索拉非尼联合塞来昔布在体外对肝癌HepG2细胞的影响

目的研究索拉非尼联合塞来昔布在体外对肝癌Hep G2细胞增殖的影响。方法以不同浓度索拉非尼和塞来昔布分别组成单药组和联合用药组作用于Hep G2细胞,MTT法检测增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期。Western blot检测Cyclin D1、Cyclin D3、CDK4蛋白的表达。结果索拉非尼、塞来昔布单药与联用均能抑制Hep G2细胞增殖,呈时间-剂量依赖效应,两药联用有协同效应(P<0.05)。药物组与空白组相比,G0/G1期细胞比例增高,联合用药组最高。联合用药组与单药及空白对照组相比,Hep G2细胞中Cyclin D1、Cyclin D3蛋白的表达显著降低。结论索拉非尼联合塞来昔布可能通过下调Cyclin D1、Cyclin D3表达,增强G0/G1期阻滞,发挥协同抑制Hep G2细胞增殖的作用。     

紫檀茋和乙酰紫草素抑制B16F10细胞增殖的协同作用

目的研究紫檀茋和乙酰紫草素对B16F10细胞的增殖抑制的协同作用与相关机制。方法通过系统药理学的方法对紫檀茋和乙酰紫草素的联合作用进行预测,并对可能靶点进行筛选及分析。体外采用MTT法测定紫檀茋、乙酰紫草素及联合用药对B16F10细胞的抑制效应;形态学水平观察细胞核的凋亡情况;流式细胞技术检测细胞凋亡及周期的变化;RT-PCR法检测细胞内相关基因的表达;体内实验采用C57BL/6小鼠移植瘤方法。结果紫檀茋有14个靶点与周期相关,乙酰紫草素有12个靶点与凋亡相关,且均有靶点与p53信号通路相关。紫檀茋、乙酰紫草素及联合用药对B16F10细胞的增殖均有抑制作用,并呈浓度剂量依赖性,并具有显著协同效果;联合给药组细胞凋亡率最高,且周期阻滞在G1期;单一给药组的p53、Bax及p21基因的表达随给药时间的延长而增加,而Bcl-2、CDK2、Cyclin E基因的表达随给药时间而减少,联合给药组p53,Bax和Bcl-2的变化差异较单独给药组显著;体内抑瘤实验给药组均有不同程度的抑瘤效果,以联合给药组抑瘤率最大。结论紫檀茋和乙酰紫草素对B16F10细胞的增殖有一定协同抑制作用,认为二者协同激活p53信号通路,诱导周期阻滞和凋亡而发挥药效。     

莪术油注射液对宫颈癌细胞株Hela增殖及Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的：探讨莪术油注射液对宫颈癌细胞Hela增殖的抑制作用及潜在作用机制。方法：采用CCK-8法筛选莪术油最佳给药剂量,并设立对照组和莪术油处理高、中、低剂量组。CCK-8法检测莪术油对Hela细胞生长曲线的影响;流式细胞术检测莪术油对Hela细胞周期的影响;Western Blot试验检测莪术油对Hela细胞中Wnt3a、β-catenin、C-myc、CyclinD1蛋白表达的调节作用。结果：CCK-8试验表明,莪术油给药剂量越大,其对Hela细胞增殖的抑制作用越明显,以高剂量组为最优。流式细胞术试验表明,莪术油可将Hela细胞阻滞在G1期,使S期和G2期细胞比例明显降低。Western Blot试验结果显示,莪术油处理后Wnt3a、β-catenin、C-myc、CyclinD1蛋白表达相较于对照组其表达明显降低。结论：莪术油注射液通过调节Wnt/β-catenin信号通路抑制宫颈癌细胞增殖。     

橘红素增强5-氟尿嘧啶抑制人胃癌AGS细胞增殖的作用及其机制研究

目的探讨橘红素联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对人胃癌AGS细胞增殖的作用及其机制。方法采用MTT法观察5-Fu和橘红素联合5-Fu对AGS胃癌细胞增殖作用;流式细胞仪检测橘红素联合5-Fu对细胞周期的影响;Western blot检测橘红素联合5-Fu对p53和p21蛋白表达的影响。结果 5-Fu可呈剂量依赖地抑制人AGS胃癌细胞的增殖(P<0.05,P<0.01),橘红素联合5-Fu可明显增强5-Fu对AGS胃癌细胞增殖的抑制作用,与5-Fu组比较差异有统计学意义(P<0.01);橘红素联合5-Fu作用于AGS细胞,S期细胞百分比明显增高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);橘红素联合5-Fu可上调p53和p21蛋白的表达,与5-Fu组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论橘红素联合5-Fu可增强5-Fu抑制人AGS胃癌细胞的增殖作用,主要机制可能是通过上调p53和p21蛋白,使细胞阻滞于S期。     

大蒜素对人宫颈癌Hela细胞增殖影响及其作用机制

目的探讨大蒜素对体外培养宫颈癌Hela细胞增殖的影响及其作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定不同浓度大蒜素对Hela细胞增殖抑制率;流式细胞术测定细胞周期变化及凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax的表达。结果 MTT显示大蒜素能抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖,并具有时间-剂量依赖性关系;流式细胞术测定结果显示10μg/ml大蒜素可明显诱导宫颈癌Hela细胞凋亡,并将细胞周期阻滞在G2/M期;可降低癌基因蛋白Bcl表达（P〈0.01）,而促进Bax表达（P〈0.01）。结论大蒜素对人宫颈癌Hela细胞增殖具有抑制作用,与细胞周期阻滞和凋亡相关蛋白表达有关。     

新型微管抑制剂Yf9b能够诱导Hela细胞G2/M期阻滞和凋亡

目的考察新型微管抑制剂2-甲氧基-5-(4-(3,4,5-三家氧基苯基)-1,3-硒唑-5-基)苯胺[2-methoxy-5-(4-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-1,3-selenazol-5-yl)aniline,Yf9b]对多种人源性肿瘤细胞的抗肿瘤活性,并研究Yf9b抑制人宫颈癌Hela细胞增殖的机制。方法采用MTT法考察Yf9b对多种肿瘤细胞的增殖抑制作用。免疫荧光染色观察Yf9b与康普瑞丁(combretastatin A-4,CA-4)对微管的抑制作用。流式细胞技术考察Yf9b与CA-4对Hela细胞周期的影响,并考察Yf9b诱导Hela细胞凋亡的情况。结果 Yf9b的作用时间与剂量依赖性地抑制Hela细胞增殖,半数抑制浓度(IC50)为(42.9±2.7)nmol·L-1。Yf9b同母体化合物CA-4一样能抑制微管聚合,将Hela细胞阻滞在G2/M期,并最终诱导细胞凋亡。结论 Yf9b是一种新型微管抑制剂,能够诱导Hela细胞G2/M期阻滞和凋亡。     

索拉菲尼联合吉西他滨序贯作用于肺癌细胞株A549的协同效应

目的观察索拉菲尼单药以及联合吉西他滨不同顺序给药对KRAS基因突变的非小细胞肺癌A549细胞的效应及其机制。方法索拉菲尼和吉西他滨单药以及不同序贯给药作用于A549细胞株。MTT法检测增殖抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期变化;蛋白质印迹法检测p-ERK及Bcl-2的变化。结果索拉菲尼和吉西他滨作用于A549细胞72 h的IC50值分别为(5.91±0.22)μmol.L-1,(10.38±0.80)nmol.L-1;且先用吉西他滨后用索拉菲尼有明显的协同效应。索拉菲尼和吉西他滨分别将A549细胞阻滞于G0/G1期和S期;且先用吉西他滨后用索拉菲尼组的p-ERK及Bcl-2下降最明显。结论索拉菲尼能抑制A549细胞的生长,且先吉西他滨后索拉菲尼的序贯方式能产生明显的协同效应。     

槲皮素体内外抑制人骨肉瘤细胞株143B增殖及其机制研究

目的研究槲皮素体内外对骨肉瘤143B细胞增殖的抑制作用及其作用机制。方法体外培养人骨肉瘤143B细胞,随机分组,MTT法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术检测凋亡率和细胞周期;建立143B细胞裸鼠异种移植瘤模型,随机分为阴性对照组、5-Fu阳性对照组及槲皮素3个剂量组,每周给药3次,4周后处死裸鼠,剥瘤,计算抑瘤率;采血,双抗体夹心ABC-ELISA法测TNF-α和TGF-α的含量。结果槲皮素(10~320μmol/L)体外可明显抑制143B细胞的增殖,且具有浓度和时间依耐性;在40~160μmol/L浓度下,槲皮素可诱导143B细胞凋亡;将细胞阻滞在G0-G1期;体内抑制肿瘤生长,提高血清TNF-α含量,降低TGF-α的含量。结论槲皮素抑制143B细胞的作用机制与诱导细胞凋亡和将细胞周期阻滞在G0~G1期,及增强机体免疫功能有关。     

5-氮杂-2’-脱氧胞苷联合紫杉醇对中分化胃腺癌细胞株SGC-7901的作用

目的:探讨甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)联合紫杉醇对中分化胃腺癌细胞SGC-7901作用,及对抑癌基因PTEN和E-cadherin(E-cad)表达的影响.方法:应用MTT、流式细胞术、RT-PCR方法检测5-Aza-CdR和紫杉醇单用和联用后对细胞的增殖抑制、周期分布、凋亡率,以及对抑癌基因PTEN和E-cad mRNA表达的改变.结果:紫杉醇和5-Aza-CdR可抑制胃腺癌细胞的生长,呈浓度依赖性.联合作用后,协同效应明显.紫杉醇可以使细胞阻滞在G2/M期,而5-Aza-CdR可以使细胞阻滞在S期,联合作用后,细胞同时阻滞在S和G2/M周期,凋亡率也增加.紫杉醇对抑癌基因PTEN,E-cad mRNA的表达与对照组相比差异无显著性,5-Aza-CdR可使其重新表达,两药联合作用后,PTEN和E-cad的表达量增多.结论:5-Aza-CdR可增强紫杉醇对胃癌细胞的增殖抑制作用;5-Aza-CdR可以使胃癌细胞阻滞在S期,而紫杉醇使细胞阻滞在G2/M期,两药联合应用后,胃癌细胞在这两个周期的分布以及凋亡率都明显高于单药的应用;5-Aza-CdR可以使胃癌细胞中的抑癌基因PTEN mRNA和E-cad mRNA重新表达,而紫杉醇则不能,但能促进5-Aza-CdR对抑癌基因的重新表达作用.     

硒酸酯多糖与紫杉醇联合应用对肝癌HepG-2细胞生长的抑制作用

目的体外观察硒酸酯多糖(KSC)与紫杉醇(Taxol)对肝癌细胞HepG-2生长的协同抑制效应,并探讨其作用机制。方法 MTT法观察KSC和Taxol单用及合用对HepG-2细胞的抑制作用,并计算两药合用72 h的IC50及合用指数CDI;采用荧光显微镜、流式细胞仪观察上述药物作用后HepG-2细胞形态学、细胞周期及凋亡率的改变。结果MTT结果显示,KSC与Taxol均能显著抑制HepG-2细胞的增殖,且具有时效-量效关系,联合组效果优于单一用药组;KSC、Taxol单用72 h的IC50分别为46.632 mg.L-1和1.684 nmol.L-1,两药联合应用后的IC50分别降至31.684 mg.L-1和0.272 nmol.L-1。30 mg.L-1的KSC与0.5~5 nmol.L-1的Taxol联合效果表现为协同作用(CDI<1.0)。细胞形态学观察可见细胞数减少,细胞核明显变小,并可见致密强荧光及凋亡小体。流式细胞术结果显示两药均作用于S期,联合组既可发生S期周期阻滞,又可诱导凋亡,但凋亡率低于Taxol单独组。结论 KSC与化疗药物Taxol联合可产生协同作用,诱导肿瘤细胞周期阻滞可能为其主要...     

小刺猴头菌液体深层发酵浸膏多糖HFP及HFA的抗肿瘤活性

目的对从小刺猴头菌液体深层发酵浸膏中提取的多糖HFP及HFA的抗肿瘤活性进行初步研究。方法 MTT法测定HFP和HFA对体外培养的人肝癌细胞SMMC7721、人肺腺癌细胞SPC-A-1和人胃癌细胞SGC7901的生长情况。预防性及治疗性给S180荷瘤小鼠灌服HFP和HFA,测定小鼠瘤重、体重、脾重及胸腺重,并计算抑瘤率、脾系数及胸腺系数。结果 HFP和HFA对体外培养的3种肿瘤细胞均表现出一定的抗肿瘤活性,但HFP的抑制作用好于HFA。HFP可抑制小鼠体内S180实体瘤的生长,且预防组的抑瘤率高于治疗组,HFP组的脾系数和胸腺系数明显高于CTX组。结论 HFP和HFA在体外及体内均具有一定的抗肿瘤活性,且HFP的作用好于HFA。     

Research of antifungal substances secreted by higher fungi in culture

A screening in vitro of antifungic activity of 24 strains of Basidiomycetes was realized with their culture filtrate. Lycoperdon perlatum Pers. = Pers., Oudemansiella platyphylla (Pers. ex Fr.) Mos., Agrocybe dura (Bolt) Singer have shown an activity against Candida albicans, Candida tropicalis and Aspergillus fumigatus; Pholiota spumosa (Fr.) Singer towards Botrytis cinerea and Lycoperdon perlatum Pers. = Pers. towards Alternaria solani, Botrytis cinerea and Verticillium dahliae. More extensive studies of the kinetics of antifungic substances production from Lycoperdon perlatum Pers. = Pers. were effectued with 2 different media and 2 different seeding technics on the strains which were sensible to the inhibitory character of this Gasteromycete.     

鲜壁虎醇提物与水提物体内、外对肿瘤活性的影响

目的:研究鲜壁虎水提物与醇提物体内、外的抗肿瘤活性。方法:体外采取MTT法测定鲜壁虎水提物、醇提物对BEL-7402细胞和HepG2细胞生长的抑制作用。体内复制移植瘤小鼠H22模型,给药后计算抑瘤率、胸腺指数和脾脏指数。结果:0.0625mg·mL-1壁虎水提物对HepG2细胞生长有显著抑制作用(P<0.05),1.0000、0.2500、0.0625mg·mL-1壁虎水提物对BEL-7402细胞的生长均有显著抑制作用(P<0.05)。1.0000、0.2500、0.0625mg·mL-1壁虎醇提物对2种细胞有促进增殖的趋势。1.0000、0.2500、0.0625mg·mL-1壁虎水提物与1.0000、0.0625mg·mL-1壁虎醇提物均可显著抑制H22荷瘤小鼠肿瘤生长活性(P<0.05)。结论:鲜壁虎水提物体外有抑制肿瘤细胞生长的作用,醇提物有促进细胞增殖的趋势。鲜壁虎水提物、醇提物体内均有抗肿瘤活性,水提物抑瘤率高于醇提物。     

姜黄素对人宫颈癌Hela细胞增殖的抑制作用

目的:研究姜黄素对人宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用。方法:姜黄经75%乙醇提取、纯化得姜黄素。MTT法检测姜黄素对体外培养Hela细胞增殖的抑制作用;倒置显微镜观察Hela细胞形态学变化;Western blot法检测抑癌基因p53蛋白的表达;流式细胞仪检测Hela细胞凋亡和周期分布。结果:姜黄素对Hela细胞生长24 h的最佳抑制质量浓度为116.68μg/ml,抑制率为63.20%;11.67、35.00、58.34μg/ml姜黄素培养24 h,人宫颈癌Hela细胞数目明显减少,细胞变圆、缩小、老化,核质发散,并与质量浓度呈正相关。29.17、145.85μg/ml姜黄素可增强p53蛋白的表达;11.67、35.00、58.34μg/ml姜黄素可促进人宫颈癌Hela细胞凋亡,并与质量浓度呈正相关,G0/G1期细胞和S期细胞逐渐减少,G2/M期细胞逐渐增多。结论:姜黄素对人宫颈癌Hela细胞增殖有明显抑制作用,并能促进其凋亡和p53的表达,阻滞Hela细胞的G2/M期。     

白藜芦醇联合5-氟尿嘧啶抗肿瘤活性的研究

目的探讨白藜芦醇(Res)与5-氟尿嘧啶(5-Fu)联合应用的抗肿瘤活性。方法 MTT法检测Res合用5-Fu对刀豆蛋白A诱导的小鼠脾细胞增殖的影响;接种S180肉瘤的小鼠随机分为模型组、Res组(20mg/kg)、5-Fu组(20 mg/kg)、Res合用5-Fu组(Res 20 mg/kg+5-Fu 20 mg/kg),每组10只。腹腔注射给药10 d后,各组称体重,计算抑瘤率、脾指数、胸腺指数。结果 Res合用5-Fu对淋巴细胞增殖表现出较强的抑制活性(P<0.01),抑制作用随药物浓度的增加而显著提高。Res合用5-Fu组的瘤重较模型组明显降低(P<0.01),抑瘤率达到41%,明显大于单用Res或5-Fu。Res合用5-Fu可提高脾指数和胸腺指数,对5-Fu所致的免疫低下有一定保护作用。结论 Res合用5-Fu具有较好的体内外抗肿瘤活性,两者有协同作用。     

甘遂提取物对肿瘤瘤株Hep、S180的抑制作用观察

目的观察甘遂提取物作用于小鼠移植瘤细胞Hep、S180后的抑制作用。方法模型组、5-Fu组、甘遂提取物组（E）、5-Fu＋E组,每组10只小鼠分别于右前肢腋皮下接种瘤中注射Tween80溶液、5-Fu、甘遂提取物、甘遂提取物＋5-Fu。免疫组化检测Bcl-2表达。体外培养S180细胞,加入药物浓度为50μg/ml、10μg/ml、1μg/ml,培养48h,流式细胞仪测细胞凋亡率。结果模型组与各实验组移植癌和移植癌组织与药物注射引起肿瘤坏死的Bcl-2蛋白表达,在统计学上有显著差别（P〈0.05）。加入药物浓度为50μg/ml、10μg/ml、1μg/ml,流式细胞仪测定凋亡率分别为33.9%、28.8%和23.3%。结论中药甘遂对Hep、S180有明显的抑制作用。     

Poisoning by Gyromitra esculenta--a review

Gyromitra esculenta (Pers.: Fr.) Fr. and a few other mushrooms have caused severe poisonings and even deaths in humans. Clinical data are characterized primarily by vomiting and diarrhoea, followed by jaundice, convulsions and coma. Gastrointestinal disorders distinguish this poisoning. Frequent consumption can cause hepatitis and neurological diseases. The species of concern are mainly G. esculenta and G. gigas (Kromb.) Cooke (non Phill.). Nevertheless, recent advances in chromatography, biochemistry and toxicology have established that other Ascomycetes species also may prove toxic. Gyromitrin (acetaldehyde methylformylhydrazone, G) and its homologues are toxic compounds that convert in vivo into N-methyl-N-formylhydrazine (MFH), and then into N-methylhydrazine (MH). The toxicity of these chemicals, which are chiefly hepatotoxic and even carcinogenic, has been established through in vivo and in vitro experiments using animals, cell cultures and biochemical systems. When we consider the chemical nature and the reactivity of these natural compounds, we suggest that chemical and biochemical mechanisms may explain their intrinsic biological activity.     

Apoptosis induction and cell cycle perturbation in human hepatoma hep G2 cells by 10-hydroxycamptothecin

10-Hydroxycamptothecin (HCPT), a DNA topoisomerase I inhibitor, is an antitumor alkaloid isolated from a Chinese tree, Camptotheca acuminata, and exhibits a remarkable antihepatoma effect. We studied HCPT to determine whether or not its anti-hepatoma activity occurs through apoptosis induction and cell cycle disturbance using the MTT method, DAPI staining, agarose gel electrophoresis and flow cytometric analysis. The results showed that HCPT inhibited proliferation of human hepatoma Hep G2, Bel-7402 and Bel-7404 cells at an optimal concentration of 0.1 microg/ml. This growth inhibition was dose and time dependent, and was accompanied by evidence of apoptotic changes and cell cycle perturbation in Hep G2 cells. Chromatin condensation and nuclear fragmentation were observed in Hep G2 cells by fluorescence microscopy. Agarose gel electrophoresis showed internucleosomal DNA fragmentation ('ladder pattern') of Hep G2 cells following treatment with HCPT, in a concentration- and time-dependent manner. Flow cytometry showed that HCPT induced a massive hypodiploid cell population and arrested cells in G2/M phase (at low dose) or in S phase (at high dose) in Hep G2 cells. The results of this study suggest that the anti-hepatoma effect of HCPT may result from apoptosis induction and cell cycle disturbance.     

苦马豆素诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡作用机制的实验研究

目的:探讨SW体外诱导人胃癌细胞株SGC7901凋亡的机制。方法:应用MTT法确定SW对体外培养的SGC7901细胞的作用剂量,通过流式细胞术及凋亡相关调控基因p53、cmyc、Bcl2的检测对细胞凋亡及细胞周期的测定,观察SW对胃癌细胞SGC7901增殖周期的影响以及抑制肿瘤细胞增殖的方式,同时利用激光共聚焦显微镜对细胞内Ca2 浓度的监测,研究SW与细胞内Ca2 超载的关系。结果:SW体外抗SGC7901细胞的完全致死剂量为6.2μg·ml-l,高于0.05μg·ml-l时抑制作用明显(P<0.05),其LC50为0.84μg·ml-l;经SW0.5～1.5μg·ml-l处理24h可引起凋亡抑制基因p53、Bcl2的明显下降、凋亡促进基因cmyc的明显升高以及肿瘤细胞内Ca2 超载,最终诱导SGC7901细胞凋亡。实验还证实SW主要作用于肿瘤细胞的S期,使瘤细胞主要积聚在S期。结论:SW通过多种途径诱导细胞凋亡可能是其发挥抗癌作用的重要机制。