多药耐药基因与脑胶质瘤

脑胶质瘤是最常见的颅内肿瘤 ,约占颅内肿瘤的 40 % .由于其呈浸润性生长 ,与周围正常脑组织无明显边界 ,手术很难做到全切除。因此 ,脑胶质瘤的术后化疗具有极其重要的意义。然而各类肿瘤细胞对化疗药物产生抗药性又极大地降低了化疗药物的效果。目前 ,研究发现肿瘤细胞产生耐药原因极其复杂 [1 ] ,最常见的是多药耐药 (MDR)现象 ,即肿瘤细胞一旦对一种化疗药物产生耐药 ,则对其他结构及功能不同的化疗药物也产生交叉耐药。关于脑胶质瘤多药耐药性的研究将有助于阐明胶质瘤抗药性的产生及化疗效果差的可能机制 ,并探讨其抗药性的逆转机制…     

替尼泊甙—司莫司汀序列给药治疗恶性脑胶质瘤

目的 探讨替尼泊甙（ＶＭ２６）与司莫司汀（ＭｅＣＣＮＵ）序列给药治疗恶性脑胶质瘤的疗效及其并发症的防治。方法 对１４５例经病理证实的恶性胶质瘤病人术后采用超选择性动脉内灌注加静脉滴注ＶＭ２６及口服ＭｅＣＣＮＵ化疗，通过比较化疗前后影像学表现评价近期疗效。结果 本组１４５例病人治疗后完全缓解２１例（１４．５％），部分缓解７２例（４９．６％），无变化３１例（２１．４％），恶化２１例（１４．５％），１、     

脑胶质瘤化疗耐药机制的研究进展

化疗对胶质瘤治疗效果不理想相当一部分是由于胶质瘤对化疗药物耐药,严重影响了化疗效果。肿瘤细胞一旦对一种抗肿瘤药物产生耐药,对其他结构不同,作用机制不同的抗肿瘤药物也产生交叉耐药性,即多药耐药（MDR）。MDR有两种表型：（1）首次使用化疗药物就产生耐药,称为原发性或内在性耐药;（2）在化疗过程中产生耐药,称为获得性或继发性耐药。目前肿瘤MDR可能存在的分子机制有以下几种：（1）药物在肿瘤细胞内的积聚减少;（2）药物失活增加;（3）药物作用靶减少;（4）凋亡与抗凋亡机制失衡;（5）MDR中的DNA修复机制等。总之,胶质瘤MDR是一个十分复杂的生物学过程,胶质瘤MDR呈现多机制、多因素的特点。因此,有必要明确肿瘤细胞的耐药机制,以便对临床制定更合理的治疗方案,预防和逆转胶质瘤抗癌药物耐药性的产生。     

替尼泊甙-司莫司汀序列给药治疗恶性脑胶质瘤

目的 探讨替尼泊甙（VM26）与司莫司汀（MeCCNU）序列给药治疗恶性脑胶质瘤的疗效及其并发症的防治。方法 对145例经病理证实的恶性胶质瘤病人术后采用超选择性动脉内灌注加静脉滴注VM26及口服MeCCNU化疗,通过比较化疗前后影像学表现评价近期疗效。结果 本组145例病人治疗后完全缓解21例（14.5%）、部分缓解72例（49.6%）、无变化31例（21.4%）、恶化21例（14.5%）。1、2、3年存活率分别为90.3%、74.5%和22.8%。全部病人无严重并发症及毒性反应。结论 VM26-MeCCNU联合序列给药可延长脑胶质瘤病人生存时间,并发症及毒副作用少。     

卡莫司汀瘤腔内灌注化疗治疗初发高级别胶质瘤

目的 探讨卡莫司汀瘤腔内灌注化疗治疗初发高级别胶质瘤的效果.方法 经手术病理证实为高级别胶质瘤的初治患者11例,2例肿瘤位于小脑半球,9例位于大脑半球.肿瘤最大径2.5～6cm,平均4.1cm.开颅手术,冰冻病理证实为分化较差的胶质细胞肿瘤,全切除或次全切除后,将卡莫司汀注射液62.5mg溶于10ml生理盐水中,均匀喷洒灌注于术腔,留院观察10 ～22天.结果 住院期间并发症包括:癫痫1例,感染1例,失语1例,发热2例,皮下积液2例.间变星形胶质细胞瘤2例,胶质母细胞瘤9例.随访6～25个月,2例死亡,2例复发,1例影像进展.生存患者karnofsky评分60～ 80分,平均66分.结论 卡莫司汀瘤腔内灌注化疗安全有效,可用于初发高级别胶质瘤术中治疗,不影响术后放疗,结合辅助放疗后疗效更佳.     

RNAi逆转肾癌细胞MDR1基因表达导致的替尼泊苷耐药

目的：研究RNA干扰（RNAinterference,RNAi）对肾癌细胞多药耐药基因（MDRl）表达的抑制作用,并分析干扰前后肾癌细胞对替尼泊苷（VM一26）敏感性的变化。方法：根据MDRI基因设计3条小干扰RNA（smalJinterferingRNA,siRNA）序列,在质粒的介导下转染肾癌A498细胞,RT—PCR法分析转染前后MDRlmRNA表达水平,筛选出干扰效率最高的siRNA序列;进而利用慢病毒包装siRNA重组质粒,感染A498细胞,RT—PCR法筛选沉默效果最好的细胞株进行克隆,Westernbolt法检测MDRl蛋白表达水平,MTT法对比干扰前后替尼泊苷对细胞半抑制浓度（ICSO）的变化。结果：3条siRNA序列均能不同程度地抑制细胞MDRl基因的表达,其中siRNA一1序列能更有效地封闭MDRl基因,使MDRlmRNA表达水平下降67％;筛选出的稳转细胞株与未干扰细胞株相比,MDRl蛋白表达量明显下降,并使替尼泊苷对细胞的IC50降低约79．8％,差异具有统计学意义（P〈O．01）。结论：RNAi可抑制肾癌A498细胞MDRl基因的表达从而逆转其对替尼泊苷的耐药,使肾癌细胞化疗耐药逆转成为可能。     

替尼泊苷和洛莫司汀诱导脑胶质瘤细胞凋亡的机制

 目的 为探讨化疗药物替尼泊苷、洛莫司汀在脑胶质瘤化疗过程中诱导细胞凋亡的作用机制,以对其临床中的疗效进行有效监控。方法 取40例脑胶质瘤组织,分离培养胶质瘤细胞,加替尼泊苷和洛莫司汀,干预24、48、72 h时分别用流式细胞术（flow cytometre,FCM）测定脑胶质瘤细胞线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential,MMP）、细胞周期和Bcl-2/Bax水平,并进行趋势性分析。结果 随着化疗药物干预时间的延长,MMP降低的比例迅速上升、细胞周期凋亡峰比例上升,Bcl-2表达下降,Bax表达大幅上升,Bcl-2/Bax比值下降。结论 替尼泊苷和洛莫司汀在脑胶质瘤化疗过程中诱导细胞凋亡的效果显著,VM-26对细胞周期的作用更强,在凋亡检测指标中MMP为最敏感、快捷的检测指标。     

脑胶质瘤多药耐药基因表达及其对化疗药物敏感性

①目的　检测 1型多药耐药基因 (MDR1)产物P170在人脑胶质瘤组织中表达及其对化疗药物敏感性。②方法　采用免疫组化的方法 ,对 38例人脑胶质瘤手术切除标本的MDR1表达水平进行检测 ;采用四唑蓝快速比色法检测氟尿嘧啶 (FU )、顺铂 (DDP)、甲氨喋呤 (MTX)、丝裂霉素 (MMC)、司莫司汀 (MeCCNU)、洛莫司汀(CCNU)、双氯乙基亚硝脲 (BCNU)、威猛 2 6 (VM 2 6 )对脑胶质瘤细胞的抑制率。③结果　 38例人脑胶质瘤细胞P170阳性表达率为 6 5 .7% ,与正常脑组织 (表达率为 0 )比较差异有显著性 (P =0 .0 0 0 2 ) ;BCNU ,MeCCNU ,CCNU对胶质瘤的抑制率较高 ,FU ,MTX ,MMC对胶质瘤的抑制率较低 ,差异有显著性 (F =4 7.6 ,q =5 .2 5～ 6 .78,P <0 .0 5 )。脑胶质瘤对 8种化疗药物的敏感性差异有极显著性 ;随着胶质瘤恶性程度的增高 ,P170的阳性表达率逐渐升高 (胶质瘤Ⅰ～Ⅳ级的表达率分别为 0 ,5 3.3% ,70 .6 % ,10 0 .0 % )。④结论　脑胶质瘤的耐药性与MDR1表达水平密切相关。     

一氧化氮抑制洛莫司汀对BT-325胶质瘤细胞的细胞毒作用

目的 :研究一氧化氮 (nitric oxide,NO)在体外实验中对洛莫司汀 (L omustine,CCNU)细胞毒作用的影响。方法 :使用不同浓度的细胞因子或 NO供体分别与 CCNU作用于 BT- 32 5细胞 ,用 Griess法测定 NO浓度 ,MTT法测定实验处理后肿瘤细胞的生存率 ,以此观察 NO对 CCNU细胞毒作用的影响。结果 :1IL - 1β和 LPS能刺激 BT- 32 5细胞生成 NO增加 ,并使 BT- 32 5细胞对 CCNU耐受性增强 (P<0 .0 5 ) ,这个作用能被 L- NAME所抑制。2 DETA NONOate能抑制 CCNU对 BT- 32 5细胞的细胞毒作用 (P<0 .0 5 ) ,在一定程度内呈剂量效应关系。3CCNU与 SNAP共培养 2 4 h后 ,其对 BT- 32 5细胞的细胞毒作用比单用 CCNU组明显增强 (P<0 .0 5 )。结论 :NO使 BT- 32 5细胞对 CCNU的耐受性增强 ,从而部分抑制 CCNU的细胞毒作用 ,这可能是 CCNU耐药的一个新机制 ;同时 NO能够缓解 CCNU在水溶液里的降解。     

高分级脑胶质瘤术后放疗同步替尼泊甙联合司莫司汀化疗疗效分析

目的分析高分级脑胶质瘤患者术后同步放化疗的疗效。方法对该院收治的65例高分级脑胶质瘤术后患者（其中Ⅲ级脑胶质瘤37例,Ⅳ级28例）均给予术后放疗肿瘤剂量（DT）50～60Gy,同时于DT20Gy后行同步替尼泊甙（VM-26）联合司莫司汀（Me-CCNU）化疗,于放疗开始后4～6个月内完成4～6周期的化疗。结果高分级脑胶质瘤患者总的中位生存期为24个月,1、3、5年生存率分别为70.77%、31.22%、12.65%。Ⅳ级胶质瘤生存率明显低于Ⅲ级胶质瘤（P（0.01）,Ⅳ级与Ⅲ级脑胶质瘤的中位生存期分别为14个月及36个月,1、3、5年生存率分别为60.71%、8.04%、0及78.38%、48.03%、21.76%。结论高分级脑胶质瘤患者术后行放疗同步VM-26联合Me-CCNU方案化疗可取得较好的预后,尤其是Ⅲ级脑胶质瘤患者。     

siRNA干扰MTMG对脑胶质瘤BCNU耐药的影响

目的：探讨MGMT在脑胶质瘤BCNU耐药中的作用。 方法：前期研究中我们从脑胶质瘤细胞系SWO38中克隆出两株亚系SWOZ1和SWOZ2,其中SWOZ1对BCNU的耐药性强于SWOZ2。我们以SWOZ2细胞系为对象诱导出BCNU耐药的细胞系SWOZ2-BCNU,并检测SWOZ1、SWOZ2和SWOZ2-BCNU这三株细胞系中MGMT的表达情况。同时构建MGMT的小分子干扰RNA（siRNA）序列,利用脂质体法转染耐药细胞系SWOZ1和SWOZ2-BCNU,以SWOZ2为对照。通过荧光定量RT-PCR和Western blot法检测MGMT干扰后mRNA和蛋白质的表达水平,并通过CCK-8法检测耐药性的变化情况。 结果：与SWOZ2相比,SWOZ1和SWOZ2-BCNU对BCNU的耐药性分别增加了4.9倍和5.3倍,同时在SWOZ1和SWOZ2-BCNU中MGMT的表达高于SWOZ2。经siRNA后,MGMT在SWOZ1和SOWZ2-BCNU的mRNA和蛋白质表达水平均显著下降（大于75%）。CCK-8法结果表明经siRNA干扰后SWOZ1和SWOZ2-BCNU对BCNU的耐药性均下降50%。 结论：我们的结果证明MGMT经siRNA后能部分逆转BCNU耐药细胞SWOZ1和SWOZ2-BCNU对BCNU的耐药性,提示MGMT在脑胶质瘤BCNU耐药中起着重要的作用。     

冻化疗对G422胶质瘤细胞凋亡及调控机制的影响

目的:观察冷冻联合5-Fu对G422胶质瘤化疗敏感性的影响,并探讨其内在的分子机制。方法:建立G422胶质瘤动物模型,随机分组,分别施以化疗、冷冻、冻化疗;TUNEL法用于观察各组在不同时间点细胞凋亡的变化;免疫组化方法检测冷冻后p27kip1蛋白的表达。结果:冷冻与化疗均能引起肿瘤细胞凋亡,冻化疗的联合应用使凋亡率明显增加。冷冻中心区少有p27kip1的阳性表达,冻后周边区表达大为增加。冻后凋亡细胞与p27kip1的表达呈显著正相关(P<0.01)。结论:冷冻能够提高G422胶质瘤对5-Fu的化疗敏感性,其发生机制可能与冻后p27kip1诱发肿瘤细胞凋亡有关;冻化疗的联合应用较单纯冷冻或化疗治疗恶性胶质瘤效果更为明显。     

联合树突状细胞负载胶质瘤细胞肿瘤疫苗治疗脑胶质瘤

目的探讨树突状细胞负载胶质瘤细胞肿瘤疫苗治疗脑胶质瘤母细胞的临床疗效。方法将64例脑胶质瘤患者随机均分为两组,两组均采用传统的手术及术后放化疗治疗,实验组在此基础上采用树突状细胞负载胶质瘤细胞肿瘤疫苗联合术后放化疗治疗,比较两组的疗效。结果放化疗后,实验组完全缓解者17例,部分缓解11例,稳定病变4例,有效28例,有效率为87.50%;对照组完全缓解者13例,部分缓解8例,稳定病变11例,有效21例,有效率为65.63%。两组有效率比较差异有统计学意义(χ2=4.2667,P=0.0389),实验组高于对照组;实验组1、3年生存率分别为100.0%、68.9%,对照组1、3年生存率分别为100.0%、52.7%,实验组疗效优于对照组(χ2=4.231,P=0.014);实验组接种疫苗后不良反应发生率34.38%,对照组31.25%,两组差异无统计学意义(χ2=0.071,P=0.790)。结论采用树突状细胞负载胶质瘤细胞肿瘤疫苗联合术后放化疗治疗脑胶质瘤患者疗效较好,有重要临床参考价值。     

sTRAIL真核表达载体的构建及其对裸鼠胶质瘤的治疗作用

目的构建重组基因表达载体PcDNA-sTRAIL并观察其对裸鼠种植性胶质瘤生长的抑制作用。方法通过PCR扩增和定向克隆技术构建重组真核表达载体PcDNA-sTRAIL。以阳离子脂质体介导转染裸鼠种植性胶质瘤细胞，同时设立未转染、空质粒转染及Lipofectin转染组，检测转染阳性率，并观察该基因载体对种植瘤生长的抑制作用。结果经过测序鉴定和蛋白表达检测证实，重组真核表达载体PcDNA-sTRAIL构建成功。阳离子脂质体介导质粒转染种植瘤瘤细胞阳性率达50％。脂质体PcDNA-sTRAIL转染种植瘤细胞后，相比未转染、空质粒转染及Lipofectin转染组，种植瘤体积、重量增长明显受抑制（均P〈0.05），表现出一定的肿瘤细胞增殖抑制作用。结论本研究成功构建了sTRAIL基因的真核表达载体，并从体外实验中初步证实了其对裸鼠种植性胶质瘤细胞增殖具有明显的抑制作用。     

化疗联合放疗与单纯放疗治疗胶质瘤的疗效分析

目的 比较替莫唑胺联合放疗、尼莫司汀联合放疗及单纯放疗三种治疗方法对胶质瘤的疗效。方法 收集安徽医科大学第一附属医院2008年1月至2013年9月收治的197例脑胶质瘤患者,术后均经病理证实。接受替莫唑胺联合放疗(I组)的患者66例,接受尼莫司汀联合放疗(Ⅱ组)的患者64例,接受单纯放疗(Ⅲ组)的患者67例。统计并比较3组患者近期疗效、1年、2年、3年生存率、总体生存时间及不良反应发生率。结果 3组患者的近期有效率分别为66.7%,35.9%和19.4%,差异有统计学意义(P<0.05)。3组患者的1年生存率差异有统计学意义(P<0.05);而2年生存率和3年生存率的差异无统计学意义(P>0.05)。与Ⅱ组和Ⅲ组相比,I组患者的总体生存时间延长,且不增加不良反应发生率。结论 胶质瘤术后联合放化疗治疗可以提高疗效,替莫唑胺联合放疗治疗胶质瘤的疗效明显优于尼莫司汀联合放疗及单纯放疗。     

替莫唑胺对脊髓胶质瘤的疗效及对MGMT、Survivin和caspase-3的影响

目的 研究替莫唑胺对脊髓胶质瘤的临床疗效,并通过细胞研究检测其对MGMT、Survivin和caspase-3的影响,探讨其抑制复发和转移的机制。方法 选取我院于2015年1月至2019年5月收治的80例脊髓胶质瘤患者,依据随机数字表法分为观察和对照两组,每组40例。两组患者均在神经电生理监测下采用显微外科切除,而观察组联合替莫唑胺治疗。比较两组患者治疗后的肿瘤切除率、McCormick神经功能以及复发、生存情况。观察组术后给予替莫唑胺治疗观察两组的肿瘤复发和生存情况。术中取患者脊髓胶质瘤细胞,体外培养检测替莫唑胺对凋亡蛋白caspase-3、MGMT、Survivin基因表达情况的影响。结果 两组患者的全切率、次切率、部分切除率差异无统计学意义(P＞0.05),而替莫唑胺治疗组患者的复发率显著低于对照组(P＜0.05)。治疗3个月后,两组患者的McCormick神经功能差异无统计学意义(P＜0.05)。随访一年观察组患者死亡率为5.00%(2例),显著低于对照组(9例,22.50%),差异有统计学意义(P＜0.05)。细胞实验表明随着替莫唑胺浓度的增加,细胞侵袭能力下降,显著低于空白对照组(P＜0.05),而脊髓胶质瘤细胞凋亡蛋白Caspase3表达增加,替莫唑胺组Survivin基因表达阳性率低于空白对照组(P＜0.05),MGMT表达阳性率略低于空白对照组,差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 替莫唑胺可增加神经电生理监测下显微外科切除术后脊髓胶质瘤的治疗效果,其机制可能与增加caspase-3活性和抑制Survivin基因表达有关,从而降低术后复发率和死亡率。     

特发性肺间质纤维化的研究及其药物疗效的回顾

本文采用国内、外文献综述方法，分析了特发性肺间质纤维化的研究进展及治疗现状。特发性肺间质纤维化在诊断、治疗等方面尚存在许多问题，其更有效的治疗药物还有待于医、药学工作者的不断研究。     

106例脑胶质瘤的显微手术治疗

目的探讨脑胶质瘤患者采取显微手术切除的临床疗效。方法对106例脑胶质瘤患者施行显微镜下切除术。术后83例获得随访2年。结果胶质瘤全切除78例(73.58%),次全切除18例(16.98%),部分切除10例(9.44%)。所有病例均无严重并发症及死亡。术后存活1年以上者76例(91.57%),存活2年以上者70例(84.34%)。结论显微镜手术治疗脑胶质瘤疗效满意、并发症少,值得临床推广应用。     

甲钴胺和胰激肽原酶肠溶片联用对糖尿病性周围神经病变的疗效观察

目的探讨作用机制不同的药物联合应用对糖尿病性周围神经病变（DPN）的疗效。方法将124例DPN患者随机分为两组,对照组应用甲钴胺,观察组应用甲钴胺和胰激肽原酶肠溶片。比较治疗前、后两组的临床症状和神经传导速度的差异。结果治疗后,两组的临床症状均缓解,神经传导速度增加;观察组临床症状的缓解和神经传导速度改善比对照组明显（P〈0．05,P〈0．01）。结论甲钻胺与胰激肽原酶肠溶片联合应用改善神经传导速度和缓解DPN症状的效果优于甲钴胺单用效果。