脑内血肿腔局部应用神经节苷脂GM-1治疗实验性脑出血的作用及其机制

背景脑出血患者常遗留严重的神经功能缺损.目前关于其发病机制的研究日益深入,希望能找到改善预后的有效方法.目的经脑内血肿腔局部应用神经节苷脂(Ganglioside)GM-1,探讨脑内局部给药能否有减低药量而提高疗效的效果,同时脑内局部用药是否具有局部量效关系.设计随机对照的实验研究.单位西安交通大学第二医院神经外科、设备科. 对象实验于2000-08/2001-04在西安交通大学医学院神经生物研究中心完成.选择健康雄性SD大鼠,体质量250～300 g,由陕西中医研究院实验动物中心提供.干预将大鼠随机分为4组①假手术组(12只)行右侧尾状核穿刺.②模型组(12只)于右侧尾状核注入50μL未抗凝自体血.③局部给药组分为大、中、小剂量组(每组12只).制作模型后6 h分别按照2 mg/kg,0.8mg/kg和0.32mg/kg于脑内血肿腔注入GM-1,液量按2mg/kg计算,不足部分用对照液(即GM1注射液溶剂,按说明书配制)补齐,同时经尾静脉注入相等体积对照液.④全身给药组(12只)制作模型后6 h经尾静脉注入GM-12 mg/kg,同样体积对照液注入右侧尾状核.上述各组于脑出血后72 h处死,测定脑含水量(每组取8只);行组织学检查(每组取4只),并作相对损失神经元计数.主要观察指标①脑水含量.②组织学观察.③相对损失神经元计数.结果脑内局部大剂量组较全身给药组脑水含量为低,分别为(79.77±0.94)%和(81.42±0.87)%,两组相比差异显著(P=0.02),脑内局部用药组脑水含量和药量线性回归分析,两者之间不具有线性关系(P=0.001).脑内局部大剂量组相对损失神经元计数较全身给药组明显为低,分别为(324.00±3.65)和(344.00±8.83),两组相比差异显著(P=0.003).组织学观察显示脑内局部大、中剂量组血肿周围存活神经元较脑内局部小剂量组明显增多.结论在用药量相等情况下,脑内局部应用Ganglioside GM-1可明显提高疗效,且随局部用药量增大而疗效出现递增,但两者之间不呈直线关系.     

脑出血模型大鼠脑组织脑红蛋白的表达

目的：观察脑红蛋白在实验性脑出血模型大鼠脑组织内表达水平的动态变化。方法：实验于2004-10／2005—10在解放军沈阳军区总医院动物实验科和神经中心实验室完成。66只大鼠随机分为3组：正常对照组6只，脑出血组30只和假手术组30只。脑出血组和假手术组再根据动物模型建立后1，6，24，48和72h 5个时间点随机分为5个亚组，每个亚组6只大鼠。采用立体定向自体血注入大鼠尾状核建立脑出血模型（假手术组注入生理盐水），用Weatern blot和免疫组织化学法检测脑出血后不同时间脑组织内脑红蛋白的表达。结果：脑出血组有3只大鼠术后死亡。有4只大鼠术后模型制备失败，均予以剔除并随机补充，66只大鼠最终纳入分析。Western blot结果显示脑出血组术后lh血肿周围脑组织内脑红蛋白相对表达水平开始增高（0．45&;#177;0．03）A8h达到高峰（0．83&;#177;0．05），72h开始下降（0.55&;#177;0．11），均明显高于假手术组（0.31&;#177;0．06，0.31&;#177;0.01，0．33&;#177;0．04）和正常对照组（032&;#177;0．07）。免疫组化染色显示在血肿周围脑红蛋白表达比其他脑区明显增多。结论：脑出血后脑内脑红蛋白表达上调，提示脑红蛋白可能对脑出血继发神经损伤起重要的保护作用。     

葡萄籽原花青素对脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的：观察不同剂量葡萄籽原花青素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及其作用的不同途径。 方法：实验于2004-10／2005-07在安徽医科大学神经生物实验室完成。取SD大鼠160只随机分成假手术组、模型组和葡萄籽原花青素50，100，200mg／kg组5组，每组32只．①缺血前30min模型组大鼠腹腔注射lmL生理盐水，葡萄籽原花青素50，100，200mg／kg组腹腔注射相应浓度的葡萄籽原花青素液1mL，6h后重复给药一次；假手术组不给药。②采用线栓法制备脑缺血再灌注大鼠模型，假手术组不栓塞动脉。各组随机取8只大鼠在再灌注12h断头处死测脑组织含水量；其余大鼠在再灌注24h断头处死取脑，分别检测脑梗死体积比、缺血侧脑组织超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量。 结果：160只大鼠全部进入结果分析。①脑梗死体积比：葡萄籽原花青素100，200mg／kg组显著低于模型组（0．3077&;#177;0．0206，0．2972&;#177;0．0248．0．4594&;#177;0.0399，P〈0．01）。②脑含水量：葡萄籽原花青素50，100，200mg／kg组均低于模型组[（79．97&;#177;0．76）％，（79．63&;#177;0.92）％，（79．67&;#177;0．51）％．（81．41&;#177;1．28）％，P〈0．01]。③超氧化物歧化酶活性：葡萄籽原花青素50，100，200mg／kg组均高于模型组[（64．35&;#177;2．29），（64．52&;#177;2．20），（64．43&;#177;2．38）．（39．72&;#177;6．94）NU／mg，P〈0．01]。④丙二醛含量：葡萄籽原花青素50，100，200mg／kg组均低于模型组[（1．15&;#177;0．07），（1．11&;#177;0．16），（1．01&;#177;0．13）．（1．42&;#177;0．23）μmol／g，P〈0．011。 结论：①葡萄籽原花青素≥100mg/kg时可使局灶性脑缺血大鼠脑梗死体积减小，发挥有效的脑保护作用。②≥50mg／kg时即能增强抗氧化酶活性，减轻脂质过氧化损伤，减轻脑水肿程度。     

局灶性脑缺血大鼠脑保护作用中阿司匹林预处理及其最佳剂量选择

目的：探讨阿司匹林预处理对缺血性脑损伤的保护机制及其最佳剂量。方法：实验于2004-06／07在锦州医学院药理学实验室完成。选用健康雄性SD大鼠，随机分为假手术组、缺血对照组、阿司匹林预处理组。阿司匹林预处理组又分为5，15，45，150mg／kg4个剂量组。以线栓法阻塞大脑中动脉制作脑缺血模型。24h后进行神经功能评分并断头取脑制备组织匀浆测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性。结果：阿司匹林5mg／kg组、15mg／kg组和45mg／kg组的神经功能评分分别为(0．67&;#177;0．39)，(0．83&;#177;0．75)，(1．50&;#177;0．24)分，缺血对照组为(2．50&;#177;1．05)分(P&;lt;0．01)，iNOS活性分别为(0．84&;#177;0．54)．(0．91&;#177;0．43)，(1．06&;#177;0．27)U／mg，缺血对照组为(1．54&;#177;0．56)U／mg(P&;lt;0．01)。阿司匹林150mg／kg组在神经功能评分及iNOS活性方面分别为(2．17&;#177;1．17)分，(1．56&;#177;0．75)U／mg，与缺血对照组差别无显著性意义(P&;gt;0．05)。结论：小剂量阿司匹林预处理对随后的缺血性脑损伤具有保护作用，其机制可能是抑制iNOS活性，最佳剂量为5mg／kg。     

定志小丸对老龄大鼠学习记忆能力的影响

目的：研究定志小丸对老龄大鼠学习记忆能力和脂质过氧化的影响。方法：选用自然老龄大鼠，采用Y电迷宫法测试行为学指标，用生化法测定血清和脑组织中的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二酶(MDA)，用荧光分光光度法测定脑内单胺类神经递质含量。结果：定志小丸200mg／kg给药组明显提高老龄大鼠学习记忆能力，提高记忆的正确反应率(70．5％，73．5％)，与空白对照组(61．0％，64．0％)相比差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。给药组升高老龄大鼠脑内单胺类神经递质的含量，使老龄大鼠脑内[空白对照组：(128．2&;#177;10．3)Nu／mL；定志小丸200mg／kg组：(143．0&;#177;6．8)Nu／mL]和血清中[空白对照组：(190．0&;#177;4．65)Nu／mL；定志小丸200mg／kg组：(222．3&;#177;2．3)Nu／mL]的SOD活力提高，MDA含量降低。结论：定志小丸能改善老龄大鼠的学习记忆功能，其机制可能与改善脑组织单胺类神经系统功能，降低脑组织中脂质过氧化物的含量有关.     

水蛭提取液对实验性脑内血肿吸收的病理学及动物行为的影响

目的：探索水蛭提取液对实验性脑内血肿吸收的作用。方法：采用成组设计的随机对照研究。脑出血模型用定量胶原酶注入大鼠尾状核来建立，观察水蛭提取液对大鼠神经功能缺损体征评分；血肿容积与血肿周围缺血，血肿周围脑组织水含量及病理改变的影响。结果：①神经功能缺损评分：3d时治疗组(1．96&;#177;0.29)分低于对照组(2．88&;#177;0.33)分(P=0.004)，至第10天时治疗组评分为0，低于对照组(0.94&;#177;0.68)分(P=0.000)。②治疗后6，10d的大鼠脑内血肿治疗组[(15．54&;#177;0.23)，(1．39&;#177;0.39)μL]比对照组[(21．33&;#177;0.39)，(5．69&;#177;0.34)μL]明显缩小(P&;lt;0.05)，同时血肿周围缺血范围治疗组小于对照组，脑水肿比对照组减轻。③水蛭提取液能加快脑出血后的病理组织修复，促进病灶周围血管内皮细胞、毛细血管和胶质细胞增生，无新鲜出血灶发现。结论：水蛭提取液对大鼠脑出血后脑内血肿有治疗作用，而不引起出血并发症。     

红景天对衰老小鼠脑过氧化脂质及线粒体超微结构的影响

背景：衰老是生物体内各组织、器官的退行性改变，是诸多病理、生理过程综合作用的结果。红景天是一种天然药用植物，具有延缓机体衰老、防治老年病等功能，但是其确切机制仍不十分清楚。目的：探讨藏药红景天提取物(诺迪康胶囊)抗衰老作用及其机制。设计：以实验动物为研究对象，随机对照的实验研究。单位：一所军医大学医院的神经内科。材料：实验于2002-03／08在解放军第四军医大学药理学实验室完成。60只昆明种小鼠随机分为正常对照组、模型组、诺迪康1，2，4g／kg3个剂量组、维生素E阳性对照组0．1mg／k，每组10只。干预：模型组、诺迪康组、维生素E阳性对照组均将30g／LD-半乳糖生理盐水溶液，按每日150mg／kg颈后部皮下注射，连续8周，同时，诺迪康组、维生素E阳性对照组灌胃给药，1次／d，连续8周。主要观察指标：诺迪康胶囊对衰老小鼠脑乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)活性、过氧化脂质(lipidperoxides，LPO)含量，脑过氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活性、丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量以及海马神经元线粒体超微结构的影响。结果：诺迪康胶囊1，2，4g／kg组均可降低脑组织LPO含量[(30．1&;#177;2．9)，(27．8&;#177;3．1)，(26．9&;#177;1．9)nmol／g]和MDA含量[(1l0．2&;#177;13．5)，(95．4&;#177;20．1)，(90．2&;#177;16．5)nmol／g]，与模型组[(33．4&;#177;2．2)，(126．5&;#177;17．2)nmol／g]相比，差异均有显著性意义(P&;lt;0．05)；并明显升高LDH活性[(1．74&;#177;0．14)，(1．92&;#177;0．23)，(2．04&;#177;0．21)NU／g]和SOD活性[(119．1&;#177;2．2)，(121．3&;#177;0．9)，(126．4&;#177;2．0)NU／g]，与模型组[(1．68&;#177;0．19)，(115．9&;#177;2．1)NU／g]相比，差异均有显著性意义(P&;lt;0．05)。电镜结果表明，诺迪康胶囊2，4g／kg组对半乳糖引起的海马神经元线粒体退行性变具有明显的保护作用。结论：诺迪康胶囊具有显著的抗衰老作用，此作用与其抗氧化损伤和保护神绎元有关。     

内给氧改善缺血再灌注后脑组织能量代谢的实验研究

目的：探讨内给氧改善大鼠脑组织缺血再灌注后能量代谢障碍，起到脑保护作用的机制。方法：30只Wiatax大鼠随机分成3组：假手术组、缺血组、治疗组，制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型，予内给氧治疗后，分别测定各组大鼠脑组织中的三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、单磷酸腺苷(AMP)，乳酸含量及Na^+-K^+-ATPase活性，计算能量负荷值。结果：内给氧治疗组的ATP含量(2．3309&;#177;0．0866)mg／L、能量负荷值为0．0960&;#177;0．0052，Na^+-K^+-ATPase活性为(0．903&;#177;0．117)μkat／g，均高于缺血组[(0．8199&;#177;0．0591)mg／L，0．1663&;#177;0．0044，(0．465&;#177;0．064)μkat／g]差异存显著性意义(P&;lt;0．05)，乳酸含量(16．0342&;#177;1．0136)mmol／g低于缺血组(24．2513&;#177;4．3571)mmol／g，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。结论：内给氧可明显改善大鼠脑缺血再灌注后能量代谢，具有脑保护作用。     

NMDA受体在慢性吗啡处理大鼠伏隔核神经元突触可塑性改变中的作用

目的：探讨N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid，NMDA)受体在慢性吗啡处理大鼠伏隔核神经元突触可塑性中的作用。方法：将15只雄性Sprague-Dawley大鼠随机等分为吗啡组(腹腔注射吗啡，起始剂量5mg／kg，2次／d，逐日递增5mg,至第10天为50mg／kg)、干预组(每次注射吗啡前30min腹腔注射NMDA受体拮抗剂地卓西平0．075mg／kg)及对照组(注射同体积的生理盐水)。末次注射后6d处死取伏隔核并制作电镜标本，日立H-600透射电镜下测量神经元突触界面结构参数。结果：吗啡组大鼠伏隔核神经元突触活性区长度[(226.46&;#177;21．10)nm]及突触后致密物厚度[(43．50&;#177;5．44)nm]显著小于对照组[(319．30&;#177;13．40)nm，(58．70&;#177;4．95)nm](F=49.528，6．725；P均&;lt;0．01)；干预组大鼠突触后致密物厚度[(57．30&;#177;1.02)nm]显著大于吗啡组[(43．50&;#177;5.44)nm](P&;lt;0．05)，与对照组差异无显著性。结论：NMDA受体在慢性吗啡处理所导致的伏隔核神经元突触可塑性改变中有重要作用。     

白藜芦醇对小鼠局灶性脑缺血的保护作用及其机制

目的：探讨不同剂量白藜芦醇对局灶性脑缺血后的神经保护作用及对脑内基质金属蛋白酶(matrix metallopoteinases，MMPs)表达的影响。方法：实验于2003-11／2004-02在解放军第四军医大学西京医院神经外科研究所实验室分两部分进行。60只健康雄性昆明白小鼠，体质量18～22g。第1部分中随机分为4组，分别为白藜芦醇10，30，60mg／kg强饲预治疗组及单纯缺血组，第2部分随机分为白藜芦醇30mg／kg及单纯缺血组。各组均为10只。采用线段血管内栓塞大脑中动脉(MCA0)获得小鼠脑缺血模型，2，3，5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色显示脑梗死范围，应用酶谱印记技术检测缺血后脑组织中MMPs活性。结果：各自藜芦醇强饲预治疗组的脑梗死体积和脑水肿程度均明显小于单纯缺血组[(120&;#177;17)mm^3，(21．5&;#177;2．5)％]，差异均有非常显著性意义(P&;lt;0．01)。30mg／kg白藜芦醇强饲预治疗组的脑梗死体积和脑水肿程度[(87&;#177;15)mm^3，(12．9&;#177;1．3)％]明显小于10mg／kg组[(102&;#177;11)mm^3，(17．8&;#177;2．3)％，P&;lt;0．01]，但与60mg／h相比，无明显差别[(89&;#177;13)mm^3，(12．5&;#177;1．6)％，P&;gt;0．05]。30mg／k异剂量的白藜芦醇明显抑制了缺血后脑组织MMP-9的活性。结论：白藜芦醇具有脑保护作用，机制与对MMP-9的抑制有关。     

氟桂利嗪干预后脑出血大鼠血肿周围神经元凋亡的变化

目的：观察大鼠脑出血后血肿周围神经元凋亡表达的变化规律及钙拮抗剂一氟桂利嗪的干预作用。 方法：实验于2003-03／09在解放军第三军医大学西南医院中心实验室完成。①取66只成年健康Wistar大鼠，随机分为正常组6只、脑出血组30只，氟桂利嗪治疗组30只；脑出血组及氟桂利嗪治疗组又分别于出血后0．5h，6h，24h，72h，120h5个时间点进行观察，每个时间点6只。②造模及给药：运用胶原酶法建立大鼠脑出血模型。氟桂利嗪药粉用生理盐水配成1g/L混悬液，出血前ld及出血后连续5d，氟桂利嗪治疗组大鼠1mg／kg腹腔内注射给药，1次／d。③观察指标：经末端脱氧核糖核苷转移酶介导的DUTP缺口末端标记法和二氨基联苯胺染色，测定脑出血后各时点血肿周围神经元凋亡表达。 结果：66只大鼠均进入结果分析。①脑出血后血肿周围凋亡细胞增多，0．5h开始升高（100．88&;#177;9．43）个／视野，6h明显增多（171．83&;#177;19．07）个／视野，24h达高峰（217．88&;#177;22．56）个／视野，72h血肿周围凋亡细胞数逐渐减少（164．50&;#177;14．07）个／视野，120h基本接近正常（54．00&;#177;12．46）个／视野。出血后各时间点与正常组（27．5&;#177;6．95）个／视野1比较差异有显著性意义（P〈0．01）。②氟桂利嗪治疗后0．5h，6h，24h，72h，120h TUNEL阳性细胞明显减少，分别为（81．17&;#177;11．29）个／视野，（101．67&;#177;10．54）个／视野，（129．83&;#177;9．28）个／视野，（71．5&;#177;16．27）个／视野，（30.67&;#177;8．09）个／视野，与脑出血组相应时点比较差异有显著性意义（P〈0．01）。结论：氟桂利嗪明显抑制脑出血后各时点血肿周围凋亡表达，对实验性脑出血神经元损伤起保护作用。     

何首乌提取物对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的：观察何首乌提取物对大鼠局灶性脑缺血再灌注后超氧化物歧化酶活性、丙二醛及一氧化氮含量的影响，探讨其对脑损伤的保护作用。方法：实验于2003—04／05在山东大学医学院实验室完成。40只Wistar雄性大鼠随机分为4组：假手术组、缺血组、20mg／kg何首乌组和40mg／kg何首乌组，每组10只。制造人鼠火脑中动脉缺血再灌沌模型。20mg／kg何首乌组和40mg／kg何首乌组于缺血前30min及缺血后1h分别给予何首乌提取物20mg／kg、40mg／kg腹腔内注射。各组大鼠于再灌注后24h检测脑缺血组织超氧化物歧化酶活件、丙二醛和一氧化氮含量。结果：40只大鼠均进入结果分析。①超氧化物歧化酶活性：20mg／kg何首乌组、40mg／kg何首乌组明显高于缺血组[（85．1&;#177;10．2），（103．2&;#177;12、9），（62．8&;#177;8．7）NU／mg，P〈0．01]，高剂量组高于低剂量组（P〈0．05）。②丙二醛和一氧化氮含量：20mg／kg何首乌组、40mg／kg何首乌组明显低于缺血组[丙二醛含量：（6．58&;#177;0．62），（5．41&;#177;0．58），（9．24&;#177;0．88）μmol／g，P〈0．01；一氧化氮含量：（5183&;#177;0．77），（4．71&;#177;0．59），（7．65&;#177;0．86）mmol／g，P〈0．011，高剂量组高于低剂量组（P〈0．05）。结论：①何首乌提取物可抑制脑缺血再灌注损伤后超氧化物歧化酶活性的下降及丙二醛、一氧化氮含量的升高，表明何首乌提取物可以清除体内过多的氧自由基，对脑缺血再灌注损伤起保护作用。②何首乌提取物的疗效与剂昔有关．高剂量的疗效明显好于低剂量．     

姜黄素对脑出血大鼠血肿周围脑组织肿瘤坏死因子水平的影响

目的：探讨姜黄素对脑出血大鼠脑组织肿瘤坏死因子(tunaor necrosis factor-alpha，TNF-α)水平的影响。方法：将120只健康雄性SD大鼠随机分为姜黄素治疗组、脑出血对照组和假手术组。每组分为手术前、术后6，12，24，48，72，96，120h8个时点，每个时点5只大鼠。采用立体定向自体血注入大鼠尾状核建立脑出血模型，观察各组术前及术后各时点血肿周围脑组织肿瘤坏死因子(TNF-α)水平及含水量变化。结果：脑出血对照组术后12～96h各时点血肿周围脑组织TNF-α水平[分别为(1.48&;#177;0.13)，(1．53&;#177;0．20)，(1．56&;#177;0．39)，(1.49&;#177;0．28)，(1．47&;#177;0.21)μg／L]较假手术组[分别为(1．06&;#177;0．33)，(1．05&;#177;0．28)，(1．14&;#177;0．15)，(1．04&;#177;0．14)，(1．08&;#177;0．11)μg／L]明显升高(P&;lt;0．05)。姜黄素治疗组术后12～96h各时点TNF-α水平[分别为(1．12&;#177;0．21)，(1．11&;#177;0．18)，(1．21&;#177;0.11)，(1．15&;#177;0．15)，(1．14&;#177;0．21)μg／L]均明显低于脑出血对照组(P&;lt;0．05)。脑出血对照组和姜黄素治疗组术后各时点血肿周围脑组织含水量分别与相应脑组织TNF-α水平呈正相关(r=0．541，P&;lt;0．05；r=0．548，P&;lt;0．05)。结论：姜黄素可抑制大鼠脑出血后TNF-α含量增加，其对抗脑出血后脑水肿作用可能与此有关。     

臭牡丹根提取物对小鼠的镇痛效应

背景：臭牡丹属马鞭草科植物，现代药理学研究表明臭牡丹具有抗炎，抗肿瘤，提高机体非特异性免疫，兴奋子宫圆韧带肌电作用与激动d肾上腺受体有关，关于镇痛作用的实验研究较少。目的：通过热板法和扭体法观察臭牡丹的乙醇提取物对小鼠的镇痛作用。设计：以动物为观察对象，随机对照实验。单位：赣南医学院的药理学教研室。材料：实验于2004-03／06在赣南医学院药理教研室完成，选择昆明种小白鼠120只，体质量(20&;#177;2)g，由赣南医学院实验中心提供。干预：50只小白鼠用于扭体法实验，随机分为生理盐水组，氨基比林0．1g／kg组，吗啡0．01g／kg组，臭牡丹提取物20g／kg组，臭牡丹提取物40g／kg组，每组10只，分别经腹腔注射给药，40min后腹腔注射6mL／L乙酸溶液(10mL／kg)，5min后开始观察小鼠扭体数和扭体抑制率，共观察10min。40只小白鼠用于热板法实验，随机分为生理盐水组，吗啡0．01g／kg组，臭牡丹提取物20g／kg组，臭牡丹提取物40g／kg组，每组10只，经腹腔注射给药后即刻置于热板金属表面，温度控制在(55&;#177;0．5)℃，分别记录给药后15，30，60rain痛阈值。30只小白鼠用于对抗纳洛酮的热板法实验，随机分为纳洛酮0．04g／kg+吗啡0．01g／kg组，纳洛酮0．04g／kg+臭牡丹提取物40g／kg组，纳洛酮0．04g／kg+生理盐水组，经腹腔注射给药，记录给药后15，30，60，90min痛反应时间值。主要观察指标：①小白鼠扭体次数和扭体抑制率。②痛反应时间。③纳洛酮对抗后，痛反应时间。结果：120只小白鼠全部进入结果分析。①扭体次数和扭体抑制率：通过腹腔注射臭牡丹提取物20和40g／kg后小白鼠的扭体次数为2．4&;#177;2．5，0．6&;#177;1．7，它们对6mL／L乙酸溶液引起的疼痛反应的抑制率为93．3％，98．3％。②热板法实验给药后15，30，60min的痛阈值：给予臭牡丹提取物20g／kg后15，30，60rain痛阈值为[(121．2&;#177;98．7)s，(191．2&;#177;78．6)s，(133．1&;#177;91．1)s]；给予臭牡丹提取物40g／kg后15，30，60min痛阈值为[(233．9&;#177;70．4)s，(219．6&;#177;78．2)s。(218．3&;#177;92．6)s]，均高于生理盐水组[(13．7&;#177;15．2)s，(9．7&;#177;12．5)s，(22．1&;#177;15．6)s](P&;lt;0．01～0．001)。③在纳洛酮对抗吗啡的实验中，吗啡0．01g／kg+纳洛酮0．04g／kg组给药后15，30，60min的痛域明显小于臭牡丹提取物40g／kg+纳洛酮0．04g／kg组[(1．7&;#177;5．2)s，(124．9&;#177;79．4)s，P&;lt;0．001；(6．4&;#177;8．6)s，(139．3&;#177;72．9)s，P&;lt;0．001；(21．8&;#177;34．0)s，(137．9&;#177;60．8)s，P&;lt;0．001]。结论：臭牡丹的乙醇提取物具有很强的镇痛作用，这种镇痛作用不是通过激动阿片受体而发挥镇痛效应的。     

胍丁胺对吗啡戒断大鼠海马神经元型一氧化氮合酶的影响

背景：胍丁胺具有增强吗啡的镇痛作用、对抗吗啡的耐受和依赖等作用。目的：观察注射胍丁胺对吗啡戒断大鼠海马神经元型一氧化氮合酶的影响，分析海马一氧化氮通路是否参与胍丁胺抑制吗啡的戒断作用。设计：随机对照实验。单位：解放军总医院麻醉科。材料：实验于2004-04／07在解放军总医院麻醉科实验室完成。选取健康SD大鼠18只，随机分为盐水对照组、吗啡组、胍丁胺吗啡组。6只／组。方法：盐水对照组皮下注射生理盐水10mg／kg；吗啡组进行5d预处理，分别皮下注射吗啡10，20，30，40，50mg／kg，2次／d；胍丁胺吗啡组每次给予吗啡前30min皮下注射胍丁胺10mg／kg。末次给吗啡后6h，吗啡组和胍丁胺吗啡组均腹腔注射纳洛酮5mg／kg。激发吗啡戒断症状，记录1h内各项吗啡戒断症状的次数（包括湿狗样抖动、咀嚼、激惹、流涎、腹泻等体征），根据动物在纳洛酮激发戒断症状的前后体重差值计算体质量减轻数。行为学测定后将各组动物麻醉处死，取海马作冰冻切片，神经元型一氧化氮合酶免疫组织化学染色。用CMIAS系统进行图像分析．每张切片选5个视野积分吸光度的均值作为阳性神经元的积分吸光度。主要观察指标：①各组大鼠吗啡戒断症状测定结果。②各组脑海马中神经元型一氧化氮合酶的表达变化。结果：实验纳入大鼠18只，全部进入结果分析。①各组大鼠吗啡戒断症状测定结果：胍丁胺吗啡组大鼠湿狗样抖动、咀嚼、激惹、流涎、腹泻、体质量减轻等戒断症状均明显低于吗啡组[（2．0&;#177;1．3），（5．0&;#177;1．1）；（0．3&;#177;0．4），（1．8&;#177;0．7）；（3．2&;#177;1．2），（6．8&;#177;3．1）；（0．2&;#177;0．4），（1．2&;#177;0．9）；（2．7&;#177;2．1），（6．7&;#177;2．1）；（6．0&;#177;3．0），（12．8&;#177;2．7）次；P均〈0．01]，与盐水对照组基本相近（P〉0．05）。②各组脑海马中神经元型一氧化氮合酶的表达变化：各组大鼠脑海马中神经元型一氧化氮合酶阳性神经元主要分布在CA1区，其胞浆被染成棕黄色，圆形的细胞核被苏木精染成淡紫色。胍丁胺吗啡组阳性神经元免疫荧光吸光度值较吗啡组显著降低（24．32&;#177;8.31，50．82&;#177;15．13，P〈0．01），与盐水对照组基本相似（24．32&;#177;8．31，15．24&;#177;1．88，P〉0．05）。结论：胍丁胺能抑制吗啡的戒断症状，降低吗啡戒断大鼠脑海马CA1区神经元型一氧化氮合酶的活性，海马一氧化氮通路参与胍丁胺抑制吗啡的戒断。     

大鼠脑出血后血肿周围组织活化凋亡蛋白酶3表达与大承气汤的干预

目的：观察大鼠脑出血后血肿周围神经元活化凋亡蛋白酶3的表达和血肿变化，及大承气汤的干预作用。方法：实验于2003-10／2004-03在中南大学湘雅医院中西医结合研究所完成。健康SD大鼠65只随机分成4组，分别为正常组(5只)，假手术组(20只)，模型组(20只)，大承气汤组(20只)。除正常组外，其余3组设4个时间点：6h，1，3，5d。每个时间点5只。采用免疫组化方法检测大鼠脑内血肿周围活化凋亡蛋白酶3的表达，用直尺测量不同时间点大鼠脑内血肿的最大直径。结果：65只大鼠进入结果分析。①活化凋亡蛋白酶3阳性细胞计数：正常组未见阳性细胞表达。造模后模型组血肿周围于6h出现阳性表达细胞．1d阳性细胞计数达高峰，3d出现轻度下降，5d明显下降[模型组：6h(24．600&;#177;2．338)个，1d(115，900&;#177;2．215)个，3d(91．940&;#177;3，177)个。5d(67．900&;#177;2．261)个[。与假手术组比较差异明显[假手术组：6h(3．120&;#177;2．235)个，ld(1．360&;#177;2．097)个，P&;lt;0.01]。大承气汤组与同时间点模型组比较：6h计数无明显差异，1，3，5d均存在明显差异[大承气汤组：1d(114．440&;#177;3．239)个，3d(84．420&;#177;3，648)个，5d(51．460&;#177;3，038)个．P&;lt;0．05或P&;lt;0.01]。②血肿体积变化情况：造模后血肿于1d达到最大，3d有所变小，5d变小明显；大承气汤组在5d缩小程度与模型组比较有明显差异[大承气汤组5d(2．000&;#177;0．187)mm，模型组5d(2．480&;#177;0．148)mm，(t=4．496，P&;lt;0．01)]。但在6h，ld，3d与模型组比较血肿缩小程度差别无显著性意义。结论：大鼠脑出血后血肿周围神经元活化凋亡蛋白酶3表达明显上调；大承气汤能减少活化凋亡蛋白酶3的表达，阻止神经元的凋亡，同时也具有一定的促进血肿吸收的作用。     

中药复方护脑素在大鼠急性脑缺血模型中的作用机制

目的 研究以麻黄、山栀子、黄连、厚朴、白术、桂枝、三七为主要成分的中药复方护脑素改善脑部微循环及脑保护的作用机制。方法 将Wistar大鼠随机分成3组，模型组(结扎两侧颈总动脉)、护脑素组(颈总动脉结扎前半小时腹腔灌注护脑素混悬液)和假手术组，每组l0只。用组织血流量仪测定各组手术前后局部脑血流量(r-CBF)，用硝酸还原法测定血浆一氧化氮(NO)，用放射免疫分析法检测血浆内皮素1(ET-1)。手术后2h将大鼠处死，取出脑组织，测定脑匀浆中NO与ET-1含量。结果 ①rCBF值：模型组为(202&;#177;38)mL／(min&;#183;kg)，显著低于假手术组(635&;#177;81)mL／(min&;#183;kg)(t=15．34，P&;lt;0．001)和护脑素组(267&;#177;47)mL／(min&;#183;kg)(t=3．33，P&;lt;0．05)。②护脑素组血浆NO(2．6&;#177;0．5)mol／L高于模型组(2．1&;#177;0．8)mol／L(t=4．23，P&;lt;0．05)。模型组血浆ET-1(540．0&;#177;101．0)ng／L高于假手术组(349．0&;#177;26．0)ng／L，(t=6．14，P&;lt;0．05)和护脑素组(427．0&;#177;83．0)ng／L，(t=2．73，P&;lt;0．05)。③模型组组织匀浆中NO(406．0&;#177;163．5)mol／L和ET-1(11．4&;#177;2．0)ng／L分别高于假手术组的(177．4&;#177;63．3)mol／L，(8．1&;#177;1．5)ng／L。(t=4．13，4．04，P&;lt;0．005)和护脑素组的(207．2&;#177;113．4)mol／L，(8．3&;#177;1．7)ng／L(t=3．16，3．64，P&;lt;0．005)。结论 护脑素在急性脑缺血模型中可通过NO、ET-1的参与，改善脑部微循环。保护缺血区脑组织。     

黄体酮对缺氧脑组织一氧化氮含量的影响

目的：观察成年小鼠缺氧后脑内一氧化氮含量的变化及黄体酮的干预作用。方法：实验于2002-09／2003-06在新乡医学院生理学与神经生物学教研室完成。32只雄性昆明种小鼠，随机分为4组，对照组、单纯缺氧组、低孕酮（4mg／kg）组和高孕酮（8mg／kg），后两组于缺氧前30min腹腔注射孕酮4mg／kg或8mg／kg。小鼠缺氧24h断头取脑，检测脑皮质及海马组织中的一氧化氮含量。结果：32只小鼠均进入结果分析。①缺氧24h后，单纯缺氧组脑皮质一氧化氮的生成量明显高于对照组[（2．15&;#177;0．29），（1．66&;#177;0．65）μmol／g，P〈0．05]；经孕酮预处理的两组，脑皮质组织一氧化氮含量较单纯缺氧组均有所下降，4mg／kg组的效果尤为明显，下降了35．81％（P〈0．01）。②海马组织在缺氧24h后，单纯缺氧组一氧化氮含量明显高于对照组[（1．76&;#177;0．60），（1．21&;#177;0．58）μmol／g，P〈0．05]；低孕酮（4mg／kg）组[（1．07&;#177;0．33）μmot／g]显著低于单纯缺氧组（P〈0.01）；而高孕酮（8mg／kg）组[（1．27&;#177;0．41）μmol／g]与单纯缺氧组差异无显著性（P〉0．05）。结论：成年小鼠缺氧24h后脑皮质和海马组织一氧化氮含量明显升高，黄体酮通过降低这种一氧化氮的升高，可能产生一定的神经保护作用。     

脑心通对局灶性脑缺血大鼠行为学和脑组织肿瘤坏死因子α的影响

目的：探讨脑心通对大鼠局灶性脑缺血损伤后行为学及脑组织肿瘤坏死因子α表达的影响。方法：实验于2004-03／11在河北医科大学第二医院神经内科实验室进行。取成年健康雄性SD大鼠150只，制造大鼠局灶性大脑中动脉阻断造模手术后，将大鼠随机分为5组，即脑心通4g／kg组、2g／kg组、1g／kg组、生理盐水和假手术组，各组又分为6，24，48，72h，7d 5个亚组，每亚组均为6只大鼠。脑心通各剂量组均为灌胃给药，生理盐水组给同体积的生理盐水，于相应时间点进行行为学评分后处死动物快速取脑，观察脑含水量的变化，病理切片苏木精一伊红染色观察组织病理学改变，免疫组织化学的方法测定肿瘤坏死因子α的动态变化。结果：实验中有8只大鼠死亡，后随机补充，进入结果分析仍为150只大鼠。①行为学评分：大鼠在大脑中动脉阻断后手术对侧肢体存在不同程度瘫痪，在术后48和72h时神经功能缺损最为明显，7d时神经功能基本恢复正常。②病理观察：除假手术组外，其余各组在脑梗死后6h局部可见少量散在炎性细胞浸润；梗死后48h，炎性细胞浸润明显增多；并持续到7d。③脑组织含水量：与假手术组相比，其他各组在各时间段均增加。术后24，48h脑心通4g／kg组为(78．95&;#177;1．36)％，(79．44&;#177;1．01)％，脑心通2g／kg组为(79．03&;#177;0．87)％，(80．46&;#177;1．54)％，低于同期的脑心通1g／kg组和生理盐水组[(79．21&;#177;0．68)％，(82．02&;#177;1．76)％．(79．30&;#177;1．11)％，(82．68&;#177;0．91)％，P&;lt;0．05]。④肿瘤坏死因子d阳性细胞表达：与假手术组相比，其他各组在各时问段均增加，梗死后6h开始增多，48h达高峰。术后24，48h脑心通4g／kg组为(27．6&;#177;2．1)，(18．4&;#177;1．5)个，脑心通2g／kg组为(38．4&;#177;2．1)，(23．2&;#177;3．3)个，低于同期的脑心通1g／kg组和生理盐水组[(50．4&;#177;5．6)，(30．8&;#177;5．3)，(52．8&;#177;3．7)，(33．0&;#177;4．7)个，P&;lt;0．05]。结论：脑心通可能通过减轻脑水肿，降低脑内肿瘤坏死因子α的表达减少炎性细胞的浸润，从而对大鼠缺血脑组织损伤产生保护作用。     

硫酸镁抗自由基作用的量效分析

目的：探讨具有抗自由基作用的硫酸镁在大鼠脑缺血后最佳治疗剂量与其脑保护作用的关系。方法：实验于2004-10-05／12-19在锦州医学院科学实验中心完成。取SD大鼠60只，随机将大鼠分为正常组、缺血组及硫酸镁80，160，320mg／b组5组，每组12只。除正常组不插入栓线外，其余4组采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血模型，术后即刻正常组与缺血组腹腔注射生理盐水1mL，硫酸镁各剂量组按上述剂量腹腔注射250g／L硫酸镁注射液(均用盐水稀释至lmL)，观察24h后脑组织病理变化，脑匀浆液中超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量。结果：经补充后60只大鼠进入结果分析。①脑组织病理变化：硫酸镁各剂量组与缺血组比较，梗死区缩小，坏死程度减轻，而且随着剂量的加大梗死周边结构完整的神经细胞数则明显增多。②超氧化物岐化酶活性：缺血组、硫酸镁80mg／kg组均显著低于正常组[(23．08&;#177;2．78)，(27．65&;#177;4．33)，(34．56&;#177;4．70)Nu／mg，p&;lt;0．01]，硫酸镁160，320mg／kg组则显著高于缺血组[(30．23&;#177;5．03)，(32．72&;#177;4．76)Nu／mg，P&;lt;0.01，且硫酸镁80，320mg／k两组间差异显著(P&;lt;0．05)。③丙二醛含量：缺血组、硫酸镁80mg／kg组均显著高于正常组[(3．52&;#177;0．69)，(2．68&;#177;0．74)，(1．44&;#177;0．55)μmol／g，p&;lt;0．01]，硫酸镁160，320mg／kg组则显著低于缺血组[(2．05&;#177;0．57)，(1．58&;#177;0．69)μmol／g，p&;lt;0．01]，且硫酸镁80，320mg／b两组间差异显著(p&;lt;0．05)。结论：①脑缺血早期应用硫酸镁可有效减轻脑组织的损害程度，减轻脑组织的炎症反应，而且大剂量组的保护作用更加明显。②硫酸镁减少自由基的生成，提高抗自由基的能力，且与硫酸镁剂量有明显的依赖关系，大剂量疗效更佳。