IgA肾病患者外周血内皮祖细胞的检测及意义

IgA肾病(IgAN)在我国原发性肾小球肾炎中,是导致慢性肾衰竭的首位病因.IgAN的病理特点是肾小球系膜细胞增生和系膜外基质增多.由于系膜区与毛细血管袢内皮直接连接无基底膜的特点,当系膜基质与系膜细胞发生免疫炎性反应时,会直接导致内皮细胞的损伤,甚至坏死.血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是血管内皮细胞(endothelial cells,ECs)的前体细胞1,推测EPCs的数量及功能在IgAN发生发展中起至关重要的作用.     

IgA肾病患者单核细胞趋化蛋白-1的变化及相关性研究

目的：探讨IgA肾病（IgAN）患者血液、尿液中单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的含量变化及其临床意义。方法：将125例患者分为两组,即大量蛋白尿组和小量蛋白尿组,选取20例正常人为对照组。采用酶联免疫吸附法对实验组及对照组血液、尿液MCP-1的含量进行检测,同时测定患者的24h尿蛋白定量和肾功能。结果：IgAN患者尿液中MCP-1的含量明显增高,大量蛋白尿组高于小量蛋白尿组和对照组。而IgAN患者血液MCP-1的含量与对照组比较差异无统计学意义。结论：IgAN的发病与趋化因子MCP-1有关。     

IgA肾病患者外周血T细胞亚群及Fas/Fasl的表达

IgA肾病是一组以IgA沉积为主要特征的肾小球肾炎。目前认为其主要是由于免疫清除功能受损及黏膜水平抗原清除缺陷。在其发病过程中与细胞免疫有密切关系。本文从临床的角度观察IgA肾病患者外周血T淋巴细胞亚群及Fas／Fasl的表达的特点,探讨免疫炎症在IgA。肾病发病机制中起重要作用。     

IgA肾病外周血B淋巴细胞微核糖核酸差异表达及临床意义

目的通过检测人外周血B淋巴细胞微核糖核酸(microRNA)的差异表达,并分析其与IgA肾病临床病理特点、IgA1分子O-糖基化异常之间的关系,探索microRNA在IgA肾病发病中的可能机制。方法收集7例IgA肾病患者及4例正常人外周血5 ml,磁珠法分选出CD19~+B淋巴细胞,提取RNA,采用表达谱芯片筛选差异表达的microRNA。在另外29例IgA肾病患者和16例正常对照者中,对候选microRNAs用实时荧光定量聚合酶链反应(quantificational real-time polymerase chain reaction,QRT-PCR)进行验证,并分析它们与临床病理、IgA1分子半乳糖缺陷(galatose-defecient IgA1,Gd-IgA1)水平的关系。结果 IgA肾病患者外周血B淋巴细胞microRNA表达明显异常,其中85个明显上调,30个明显下调。对5个候选microRNA:miR-3189-5p、let-7g-5p、miR-4258-5p、miR-4695-3p及miR-99b-5p,进一步验证显示,其表达水平在IgA肾病患者与正常对照之间差异无统计学意义(P0.05)。且上述5个microRNA表达量与IgA肾病患者的临床病理指标没有明显的相关性。IgA肾病组血清IgA1、Gd-IgA1明显高于正常对照(P0.05或P0.01)。5个候选microRNA:miR-3189-5p、let-7g-5p、miR-4258-5p、miR-4695-3p及miR-99b-5p的水平与IgA肾病患者IgA1分子O-连接半乳糖缺陷之间没有明显相关性。结论 IgA肾病患者和正常人外周血CD19~+B淋巴细胞microRNA表达谱存在明显差异。初步验证显示miR-3189-5p、let-7g-5p、miR-4258-5p、miR-4695-3p及miR-99b-5p的表达水平在IgA肾病患者与正常对照之间差异无统计学意义,且与IgA肾病的临床病理特点和Gd-IgA1之间无明显相关性,提示这5个microRNA可能不是参与IgA肾病发病和进展的重要microRNA。     

六味地黄汤对IgA肾病大鼠外周血C1GALT1及Cosmc mRNA表达影响研究

目的:观察六味地黄汤对Ig A肾病大鼠外周血C1GALT1及Cosmc mRNA表达,探讨其对Ig A糖基化的影响。方法:SD大鼠40只随机分为正常对照组,模型组,雷公藤多苷片组,六味地黄汤组。除正常对照组外均采用运用牛血清白蛋白+脂多糖+四氯化碳方法建立实验性Ig A肾病模型。造模成功后连续灌胃4周。将各组大鼠外周血分离的PBMC悬液,采用实时荧光定量PCR检测C1GALT1及Cosmc mRNA的表达,ELISA法测定外周血中Ig A含量,凝集素亲和ELISA法检测Ig A1异常糖基化程度,并进行定量分析。结果:各组C1GALT1mRNA表达量并差异无统计学意义(P0.05);在各组Cosmc mRNA表达中,六味地黄汤组及雷公藤多苷片组表达均较模型组升高(P0.05),但六味地黄汤组表达较雷公藤多苷片组低(P0.05);在各组大鼠Ig A含量及异常糖基化程度比较中,六味地黄汤组较模型组下降,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:六味地黄汤可以上调Cosmc mRNA表达,增加C1GALT1活性,改善Ig A1糖基化异常,从而下调体内Ig A1含量,避免进一步沉积肾脏,延缓Ig A肾病的进展。     

IgA肾病患者扁桃体B1a细胞和IgA1阳性细胞表达及相关因素分析

目的 研究B1a和IgA1阳性细胞在IgA肾病患者扁桃体中的表达及B1a细胞与血尿、蛋白尿和病理Lee分级的关系。 方法 肾活检确诊为原发性IgA肾病及非肾炎慢性扁桃体炎患者各8例为对象,用免疫荧光法和激光共聚焦显微镜对其扁桃体组织进行B1a及IgA1细胞定位和定量计算,并按蛋白尿程度和Lee分级标准与IgA肾病组B1a细胞数量行统计学分析。 结果 B1a细胞主要分布在扁桃体生发中心和小结帽;IgA1细胞主要分布在上皮内、上皮下,以上皮和淋巴组织交界区为多。与慢性扁桃体炎组比较,IgA肾病组两种细胞表达明显增多（P < 0.01）,且呈正相关（r = 0.778,P = 0.023）。在血尿伴蛋白尿和Lee≥Ⅲ级组B1a细胞显著高于单纯血尿和Lee<Ⅲ级组（P < 0.05）。 结论 IgA肾病患者扁桃体中IgA1可能是B1a细胞分泌的。B1a细胞数量随着患者蛋白尿的出现和病理严重程度的加重而增加,可能在疾病发生和进展过程中起着重要的作用。     

IgA肾病患者IgA1对足细胞nephrin mRNA表达的影响

近年研究发现IgA肾病患者的血清IgA1与正常人相比具有明显的异质性,其中起致病作用的主要是聚合型IgA1（polymeric IgA1,pIgA1）。新近研究也发现IgA肾病（IgAN）不仅是系膜细胞受累的疾病,而且在疾病的发生发展过程中也存在着足细胞的破坏。目前关于患者血清IgA1分子异常和足细胞损伤之间有何关系尚不清楚,我们亦未检索到相关报道。本研究拟观察IgAN患者血清IgA1对足细胞分子nephrin表达的影响。     

黑色素瘤黏附分子CD146在IgA肾病肾组织和外周血中的表达及意义

我国IgA肾病(IgAN)占原发性肾小球疾病的58.2％[1],但目前其确切发病机制仍不清楚.本研究用免疫荧光技术和流式细胞学方法检测黑色素瘤黏附分子( CD 146,Mel-CAM,MUC18,A32,S - Endo-I)在IgAN患者肾组织和外周血中的表达,并分析其表达与IgA沉积的关系及分布特点,以期在分子免疫病理水平对IgA肾病发病机制进行探讨,为临床诊治IgAN提供依据.     

粘膜方对IgA肾病患者外周血B淋巴细胞Comsc表达的影响

目的:研究粘膜方是否通过上调外周B淋巴细胞Cosmc的表达,从而减少IgA肾病患者IgA1异常糖基化的量。方法:从IgA肾病患者及健康体检者采集静脉血,分离外周B淋巴细胞,采用体外细胞培养的方法,与正常人肾小球系膜细胞共培养后收集上清,与粘膜方含药血清共作用,采用实时RT-PCR和Western Blot测定Cosmc和TGF-β1mRNA和蛋白的表达水平。结果:IgA肾病患者外周血B淋巴细胞Cosmc的mRNA和蛋白表达比健康组减少,且P0.01,差异具有统计学意义;经粘膜方含药血清共作用后,IgA肾病患者外周B淋巴细胞Cosmc的mRNA和蛋白水平表达增加,且P0.001,差异具有统计学意义;IgA肾病患者外周血B淋巴细胞TGF-β1的mRNA和蛋白表达比健康组上升,且P0.05,差异具有统计学意义;经粘膜方含药血清共作用后,IgA肾病患者外周B淋巴细胞TGF-β1的mRNA和蛋白表达下降,且P0.01,差异具有统计学意义。结论:在体外人肾系膜细胞培养实验中,具有和解法立法组方的粘膜方能上调IgA肾病患者外周B淋巴细胞的Cosmc mRNA和蛋白的表达水平,并下调IgA肾病患者外周B淋巴细胞的TGF-β1和蛋白的表达水平。     

IgA肾病肾组织中基质金属蛋白酶2和单核细胞趋化因子1的表达

目的探讨基质金属蛋白酶2（MMP-2）和单核细胞趋化因子-1（MCP-1）在IgA肾病肾组织的表达强度及其在该病早期肾损害发病机制中的作用。方法将30例IgA肾病患者经肾脏活体组织检查的。肾组织和1（）例切除肾肿瘤患者正常肾组织,进行MMP-2、MCP-1、Ⅳ型胶原免疫组织化学检测并进行半定量分析,按其组织学改变Lee分级标准和肾小管间质病变程度进行分组和分级,同时检测肾功能、24h尿蛋白定量等临床指标,并与组织学、免疫组织化学检测结果进行相关分析。结果在IgA肾病轻度肾损害阶段,MMP2和MCP-1表达水平显著高于正常对照（P〈0．05）,随着病变级别加重,MMP-2和MCP-1在肾小管间质的表达呈逐渐减少趋势（P〈0．05）,而Ⅳ型胶原在肾小管间质表达随肾损害加重呈逐渐增加趋势（P〈0．01）。Spearman相关分析显示,MMP-2和MCP-1表达水平与肾小管间质炎症细胞浸润程度呈正相关（P〈0．05）,与Ⅳ型胶原表达水平呈负相关（P〈0．05）。结论MMP-2和MCP-1可能参与IgA肾病早期单个核细胞浸润等早期肾损害发病机制。     

Wnt/β-catenin在IgA肾病中的表达及意义

目的:探讨Wnt/β-catenin及其下游靶基因在IgA肾病中的表达,分析其与患者的临床病理参数的相关性。方法:根据肾小管间质病变程度分组,采用RT-PCR、Western blot和En Vision-免疫组化技术检测各组IgA肾病患者以及正常对照组患者肾活检组织中Wnt/β-catenin及其下游靶基因snail、基质金属蛋白酶-7(MMP-7)、α-平滑肌动蛋白(α-SMA)的表达,各组之间进行比较。结果:IgA肾病患者肾活检组织中β-catenin、snail、MMP-7、α-SMA mRNA和蛋白表达水平较正常对照组升高(P0.05)。β-catenin、snail在伴有轻度肾小管间质病变的IgA肾病患者肾活检组织中表达水平高于无肾小管间质病变的IgA肾病患者(P0.05),其后随着肾小管间质病变程度的加重逐渐下降。MMP-7、α-SMA在IgA肾病患者肾活检组织中的表达水平与肾小管间质病变的严重程度相一致。结论:Wnt/β-catenin及其下游靶基因在IgA肾病中表达异常,可能参与IgA肾病的发生发展。     

活化白细胞黏附分子在IgA肾病中的表达及意义

目的:探讨活化白细胞黏附分子(CD166)在IgA肾病中的表达及与IgA肾病临床病理特征的关系.方法:用免疫组化二步法检测CD166蛋白在79例IgA肾病患者肾组织的表达.结果:CD166在IgA肾病患者肾小管、间质普遍表达,按Lee分级的级别增加逐渐增高.与单纯性血尿患者(A组)相比,混合蛋白尿、血尿患者(B组)肾小管间质CD166表达明显增高.肾小管间质CD166表达与患者病理分级、小管间质病变、单个核细胞浸润程度及血清C反应蛋白(CRP)水平正相关.结论:CD166在IgA肾病中表达异常,在IgA肾病小管、间质病变及疾病进展中起一定作用.     

IgA肾病患者IgA1糖基化异常及其致病机制

IgA肾病(IgAN)是导致终末期肾病最常见的原发性肾小球疾病。其病理特点为IgA1在肾小球系膜区沉积,IgA1分子的异常糖基化是导致IgAN发病的关键因素。多种与IgAN相关的基因位点已经被发现。这些基因编码的细胞因子参与了IgA1糖基化异常的发病机制。此外糖基化酶缺乏、分子伴侣甲基化异常都可能导致IgA1异常糖基化。异常糖基化的IgA1可通过自我聚集或形成免疫复合物沉积于系膜区,进而刺激系膜细胞增殖、分泌系膜基质、细胞因子、趋化因子、生长因子等,导致肾小球损伤。对IgA1异常糖基化的深入研究有助于了解IgA肾病的发病机制并提供新的诊断与治疗措施。     

前列腺癌TSP-1的表达与血管新生的关系及意义

目的：探讨良性前列腺增生及前列腺癌中血管生成与血小板反应素-1（TSP-1）表达的相关性。方法：应用免疫组织化学方法检测32例良性前列腺增生和32例前列腺癌组织中TSP-1的表达及微血管密度（MVD）。结果：前列腺癌组织中TSP-1表达显著低于良性前列腺增生（P〈0．05）,MVD则明显升高（P〈0．05）;随着肿瘤分期的进展,浸润转移性癌中TSP-1的表达降低甚至缺失,而MVD却逐渐升高。结论：TSP-1在前列腺癌中呈低表达,与前列腺癌的血管新生相关;作为一种内源性血管新生抑制剂,它具有抑制肿瘤生长及血管新生的作用。     

单核细胞趋化蛋白-1在终末期肾病血液透析患者中的检测及意义

目的 探讨终末期肾病血液透析患者血浆单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的水平及其意义.方法 对本院维持性血液透析患者66例及健康志愿者22例,用ELISA法测定血浆MCP-1水平,用全自动生化仪测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、血肌酐(Scr)与血白蛋白(ALB)值.比较其结果并分析其意义.结果 血液透析组血浆MCP-1水平(115.9pg/ml±10.3pg/ml)明显高于对照组(60.3pg/ml±8.4pg/ml),其差异有统计学意义(P＜0.05).血液透析合并冠心病组血浆MCP-1水平明显高于非合并冠心病组[(136.2±11.7)pg/ml vs(91.6±9.4)pg/ml,P＜0.05].结论 终末期肾病血液透析患者血浆MCP-1水平显著高于正常人,合并冠心病患者血浆MCP-1水平更高,提示MCP-1水平升高与肾功能衰竭有一定关系,且是合并冠心病的重要危险因素.     

调节性及辅助性T细胞在人类IgA肾病中的表达及意义

目的 探讨CD4+CD25high调节性T细胞（Treg）及辅助性T细胞亚群（Th1、Th2）比例失衡在IgA肾病（IgAN）免疫发病机制中的作用。 方法 用流式细胞仪检测IgAN患者外周血Treg及Th1、Th2的比例。以胞内染色技术检测叉头框蛋白3（FOXP3）的表达。Treg及Th1、Th2的比例与IgAN各项临床病理指标的相关性分析采用Spearman或Pearson相关分析法。 结果 IgAN患者外周血中Treg比例明显高于健康人[（2.14±0.82）％比（1.59±0.53）％，P ＜ 0.05]，与血IgA水平呈正相关（r = 0.397，P ＜ 0.05），与eGFR呈负相关（r = -0.376，P ＜ 0.05）。IgAN患者外周血中Th2细胞比例显著高于健康对照组[（2.57±0.72）％比（1.81±1.10）％，P ＜ 0.05]，与血IgA水平呈正相关（r = 0.468，P ＜ 0.05）。IgAN患者Th1/Th2比值显著低于健康对照组（5.75±1.89比12.73±9.79，P ＜ 0.05），但与临床各指标间没有相关性。 结论 IgAN患者体内存在T细胞亚群表达紊乱。Treg在外周血中的增多以及以Th2为优势的Th1/Th2失衡可能在IgAN的发病中起重要作用。     

白细胞介素17在IgA肾病肾小管间质的表达及意义

目的观察白细胞介素17（IL-17）在IgA肾病患者肾组织的表达,探讨IL-17在IgA肾病中的临床及病理意义。方法选择51例IgA肾病患者肾组织活体检查采用Katafuchi半定量积分标准和免疫组织化学技术进行病理学积分和检测IL-17的表达,同时检测51例IgA肾病患者中30例外周血单个核细胞（PBMCs）中IL-17、转化生长因子β1（TGF-β1）、IL-6、IL-23、IL-βmRNA的表达。结果正常肾组织中未见IL-17表达。51例IgA肾病患者中,21例肾小管上皮细胞胞质IL-17表达阳性,2例肾间质淋巴细胞IL-17表达阳性,总阳性率为45．10％;并且随着肾小管间质病变加重,IL-17的表达逐步增多。IgA肾病患者PBMCs中IL-17、IL-6、IL-23、IL-1βmRNA的表达较正常人显著升高（P〈0．01）,TGF-β1mRNA的表达与正常人比较无统计学差异（P〉0．05）,IL-17mRNA与TGF-β1、IL-β1mRNA的表达呈正相关（r=0．67、0．71,P〈0．05）。IgA肾病患者肾小管间质IL-17的表达水平与尿位相畸形红细胞计数、肾小管间质病理积分呈正相关（r=0．60、0．67,P〈0．05）,IL-17mRNA的表达与血肌酐呈正相关（r=0．66,P〈0．05）。结论IgA肾病患者肾小管间质及外周血中IL-17表达增高,并与临床及病理预后指标密切相关,提示IL-17可能是参与IgA肾病发病及进展的因素之一。     

TSP-1在前列腺癌中的表达及临床意义

目的:探讨前列腺癌中肿瘤血管生成与凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)表达的相关性。方法:采用免疫组织化学方法检测22例前列腺癌中微血管密度(MVD)值和TSP-1的表达,采用RT-PCR检测7例前列腺癌组织中TSP-1mRNA的表达。结果:前列腺癌中TSP-1阳性表达率为72.7%(16/22),绝大多数表达位于肿瘤细胞的胞质中,少数表达位于肿瘤细胞外基质。在22例前列腺癌组织中,平均MVD为71.21±31.14/100倍视野,具有TSP-1强表达的肿瘤组织中MVD值较高。7例前列腺癌组织均表达TSP-1mRNA,TSP-1mRNA在前列腺癌的各期肿瘤组织呈高水平表达。TSP-1的免疫活性与微血管密度间呈显著地相关性(r=0.54,P=0.009)。结论:TSP-1在前列腺癌组织中呈高表达,与前列腺癌的血管生成相关,可能有促进前列腺癌血管生长的作用。     

CD34在IgA肾病肾小管间质病变中的表达及意义

目的:研究白细胞分化抗原CD34在IgA肾病肾小管间质病变中的表达变化,探讨其在IgA肾病进展过程中的作用.方法:应用免疫组织化学双标记技术检测不同小管间质病变程度的IgA肾病患者肾组织内CD34和α-平滑肌激动蛋白(α-SMA)的表达.肾小管间质病变分级采用Katafuchi积分.详细收集每例患者肾活检时的24 h尿蛋白定量(TUPr)及内生肌酐清除率(Ccr),并与免疫病理结果进行相关分析.结果:无小管间质病变组未见CD34的表达,α-SMA仅表达于间质的动脉壁;轻度小管间质病变组CD34和α-SMA表达散在,主要见于小管间质受损部位;中、重度病变组较轻度病变组CD34和α-SMA的表达显著增加(P＜0.05);小管间质内CD34的表达与α-SMA的表达及TUPr、Ccr具有显著相关性(P＜0.05).结论:随小管间质病变进展而出现的CD34表达增多可能在IgA肾病中发挥重要作用.