益气化瘀方对膝骨关节炎大鼠关节软骨退变的防治作用

目的：研究益气化瘀方对膝骨关节炎大鼠模型关节软骨退变的防治作用及其机制。 方法：1月龄SD大鼠90只,随机分为正常对照组、模型组和益气化瘀方组,每组各30只。模型组,益气化瘀方组大鼠通过肩关节离断术＋直立位诱导法建立大鼠膝骨关节炎模型。益气化瘀方组大鼠分别于5、7、9月龄（即造模术后4、6、8月）开始用药,连续用药1个月。3组大鼠分别于6、8、10月龄（即造模术后5、7、9月）处死,每次10只。处死后取大鼠膝关节,行番红O／固绿染色观察关节形态学变化,实时荧光定量聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）检测各组关节软骨内Ⅱ型胶原基因（type Ⅱ collagen gene,Col2A1）、聚集蛋白聚糖（aggrecan-1,Agc1）、基质金属蛋白酶-13（matrix metalloproteinase-13,MMP-13）以及金属蛋白酶组织抑制剂-1（tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1,TIMP-1）mRNA表达的情况。 结果：模型组关节软骨结构破坏严重,而益气化瘀方组大鼠关节软骨退变较模型组明显减轻。实时荧光定量PCR结果显示,益气化瘀方组6和10月龄大鼠膝关节软骨Col2A1、Agc1以及TIMP-1 mRNA表达量高于模型组（P〈0．01,P〈0．05）,MMP-13 mRNA表达与模型组比较差异无统计学意义;益气化瘀方组8月龄大鼠Agcl mRNA表达明显高于模型组（P〈0。01）,MMP-13 mRNA表达明显低于模型组（P〈0．01）。 结论：益气化瘀方可通过促进软骨合成聚集蛋白聚糖与Ⅱ型胶原,延缓膝骨关节炎大鼠关节软骨的退变。     

益气化瘀补肾方治疗膝骨关节炎临床研究

目的观察施杞教授经验方益气化瘀补肾方治疗膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)的临床疗效,初步分析中药治疗KOA的优势。方法将122例符合纳入标准的患者随机分为两组,治疗组62例采用施杞教授经验方益气化瘀补肾方内服及外用,对照组60例采用美洛昔康治疗,疗程12周,比较两组总体疗效及主要症状评分。结果两组总有效率比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗组改善"膝部肿胀"、"膝部僵硬"、"腰膝酸软"、"膝部怕冷"的疗效优于对照组(P<0.05),对照组改善"疼痛"、"下蹲疼痛"、"上下楼疼痛"的疗效优于治疗组(P<0.05)。结论益气化瘀补肾方治疗KOA的总体疗效与美洛昔康相当,改善"膝部肿胀"、"膝部僵硬"、"腰膝酸软"、"膝部怕冷"的疗效优于美洛昔康,值得推广应用。     

补肾益气活血方对兔实验性膝骨关节炎软骨细胞bFGF-mRNA表达的影响

目的:探讨补肾益气活血方对膝骨关节炎的软骨细胞中bFGF-mRNA的表达的影响。方法:新西兰兔32只,随机分成四组:假手术组、模型组、醋氨酚组和补肾益气活血方组。其中模型组、醋氨酚组和补肾益气活血方组建立兔Hulth膝骨关节炎模型,分别采取相应的处理方法。术后4周处死取材进行bFGF-mRNA原位杂交,并采用图像分析系统对其表达测定。结果:补肾益气活血方组关节软骨中bFGF-mRNA的阳性表达高于假手术组和模型组(P<0.01),具有显著性差异。结论:补肾益气活血方可上调关节软骨中bFGF-mRNA的表达,从而起到防治膝骨关节炎的作用。     

补肾活血方对骨关节炎关节软骨保护作用的临床研究

为探讨补肾活血方对骨关节炎关节软骨的保护作用,选取膝关节炎患者60例,随机分为补肾活血方组和西乐葆组各30例,单盲给药,用平均Womac关节炎指数评分和平均OA严重程度指数评定2组用药前后临床症状的改善情况,采用夹心酶联免疫吸附法测定血清蛋白聚糖与Ⅱ型胶原表达.结果:6个月后补肾活血方组的改善明显优于西乐葆组(P＜0.01);蛋白聚糖和Ⅱ型胶原表达变化治疗前后比较,有显著性差异(P＜0.01).说明补肾活血方对骨关节炎的关节软骨有保护和促进修复的作用.     

Ⅱ型胶原蛋白酶诱导 SD 大鼠膝骨关节炎模型的建立

目的：建立Ⅱ型胶原蛋白酶诱导的SD大鼠膝骨关节炎模型。方法将SD大鼠20只随机分为A组和B组,每组10只。分别于第1、4天给予A组大鼠膝关节腔内注射Ⅱ型胶原蛋白酶,予B组大鼠膝关节腔内注射生理盐水进行造模。观察两组大鼠第1、3和7天体重的变化,以及第1、4、7天膝关节直径的变化,测定第7天大鼠处死后脾脏、胸腺重量和脏器系数,HE染色观察光镜下膝关节组织的一般形态。结果造模后,A组的体重呈下降、减少趋势,B组的体重呈上升、增长趋势。造模后第3、7天,A、B组间体重比较差异有统计学意义。 A组造模后的膝关节直径明显大于造模前,前后比较差异有统计学意义（ P＜0.01）。 B组造模后的膝关节直径与造模前差异无统计学意义（P＞0.05）。 A组造模后的膝关节直径大于B组,差异有统计学意义（P＜0.01）。关节组织HE染色光镜下观察显示,A组的关节呈早期骨关节炎的表现,而B组的关节组织无骨关节炎的表现。结论Ⅱ型胶原蛋白酶可成功建立SD大鼠早期膝骨关节炎模型。体重、膝关节直径、脾脏和胸腺重量、脏器系数及膝关节组织病理这几个指标有助于此模型生理病理特点的观察。     

益气化瘀补肾方对腰椎间盘突出症患者软组织张力的影响

目的:观察益气化瘀补肾方对腰椎间盘突出症患者软组织张力的影响。方法:128例腰椎间盘突出症患者随机分为对照组和观察组,每组各64例。对照组采用腰椎间盘突出非手术治疗;观察组在对照组治疗基础上给予益气化瘀补肾方。比较两组患者临床疗效、视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)、JOA评分、脊柱ODI评分及软组织张力。结果:观察组有效率为89.06%,对照组为68.75%,两组比较,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后两组患者VAS疼痛评分及软组织张力均降低(P0.05),脊柱ODI评分、JOA评分升高(P0.05);观察组患者治疗后VAS及软组织张力低于对照组(P0.05),脊柱ODI评分、JOA评分高于对照组(P0.05)。结论:应用益气化瘀补肾方治疗腰椎间盘突出症可提高临床疗效,改善临床症状,提高患者生活质量,可降低VAS及软组织张力,提高JOA评分、脊柱ODI评分。     

益气化瘀补肾方对腰椎间盘突出症患者软组织张力的影响

目的:观察益气化瘀补肾方对腰椎间盘突出症患者软组织张力的影响。方法:128例腰椎间盘突出症患者随机分为对照组和观察组,每组各64例。对照组采用腰椎间盘突出非手术治疗;观察组在对照组治疗基础上给予益气化瘀补肾方。比较两组患者临床疗效、视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)、JOA评分、脊柱ODI评分及软组织张力。结果:观察组有效率为89.06%,对照组为68.75%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者VAS疼痛评分及软组织张力均降低(P<0.05),脊柱ODI评分、JOA评分升高(P<0.05);观察组患者治疗后VAS及软组织张力低于对照组(P<0.05),脊柱ODI评分、JOA评分高于对照组(P<0.05)。结论:应用益气化瘀补肾方治疗腰椎间盘突出症可提高临床疗效,改善临床症状,提高患者生活质量,可降低VAS及软组织张力,提高JOA评分、脊柱ODI评分。     

兔膝骨关节炎关节软骨细胞凋亡的实验研究——超微结构观察

目的 为探讨骨关节炎关节软骨退变的发生机理。方法 按照Hulth法建立兔膝关节炎模型实验组，12只实验兔随机分为2组，每组6只，自身健侧做实验对照组，分别为建模后2周组和4周组后取材，分别制作光镜电镜标本进行系统观察研究。结果 不同时期的骨关节炎关节软骨有程度不一的软骨细胞凋亡，以4周组最为显著，特别是在电镜下软骨细胞凋亡的形态学改变更具特征、更为典型。结论 (1)膝骨关节炎的关节软骨细胞退变时，软骨细胞数目的减少有软骨细胞凋亡的参与。(2)关节软骨退变的程度与软骨细胞数目的减少即与软骨细胞凋亡的程度有关。(3)形态学的特征性表现可作为判断软骨细胞是否发生凋亡的“金指标”。     

补肾化瘀法治疗膝骨关节炎的临床疗效观察

目的：观察补肾化瘀法治疗膝关节骨性关节炎的疗效并探讨其作用机理。方法：膝关节骨性关节炎患者100例随机分成2组,治疗组100例运用补肾化瘀法综合治疗;对照组100例采用保泰松片治疗。2组均30日为1个疗程,判定疗效。结果：2组临床疗效、治疗前后膝关节骨性关节炎严重性指数（ISOA）积分分值比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：补肾化瘀法治疗膝关节骨性关节炎疗效确切。     

补肾活血方对兔膝骨关节炎病变软骨BMP-2/gremlin表达的影响

目的观察家兔膝骨关节炎模型关节软骨BMP-2/gremlin的表达情况及补肾活血方的调节作用。方法 48只实验用家兔随机分为治疗组、阳性对照组和阴性对照组,每组16只。治疗组和阳性对照组行右膝关节前交叉韧带横断手术(ACLT)造模,阴性对照组行右膝模拟造模手术。治疗组造模后给予补肾活血方灌胃治疗,阳性对照组造模后给予制动干预,阴性对照组行模拟手术后给予生理盐水灌胃。在术后第4、8周各组各处死8只家兔,观察膝关节损伤软骨肉眼改变,取组织标本经石蜡包埋切片后行常规苏木精-伊红染色观察软骨组织的病理变化,Real time PCR法及免疫组化法检测BMP-2、gremlin的表达。结果补肾活血方可减轻兔膝骨关节炎模型关节软骨形态学损害。治疗组和阳性对照组第4、8周软骨中BMP-2及gremlin表达量明显高于阴性对照组(P<0.05),且阳性对照组较治疗组gremlin同期表达增多(P<0.05);第8周阳性对照组标本中BMP-2表达持续稳定,但gremlin表达水平较第4周明显上升(P<0.05)。结论补肾活血方对兔ACLT模型关节软骨中修复保护性细胞因子BMP-2的表达有上调作用,同时抑制BMP-2拮抗因子gremlin过度表达,对骨关节炎修复有良好的调节作用。     

补肾益气化瘀方抗衰老的实验研究

寻找抗衰老的药物成为当前医学研究的紧迫课题。D-半乳糖制备的亚急性鼠衰老模型是经典的实验模型,在国内外已广泛应用于衰老的研究。补肾益气化瘀方是根据中医理论组建的验方,由枸杞子、肉苁蓉、巴戟天、党参、鸡血藤、丹参、菖蒲、远志等8味中药组成。本研究的目的就是探讨补肾益气化瘀方抗衰老的作用及机制。     

益气化瘀方影响椎间盘软骨细胞Ⅰ、Ⅱ型胶原的作用分析

目的分析益气化瘀方及其拆方于椎间盘的软骨细胞,其凋亡状态下的Ⅰ型与Ⅱ型胶原所具有的调控表达作用。方法通过对椎间盘（大鼠）软骨细胞进行培养（酶消化法）,再运用Fas抗体对其进行诱导凋亡,以益气化瘀方（还包括其拆方：化瘀方和益气方）相应的药理血清来进行干预,再以SP法（免疫组化）对大鼠椎间盘的软骨细胞于不同状态之下对这两型胶原的表达情况做相关检测与分析。结果凋亡模型组显示胶原表达（I型）较正常的对照组明显,显示II型胶原仅呈轻度表达,两组差异呈显著性（P〈0.01）;所用益气化瘀方（还包括其拆方：化瘀方和益气方）,同凋亡模型组相较,不仅均能够明显的上调其胶原的表达（II型）,而且能够下调其胶原的表达（I型）,再将3种中药组与诱导凋亡组相较,差异呈显著性（P〈0.01）。结论予以益气化瘀方（还包括其拆方：化瘀方和益气方）能够调控发生在凋亡状态下大鼠椎间盘自身软骨细胞胶原的表达（I型与Ⅱ型）。     

针灸联合补肾活血方治疗膝骨关节炎疗效观察

目的探讨针灸联合补肾活血方治疗膝骨关节炎的临床疗效。方法选择80例膝骨性关节炎患者,将其随机分为实验组和对照组,每组各40例,实验组给予针灸联合补肾活血方治疗,对照组给予西药治疗。观察治疗前后2组临床疗效及不良反应。结果实验组总有效率92.5%;对照组总有效率67.5%,2组总有效率比较差异有显著性（P〈0.05）,2组不良反应发生率低。结论针灸联合补肾活血方治疗膝骨关节炎疗效肯定,无副作用,有广阔应用前景。     

补肾活血方对膝骨关节炎大鼠关节软骨HIRA、ASF1a表达的影响

[目的]探讨补肾活血方对膝骨关节炎大鼠关节软骨衰老信号分子HIRA、ASF1a表达的影响.[方法]选用雌性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组和中药组;采用切除双侧卵巢并切断右侧膝交叉韧带法复制骨关节炎动物模型,术后第4周开始灌服补肾活血中药,模型组、假手术组灌服等量的生理盐水,分别于术后8、12、16周取材,采用骨关节...     

益气化瘀补肾方对大鼠肾虚型颈椎病的作用机制

目的：研究益气化瘀补肾方对大鼠肾虚型颈椎病的作用机制。方法：选择3月龄雌性SPF级SD大鼠30只，随机分为正常对照组、肾虚型颈椎病模型组（简称模型组）和益气化瘀补肾方组，每组10只。除正常对照组不施加任何手术外，采用由动静力失衡大鼠颈椎间盘退变模型和去卵巢肾虚模型复合法建立肾虚型颈椎病模型。手术3个月后，益气化瘀补肾方组大鼠予益气化瘀补肾方灌胃治疗1个月。放射免疫法检测血清雌二醇（estradiol，E2和血浆环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate，cAMP）、环磷酸鸟苷（cyclic guanosine monophosphate，cGMP）含量；锥板法检测血液流变学；流式细胞仪检测血小板表面α-颗粒膜糖蛋白（alpha—granular membrane protein，CD62p）表达；HE染色观察颈椎间盘组织病理学改变，免疫组织化学检测颈椎间盘Ⅱ型胶原蛋白表达情况，并通过实时荧光定量聚合酶链式反应法检测聚集蛋白聚糖（aggrecan-1，Agcl）、Ⅱ型前胶原基因（type Ⅱ procollagen gene，Col2al）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1）、基质金属蛋白酶-13（matrix metalloproteinase-13，MMP-13）mRNA表达。结果：与模型组比较，益气化瘀补肾方组大鼠血清E2含量升高（P〈0．05）；血浆cAMP、cGMP含量有所升高，但差异无统计学意义；全血低切黏度、低切还原黏度和CD62p表达百分率下降（Pd0．05或P〈0．01）；颈椎间盘退变有所改善，Miyamoto评分下降（P〈0．05），11型胶原表达增加；Agcl、Col2al和TIMP-1 mRNA表达增加（P〈0．05，P〈0．01），MMP-13 mRNA表达下降（Pd0．01）。结论：益气化瘀补肾方可通过调节免疫系统、代谢系统、凝血系统和内分泌系统等指标，改善肾虚型颈椎病证候指标，并延缓椎间盘退变。     

补肾活血方对骨关节炎软骨细胞低氧诱导因子-1αmRNA的影响

[目的]观察补肾活血方对骨关节炎软骨细胞中低氧诱导因子(HIF)-1α mRNA表达的影响.[方法]32只SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药组、塞来昔布组(西药组),每组8只,按照Hulth法复制膝骨关节炎模型,取关节软骨,对关节软骨病理切片采用Safranin O染色,光镜下观察,进行Mankin评分,并采用实时荧...     

黄芪甲苷对人膝骨关节炎退变软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖mRNA表达的影响

目的:观察黄芪甲苷对原代培养骨关节炎患者的膝关节软骨细胞的Ⅱ型胶原和蛋白多糖mRNA表达影响,初步探讨黄芪甲苷防治膝骨关节软骨退变的作用机制。方法:原代培养骨关节炎患者的膝关节软骨细胞,用第三代细胞进行试验。将5个不同浓度的黄芪甲苷,分别作用于关节软骨细胞4、8、24、48、72h后,采用Real Time-PCR法检测细胞中Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)、蛋白多糖基因(ACAN)的mRNA表达。结果:黄芪甲苷浓度为25~75mmol/L,作用于退变关节软骨细胞24~72h时,软骨细胞Col Ⅱ和ACAN mRNA的表达量均较对照组显著增加。结论:黄芪甲苷可延缓膝骨关节炎关节软骨细胞的退变,促进软骨细胞ColⅡ及ACAN mRNA的表达可能是其作用机制之一。     

益气化瘀补肾方对大鼠血瘀型颈椎病作用机制研究

目的：探讨益气化瘀补肾方对血瘀型颈椎病大鼠的作用机制。方法：选择3月龄雌性SPF级SD大鼠30只,随机分为正常组、血瘀型颈椎病模型组（模型组）和益气化瘀补肾方组（治疗组）,每组10只。正常组不施加任何手术,其余两组采用动静力失衡性大鼠颈椎间盘退变模型复合肾上腺皮质激素和肾上腺素法建立血瘀型颈椎病模型。手术3个月后,治疗组大鼠予益气化瘀补。肾方灌胃治疗1个月。通过放射免疫学、颈椎间盘组织病理学、免疫组织化学、分子生物学等技术研究益气化瘀补肾方作用机制。结果：与正常组相比,模型组动物出现舌质瘀紫、尾色瘀青,血黏度、CD62p增高,cAMP增高,颈椎间盘退变,Ⅱ型胶原表达减少;治疗组与模型组比较,血浆黏度、CD62p、三酰甘油、cAMP降低（P〈0．05或P〈0．01）;颈椎间盘退变有所改善,Miyamoto评分下降（P〈0．05）,Ⅱ型胶原表达增加（P〈0．01）,Agcl、Col2al、TIMP-1表达增高（P〈0．05）。结论：益气化瘀补肾方可通过免疫系统、代谢系统、凝血系统、内分泌系统等改善血瘀型颈椎病大鼠的证候指标,延缓椎间盘退变。     

益气化瘀补肾方对大鼠气虚型颈椎病的作用机制研究

目的：探讨益气化瘀补肾方对气虚型颈椎病大鼠的作用机制。方法：选择3月龄雌性SPF级SD大鼠30只,随机分为正常组、气虚型颈椎病模型组（模型组）和益气化瘀补肾方组（治疗组）,每组10只。正常组不施加任何手术,气虚型颈椎病模型采用动静力失衡性大鼠颈椎间盘退变模型复合疲劳加饥饱失常法气虚模型建立,手术3个月后治疗组大鼠予益气化瘀补肾方灌胃治疗1个月。通过放射免疫学、颈椎间盘组织病理学、免疫组织化学、分子生物学等技术研究益气化瘀补肾方作用机制。结果：模型组动物出现精神委靡、少动、体质量下降等气虚表现,cGMP降低,cAMP／cGMP增高,三酰甘油和CD62p增高,E2降低,颈椎间盘退变,Ⅱ型胶原减少,Agc1、Col2a1表达减少,MMP-13表达增高;治疗组与模型组相比,动物精神状态恢复稍快,cAMP／cGMP增高,三酰甘油和CD62p降低,颈椎间盘退变有所改善,Ⅱ型胶原增加,C012a1和TIMP-1表达增高。结论：益气化瘀补肾方通过免疫、代谢、凝血等系统改善证候指标并延缓椎间盘退变。     

栀子对兔膝骨关节炎模型关节软骨基质及IL-1表达的影响

目的：观察栀子浸膏对Hulth法复制兔膝骨关节炎模型中软骨基质的改变及软骨与滑膜中IL-1的影响。方法：36只大耳白兔随机分为给药组、模型组和对照组,每组12只。给药组、模型组行Hulth术法复制骨关节炎模型,术后第5周,给药组以栀子浸膏600mg/kg灌胃,模型组与对照组给予等量生理盐水灌胃,给药3周后解剖显微镜下行软骨PelletierJP评分,取股骨内侧髁关节软骨行Masson及甲苯胺蓝染色观察软骨中胶原纤维、蛋白多糖含量的变化,免疫组化检测软骨与滑膜中IL-1的表达情况。结果：栀子浸膏能延缓骨关节炎关节软骨基质的丢失,给药组软骨与滑膜中IL-1的表达明显低于模型组,P〈0.05。结论：栀子浸膏可减少骨关节炎模型软骨与滑膜中IL-1的表达和保护关节软骨基质,从而延缓病程的进展。