广州及周边地区蝙蝠携带SRAS冠状病毒的流行病学调查

目的了解野生动物市场果蝠携带SARS冠状病毒（SARS-CoV）和SARS样冠状病毒（SARS-like-CoY）情况。方法2004年9月至2005年11月，在广州及广州野生动物市场收集来自广州及周边地区的分属两个亚目9个种的蝙蝠共905只，有犬蝠（Cynopterus sphinx）、棕果蝠（Rousettus leschenaulti）、普通长翼蝠（Miniopterus schreibersi）、普氏蹄蝠（Hipposideros prmti）、中华菊头蝠（Rhinolophus sinicus）、小黄蝠（Scotophilus kuhlii）、大耳双色蹄蝠（Hipposideros Pomona）、中菊头蝠（Rhinolophus affinis）和小菊头蝠（Rhinolophus pusillus）。收集的蝙蝠分别取得咽拭813份、血清524份、肺组织853份及直肠粪便853份标本共计3043份，用新型冠状病毒（N-蛋白）测定试剂盒（酶联免疫法）、SARS-CoV RNA检测试剂盒、荧光PCR及基因芯片检测并通过RT-PCR和细胞分离培养检测SARS-CoV和SARS-like-CoV。结果收集的9个种905只蝙蝠共3043份标本未检测、分离出SARS-CoV和SARS-like-CoV。结论调查的广州及周边地区的9种蝙蝠均未检测到SARS-CoV和SARS-like-CoV。     

广东及海南蝙蝠乙型脑炎病毒血清抗体的检测

目的对蝙蝠血清进行乙型脑炎病毒（JEV）抗体的检测,了解蝙蝠感染JEV情况。方法2013年,我们在广东省和海南省
采集蝙蝠,对采集到的蝙蝠心脏取血,分离血清,采用间接ELISA试验和病毒中和试验对血清进行JEV抗体的检测。结果间接
ELISA检测201份蝙蝠血清,JEV抗体阳性率46.27%（93/201）,其中,海南蝙蝠阳性率88.89%（48/54）,广东蝙蝠阳性率30.61%
（45/147）。在棕果蝠、普通长翼蝠、普通伏翼蝠和大耳菊头蝠血清中均检测到JEV 抗体,普通长翼蝠（海南）阳性率最高达
95.56%（43/45）。采用病毒中和试验对28 份间接ELISA检测阳性的蝙蝠血清进行检测,阳性率53.57%（15/28）,中和抗体滴
度在1∶10~1∶28.22 之间。结论不同地区和多个种类蝙蝠可自然感染JEV,且感染率较高,蝙蝠在JEV循环中的意义值得进
一步探讨。
     

儿科患者与医务人员血清冠状病毒(变异株)抗体检测

目的本次严重急性呼吸综合征(SARS)流行中,儿童发病率低、症状轻,推测儿童可能存在保护性抗体.对儿科非SARS患者及医务人员进行血清冠状病毒(变异株)抗体检测,试剂盒为北京华大吉比爱生物技术有限公司冠状病毒(变异株)IgG抗体检测试剂盒(国药试字2003004批号20030501).方法用酶联免疫吸附法(ELISA),检测2001及2003年的168例非SARS患儿的血清标本,及与这些患儿有密切接触的171份医务人员血清标本,以86份成人非感染非医务人员血清标本做对照.结果非SARS患儿2001年77份血清标本阳性32例(41.56%),2003年91份阳性36例(39.56 %),医务人员抗体阳性2例(1.17%),成人对照为0%.儿童冠状病毒(变异株)抗体阳性率有随年龄增长逐渐下降的趋势.抗体滴度中位数在2003年患儿(0.200)、2001年患儿(0.170)、医务人员(0.019)及非感染成人(0.054)间存在极显著性差异.结论在非SARS患儿中冠状病毒(变异株)抗体阳性率高达40%,显著高于成人,与其密切接触的医务人员抗体阳性的检出率与对照组无明显差异,抗体滴度无升高.     

针对SARS患者的特异性抗体检测结果不容乐观

为了探讨SARS患者体内抗SARS冠状病毒抗体的产生和变化规律，北京佑安医院采用经国家食品药品监督管理局（SDA）审批的，由中国医学科学院，军事医学科学院和北京华大基因工程有限公司共同开发研制的抗SARS冠状病毒抗体检测试剂盒（ELISA试剂盒），对75例住院SARS患者的390份血清标本进行了IgM抗体和IgG抗体的检测。     

蝙蝠、恒河猴血清中乙型脑炎和基孔肯雅病毒抗体调查

<正> 流行性乙型脑炎(简称乙脑)和基孔肯雅病(Chikungunya)均由病毒引起,经蚊虫传播,严重危害人类健康的自然疫源性疾病。为进一步了解乙脑病毒和基孔肯雅病毒的宿主情况,我们用血凝抑制试验对采自云南的蝙蝠和恒河猴血清中进行了乙脑及基孔肯雅病毒抗体的检测。现将结果报告如下。1 材料与方法1.1 血清采集:棕果编蝠(Rousettusleschenaulti)血清,采自云南省河口地区。恒河猴(Macaca mulatta)血清,采自西双版纳、临沧及思茅地区。采到的动物血清—30℃低温保存,以备检测。1.2 试验方法:采用微量血凝制试验。乙脑和基孔肯雅抗原及免疫血清由本实验室自制,抗原用4个血凝单位,用0.5%的鸽血球测定。     

不同人群抗SARS冠状病毒特异性抗体血清学检测与分析

目的 :探索不同人群中抗SARS冠状病毒特异性抗体的发生、发展及分布规律 ;评价间接ELISA方法检测SARS冠状病毒IgG、IgM特异性抗体试剂盒及改进方法。 方法 :分别获取SARS流行前无偿献血者标本 3990份 ,一线抗SARS医务人员标本 397份和临床确诊的SARS患者标本 15 7份 ,采用ELISA方法进行SARS冠状病毒特异性抗体检测。结果 :SARS流行前无偿献血者标本 3990份共检出IgG抗体阳性标本 16份 ,阳性率为 0 .4 0 % ;IgM抗体阳性标本 0份 ,阳性率为 0 %。一线抗SARS医务人员标本 397份 ,共检出IgG抗体阳性标本 2份 ,阳性率为 0 .5 0 % ;IgM抗体均为阴性。临床确诊的SARS患者标本 15 7份 ,共检出IgG抗体阳性标本 119份 ,阳性率为 75 .79% ;IgM阳性标本 6 8份 ,阳性率为 4 3.31%。结论 :一线抗SARS医务人员与SARS流行前无偿献血者IgG、IgM抗体阳性率无显著差异 (P =0 .76 >0 .0 5 ) ;采用该SARS冠状病毒 (变异株 )IgG抗体试剂盒检测SARS流行前无偿献血者人群存在一定的阳性率 ,说明该试剂盒包被的抗原与其它免疫球蛋白 (IgG)有交叉反应 ,有待进一步改进     

广东和广西部分地区蝙蝠携带登革病毒及流行性乙型脑炎病毒的调查研究

目的了解广东及广西蝙蝠携带登革病毒和流行性乙型脑炎(乙脑)病毒的情况。方法2004年9月至2005年11月期间11次收集广东及广西部分地区的蝙蝠。收集的蝙蝠取脑组织标本和血清标本,采用两对登革病毒和乙脑病毒通用引物,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和细胞培养分离方法检测所采集蝙蝠标本中的登革病毒(denguevirus,DV)和乙脑病毒(Japaneseencephalitisvirus,JEV)。结果收集了4个科9个种共905只蝙蝠,其中棕果蝠154只、犬蝠395只、普通长翼蝠5只、小黄蝠52只、中菊头蝠228只、中华菊头蝠15只、小菊头蝠41只、双色蹄蝠8只、普氏蹄蝠7只。蝙蝠来源于粤中、粤西和桂东的7个县市。905只蝙蝠标本中未检测、分离到登革病毒和乙型脑炎病毒。结论未发现所调查的蝙蝠携带登革病毒和乙型脑炎病毒。     

ELISA方法检测肠道病毒71型抗体效果分析

目的分析酶联免疫吸附试验（ELISA）方法对肠道病毒71型（EV71）的检测效果。方法以52份EV71型手足口病阳性患儿和55份正常儿童的血清为样本,用ELISA试剂盒和中和抗体方法分别检测,结果进行对比。结果与中和抗体方法相比较,ELISA方法敏感性为96．2％,特异性为92．7％,总符合率为94．4％。两种检测方法差异无统计学意义（χ^2=0．075,P〉0．05）。结论ELISA方法适用于EV71型手足口病常规诊断。     

合成肽抗原抗精子抗体ELISA试剂盒的研究

目的 :建立合成多肽抗原检测抗精子抗体 (As Ab)的酶联免疫吸附测定法 (EL ISA )。方法 :固相法合成特异性精子肽 ,包板制备检测 As Ab的 EL ISA试剂盒 ,并对该试剂盒进行方法考核。结果 :抗原包被浓度选择 0 .5 mg/ L ;检测 4 39份血清标本的 As Ab表明 ,不明原因不育患者组阳性率达 2 1.5 % ,未婚男女对照组阳性率仅为 1% ,两组对比差异有统计学意义 (P <0 .0 0 5 )。与德国 Gesellschaft试剂盒比较检测 2 6份血清标本 ,显示极好的一致性 (Kappa值 0 .77>0 .75 )。重复性试验显示其精密度较好 (CV<10 % ) ;37℃放置 8d,结果不受影响。结论 :结果表明该合成肽抗原检测抗精子抗体 EL ISA试剂盒特异性强 ,重复性好、稳定性高 ,操作简便     

SARS病毒抗体效价测定方法的建立及应用

目的 :建立抗SARSIgG和IgM抗体效价定量测定方法。方法 :①在SARS冠状病毒抗体IgG诊断试剂盒和IgM诊断试剂盒的基础上 ,通过选择IgG、IgM标准血清样本 ,作系列稀释 ,建立效价和吸光度标准曲线 ,采用电子表格获得最佳拟合方程式 ,应用于标本血清效价计算。②应用该方法测定 80例康复期SARS患者血清SARSIgG、IgM抗体及其效价。 结果 :①取得了良好的拟合方程式 ,R2 均可大于 0 .99。② 80名康复期SARS住院患者血清中SARS病毒IgG抗体 6 1名阳性 ,效价为 31.9± 4 0 .0 (1.1～ 2 6 4 .0 ) ,偏度系数为 3.6 77;19例阴性。 80名康复期SARS住院患者血清SARS病毒IgM抗体 19名阳性 ,效价为 2 .5 9± 1.35 (1.1～ 5 .5 ) ,偏度系数为 0 .92 7。结论 :①SARS冠状病毒抗体定性诊断试剂盒具有良好的敏感性和特异性 ,在选择IgG、IgM标准血清和采用电子表格得出相应的最佳拟合方程式后 ,可计算出患者血清SARS病毒抗体效价。②SARS病毒抗体阳性的康复期SARS患者血清中的SARSIgG抗体呈偏态分散分布 ,无明显规律可循     

非SARS患儿体内SARS冠状病毒抗体的检测分析

目的 探讨非急性重症呼吸综合征(SARS)患儿体内是否存有SARS冠状病毒相关抗体。方法采用国家药品生物制品检定所正式检定通过的2种SARS抗体诊断试剂(间接免疫荧光检测试剂和双抗原夹心ELISA试剂)，对广州地区l060例非SARS患儿血清样本进行检测。结果 1060例非SARS患儿血清样本，间接免疫荧光法检测IgM、IgG均为阴性。双抗原夹心ELISA法检测也仅有2例出现弱阳性。结论 非SAILS患儿体内并未存在SAILS病毒相关抗体。     

非SARS患儿体内SARS冠状病毒抗体的检测分析

目的探讨非急性重症呼吸综合征(SARS)患儿体内是否存有SARS冠状病毒相关抗体。方法采用国家药品生物制品检定所正式检定通过的2种SARS抗体诊断试剂(间接免疫荧光检测试剂和双抗原夹心ELISA试剂),对广州地区1 060例非SARS患儿血清样本进行检测。结果1 060例非SARS患儿血清样本,间接免疫荧光法检测IgM、IgG均为阴性。双抗原夹心ELISA法检测也仅有2例出现弱阳性。结论非SARS患儿体内并未存在SARS病毒相关抗体。     

ELISA法和免疫印迹法检测抗ENA抗体的比较

目的：将目前国内新开展的两种检测ＥＮＡ技术,即免疫印迹法（ＩＢＴ）和酶免疫法（ＥＬＩＳＡ）进行对比、分析。方法：用 ＩＢＴ法及 ＥＬＩＳＡ法同时检测 １３０例各种结缔组织病、非结缔组织病人及健康人血清中的抗ＥＮＡ抗体。结果：２０例健康人,两法均为阴性;８０例结缔组织病患者,两法检出抗 Ｓｍ抗体的符合率为 ９１．３％,检测抗 ＲＮＰ抗体的符合率为 ８２．５％,以上抗体两法的敏感性无显著差异（Ｐ＞０．０５）。检测抗ＳＳＡ抗体,ＩＢＴ法检出率低。抗ＳＳＢ抗体检出率两法亦无显著差异（Ｐ＞０．０５）,符合率为８７．５０％,在１２例ＳＳ的检测中符合率比较低,为５０％。结论：两种方法在检测抗Ｓｍ、ＲＮＰ、ＳＳＢ抗体时,敏感性无显著差异,ＥＬＩＳＡ法检测抗ＳＳＡ抗体优于ＩＢＴ法。上述两种方法在临床应用于抗ＥＮＡ抗体的检测中于可互相验证和补充。     

人血清中青霉素抗体的酶联免疫吸附测定

目的: 建立检测青霉素抗体的ELISA法,并探讨其临床意义。方法: 以氨苄西林用SPDP法与兔血清白蛋白交联,用此交联物为包被抗原,HRP-抗人IgG为酶标抗体,建立检测青霉素抗体的ELISA法,并对部分临床标本进行青霉素抗体检测。结果: 建立的方法其批内、批间变异系数分别为6.8%、8.4%。氨苄西林-兔白蛋白交联物免疫家兔获得兔抗氨苄西林的抗体,以此抗体作阻断试验,抑制HRP-抗人IgG的显色。临床标本检测结果表明,不同疾病患者青霉素抗体的阳性率不同。结论: ELISA可用于临床对青霉素抗体的检测,具有较好的特异性、敏感性和重复性。     

三种登革热抗体检测方法的临床对比研究

目的 比较酶联免疫吸附法（ELISA）、免疫斑点法（DIBA）和免疫层析法（ICT）检测登革热抗体的敏感性、特异性及其他优缺点。方法 用ELISA、DIBA和ICT同时检测登革热患者和流行性出血热、疟疾、乙脑、流感、钩体等其他发热患者的DV-IgM／Igg抗体,比较测试结果。结果 用ICT法（澳大利亚PANBIO Limited）检测登革热患者DV-IgM的阳性率为60．4％（32／53）,DV-IgG无1例阳性;检测非登革感染发热患者DV-IgM的假阳性率为14．7％（5／34）,DV-IgG无1例阳性。用ELISA法（德国GMBH）检测登革热患者DV-IgM的阳性率为66．0％（35／53）,DV-IgG的阳性率为70．2％（40／57）;检测非登革感染发热患者DV-IgM的假阳性率为35．3％（12／34）,DV-IgG的假阳性率为8．8％（3／34）。用ELISA法（澳大利亚PANBIO Limited）检测登革热患者DV-IgM的阳性率为75．5％（40／53）,DV-IgG的阳性率为49．1％（28／57）;检测非登革感染发热患者DV-IgM的假阳性率为11．8％（4／34）,DV-IgG无1例阳性。用DIBA法（新加坡Genelabs Diagnostics）检测登革热患者DV—IgM的阳性率为84．9％（45／53）,DV—IgG的阳性率为64．9％（37／57）;检测非登革感染发热患者DV-IgM的假阳性率为47．1％（16／34）,DV-IgG无1例阳性。结论 通过比较显示,ICT法检测DV-IgM抗体适合在登革热爆发流行期间用作疫区基层医疗单位的早期初筛试验;ELISA法检测DV-IgM／IgG抗体适合在普查及大批量标本检测时使用;DIBA法检测DV-IgM抗体不适合作为初筛试验;DIBA法检测DV-IgG抗体适合在登革热散发期间使用,可作为登革病毒感染的确证实验。     

Evaluation by indirect immunofluorescent assay and enzyme linked immunosorbent assay of the dynamic changes of serum antibody responses against severe acute respiratory syndrome coronavirus

Background Severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS-CoV) is a newly emerging virus that gives rise to SARS patients with high rates of infectivity and fatality. To study the humoral immune responses to SARSCoV, the authors evaluated lgG and IgM specific antibodies in patients‘ sera.Methods Two methods, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and indirect immunofluorescent assay (IFA) , were used to detect specific serum IgG and IgM against SARS-CoV in 98 SARS patients and 250 controls consisting of patients with pneumonia, heahh-care professionals and healthy subjects. The serum antibody profiles were investigated at different times over one and a half years in 18 of the SARS patients.Results The sensitivity and specificity of ELISA for detecting IgG against SARS-CoV were 100.0% and 97.2% and for IgM 89. 8% and 97.6% respectively; the figures using IFA for IgG were 100.0% and 100.0% and for IgM 81.8% and 100.0% respectively. During the first seven days of the antibodies trace test, no IgG and IgM were detected, but on day 15, IgG response increased dramatically, reaching a peak on day 60,remaining high up to day 180 and decreasing gradually until day 540. On day 15,IgM was detected, rapidly reached a peak, then declined gradually until day 180 when IgM was undetectable.Conclusion The detection of antibodies against SARS virus is helpful in the clinical diagnosis of SARS.     

CMV抗体免疫金快速检测试剂盒的开发与初步应用

目的: 开发一种低成本、简单易用的基于免疫金渗滤法的试剂盒,以用于检测分析血清中的巨细胞病毒抗体. 方法: 将用人工合成的人巨细胞病毒(HCMV)抗原表位的线性肽和分支多抗原肽分别划线固定于硝酸素纤维膜上,制成免疫层析检测试纸条,血清中IgG与测试条上金标记物结合后沿硝酸纤维素膜移动,与膜上的固相抗原结合形成肉眼可见的红色带条并用GICA和ELISA试剂盒对比检测120份血清标本中抗HCMV抗体. 结果: 分支多抗原肽制成的免疫层析检测试纸条的灵敏度为97.9%,特异度为87.5%,两法符合率为95.8%. 结论: GICA检测血清中的抗HCMV抗体特异性强,灵敏度高,简便快速,有广泛应用价值.     

斑点免疫渗滤法检测丙肝IgG抗体试剂盒的研制

用基因工程重组的丙肝抗原包被于硝酸纤维素膜，建立了检测丙肝ＩｇＧ抗体的斑点免疫渗滤法。与ＥＬＩＳＡ试剂盒进行双盲式同步测定，二法检验结果差异无显著性。渗滤法简便快速，适用于各级医院，有很强的推广价值。     

抗核抗体谱IgG检测酶联免疫吸附法试剂盒的临床试验

目的根据《体外诊断试剂临床试验技术指导原则》要求,对由欧蒙(杭州)医学实验诊断有限公司生产的酶联免疫吸附法(ELISA)二类体外诊断试剂盒中抗核抗体谱IgG检测试剂盒进行临床验证试验,以评价该试剂盒的临床应用性能。方法收集2017年11月至2018年3月本院83例系统性红斑狼疮、夏普综合征(MCTD)、干燥综合征、进行性系统性硬化症、皮肌炎/多肌炎等患者有效血清样本及32例有效同源血浆,对照组为健康人群,其中血清27名、血浆26名。使用欧蒙(杭州)医学实验诊断有限公司拟注册的抗核抗体谱IgG检测试剂盒(ELISA)分别与苏州浩欧博生物医药有限公司、INOVA Diagnostics,Inc.及EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG生产的酶联免疫吸附法检测系统检测ANA谱,通过计算符合率和Kappa检验评价分析拟注册试剂盒与其他3种试剂的一致性。结果待评价试剂盒(抗核抗体谱IgG检测试剂盒(ELISA)与对比试剂盒,包括[对比试剂盒1[抗核抗体筛查试剂盒(ELISA)]/对比试剂盒2[抗核糖体P蛋白抗体检测试剂盒(ELISA)]检测不相符的样本,以第三方试剂盒EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG生产的抗核抗体谱IgG检测试剂盒(ELISA)的检测结果为准,最终待评价试剂盒与对比试剂/第三方试剂的血清检测阳性符合率为100%,阴性符合率为100%,总符合率为100%,Kappa值为1.00。待评价试剂盒检测血清与同源血浆检测阳性符合率为100%,阴性符合率为97%,总符合率为98%,Kappa值为0.96。结论待评价试剂盒经过临床试验验证,待评价试剂盒与对比试剂/第三方试剂血清及血浆检测结果符合性良好,具备应用性能。     

应用ABC-ELISA和SPA-ELISA诊断华枝睾吸虫病的初步比较

本文应用生物素-亲和素过氧化物酶联免疫吸附试验(ABC—ELISA)检测华枝睾吸虫病患者血清IgG抗体,并与常规SPA-ELISA比较。前法与粪检的阳性和阴性符合率分别为100％和87％,后法分为100％和95.7％。用SPA-ELISA检测12份日本血吸虫病兔血清未见交叉反应。由于SPA-ELISA操作简便,试剂价廉,因此更适宜于基层单位推广使用。