喉癌手术安全切缘的免疫组化研究

目的：从基因蛋白水平角度研究喉癌手术安全切缘。方法：应用 Ｌ Ｓ Ａ Ｂ免疫组化法,检测了ｒａｓ、ｃｍ ｙｃ、ｐ５３ 癌基因在３０ 例喉癌,边缘区,癌旁０．５、１．０、１．５、２．０ ｃｍ 粘膜处和 ４ 例正常喉粘膜中的表达情况。结果：三种癌基因产物的单独及联合表达阳性率依正常粘膜→癌旁２．０ ｃｍ →１．５ ｃｍ →１．０ ｃｍ →０．５ ｃｍ →边缘区→癌顺序递增,且癌基因蛋白的表达在距肿瘤０．５ ｃｍ 以内的癌旁组织与癌旁组织１．０ ｃｍ 处有显著性差异（ Ｐ ＜ ０．０５）。结论：距肿瘤０．５ ｃｍ 内的癌旁组织应视为癌前期病变,以切缘距肿瘤０．５ ｃｍ 作为喉癌手术安全切缘的标准较为合适     

晚期喉癌边缘DNA含量和增殖细胞核抗原表达

目的 探讨晚期喉癌边缘ＤＮＡ含量和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达与喉癌手术预后的关系。方法 通过ＰＣＮＡ表达和ＤＮＡ含量检测，对３４例晚期喉癌边缘进行观察。结果 肿瘤边缘１．０、０．５、０ｃｍ处粘膜，ＰＣＮＡ指数分别为８．６２％，１７．７６％和５０．３２％。ＤＮＡ指数分别为０．９８、１．０８２和１．４３６。统计学分析１．０、０．５ｃｍ处粘膜０ｃｍ处粘膜差异有显著性（Ｐ〈０．０１）。结论 中、重度非     

晚期喉癌边缘DNA含量和增殖细胞核抗原表达

目的探讨晚期喉癌边缘ＤＮＡ含量和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达与喉癌手术预后的关系。方法通过ＰＣＮＡ表达和ＤＮＡ含量检测，对３４例晚期喉癌边缘进行观察。结果肿瘤边缘１．０、０．５、０ｃｍ处粘膜，ＰＣＮＡ指数分别为８．６２％、１７．７６％和５０．３２％。ＤＮＡ指数分别为０．９８、１．０８２和１．４３６。统计学分析，１．０、０．５ｃｍ处粘膜与０ｃｍ处粘膜差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。结论中、重度非典型增生的上皮在分裂，增殖等生物学行为方面已与轻度非典型增生和单纯性增生的上皮细胞不同，手术切缘应在中度非典型性增生的粘膜上皮以外，即０．５ｃｍ以外。     

喉癌组织中转化生长因子—α的研究

应用分子杂交技术和放射免疫分析方法研究了人喉癌组织，喉癌癌旁组织，正常喉组织中转化生长因子－αｍＲＮＡ的表达，ＴＧＦ的活性以及ｃ－ｍｙｃ，ｃ－ｆｏｓ，ｃ－Ｎ－ｒａｓ及ｖ－ｅｒｂＢ四种癌基因ｍＲＮＡ的表达。主要结果为：１．喉癌组织ＴＧＦ－α－ｍＲＮＡ表达高于正常喉组织，也高于喉癌旁组织；２．喉癌组织中可以测到ＴＧＦ－α免疫活性；３．与正常喉组织及癌旁组织比较，喉癌组织中有ｃ－ｍｙｃ，ｃ－ｆｏｓ，ｃ－     

HLA—DR在喉癌中的表达及临床意义

应用免疫组织化学方法研究喉癌组织中组织相容性Ⅱ类抗原－ＨＬ－ＤＲ表达情况，９５例患者的喉癌组织中有２９例（３０．５％）ＨＬＡ－ＤＲ阳性，６６例（６９．５％）阴性，而６例喉正常粘膜上皮及６１例癌旁上皮均为阴性，统计分析发现ＨＬＡ－ＤＲ阳性的标本分化程度高者（８２．８％）明显多于ＨＬＡ－ＤＲ阴性者（５６．１％）（Ｐ〈０．０５）前者的５年生存率（７９．６％）略高于后者（７０．５％）但无统计学显著差异（Ｐ     

Myc基因家族在喉癌中的异常扩增及其意义

目的 探讨Ｍｙｃ基因家族在喉癌中的异常扩增及其临床意义。方法 应用ＰＣＲ－非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳－激光扫描技术检测了３２例喉癌组织、１２例癌旁组织和６例正常组织。结果 正常组织细胞Ｍｙｃ基因无扩增，３２例喉癌中４７％（１５／３２）有Ｃ－ｍｙｃ和Ｌ－ｍｙｃ扩增，４１％（１３／３２）有Ｎ－ｍｙｃ基因扩增。Ｍｙｃ基因扩增率与年龄、性别、喉癌临床分期及分化程度无关（Ｐ〉０．０５），但有淋巴结转移的患者的     

三种癌基因与喉癌生物学行为关系的研究

为探讨癌基因在原当性喉癌中的增殖调控作用，采用免疫组化ＳＡＢＣ方法对３６例原发性喉部行Ｐ１６，Ｒｂ和周期蛋白Ｄ１的检测，结果：Ｐ１６在肿瘤中阳性率３０．６％，与癌旁组织阳性率６１．１％之间差异有显著性（Ｐ〈０．０５），Ｒｂ，Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１阳性率分别为６１．１％和４７．２％，Ｐ１６与Ｒｂ之间阳性率差异有显著性（Ｐ〈０．０５），多数情况下当Ｐ１６阳性归Ｒｂ阴性，反之亦然。经秩相关检验Ｒｂ与Ｃｙｃｌ     

P^16抑癌基因与喉癌颈淋巴结转移和恶性度关系的探讨

目的：为了探讨Ｐ＾１６蛋白表达与喉癌颈淋巴结转移及瑟癌组织恶性度的关系。方法：用免疫组化ＳＰ法对８２例声门上型喉癌的原发灶、癌旁组织及颈淋巴进行了Ｐ＾１６蛋白表达的检测。结果：喉癌原发灶中Ｐ＾１６蛋白表达阳性率５４．９％；其中无颈淋巴结转移组阳性率为６８．３％；有颈淋巴结转移组的阳性率４１．５％，差异有显著性意义（Ｐ〈０．０５）。低度恶性组原发灶中Ｐ＾１６蛋白表达阳性率６２．２％；高度恶性组原发灶     

喉癌癌变过程中CyclineE的表达及临床病理学意义

目的：研究喉癌癌变过程中ＣｙｃｉｉｎＥ的临床病理学意义。方法：用免疫组化检测２０例正常喉粘膜，４０例喉不典型增生和６０例喉癌组织中ＣｙｃｌｉｎＥ的表达。结果：ＣｙｃｌｉｎＥ阳性表达定位于肿瘤细胞核。在喉癌癌变过程中，喉正常粘膜、不黄型增生病变和喉癌中ＣｙｃｌｉｎＥ阳性表达率分别为：５．０％（１／２０），２０．０％（８／４０）和４５．０％（２７／６０）（Ｐ〈０．００１）。喉癌淋巴结转移组Ｃｙｃｌｉｎ     

声门上型喉癌中端粒酶活性的检测及其意义

目的：探讨端粒酶活性在声门上型喉癌中的表达及其意义。方法：采用端粒重复序列扩增法检测了ＨＥＰ－２喉癌细胞系,２６例声门上型喉癌组织和１５例癌旁组织。结果：ＨＥＰ－２喉癌细胞系呈端粒酶阳性,癌组织的端粒酶阳性率为８４．６％,明显高于癌旁组织的阳性率４０％（Ｐ〈０．０１）,喉癌组织端粒酶活性的表达与临床分期和有无颈淋巴结转移未出现出相关性（Ｐ〉０．０５）。结论：端粒酶活化是喉癌发生的重要遗传学改变,但     

p53蛋白在喉鳞癌及癌旁组织中表达的研究

应用抗ｐ５３单克隆抗休琢ＬＳＡＢ免疫组织化学染色法检测喉鳞癌，喉癌旁组织及声带息肉ｐ５３蛋白的表达。结果显示：２５例喉鳞癌呈阳性反应，４例距肿瘤边缘〈０．５ｃｍ的喉癌旁组织呈弱阳以应，２０例距肿瘤边缘〉２ｃｍ的喉癌旁组织及１６例声带息肉均为阴性。     

喉鳞状细胞癌中Skp2和p27蛋白的表达

目的 探讨细胞S相激酶相关蛋白(S-phase kinase associated protein 2,Skp2)、p27蛋白与喉鳞状细胞癌(简称喉癌)各临床因素及预后的相关性.方法 采用免疫组化SP法检测79例喉癌患者肿瘤组织的Skp2、p27表达.结果 喉癌中Skp2高表达率(53.16%)显著高于正常喉组织(0%,P＜0.05);喉癌Skp2蛋白低表达组的5年生存率(72.18%)显著高于高表达组(44.17%,P＜0.01).p27蛋白在喉癌和癌旁喉组织中的高表达率分别为30.38%和90%,差异具有显著性(P＜0.05);喉癌p27蛋白高表达组的5年生存率(72.98%)显著高于低表达组(51.13%,P＜0.01).将Skp2和p27结合分析,Skp2高表达并p27低表达组的5年生存率最低,与另一组相比具有显著性差异(P=0.001).结论 Skp2蛋白通过降解靶蛋白p27可能在喉癌发生、发展中发挥重要作用.     

Survivin和VEGF蛋白在喉癌组织中的表达及其相关性研究

目的:探讨Survivin、VEGF蛋白在喉癌组织中的表达及其生物学意义,并探讨其相关性。方法:采用免疫组织化学(SP法)染色技术对40例喉癌组织(喉癌组)和5例正常喉黏膜石蜡标本(对照组)进行Survivin、VEGF蛋白表达的检测,并采用图像分析进行定量分析。结果:Survivin和VEGF蛋白在喉癌组织中的阳性表达率均高于对照组(均P<0.01);在有淋巴结转移的喉癌组织中Survivin和VEGF的表达高于无淋巴结转移的喉癌组织(分别为P<0.05和P<0.01);不同性别、不同年龄患者喉癌组织中Survivin和VEGF的表达差异均无统计学意义(均P>0.05);Survivin和VEGF的表达均与喉癌组织TNM分期有关(均P<0.05);Survivin的表达与患者生存期存在负相关关系(r=-0.646,P<0.01);VEGF的表达与患者生存期也存在负相关关系(r=-0.567,P<0.01);而Survivin与VEGF在喉癌组织中的表达存在正相关关系(r=0.676,P<0.01)。结论:喉癌组织中Survivin、VEGF蛋白的表达与TNM分期、淋巴结转移和预后有密切关系,它们的高表达提示肿瘤患者预后不良;该两基因在喉癌组织中表达上调,提示该两基因在喉癌的发生、发展中起重要作用。     

喉鳞状细胞癌组织中Survivin基因与p15和p16基因表达的关系

目的　探讨抑凋亡基因Survivin(SVV)在喉鳞状细胞癌 (laryngealsquamouscellcarcinomas,LSCC)中的表达意义及与抑癌基因p15、p16表达的关系。 方法　采用免疫组化链酶卵白素 生物素复合体 (strepavidin biotincomplex ,SABC)方法检测了 4 8例LSCC组织及 2 4例癌旁组织、2 4例正常喉黏膜组织SVV、p15、p16蛋白的表达并进行统计分析。 结果　SVV蛋白在正常喉黏膜中不表达 ,4 8例LSCC组织中 2 7例SVV蛋白阳性表达 ,占 5 6 3% ,2 4例癌旁组织中 6例SVV蛋白阳性表达 ,占 2 5 0 % SVV蛋白在LSCC组织与癌旁组织中的表达以及SVV在癌旁组织与正常喉黏膜中的表达差异均有显著性 (P <0 0 5 )。SVV蛋白表达与LSCC的发生部位、TNM分期、病理分级、淋巴结转移及预后有关 (P <0 0 5 )。p16蛋白强阳性组、p16蛋白弱阳性组及 p16蛋白阴性组的SVV蛋白阳性率差异有显著性 (P <0 0 0 1) ,且表达呈正相关 (C =0 5 2 )。p15蛋白阳性组与 p15蛋白阴性组的SVV蛋白阳性表达差异无显著性。结论SVV基因在LSCC的发生发展中起重要作用 ,并对LSCC的早期诊断、预后判断有意义。SVV的过度表达与 p16抑癌作用的失去可能在LSCC的发病机制中有协同作用。     

p53在喉鳞状细胞癌及癌旁组织中的表达与生物学行为的关系及意义

目的:研究并回顾性分析喉鳞状细胞癌(LSCC)及癌旁组织中p53基因的表达及其与生物学行为的关系和意义。方法:用免疫组织化学SP法检测76例LSCC及癌旁组织中的p53表达。结果:LSCC组织中p53过表达47.4%(36/76),对应原位癌p53过表达为40.0%(4/10);癌旁非典型增生组织中p53过表达22.2%(8/36);癌旁正常组织中p53无过表达(0/56);p53在LSCC实质及相应原位癌中的表达呈现完全一致性。p53在癌旁非典型增生组织和对应癌实质组织中的过表达呈现高度显著正相关性(P<0.01);p53在癌组织中的过表达显著高于非典型增生组织(P<0.01);p53过表达和性别、年龄、临床分期、临床LSCC类型(LSCC位置)、肿瘤大小均无统计学意义,和病理分级(G1→G2 G3)有高度显著相关性(P<0.01)。p53在LSCC淋巴结转移组的过表达(68.8%)高于非转移组中的过表达(41.7%),但差异无统计学意义。LSCC病理分级(G1→G2 G3)和淋巴结转移有高度显著相关性(P<0.01)。结论:p53异常表达可出现于LSCC不同阶段及癌旁癌前病变组织中,并具有显著相关性,是LSCC发生、发展的重要因素及有意义的早期改变,并可反映喉癌组织细胞增殖活性和恶性程度及预后。     

血管生成素-1和血管生成素-2在喉鳞状细胞癌中的表达及与血管生成的关系

目的:研究喉鳞状细胞癌(LSCC)中血管生成素-1,2(Ang-1,2)的表达及与临床病理学特征、CD105标记的微血管密度(MVD)之间的关系,评估Ang-1,2及血管内皮生长因子(VEGF)在LSCC中的联合表达对肿瘤血管生成的作用。方法:用常规免疫组织化学法检测LSCC标本61例、癌旁组织30例及正常喉黏膜组织15例中Ang-1,2及VEGF的表达和MVD,并对临床病理资料进行回顾性分析。结果:Ang-1,2在LSCC细胞、正常喉黏膜上皮细胞及血管内皮细胞均有表达;VEGF只表达于LSCC组织中;LSCC组织与癌旁组织及正常喉黏膜组织相比,Ang-1,2表达显著增加(均P<0.05)。对于临床病理因素的分析表明,Ang-1,2在高、中低分化LSCC中的表达差异无统计学意义(均P<0.05);Ang-2表达与临床分期、MVD有显著的相关性(均P<0.05),而Ang-1的表达与临床分期、MVD无显著的相关性(均P>0.05)。在所有联合表达状态中Ang-2和VEGF同时为阳性的肿瘤组织MVD均值为最高,显著高于其他任何状态(P<0.05)。结论:Ang-1,2在LSCC中的表达可能在肿瘤进展过程中起了重要的作用,与肿瘤血管的形成关系密切。其中Ang-2与VEGF共同作用促进肿瘤血管的形成。     

喉癌组织中FHIT基因蛋白表达的研究

目的:以喉鳞状细胞癌为研究对象,探讨FHIT基因蛋白表达在喉癌发生、发展中的作用及临床意义.方法:用免疫组织化学SP法检测52例喉癌组织、23例癌旁组织及10例正常组织中FHIT基因蛋白的表达,分析在不同临床病理指标下FHIT蛋白表达的情况.结果:FHIT蛋白在正常组织中的阳性表达率(90.0%)及癌旁组织中的阳性率(78.3%)均高于癌组织中的阳性率(46.2%),差异有统计学意义(均P＜0.01).癌组织FHIT蛋白阳性表达率与临床分期和颈淋巴结转移有关,与病理分级无关.结论:喉癌的发生、发展与FHIT抑癌基因的失活有密切关系,FHIT基因很可能是喉癌重要的侯选抑癌基因.     

喉鳞状细胞癌患者预后的多因素分析

目的：探讨影响喉鳞状细胞癌患者预后的主要因素。方法：采用免疫组织化学SP法检测79例喉鳞状细胞癌患者肿瘤组织和10例癌旁正常组织中细胞s期激酶相关蛋白（Skp2）、p27、上皮细胞钙黏素（E-cad）、r连环素（α-cat）的表达,并对可能影响喉鳞状细胞癌患者预后的12项临床病理因素进行单因素和多因素分析。结果：①Skp2在喉鳞状细胞癌和癌旁正常组织中的表达率分别为53,16％和0,p27分别为30．38％和90．00％,E-cad分别为34．18％和100,00％,α-cat分别为40．51％和100,00％,其差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。②本组患者总的5年生存率为58．75％,Skp2蛋白低表达组的5年生存率（72．18％）显著高于高表达组（44．17％）（P〈0.01）;p27蛋白高表达组的5年生存率（72．98％）显著高于低表达组（51．13％）（P〈O．01）;E-cad及α-cat阳性表达组的5年生存率（分别为63．80％和81．74％）显著高于阴性表达组（分别为50.68％和41．09％）（P〈0．05和P〈0．01）。③单因素分析显示：病理分级,颈淋巴结转移,临床分期,T分期,复发,Skp2、p27、E-cad及α-cat表达对患者预后的影响均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）;多因素分析显示：复发、Skp2及α-cat表达为影响患者预后的独立因素（P〈0．05或P〈O．01）。④Skp2和p27蛋白表达之间存在着负相关关系（P〈0.01）;p27和α-cat蛋白表达之间、E-cad和α-cat蛋白表达之间存在正相关关系（均P〈0．01）。结论：复发、Skp2及α-cat表达为影响喉鳞状细胞癌患者预后的重要因素。     

Stat3及其靶基因Cyclin D1在喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义

目的:研究喉鳞状细胞癌组织中信号转导和转录激活因子3(Stat3)及其靶基因细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达情况并探讨其临床意义。方法:应用Western blot和RT-PCR方法,研究喉鳞状细胞癌组织中Stat3、Cyclin D1蛋白和mRNA的表达情况以及与喉鳞状细胞癌临床病理因素的关系。结果:喉鳞状细胞癌组织中Stat3、Cyclin D1蛋白和mRNA的表达水平明显高于正常喉黏膜组织(P<0.01)。Stat3、Cyclin D1蛋白表达水平与喉鳞状细胞癌临床分期、分化程度及淋巴结转移有关(P<0.01);在喉鳞状细胞癌组织中Stat3蛋白、mRMA与CyclinD蛋白、mRNA的表达均呈正相关(r=0.564、0.552,均P<0.01)。结论:Stat3信号转导通路在喉鳞状细胞癌的发生、发展过程中起重要作用,检测喉鳞状细胞癌组织中Stat3及其靶基因Cyclin D1的表达可以反映肿瘤的恶性程度。