胞色素P450酶活性的体内外影响

目的 考察复方曲肽注射液对细胞色素P450(CYP450)酶活性的体内外影响。方法 将人肝微粒体与复方曲肽注射液(体积分数0.05%～10%)和CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4的特异性探针底物共孵育30 min,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)技术检测相应代谢产物的生成量,并计算半数抑制浓度(IC₅₀);将人原代肝细胞与复方曲肽注射液(体积分数0.05%～10%)或CYP1A2、CYP2B6、CYP3A4阳性诱导剂共孵育48 h后,采用实时荧光定量聚合酶链式反应法测定上述酶mRNA的相对表达量(即诱导倍数)。将雄性SD大鼠随机分为对照组(生理盐水+CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4探针底物8、2、1、1、10、10、8mg/kg)和实验组(复方曲肽注射液0.9m L/kg+CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4探针底物8、2、1、1、10、10、8 mg/k...     

黄酮类化合物对细胞色素P450 CYP1，2E1，3A4和19的影响

黄酮类化合物广泛存在于蔬菜、坚果、水果和饮料及中草药中，可诱导或抑制多种细胞色素P450的活性。本篇综述主要集中回顾黄酮类化合物对于细胞色素P450 CYP1，2E1，3A4和19的影响。归纳总结了该类物质抑制和诱导细胞色素P450的多种机制，如刺激特定的受体、稳定相关mRNA等。并总结了该类物质对细胞色素P450的影响体内和体外水平的研究结果并非总是一致的原因，如体内外的浓度的差异、基因和其他环境因素的影响。由于黄酮类化合物可通过影响细胞色素P450的活性影响药物代谢从而导致药物不良反应和药物相互作用，因此在将该类物质与其他药物合用时应高度重视。     

聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯对大鼠体内细胞色素P450酶活性的影响

目的采用Cocktail混合探针药物法,探究聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯(吐温80)对大鼠体内Cyp450同工酶活性的影响,为提高临床低生物利用度药物的疗效提供新的途径,也为药物研发领域研制新型制剂选择合适的辅料提供理论依据。方法选用非那西丁、奥美拉唑、安非他酮和咪达唑仑分别作为大鼠体内4种Cyp450酶(Cyp1a2、Cyp2c11、Cyp2b1、Cyp3a1)的探针药物。SD雄性大鼠连续尾静脉注射吐温80溶液14 d,第14日给药30 min后,尾静脉注射混合探针药物后于各时间点取血。采用LC-MS/MS法测定试验组和对照组混合探针药物的血药浓度,用DAS 2.0软件拟合药代动力学参数。结果吐温80连续尾静脉注射2周后,与空白对照组相比,非那西丁、奥美拉唑、安非他酮的代谢明显减慢,而咪达唑仑的代谢无明显差异。结论吐温80对大鼠体内Cyp2c11、Cyp2b1、Cyp1a2酶有明显抑制作用,而对大鼠体内Cyp3a1无明显影响。因此,在临床上吐温80与CYP1A2、CYP2B6、CYP2C19酶相关的底物合用时,应注意给药剂量,防止药物在体内的血药浓度过高从而导致不良反应。     

天然冰片对大鼠细胞色素P450四种亚型活性的影响

目的：用Cocktail探针药物法研究天然冰片对大鼠细胞色素P450四种亚型CYP1A2、CYP2C6/11、CYP2E1和CYP3A活性的影响。方法：将大鼠随机分为2组,给药组灌胃给予天然冰片-0.8%CMC-Na混悬液,剂量90mg/kg,对照组灌胃给予不含药物的0.8%CMC-Na溶液,每天1次,连续7d。于第8天,两组大鼠均尾静脉注射混合探针药物溶液（茶碱10mg/kg、甲苯磺丁脲2.5mg/kg、氯唑沙宗10mg/kg、氨苯砜5mg/kg）,眼内眦静脉采血,超高效液相色谱法检测各探针药物的血药浓度,采用WinNonlin 5.0.1计算药代动力学参数。结果：与对照组相比,天然冰片组中甲苯磺丁脲的t1/2、AUC0-t、AUC0-∞和MRT0-∞明显减小,两组之间的差异具有统计学意义（P〈0.05）;而两组之间茶碱、氯唑沙宗和氨苯砜的药代动力学参数则没有明显差异。结论：天然冰片对大鼠CYP2C6/11的活性具有诱导作用,对CYP1A2、CYP2E1和CYP3A活性无显著影响。     

地非三唑对大鼠肝细胞细胞色素P450 CYP1A1/2的诱导作用

目的试从mRNA表达水平阐明地非三唑对鼠肝微粒体中细胞色素P450 CYP1A1/2的诱导机制。方法给SD大鼠腹腔注射地非三唑,采用Tr-izol法提取大鼠肝脏RNA,用RT-PCR测定经地非三唑处理1,2及4d的鼠肝中细胞色素P450 CYP1A1,CYP1A2 mRNA的表达水平。结果地非三唑处理不同时间的鼠肝细胞中细胞色素P450CYP1A1,CYP1A2 mRNA的表达水平比空白对照组明显增加,空白对照组CYP1A1吸光度比值为0.270±0.040,诱导1,2及4d的吸光度比值分别为0.343±0.055,0.417±0.045及0.603±0.083;空白对照组的CYP1A2吸光度比值为0.613±0.189,而诱导1,2及4d的吸光度比值分别为1.510±0.226,3.057±0.518及4.120±0.458。随着诱导时间的增加,细胞色素P450 CYP1A1及CYP1A2 mRNA的表达也逐步增加,诱导时间与表达水平之间存在一定的线性关系,相关系数分别为0.9984和0.9563。结论地非三唑对细胞色素P450 CYP1A1/2 mRNA表达具有诱导作用。     

地非三唑对大鼠肝细胞细胞色素P450 CYP1A1/2的诱导作用

目的 试从mRNA表达水平阐明地非三唑对鼠肝微粒体中细胞色素P450 CYP1A1/2的诱导机制。方法 给SD大鼠腹腔注射地非三唑，采用Trizol法提取大鼠肝脏RNA,用RT-PCR测定经地非三唑处理1, 2及4 d的鼠肝中细胞色素P450 CYP1A1, CYP1A2 mRNA的表达水平。结果 地非三唑处理不同时间的鼠肝细胞中细胞色素P450 CYP1A1, CYP1A2 mRNA的表达水平比空白对照组明显增加，空白对照组CYP1A1吸光度比值为0.270±0.040, 诱导1, 2及4 d的吸光度比值分别为0.343±0.055, 0.417±0.045及0.603±0.083；空白对照组的CYP1A2吸光度比值为0.613±0.189, 而诱导1，2及4 d的吸光度比值分别为1.510±0.226, 3.057±0.518及4.120±0.458。随着诱导时间的增加，细胞色素P450 CYP1A1及CYP1A2 mRNA的表达也逐步增加，诱导时间与表达水平之间存在一定的线性关系,相关系数分别为0.9984和0.9563。结论 地非三唑对细胞色素P450 CYP1A1/2 mRNA表达具有诱导作用。     

浙贝乙素与浙贝乙素胆酸酯对人细胞色素P450酶活性的影响

目的探讨浙贝乙素和浙贝乙素胆酸酯对人细胞色素P450（CYP）酶5种主要亚型（同工酶）活性的影响。方法人CYP酶探针底物非那西丁（CYP1A2）、甲苯磺丁脲（CYP2C9）、奥美拉唑（CYP2C19）、右美沙芬（CYP2D6）、睾酮（CYP3A4）和咪达唑仑（CYP3A4）分别与不同浓度的浙贝乙素或浙贝乙素胆酸酯在体外与人肝微粒体共孵育20 min,以液质联用（LC/MS/MS）法同时测定各探针底物相应代谢产物的生成量并计算半数抑制浓度（IC50）值,评价浙贝乙素及浙贝乙素胆酸酯对5种CYP酶同工酶的抑制作用。结果浙贝乙素在所考察的0～200 μmol&#8226;L－1浓度范围内对5种主要的人肝微粒体CYP酶亚型基本没有抑制作用（CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP3A4）或者仅有很弱的抑制效应（CYP2D6,IC50≥200 μmol&#8226;L－1）;浙贝乙素胆酸酯在0～200 μmol&#8226;L－1浓度范围内对5种主要的人肝微粒体CYP亚型均有很强的抑制效应,其中对CYP2D6,CYP2C9,CYP2C19,CYP3A4四种亚型的抑制强度最大,IC50≤10 μmol&#8226;L－1,对CYP1A2亚型也有较强的抑制作用,IC50约为128 μmol&#8226;L－1。结论浙贝乙素对人肝微粒体5种主要的CYP同工酶活性无抑制作用,而浙贝乙素胆酸酯对人肝微粒体5种主要的CYP同工酶活性均有很强的抑制作用。     

黄酮类化合物对细胞色素P450 CYP1A2的抑制作用及其构效关系研究

利用本实验室已建立的体外肝微粒体模型， 测定36个黄酮类单体化合物对人细胞色素P450 CYP1A2的抑制活性， 并使用三维定量构效关系方法研究化合物的分子结构参数与其抑制活性之间的关系。CoMSIA模型证实黄酮类化合物的结构参数与其CYP1A2抑制活性存在明显的相关性(模型的相关系数R²为0.948)， 且有良好的预测能力(交叉验证相关系数q²为0.630)， 同时使用“留五法”证实模型的稳定性和可靠性。结果表明， 相对于黄酮， α-萘黄酮的π-π共轭体系更有利于提高化合物的抑制活性。根据获得的模型的三维等势图， 在α-萘黄酮基础上， 6、3′、4′位引入带正电基团或是疏水基团，同时5位引入带负电基团，能有效改善化合物的CYP1A2抑制活性。     

异喹啉类的新化合物CPUC1对K562/A02细胞多药耐药的逆转作用

目的　研究新化合物CPUC1对K5 6 2 /A0 2细胞多药耐药的逆转作用。方法　MTT法检测长春新碱细胞毒作用。流式细胞仪测定细胞内罗丹明 12 3的累积。DNA含量分析和AnnexinV/PI双染测定长春新碱诱导的细胞凋亡作用。结果　CPUC1可以明显逆转K5 6 2 /A0 2细胞对长春新碱的耐药性。CPUC1可以浓度依赖性增加K5 6 2 /A0 2细胞内罗丹明12 3的积累。CPUC1可明显增强长春新碱诱导的K5 6 2 /A0 2细胞凋亡。结论　CPUC1通过抑制P 糖蛋白 (P glycoprotein ,P gp)功能逆转了P gp介导的K5 6 2 /A0 2细胞的多药耐药性