TLR4介导大鼠肾脏缺氧复氧炎症反应依赖于MyD88

目的：探讨MyD88是否参与了TLR介导大鼠肾脏缺氧复氧（hypoxia/reoxygenation,H/R）引起的炎症反应.方法：体外分离获得Wistar大鼠原代肾小管上皮细胞（proximal tubule epithelial cells,PTECs）,建立H/R模型.采用TLR4siRNA干扰PTECs,检测白细胞介素8（interleukin-8,IL-8）和肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α,TNF-α）的表达.之后,加入髓样分化因子88（myeloid differentiation factor 88,MyD88）的抑制剂ST2825后,检测IL-8和TNF-α的表达.结果：TLR4表达沉默后,IL-8、TNF-α和MyD88的表达均显著下降（P〈0.05）;加入ST2825后,IL-8、TNF-α和MyD88的表达均显著下降（P〈0.05）,且抑制MyD88活性后显著降低细胞的凋亡水平（P〈0.05）.结论：MyD88参与了TLR4介导的大鼠肾脏缺氧复氧引起的炎症反应.     

缺血/再灌注过程中信号转导通路的磷酸化调节

器官移植、中风、心肌梗死等会引发局部缺血/再灌注（Ischemia／Reperfusion,I／R）。炎性细胞的活化和细胞毒素因子的表达与再灌注损伤密切相关。这些炎性介质的活化会启动相关下游磷酸化或去磷酸化的级联反应。该文仅综述I／R损伤过程中信号转导通路磷酸化调节机制的研究进展。     

Toll样受体4与肾脏疾病研究进展

Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)是一种模式识别受体,是链接固有免疫和获得性免疫的桥梁,在免疫系统的调节中有重要作用,它可通过激活信号转导通路、促进炎症因子表达等诱发炎症反应.TLR4不仅表达于各种免疫细胞表面,还在肾小球系膜细胞、肾小管上皮细胞等都有广泛表达.近年来,TLR4在肾脏疾病中的作用受到越来越多的关注,本文就TLR4在肾缺血再灌注损伤、糖尿病肾病、急性肾损伤以及尿路感染等肾脏疾病中的作用作一综述.     

七氟醚预处理对大鼠肺缺血-再灌注损伤的保护作用及对TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响

目的 探讨七氟醚预处理对肺缺血-再灌注损伤(IRI)的保护作用及对Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子(NF)-κB信号通路的影响.方法 将40只健康成年SD大鼠随机分为对照组(Sham组)、模型组(LIRI组)、七氟醚预处理组(Sev组)和TLR4抑制剂TAK-242联合七氟醚预处理组...     

急性缺血-再灌注肾损伤中炎症信号通路研究进展

肾缺血-再灌注损伤是急性肾损伤的一个常见的病因,动物模型研究结果表明,缺血性急性肾损伤与小管间质性炎症反应密切相关,炎症加剧了肾损伤.由内皮功能异常触发的炎症级联反应可以被缺血的近端小管产生的一些因子显著放大.这些因子包括致炎症因子(如肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、白细胞介素1),趋化因子(如单核细胞趋化蛋白1、白细胞介素8,激活正常T淋巴细胞表达和分泌因子).细胞因子及趋化因子的数量以及炎性细胞的浸润水平被认为是反映缺血损伤后局部炎症反应强弱的标志.目前有很多学者致力于揭示急性肾损伤时的炎症反应及细胞信号传导通路,以期找到缺血性急性肾损伤合适的临床治疗途径.     

急性缺血-再灌注肾损伤中炎症信号通路研究进展

肾缺血-再灌注损伤是急性肾损伤的一个常见的病因,动物模型研究结果表明,缺血性急性肾损伤与小管间质性炎症反应密切相关,炎症加剧了肾损伤.由内皮功能异常触发的炎症级联反应可以被缺血的近端小管产生的一些因子显著放大.这些因子包括致炎症因子(如肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、白细胞介素1),趋化因子(如单核细胞趋化蛋白1、白细胞介素8,激活正常T淋巴细胞表达和分泌因子).细胞因子及趋化因子的数量以及炎性细胞的浸润水平被认为是反映缺血损伤后局部炎症反应强弱的标志.目前有很多学者致力于揭示急性肾损伤时的炎症反应及细胞信号传导通路,以期找到缺血性急性肾损伤合适的临床治疗途径.     

急性缺血-再灌注肾损伤中炎症信号通路研究进展

肾缺血-再灌注损伤是急性肾损伤的一个常见的病因,动物模型研究结果表明,缺血性急性肾损伤与小管间质性炎症反应密切相关,炎症加剧了肾损伤.由内皮功能异常触发的炎症级联反应可以被缺血的近端小管产生的一些因子显著放大.这些因子包括致炎症因子(如肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、白细胞介素1),趋化因子(如单核细胞趋化蛋白1、白细胞介素8,激活正常T淋巴细胞表达和分泌因子).细胞因子及趋化因子的数量以及炎性细胞的浸润水平被认为是反映缺血损伤后局部炎症反应强弱的标志.目前有很多学者致力于揭示急性肾损伤时的炎症反应及细胞信号传导通路,以期找到缺血性急性肾损伤合适的临床治疗途径.     

TOLL样受体信号途径与肾缺血再灌注

缺血再灌注损伤（IRI）或称再灌注损伤,是指组织缺血一段时间,当血流重新恢复后,细胞功能代谢障碍及结构破坏反而较缺血时进一步加重,器官功能进一步恶化的综合征。根据大量实验与临床研究,虽然再灌注损伤主要与氧自由基损伤及钙超载有关,但是炎症因子链式释放和中性粒细胞浸润在发病中可能起决定性的作用。本文将从炎症因子释放通路与粒细胞的关系出发,探讨Toll样受体（TLRs）与肾脏缺血再灌注损伤之间的关系。     

Toll样受体2/4在糖尿病大鼠肾缺血再灌注损伤时的表达及肾康注射液的保护作用

目的探讨糖尿病(DM)大鼠肾缺血再灌注损伤(IRI)的可能机制及肾康注射液(SKI)的保护作用。 方法采用高糖高脂饮食诱导6周联合小剂量链脲佐菌素的方法建立DM大鼠模型,将造模成功的SD大鼠随机分为糖尿病肾缺血再灌注组(DMIR)、糖尿病肾缺血再灌注SKI治疗组(DMIR＋SKI)、糖尿病假手术组(DMS)和正常对照组(NCS)。DMIR＋SKI组大鼠应用SKI[6.0 g/(kg·d)]干预8周,其它组用等量生理盐水。应用右肾切除联合左肾动脉夹闭45 min后再灌注24 h的方法诱导肾IRI。最后,抽血、留取肾组织。ELISA法检测大鼠血清高迁移率族蛋白(HMGB1)水平;免疫组化方法检测肾组织HMGB1、Toll样受体(TLR)2和TLR4的表达;免疫印迹法和实时定量PCR法检测肾组织TLR2、TLR4、髓样分化因子88 (MyD88),核因子-κBp56 (NF-κBp56)的表达。 结果DMIR组大鼠血清HMGB1水平,肾小管HMGB1、TLR2和TLR4的表达以及肾组织TLR2、TLR4、MyD88和NF-κBp56的蛋白及mRNA水平均明显高于DMS组(P<0.01);经过SKI干预治疗8周,DMIR＋SKI组大鼠的上述指标均明显低于DMIR组(P<0.01)。 结论SKI可通过抑制TLR2/4炎症反应通路,减轻DM大鼠肾IRI炎症反应而起到肾脏保护作用。     

TLR4/MyD88依赖性通路和Caveolin-1的表达与2型糖尿病神经病变患者炎症状态的相关性

目的探讨单核细胞Toll样受体4(TLR4)/下游髓样分化蛋白(MyD88)依赖性通路和陷窝蛋白-1(Caveolin-1)的表达与2型糖尿病神经病变患者炎症状态的相关性。方法 120例受试者均分为三组:健康志愿者组(NC组)、2型糖尿病不伴有神经病变组(TDM组)和2型糖尿病伴有神经病变组(DPN组);单次抽取各研究对象清晨空腹血8ml;应用密度梯度离心法分离和提取外周血单核细胞;分别通过RT-PCR检测Caveolin-1mRNA和TLR4表达,Western blot检测Caveolin-1和TLR4及其下游信号(MyD88、IκB、p-IκB)蛋白表达,ELISA检测血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的水平。结果与TDM和NC组比较,DPN组患者血浆TNF-α、IL-6和TLR4及其下游信号蛋白表达明显增加(P0.05),而Caveolin-1表达明显降低(P0.05);Spearman相关性分析显示TLR4mRNA与TNF-α(r=0.723,P0.01)和IL-6(r=0.486,P0.01)呈正相关,且与TNF-α密切程度高于IL-6,与Caveolin-1mRNA呈负相关(r=-0.782,P0.01)。结论 DPN患者炎症状态与单核细胞TLR4/MyD88依赖性通路介导的炎症级联反应相关;低表达的Caveolin-1与DPN患者TLR4/MyD88依赖性通路异常活化有关。     

肝移植术后肝缺血再灌注损伤保护作用的研究进展

肝缺血再灌注损伤是肝移植术后最常见的并发症。活性氧生成过多导致的氧化应激、自噬、炎症反应是造成肝缺血再灌注损伤的重要步骤。其中,核转录因子红系2相关因子2被认为是抗氧化反应的主要调节因子,PI3K-Akt-mTOR通路被认为是自噬的重要通路,HMGB1-TLR4-NF-κB通路被认为是导致炎症的关键信号通路,本文将从上述通路及调节分子出发,分别从基因、分子、药物等方面研究对肝缺血再灌注细胞的抗氧化、抗炎、调节自噬作用,探究对肝缺血再灌注细胞的保护作用。     

SHH信号转导通路参与炎症反应发生机制的研究进展

炎症反应通过细胞因子的作用参与多种疾病的发生和发展,如缺血性疾病、糖尿病等.Hedgehog(HH)信号通路作为与发育相关的重要信号转导途径,近来被报道与保护细胞免受细胞因子相关的细胞毒性作用相关.其中音猬因子(SHH)信号通路研究最多.目前有研究表明SHH信号转导通路可能在炎症反应的发生机制中起关键作用.     

异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时TLR4和MyD88表达的影响

目的 评价异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时Toll样受体4(TLR4)和髓样分化因子88(MyD88)表达的影响.方法 雄性成年SD大鼠54只,体重250～300 g,随机分为3组(n=18):假手术组(S组)仅分离血管,不留置线栓;脑缺血再灌注组(IR组)采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,缺血2 h,再灌注24 h;异氟醚预处理(IP组)吸入2%异氟醚,1h/d,连续5 d,处理结束后24 h时制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型.再灌注24 h时进行神经功能缺陷评分,然后每组处死3只大鼠,测定脑梗死体积.分别于再灌注24、48和72 h时,处死5只大鼠,取右侧大脑缺血部位额叶皮质,采用Western blot法测定TLR4、MyD88和NF-κB的表达水平.结果 与S组比较,IR组和IP组神经功能缺陷评分升高,脑梗死体积增大,IR组TLR4、MyD88和NF-κB的表达均上调,IP组MyD88和NF-κB的表达上调(P＜0.05);与IR组比较,IP组神经功能缺陷评分降低,脑梗死体积减小,TLR4、MyD88和NF-κB的表达均下调(P＜0.05).结论 异氟烷预处理可通过抑制脑组织TLR4和MyD88的表达,减轻炎性反应,从而减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤.     

TLR4/MyD88信号通路在膝骨关节炎滑膜炎中的作用

Toll样受体4是重要的固有免疫模式识别受体,通过识别损伤相关分子模式及病原相关分子模式,启动髓样分化因子 88依赖途径后激活NF-κB信号通路,引发炎性介质及细胞因子的分泌,触发固有免疫应答,在膝骨关节炎滑膜炎的发生中发挥作用。研究TLR4/MyD88信号通路在膝骨关节炎滑膜炎中的作用,以期更深入的阐明膝骨关节炎滑膜炎发病机制,为膝骨关节炎滑膜炎的诊疗提供理论依据和参考。     

Toll样受体4介导小鼠肠缺血再灌注诱导的肺损伤及肺炎症反应

内脏器官缺血是临床重症患者的常见病变之一,不但会造成局部内脏器官的缺血性损害,而且会引发远隔部位脏器病变.在诸多脏器中,肺脏最易受到机体远隔脏器缺血性病变的影响,成为机体失控炎症损害的主要靶器官之一,常常迅速进展为急性呼吸窘迫综合征,病情凶险顽固,预后极差.前期研究证实,局部脏器缺血引发的炎症反应是肺损伤的发病基础,肺损伤的本质是全身炎症反应在肺部的表现,是炎症肺损伤.在炎症肺损伤发生发展的过程中,诸多炎性细胞和炎症介质通过不同的信号转导途径,构成炎症反应的“细胞刚络”和“生物介质网络”,直接参与炎症肺损伤的发生发展,但其潜在的分子生物学机制目前还不甚明朗.本研究拟通过利用Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)基因突变小鼠和TLR4野生型小鼠,在肠缺血再灌注(IR)损伤基础上,以肺脏为靶器官,初步研究TLR4信号通路在脏器IR引发炎症肺损伤中的作用机制.     

Toll样受体4与肾脏纤维化研究进展

<正>肾脏纤维化是各种慢性肾脏病进展至终末期肾病的共同病理特征,由多种细胞、细胞因子及生长因子共同参与,最终导致细胞外基质合成增多而致纤维化,纤维化的发生发展中与炎症反应共存[1,2]。Toll样受体4(toll-like receptor4,TLR4)是人类发现的第一个TLR相关蛋白,TLR4通过识别病原相关分子模式的特有抗原成分而进行信号识别和传导,在急性炎症反应的调节、细胞信号的转导和纤维化发生发展中起重要作用。目前研究提示,TLR4是介导肾脏炎症及纤维化的重要信号分子,TLR4与其配体结合后,可通过激活My D88依赖的信号通路和非My D88依赖的信号通路(TRIF通路),诱导炎症及致纤维化等因子的激活及释放,从而导致肾脏纤维化的发生发展。     

髓样分化因子88的研究进展：把握TLR信号通路中的瓶颈

目的总结髓样分化因子88（myeloid differentiation factor 88,MyD88）在Toll样受体（toll like receptor,TLR）信号通路中的作用、MyD88与相关疾病的关系及其潜在的应用价值。方法收集近年来国内外有关MyD88在TLR信号通路中的作用及其与相关疾病关系的文献并作综述。结果 MyD88是一种重要的接头蛋白,在TLR信号通路中处于节点位置,起到承上启下的作用,是通路中的＂瓶颈＂。其传导的信号可导致下游多种转录因子的激活,从而启动先天性免疫反应,并且其与多种疾病的发生均有关。结论 MyD88是TLR信号通路的核心接头蛋白,在先天性免疫、获得性免疫和多种疾病的发生中均起着重要作用,是一个潜在的临床疾病的治疗靶点。     

TLR4和NF-κB在大鼠肾缺血再灌注损伤中的表达及意义

目的：观察大鼠肾缺血再灌注损伤后Toll样受体4（TLR4）和核因子-κB（NF-kB）的表达变化及其关系.方法：将40只SD大鼠随机等分为假手术组（S组）和肾缺血再灌注损伤组（I/R组）,建立肾缺血再灌注模型.在肾缺血再灌注后24 h切取肾脏.采用免疫组织化学法观察TLR4蛋自及NF-κB蛋白在肾脏组织中的表达变化及其相关性 采用半定肇逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测两组肾组织中TLR4、NF-κB的mRNA水平表达变化.结果：TLR4蛋白在S组大鼠肾小管细胞中有少量表达,在I/R组24 h后肾组织中表达明显增加,与S组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）.NF-κB P65蛋白在S组大鼠肾小管细胞胞浆和少量胞核中有表达.在I/R组24 h后肾小管细胞胞浆和胞核均可见NF-κB P65明显表达.差异有统计学意义（P〈0.01）.TLR4和NF-κB在肾缺血再灌注损伤组织中的表达具有明显的相关性.I/R组中的TLR4 mRNA、NF-κB mRNA表达均较S组上调,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论：大鼠肾缺血冉灌注损伤后,肾组织TLR4和NF-κB P65的表达明显上调,且有明显的相关性.TLR4有可能通过激活NF-κB继而引起下游的炎症因子募集,介导肾缺血再灌注损伤.     

远隔缺血预处理联合七氟醚后处理对大鼠心肌缺血-再灌注时TLR4/NF-κBp65的影响

目的评价远隔缺血预处理联合七氟醚后处理对大鼠心肌缺血-再灌注时的影响及其机制。方法成年雄性SD大鼠75只,体重250～300 g,成功建立Langendorff离体灌注模型的大鼠心脏之后,采用随机数字表法分为五组(n=15):对照组(C组)、缺血-再灌注组(IR组)、远隔缺血预处理组(R组)、七氟醚后处理组(S组)和远隔缺血预处理+七氟醚后处理组(RS组)。C组持续灌注150 min。IR组给予缺血-再灌注处理。R组给予远隔缺血预处理后,给予缺血-再灌注处理。S组给予缺血-再灌注处理,于再灌注初给予经2.4%七氟醚饱和的K-H液灌注2 min。RS组给予远隔缺血预处理后给予缺血-再灌注处理,于再灌注初给予经2.4%七氟醚饱和的K-H液灌注2 min。再灌注末,采用1%2,3,5氯化三苯基四氮唑测定心肌梗死体积百分比。采用ELISA法检测肌酸激脢同工酶(CK-MB),白细胞介素-8(IL-8),白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度。采用Western blot法测定Toll-样受体4(TLR4),高迁移率族蛋白B1(HMGB-1),髓样分化因子88(MyD88),人核因子κB抑制蛋白α(IKB-α),核因子-κBp65(NF-κBp65),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3),B淋巴细胞瘤基因-2(Bcl-2)和Bcl-2相关蛋白(BAX)的蛋白含量。采用HE染色观察心肌组织形态学变化。结果与C组比较,IR组、R组、S组和RS组心肌梗死体积百分比明显增加,CK-MB、IL-8、IL-6和TNF-α浓度,TLR4、HMGB-1、MyD88、NF-κBp65、Caspase3和BAX蛋白含量均明显升高,IKB-α和Bcl-2蛋白含量明显降低(P0.05),心肌组织病理形态明显恶化。与IR组比较,R组和S组心肌梗死体积百分比明显减小,CK-MB、IL-8、IL-6和TNF-α浓度,TLR4、HMGB-1、MyD88、NF-κBp65、Caspase3和BAX蛋白含量均明显降低,IKB-α和Bcl-2蛋白含量明显升高(P0.05),心肌组织病理形态明显改善。与R组和S组比较,RS组心肌梗死体积百分比明显减小,CK-MB、IL-8、IL-6和TNF-α浓度,TLR4、HMGB-1、MyD88、NF-κBp65、Caspase3和BAX蛋白含量均明显降低,IKB-α和Bcl-2蛋白含量明显升高(P0.05),心肌组织病理形态明显改善。结论远隔缺血预处理和七氟醚后处理均可抑制TLR4/NF-κBp65信号通路和炎症反应,明显减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤。两者联合处理对心肌的保护作用明显优于单独处理。     

树突状细胞MyD88介导热休克蛋白60的信号转导

目的观察热休克蛋白印（HSP60）刺激对树突状细胞（DC）活性的影响，探讨髓性分化因子88（MyD88）在介导HSP60信号转导中的作用。方法培养小鼠骨髓源性DC，分为对照组、HSP60组及RNA干扰组，对照组在正常条件下继续培养2d，HSP60组加入终质量浓度为10mg／L的HSP60，RNA干扰组于加入MyD88 siRNA4h后给予10mg／L HSP60刺激，均继续培养2d。流式细胞术检测DC细胞表面CD11c、CD80、CD86及MHC-Ⅱ分子的变化，ELISA法检测DC分泌肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ（IFN-γ）和白细胞介素-12（IL-12）的浓度，免疫细胞化学检测DC MyD88、核因子-κB（NF-κB）的表达，Western blot检测DC MyD88的变化，混合淋巴细胞培养检测T细胞增殖能力。结果3组CD11c阳性率差异无统计学意义（P〉0．05），分别为78．65％、82．40％及85．72％，HSP60组CD80、CD86及MHC-Ⅱ分子的阳性率分别为70．28％、76．49％及38．24％，较对照组（阳性率分别为28．42％、34．56％及16．28％）及RNA干扰组（阳性率分别为32．16％、40．47％及20．76％）显著增高（P〈0．05）；HSP60组TNF-α、IFN-γ及IL-12浓度显著高于对照组及RNA干扰组（P〈0．05）；HSP60组可见MyD88高表达及NF-κB核移位；HSP60组SI显著高于对照组及RNA干扰组（P〈0．01）。结论HSP60通过MyD88依赖的途径活化DC，MyD88是HSP60信号转导中的重要调节分子。