参附注射液对前列腺癌PC-3细胞凋亡诱导的影响

目的:研究参附注射液(SF)对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响及可能机制。方法:实验设立对照组和SF 50、100、200μl/ml组,Annexin V/PI染色流式细胞术检测细胞凋亡,RT-PCR检测p53 mRNA表达。结果:与对照组比较,作用24、48、72 h后,SF 50、100、200μl/ml组PC-3细胞存活率显著减少(P均0.05)。SF各组24 h存活率分别为(93.76±2.63)%、(81.21±1.80)%、(18.01±3.84)%;48 h存活率分别为(94.67±1.11)%、(78.33±2.89)%、(10.34±1.44)%;72 h存活率分别为(91.30±0.47)%、(36.67±1.56)%、(1.33±0.32)%,呈浓度和时间依赖性。作用48 h后,p53 mRNA表达明显升高(P0.05)。结论:SF可以诱导PC-3细胞凋亡,其作用机制可能与p53表达增高相关。     

趋化因子在前列腺癌生长、转移及其治疗中的作用

趋化因子是一系列具有趋化功能的细胞因子.前列腺癌作为危害男性健康的一大癌肿,其发病率愈发升高.越来越多的证据表明,趋化因子与前列腺癌的生长、侵袭、转移密切相关,现通过趋化因子在肿瘤中的生长、侵袭、转移中的作用,综述前列腺癌原位生长的效应、局部侵袭所产生的临床症状、骨转移的趋化因子相关分子机制及针对趋化因子的前列腺癌趋化因子靶向治疗.     

MCCC2在前列腺癌细胞系中的表达及其对前列腺癌转移影响的初步研究

目的分析比较MCCC2基因在不同类型前列腺癌细胞系中的表达差异,通过构建前列腺癌MCCC2基因稳定表达细胞株研究其表达对前列腺癌细胞迁移能力的影响,初步证实MCCC2基因在前列腺癌进展转移中的意义。方法利用RT-PCR方法检测MCCC2基因在局限性和转移性前列腺癌细胞中的表达情况,分析其表达与前列腺癌进展转移的关系;以前列腺癌细胞基因组cDNA为模板,通过PCR扩增MCCC2基因,重组构建含有Flag标签的pCDNA3．1（＋）．Flag．MCCC2质粒,包装慢病毒,转染前列腺癌细胞,通过荧光显微镜、RT—PCR和WesternBlot等方法鉴定MCCC2基因在细胞内的表达情况;利用Transwell及划痕实验研究MCCC2基因对前列腺癌细胞迁移能力的改变。结果较局限性前列腺癌细胞22Rvl,MCCC2基因mRNA在转移性前列腺癌细胞LNCaP、PC3及DUl45中的表达显著升高。同时,激素非依赖性前列腺癌细胞中MCCC2mRNA表达比激素依赖性前列腺癌细胞明显增强。进而,我们成功构建和包装了表达MCCC2基因的pCDNA3．1（＋）-Flag．MCCC2重组质粒及慢病毒,并转染前列腺癌细胞,筛选出稳定表达株;并且,通过Transwell和划痕实验证实MCCC2基因表达与前列腺癌细胞的迁移能力呈正性关联。结论局限性和转移性前列腺癌细胞、激素依赖性和非依赖性前列腺癌细胞中MCCC2基因的表达存在明显差异,提示MCCC2可能在前列腺癌的进展转移过程中发挥重要作用;成功构建了MCCC2基因稳定表达的前列腺癌细胞株,并初步证实其过表达可以促进前列腺癌细胞的迁移能力,为进一步研究MCCC2基因在前列腺癌进展、转移等过程中的具体作用奠定了实验基础。     

黄酮类化合物对前列腺癌细胞的凋亡诱导作用

黄酮类化合物是广泛存在于植物中的一类多酚类化合物,具有广泛的生物活性,近年来研究发现其在抗肿瘤方面具有显著疗效,主要表现在抗细胞增殖、诱导细胞凋亡、干预细胞信号转导和增强抑癌基因活性及抑制癌基因表达等方面。本文就黄酮类化合物诱导前列腺癌细胞凋亡的作用机制进行综述。     

趋化因子CXC受体4在前列腺癌细胞中的表达

目的:对趋化因子CXC受体4(CXCR4)在前列腺癌(PCa)组织以及PCa细胞系PC-3M中的表达进行研究。方法:提取正常前列腺组织、PCa组织和PC-3M细胞的总RNA,采用RT-PCR方法,于mRNA水平检测其CXCR4的表达情况;制备PC-3M细胞爬片和MCF-7细胞爬片(人乳腺癌细胞系,作为阳性对照),采用SABC免疫组织化学方法,于蛋白水平测定CXCR4在PC-3M细胞中的表达。结果:RT-PCR方法显示PC-3M细胞和PCa组织CXCR4 mRNA有较高水平的表达,正常前列腺组织未见CXCR4 mRNA的表达;SABC显示PC-3M细胞CXCR4蛋白呈强表达。结论:CXCR4在PCa组织和PC-3M细胞中有明显表达,在正常前列腺组织中无明显表达,CXCR4可能在PCa的发生发展中发挥重要作用。     

miR-21诱导FOXO1调控前列腺癌细胞EMT及侵袭转移

目的探讨miR-21诱导FOXO1调控前列腺癌细胞EMT及侵袭转移。方法人工合成miR-21 mimic/inhibitor及其对照组序列,分别转入前列腺癌细胞株C4-2、DU145中,收集细胞行RT-qPCR检测miR-21、FOXO1 mRNA表达,行Western blot检测FOXO1、E-cadherin和N-cadherin表达,行Transwell试验检测转染后前列腺癌细胞侵袭透膜能力变化。结果前列腺癌细胞株C4-2、DU145转染miR-21 mimic/inhibitor及对照序列后,RT-qPCR检测miR-21表达升高/降低明显(P0.05),RT-qPCR检测FOXO1 mRNA表达与miR-21一致。在Western blot结果中,转染miR-21 mimic前列腺癌细胞FOXO1、N-cadherin表达高于对照组,E-cadherin表达相反;转染miR-21 inhibitor前列腺癌细胞FOXO1、N-cadherin表达低于对照组,E-cadherin表达相反。Transwell试验显示,转染miR-21 mimic前列腺癌细胞侵袭透膜能力较对照组增强(P0.01),转染miR-21 inhibitor前列腺癌细胞侵袭能力较对照组减弱(P0.01)。结论 miR-21通过诱导FOXO1调控前列腺癌细胞EMT及侵袭转移。     

乙酰左旋肉碱预处理对低氧低糖诱导PC12细胞凋亡的影响

目的 评价乙酰左旋肉碱预处理对低氧低糖诱导PC12细胞凋亡的影响.方法 PC12细胞接种于96孔板中,采用随机数字表法,将细胞随机分为5组(n=6):对照组(C组)、细胞损伤组(Ⅰ组)和不同浓度乙酰左旋肉碱预处理组(A1-3组).C组加入含葡萄糖4.5 g/L的DMEM溶液孵育3h;Ⅰ组加入含葡萄糖0.5 g/L和Na2SO4 3 mmol/L的DMEM溶液孵育3h;A1-3组分别加入0.2、0.4和0.6 mmol/L乙酰左旋肉碱孵育24h,然后加入含葡萄糖0.5 g/L和Na2S2O4 3mmol/L的DMEM溶液孵育3h.采用MTT法检测细胞活力,采用TUNEL法检测细胞凋亡率,测定细胞SOD和ATP酶的活性和MDA含量.结果 与C组比较,Ⅰ组细胞活力降低,细胞凋亡率升高,SOD和ATP酶的活性降低,MDA含量增加(P＜0.05),A1-3组细胞活力、细胞凋亡率、SOD和ATP酶的活性和MDA含量差异无统计学意义(P＞0.05);与Ⅰ组比较,A1-3组细胞活力升高,细胞凋亡率降低,SOD和ATP酶的活性升高,MDA含量下降(P＜ 0.05);A1-3组间细胞活力、细胞凋亡率、SOD和ATP酶的活性和MDA含量比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 乙酰左旋肉碱预处理可通过抑制细胞凋亡,减轻低氧低糖诱导PC12细胞损伤.     

低氧诱导因子-3α对胎盘滋养层细胞生长的影响

目的 研究低氧诱导因子-3α(HIF-3α)对人绒毛膜滋养层细胞(HTR8/SVneo)生物学行为的影响.方法 构建人HIF-3α过表达载体(pcDNA3.1-HIF-3α),并筛选HIF-3α抑制剂(HIF-3α siRNA)最佳靶序列;用2.5μg的pcDNA3.1-HIF-3α质粒和75 pmol/L的HIF-3...     

多沙唑嗪诱导前列腺癌细胞的凋亡

丛生蛋白是一种与凋亡有关的多功能糖蛋白，可以诱导多种细胞发生凋亡。为了研究经25lμmol／L多沙唑嗪处理的雄激素非依赖性前列腺癌细胞（PC-3）中，丛生蛋白的表达水平与PC-3细胞凋亡之间的关系，Youm等进行了一项研究，研究者应用DNA碎裂片段，逆转录聚合酶链反应，末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术（TUNEL）来评估细胞凋亡的程度和丛生蛋白mRNA及蛋白质的基因时空表达。     

姜黄素对雄激素依赖性前列腺癌细胞的诱导凋亡作用

目的:探讨姜黄素对雄激素依赖性前列腺癌细胞株(LNCaP)的诱导凋亡作用。方法:分别用10、25、50、75、100μmol/L浓度的姜黄素作用于LNCaP细胞,5、12、24 h后MTT法检测细胞生长活性;24 h后流式细胞仪测定细胞周期及细胞凋亡的变化,透射电镜观察细胞超微结构变化;5 h后W estern印迹法检测细胞内IκBα的表达。结果:姜黄素能显著抑制LNCaP细胞的生长,呈剂量与时间依赖性,不同浓度姜黄素组之间与不同作用时间组之间的差异均有显著性意义(P均<0.05)。姜黄素诱导LNCaP细胞出现剂量依赖性G2/M期阻滞(P<0.01),各浓度组凋亡细胞比例均显著高于空白对照组(P均<0.05),差异有显著性意义;姜黄素作用24 h后LNCaP细胞出现凋亡的形态学改变;不同浓度姜黄素作用后,LNCaP细胞内IκBα的表达无变化。结论:姜黄素能显著抑制LNCaP细胞的体外生长,并促进其凋亡。     

低氧对肌腱细胞基因表达谱的影响

目的 探讨低氧对肌腱细胞基因表达谱的影响.方法 酶消化法分离得到的肌腱细胞分别在低氧（2％O2）和常规氧浓度（21％O2）下进行培养,第1代肌腱细胞进行表达谱检测,并用RT-PCR对其中4个差异表达基因进行验证.结果 低氧培养组与常规氧浓度组相比,有40个基因表达差异,且全部在低氧组表达上调.选取的4个差异表达基因的RT-PCR的验证结果与芯片结果一致.结论 低氧促进肌腱细胞增殖涉及多个基因参与.     

ABL-N诱导前列腺癌细胞凋亡及其机制

目的 探讨旋覆花内酯(ABL)-N诱导前列腺癌细胞凋亡的作用及其机制.方法 0～40μmol/L ABL-N分别处理前列腺痛细胞后,利用噻唑蓝(MTF)检测对细胞增长的抑制作用;流式细胞学、TUNEL染色等方法检测其诱导凋亡的作用,并检测Capase活性,Western blot测定bax、bel-2水平变化.结果 ABL-N明显抑制前列腺癌细胞PC3、LNCaP及DU145的生长,并呈剂量依赖性.40 μmol/L ABL-N作用24 h后,(73.34±4.41)%的PrEC细胞存活,而3种前列腺癌细胞分别为(11.92±2.31)%、(12.55±1.94)%、(13.28±2.26)%.膜联蛋白/碘化丙锭(Annexin V/PI)及TUNEL染色表明ABL-N呈剂量依赖性诱导PC3凋亡.ABL-N可激活Caspase活性,尤其Caspase-3,20μmol/L ABL-N作用24 h后其活性是对照组的4.23倍;bax/bcl-2比率随浓度增加明显增高.结论 ABL-N可通过Caspase途径及bax/bcl-2蛋白途径,诱导PC3等前列腺癌细胞凋亡,抑制前列腺癌细胞增殖.

Abstract：

Objective To explore the ABL-N-induced apoptosis of human prostate cancer cells and the mechansim. Methods After administration of 0-40 μmol/L ABL-N for 24 h, the effects of ABL-N on the induction of apoptosis in human prostate cancer cells PC3 were measured by methyl thiazol tetrazolium ( MTT) colorimetry, Annexin V/propidium iodide staining and TUNEL staining. The levels of bax and bcl-2 were tested by Western blotting. Caspase activity was assayed. Results ABL-N treatment to PC3,LNCaP, and DU145 cells resulted in a dose-dependent inhibition of cell growth without any substantial effect on normal human prostate epithelial PrEc cells. About (73. 34 ±4. 41)% of PrEC cells were viable following a 24-h exposure to 40 μmol/L ABL-N, whereas only (11. 92 ± 2. 31) % of PC3, (12. 55 ±1. 94) % of LNcap, and (13. 28 ± 2. 26) % of DU145 cells survived under similar conditions of ABL-N treatment. ABL-N treatment resulted in a dose-dependent induction of apoptosis of PC3 cells. Furthermore,ABL-N induced the activation of Caspases, especially Caspase 3. The Caspase-3 activity of PC3 cells treated with ABL-N (20 μmol/L) (0. 95) was significantly increased by about 4. 2-fold of the untreated cells (0. 24) at 24 h. The ratio of bax/bcl-2 was also increased significantly. Conclusion ABL-N induces apoptosis though the activation of Caspase 3 and pro- and anti-apoptotic Bcl-2 family proteins in prostate cancer cells.     

多沙唑嗪诱导前列腺癌细胞的调亡

丛生蛋白是一种与调亡有关的多功能糖蛋白,可以诱导多种细胞发生调亡.为了研究经25μmol/L多沙唑嗪处理的雄激素非依赖性前列腺癌细胞(PC-3)中,丛生蛋白的表达水平与PC-3细胞调亡之间的关系,Youm等进行了一项研究,研究者应用DNA碎裂片段,逆转录聚合酶链反应,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)来评估细胞调亡的程度和丛生蛋白mRNA及蛋白质的基因时空表达.     

趋化因子受体4在前列腺癌中的表达及其与转移的相关性研究

目的：研究趋化因子受体4（CXCR4）在前列腺癌（PCa）组织中的表达及其与患者血清PSA水平的相关性,探讨CXCR4在PCa转移中的作用。方法：采用EnVision免疫组织化学染色方法检测40例PCa组织（包括15例转移和25例未转移PCa组织）及配对癌旁组织和10例正常前列腺组织中CXCR4的表达情况,统计分析PCa与癌旁和正常组织CXCR4的表达差异,以及CXCR4表达与血清PSA水平及转移的相关性。结果：CXCR4蛋白在PCa中高表达,其阳性表达率为82．5％（33／40）;癌旁组织表达较低,阳性表达率为37．5％（15／40）;而正常前列腺组织中未见CXCR4表达（0／10）。与癌旁及正常组织相比,PCa组织表达CXCR4显著增高,差异有统计学意义（P〈O．01）;而癌旁组织与正常组织CXCR4表达差异则无统计学意义（P〉O．05）。PCa中CXCR4表达与癌转移特征的相关性差异具有统计学意义（P〈O．05）,不同血清PSA水平的癌组织CXCR4表达差异则无统计学意义（P〉0．05）。结论：CXCR4在PCa组织尤其在转移性PCa组织中高表达。CXCR4可能是一个独立的,较有效的转移预测指标,可为临床判断预后提供参考。研究结果为进一步研究CXCR4／SDF1与转移性PCa的关系奠定了基础。     

Nur77对前列腺癌细胞生长的影响

目的:本研究试图揭示Nur77对前列腺癌细胞生长的影响,并探索其用于治疗前列腺癌的价值.方法:采用Western印迹技术检测Nur77蛋白在前列腺癌组织及细胞中的表达情况,并且采用流式细胞仪等检测Nur77对前列腺癌细胞的生长和凋亡的影响.结果:人前列腺癌组织和细胞中存在Nur77和雄激素受体(AR)的表达,过表达的N...     

苦参碱对雄激素依赖性前列腺癌细胞的影响

目的：探讨苦参碱（Matrine）对雄激素依赖性前列腺癌细胞株（LNCaP）凋亡及前列腺特异抗原（prostate specific antigen,PSA）表达的影响。方法：分别用0.5g／L、1.0g／L、1.5g／L、2.0g／L浓度的苦参碱作用于LNCaP细胞12h、24h、36h后MTT法检测细胞生长活性;24h后流式细胞仪测定细胞凋亡的变化;24h后Western印迹法检测细胞内Bel-2和Bax的表达;12h、24h、36h后化学发光法检测LNCaP细胞培养液中PSA的变化。结果：苦参碱能抑制LNCaP细胞的生长,呈剂量与时间依赖性,不同浓度苦参碱组之间与不同作用时间组之间的差异均有统计学意义（P〈0.05）。苦参碱诱导LNCaP细胞凋亡,各浓度组凋亡细胞比例均显著高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;LNCaP细胞内Bcl-2含量呈浓度依赖性下降,Bax含量呈浓度依赖性升高（P〈0.01）;LNCaP细胞培养液中PSA的表达显著下降（P均〈0.05）。结论：苦参碱能显著抑制LNCaP细胞的体外生长,诱导其凋亡,并抑制PSA的表达。     

红景天苷对低氧诱导大鼠海绵体平滑肌细胞凋亡的抑制作用

目的:探讨红景天苷对低氧诱导的大鼠海绵体平滑肌细胞(CCSMCs)凋亡的影响。方法:采用酶消化法体外培养大鼠CCSMCs,抗α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和结蛋白(Desmin)免疫荧光鉴定CCSMCs纯度;通过MTT法筛选红景天苷无毒剂量;以低氧混合气体(1%O2,5%CO2,94%N2)通入缺氧小室建立细胞低氧模型;细胞分为3组:正常组,低氧组,红景天苷(32μg/ml)干预组,采用流式细胞术观察各组CCSMCs凋亡的情况,Western印迹检测caspase-3蛋白表达水平。结果:成功培养大鼠CCSMCs,免疫荧光显示绝大部分细胞α-SMA、Desmin阳性;≤32μg/ml的红景天苷对细胞无明显的毒性;低氧组CCSMCs早期凋亡[(18.69±1.29)%]较正常组[(12.77±1.41)%]明显增多(P0.01),低氧组晚期凋亡[(21.03±1.53)%]较正常组[(14.63±2.00)%]亦增加(P0.05),同时,活化型caspase-3蛋白表达上升(P0.01);32μg/ml红景天苷剂量下可有效降低低氧诱导的CCSMCs早期凋亡率[(13.46 1.87)%](P0.01),活化型caspase-3蛋白表达下降(P0.01)。结论:红景天苷能够降低低氧诱导的CCSMCs活化型caspase-3蛋白的表达,抑制了低氧诱导的CCSMCs凋亡。     

氯化钴诱导低氧对肿瘤细胞生长代谢影响的研究进展

氧稳态的平衡和稳定是机体新陈代谢和维持正常生命活动的必要条件,在某些生理或病理条件下,机体内的氧稳态失衡,引起细胞或组织的整体或局部的缺氧。肿瘤都是以细胞的过度增殖为特点,导致瘤细胞处于低氧或缺氧的环境,氯化钴(Co Cl)作为化学性低氧模拟剂,主要用于细胞内缺氧造模,其机制是2Co2+与Fe2+竞争性结合血红蛋白,抑制正常的含氧血红蛋白的形成,导致体内的脱氧血红蛋白的含量增加,从而阻断了氧信号传导系统中氧感受器与氧结合,使细胞的含氧量下降,引起细胞在不缺氧的条件下"感觉"缺氧,同时诱导促进或抑制细胞凋亡作用的低氧诱导因子-1(HIF-1)的表达。因此,了解Co Cl2对肿瘤细胞凋亡的促进或抑制作用的机制,并根据肿瘤细胞类型的不同,合理运用低氧环境协同Co Cl2细胞毒性作用和增强肿瘤细胞对放化疗的敏感性,从而能更好地应用于临床。     

缺氧诱导因子1α过表达对前列腺癌细胞血管生成能力的影响

目的:观察转染缺氧诱导因子1α(HIF-1α)对人前列腺癌细胞血管形成相关蛋白的影响,并探讨其分子机制。方法:用脂质体Lipofectamine2000包装重组真核表达载体pCDNA3.1(-)/HIF-1α后转染人前列腺癌细胞LNCaP,600μg/ml G418筛选稳定表达的抗性克隆。免疫荧光及Western印迹法鉴定HIF-1α过表达,Western印迹法检测血管形成相关蛋白血管内皮生长因子(VEGF)、iNOS、促血管生成素2(Ang-2)。结果:与未转染细胞LN-CaP相比,转染细胞LNCaP/HIF-1α中出现明显的HIF-1α蛋白条带,并激发出较强荧光,VEGF、iNOS表达增加,Ang-2未见明显变化。结论:HIF-1α过表达能够诱导LNCaP细胞血管形成相关蛋白表达增多,进而增强其体外血管形成能力。     

缺氧诱导因子1α过表达对前列腺癌细胞血管生成能力的影响

目的：观察转染缺氧诱导因子1α（HIF-1α）对人前列腺癌细胞血管形成相关蛋白的影响,并探讨其分子机制。方法：用脂质体Lipofectamine2000包装重组真核表达载体pCDNA3.1（-）/HIF-1α后转染人前列腺癌细胞LNCaP,600μg/ml G418筛选稳定表达的抗性克隆。免疫荧光及Western印迹法鉴定HIF-1α过表达,Western印迹法检测血管形成相关蛋白血管内皮生长因子（VEGF）、iNOS、促血管生成素2（Ang-2）。结果：与未转染细胞LN-CaP相比,转染细胞LNCaP/HIF-1α中出现明显的HIF-1α蛋白条带,并激发出较强荧光,VEGF、iNOS表达增加,Ang-2未见明显变化。结论：HIF-1α过表达能够诱导LNCaP细胞血管形成相关蛋白表达增多,进而增强其体外血管形成能力。