中药生精冲剂对精索静脉曲张大鼠的治疗

目的：研究中药生精冲剂对大鼠精索静脉曲张的影响及疗效。方法：从80只SD雄性大鼠中随机抽出20只作为假手术组，余60只均建立精索静脉曲张病理模型后随机均分为模型组、生精冲剂组和克罗米芬组。造模后15d生精冲剂组和克罗米酚组分别给予生精冲剂4g/（kg·d）和克罗米芬20mg/（kg·d）灌胃，模型组和假手术组正常喂食。造模后45d放免法测定血清性激素（FSH、LH和T）及观察各组大鼠睾丸组织结构。结果：生精冲剂组大鼠光镜下睾丸组织结构优于模型组和克罗米芬组；血清FSH、LH生精冲剂组显著低于模型组和克罗米芬组（P〈0.05），而克罗米芬组显著高于其他3组。T在生精冲剂组、克罗米芬组和假手术组之间无显著差异，但均显著高于模型组（P〈0.05）。结论：中药生精冲剂对精索静脉曲张引起的睾丸损害有保护及修复作用，且可能优于克罗米芬。     

生精冲剂对精索静脉曲张大鼠睾丸生精功能的作用

目的:探讨生精冲剂对精索静脉曲张睾丸损伤的作用.方法:观察生精冲剂对实验性精索静脉曲张大鼠睾丸组织结构、超微结构的影响.测定各组实验大鼠睾丸SOD、CAT、ACE活性和LPO、NO含量.结果:治疗组鼠睾丸组织结构与超微结构的损害程度明显低于模型组;SOD、CAT、ACE活性测定值明显高于模型组,LPO、NO含量明显低于模型组(P<0.05).结论:生精冲剂对精索静脉曲张造成的睾丸损害有保护作用,其提高精液质量和生育率的机制可能与抗脂质过氧化和增强抗氧化酶活性有关.     

生精冲剂对实验性精索静脉曲张大鼠生精细胞凋亡状况的影响

目的:探讨实验性精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡状况以及生精冲剂对其凋亡的影响。方法:将60只成年雄性W istar大鼠随机抽出20只为对照组,其余按石津和彦改良法制成左精索静脉曲张大鼠模型,再随机分为模型组20只,治疗组20只。用末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位缺口末端标记法(TUNEL)检测睾丸生精细胞凋亡。结果:模型组大鼠睾丸生精细胞凋亡指数明显高于对照组(P<0.01)和治疗组(P<0.01),治疗组与对照组比较有明显差异(P<0.01)。结论:实验性精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡增加,这可能是影响生育力的机制之一;生精冲剂能够减少精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡,对睾丸生精功能具有保护作用,进而可提高睾丸的生殖能力。     

生精障碍BALB/c小鼠睾丸组织的体外培养研究

目的:探寻生精障碍小鼠睾丸组织生精能力的体外发育与成熟方法。方法:8周龄BALB/c雄性小鼠68只,随机分为4组,每组17只。对照组为正常同龄BALB/c雄性小鼠睾丸组织,实验组分别采用注射40 mg/kg白消安后第4周睾丸组织为SCOS组,第6周睾丸组织为重度H-S(H-S1)组,第8周睾丸组织为轻度H-S(H-S2)组。琼脂糖凝胶法体外培养3种生精障碍小鼠睾丸组织及对照组睾丸组织至第4周,通过免疫组化检测减数分裂过程中标记蛋白[减数分裂启动:维甲酸诱导蛋白8(STRA8);减数分裂中:联会复合蛋白3(SCP3);减数分裂后:转换蛋白1(TNP1)]的表达情况,判断体外培养过程中生殖细胞的发育与成熟能力; TUNEL法检测培养前后生殖细胞凋亡情况。结果:①培养前与对照组相比,睾丸组织损伤越严重其STRA8的表达越少(P0.05);随着培养时间的延长,在培养4周后3个实验组中STRA8的表达呈上升趋势(P0.05)。②培养前与对照组相比,SCOS组SCP3表达最少、H-S2表达最多(P0.05);培养4周后SCP3表达增加,但仍未达到对照组表达水平,且损伤越严重,表达越少;③培养4周后TNP1在对照组有阳性表达,H-S1、H-S2组可见个别阳性表达(P0.05),SCOS组无表达。④与培养前相比,培养4周后SCOS组凋亡增加,H-S组凋亡减少(P0.05)。结论:琼脂糖凝胶体外培养可以诱导生精障碍的BALB/c小鼠睾丸组织进行减数分裂,生精功能损伤较轻者的体外培养效果好。     

中药赞育延生饮对生精障碍大鼠治疗作用的实验研究

目的观察中药赞育延生饮对生精障碍大鼠的治疗作用。方法选用SD大鼠,灌胃腺嘌呤造成肾阳虚生精障碍模型。造模后,中药组大鼠每曰给予中药赞育延生饮(zanyuyanshengyin,ZYYSY)5．4g／kg体重,西药纽给予克罗米芬13．5mg／kg体重,模型组不予任何治疗,连续1个月。用酶联免疫法测血清睾酮值,用TUNEL法测生精细胞凋亡率,用免疫组织化学法研究生精细胞的增殖率和Bcl-2、Bax表达率。结果中药治疗组大鼠血睾酮水平明显升高(239．463±24．8),精子数量增多(18．83±6．07),生精细胞增殖率上升(39．15±3．70),凋亡率下降(3．04±0．32),与模型组各相应检测值(8．784±2．05,9．75±4．03,20.63±4．98,7．12±0．30)相比有显著性差异(P<0．05)。结论中药赞育延生饮治疗大鼠生精功能障碍有效。     

睾丸体积与睾丸生精状态的相关性分析

对103例男性不育患者的睾丸体积与睾丸活检进行对比分析。睾丸活检按光镜下曲细精管中精子发生状态分为轻、中、重度生精障碍,轻度25例,中度45例、重度33例。其睾丸体积分别为13.38±5.13ml,9.09±3.85ml,6.57±3.71ml。三组间睾丸体积有非常显著差异（P<0.01）。表明睾丸体积与睾丸生精状态密切相关。因此,在体检中测定睾丸体积可以迅速判断男性的生殖状态。     

表观遗传学调控对生精功能障碍性不育C57BL/6J小鼠动物模型影响的实验研究

目的:探讨表观遗传学调控对生精功能障碍性不育C57BL/6J雄性小鼠动物模型的作用及影响.方法:60只C57BL/6J雄性小鼠随机均分为对照组和模型组.应用附睾靶向多肽(CSA)结合吲哚青绿包载游离纳米粒(ICG-NPs)联合白消安和二甲基亚砜构建生精功能障碍性不育动物模型.在附睾中检测精子DNA碎片指数(DFI)、精...     

生精障碍相关基因单核苷酸多态性研究进展

生精相关基因遗传多态性是生精障碍的一个重要的遗传病因.通过基因敲除技术现已鉴定出大量与精子发生密切相关基因.此类生精障碍基因包括表达酶类、受体类、细胞凋亡类、转录调控类等基因.上述基因的遗传易感性、感染和环境等因素共同作用导致男性非梗阻性无精子症和少精子症.生精障碍相关基因单核苷酸多态性(SNP)分析可从分子水平上阐述...     

抗肿瘤药物对生精功能的影响

化疗的应用，提高了恶性肿瘤患者的存活率。但抗肿瘤药物在杀死肿瘤细胞的同时，也会造成男性生精功能不同程度的损害，甚至不育。本文复习相关文献，就抗肿瘤药物所致的睾丸组织学，促性腺激素水平的改变，抗肿瘤药物对精子生成的影响及相关因、化疗过程中生精功能的保护等问题作一综述。     

Y染色体微缺失不育患者精液细胞学观察

目的:对Y染色体AZF区域微缺失不育患者进行精液细胞学检查,从而评估其生精功能。方法:收集35例AZF缺失不育患者,年龄23~44岁,经3次以上精液常规分析证实,26例为非梗阻性无精子症,9例为严重少精子症。按照AZF缺失部位分为以下4组进行观察:AZFa+b+c区域缺失组5例,AZFb+c缺失(4例)及单独AZFb缺失(3例)组7例,AZFc缺失组23例。采集患者精液,待自然液化后离心,生理盐水洗涤2次,离心沉淀物经生理盐水稀释后涂于干净玻片上,瑞吉染色,光学显微镜下观察。对其中6例患者进行了睾丸组织病理学检查。结果:AZFa+b+c缺失组,精液细胞学检查均未见各级生精细胞,可见少量上皮细胞。其中1例经睾丸活组织病理学检查,生精小管中未见各级生精细胞,为唯支持细胞综合征,与精液细胞学检查结果一致。AZFb+c缺失及单独AZFb缺失组,精液细胞学检查其中6例细胞停滞在精母细胞阶段,2例睾丸活检见生精阻滞在初级精母细胞阶段。1例AZFb缺失的患者精液细胞学检查见初级精母细胞、次级精母细胞和精子细胞,但睾丸活检显示阻滞在精母细胞阶段。AZFc缺失组中,少精子症组(8例)患者生精细胞检查5例停滞在精母细胞阶段,见少量精子细胞,另3例未见各级生精细胞;无精子症组(15例)患者未见各级生精细胞,其中2例经睾丸活检,证实为唯支持细胞综合征。结论:精液细胞学检查对AZF缺失患者能有效评估生精功能,作为一项无创检查技术,容易被患者接受,推荐作为临床评估生精功能的一项方法。     

清利生精丸对大肠埃希菌感染小鼠生殖细胞凋亡及Fas/FasL表达的影响

目的:探讨清利生精丸是否具有抗生殖细胞凋亡及影响Fas/FasL的表达作用,从分子水平进一步阐明清利生精丸治疗大肠埃希菌感染所致男性不育的机制。方法:将50只雄性昆明小鼠,经膀胱注射大肠埃希菌建立动物感染模型,观察15d后随机分为5组(10只/组):模型组(不治疗)、大剂量(22.5g/ml)、中剂量(13.5g/ml)、小剂量(4.50g/ml)3个清利生精丸治疗组、呋喃坦啶西药治疗组,编码依次为MN、MTa、MTb、MTc、MTd组;另取10只同样小鼠膀胱注射生理盐水作为正常对照组(编码为CT)。各治疗组连续灌胃药液10d后,应用流式细胞术检测小鼠睾丸生殖细胞凋亡率,免疫组化测定生殖细胞Fas/FasL蛋白表达水平和同时观察睾丸组织的病理变化。结果:MN组生殖细胞凋亡率(57.44%)与CT组(28.54%)、MTa组(30.11%)、MTb组(28.59%)相比,差异有显著性(P<0.01);MN组生殖细胞凋亡率与MTc组(46.54%)和MTd组(43.41%)比较,有所增加,但无显著性差异(P>0.05)。MN组小鼠睾丸生殖细胞Fas/FasL蛋白的表达水平明显高于CT、清利生精丸各治疗组和MTd组,差异有显著性(P<0.01);MN组小鼠睾丸组织出现明显的病理改变,其他各组未见明显异常。结论:实验雄性小鼠感染大肠埃希菌后,可导致小鼠睾丸生殖细胞凋亡增加,Fas/FasL蛋白的表达水平上升;清利生精丸通过降低Fas/FasL蛋白的表达,降低生殖细胞的凋亡率,提高生殖能力,可作为治疗大肠埃希菌感染性不育的有效药物之一。     

精子发生阻滞不育患者睾丸雌激素受体α的表达

目的:探讨雌激素受体α(ERα)在睾丸的表达与精子发生阻滞的关系。方法:用HE染色技术检查120例不育症患者睾丸活检标本,其中精子发生阻滞患者标本应用免疫组化法检查ERα的表达,并以10例健康人睾丸组织作为对照。结果:120例标本中符合精子发生阻滞病理诊断标准者有31例(占25.8%)。正常健康人睾丸组织中,ERα在睾丸支持细胞、类肌细胞和间质细胞的细胞核内表达,生精上皮细胞不表达;而在精子发生阻滞的睾丸组织中,ERα也在睾丸支持细胞、类肌细胞和间质细胞的细胞核内表达,但表达较弱,生精上皮细胞不表达。两者表达强度存在显著性差异(P<0.05)。结论:雄激素与雌激素通过各自的受体发挥协调作用而共同促进精子发生。精子发生阻滞可能与包括雄激素受体、ERα及热休克蛋白90在内的一系列复杂的细胞信号转导障碍有关。     

精子发生阻滞不育患者睾丸雄激素受体和热休克蛋白90α的表达

目的 :探讨精子发生阻滞与雄激素受体 (AR)和热休克蛋白 90α(HSP90α)表达的关系。　方法 :应用免疫组化二步法 ,检查 5 7例精子发生阻滞引起的不育患者睾丸活检标本AR和HSP90α的表达 ,并以 15例正常健康人睾丸组织作为对照。　结果 :在正常健康人睾丸组织中 ,AR在精原细胞、精母细胞、圆形精子细胞、支持细胞、间质细胞和肌样细胞的胞核均有表达 ,但各类细胞表达AR的强度有差异。在精子发生阻滞的睾丸组织中 ,AR高表达主要在阻滞细胞水平的胞质 ,即在核周形成一环行特异性免疫反应阳性产物带。HSP90α在正常睾丸组织精原细胞、精母细胞、支持细胞、间质细胞和肌样细胞的胞质表达 ;在精子发生阻滞的睾丸组织中 ,HSP90α为高表达 ,正常睾丸组织和精子发生阻滞的睾丸组织 ,其表达强度存在显著性差异 (P <0 .0 5 )。　结论 :AR表达部位异常可能无法介导雄激素进入核内 ,而不能实现对基因转录或翻译的调节 ,致使生精细胞难以进入细胞周期而呈现阻滞。HSP90α的高表达可能加剧AR稳定性降低 ,进而增强了AR的遍在化反应。     

男性不育患者生精细胞HCMV、HSV感染检测及形态学研究

目的:探讨男性不育患者精液中生精细胞人类巨细胞病毒(HCMV)、单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)感染状况及其形态学特征。方法:收集83例精液检查中发现较多生精细胞男性不育患者精液,洗涤收集细胞后提取DNA,用PCR方法进行HCMV、HSV-Ⅱ筛查,阳性者精液细胞涂片用免疫细胞化学法(ICC)做相应的病毒标记,并另行细胞学染色作形态学观察。结果:83例精液样本PCR检测HCMV阳性8例,HSV-Ⅱ阳性4例,未发现2种病毒同时阳性病例。8例HCMV阳性病例ICC标记生精细胞HCMV晚期抗原均见阳性表达,HCMV早期抗原均为阴性表达;4例HSV-Ⅱ阳性病例ICC标记生精细胞3例阳性表达,1例弱阳性。12例病毒阳性病例均发现较多未成熟生精细胞,并有不同程度的核染色质固缩、出现空泡、核膜破损、核崩解、凋亡小体等凋亡现象,但未能找到病毒感染的特异性形态学改变(如病毒包涵体)。病毒感染阳性组精子密度明显低于阴性组(P<0.05)。结论:生精细胞HCMV、HSV-Ⅱ感染时可出现不同程度的病理性损害,影响生精功能,感染的生精细胞形态学表现为出现凋亡现象等病理性改变;不育男性患者精液中出现病理性生精细胞,其生精细胞HCMV感染率可能较高。     

男性不育患者生精细胞HCMV、HSV感染检测及形态学研究

目的：探讨男性不育患者精液中生精细胞人类巨细胞病毒（HCMV）、单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-Ⅱ）感染状况及其形态学特征。方法：收集83例精液检查中发现较多生精细胞男性不育患者精液，洗涤收集细胞后提取DNA，用PCR方法进行HCMV、HSV-Ⅱ筛查，阳性者精液细胞涂片用免疫细胞化学法（ICC）做相应的病毒标记，并另行细胞学染色作形态学观察。结果：83例精液样本PCR检测HCMV阳性8例，HSV-Ⅱ阳性4例，未发现2种病毒同时阳性病例。8例HCMV阳性病例ICC标记生精细胞HCMV晚期抗原均见阳性表达，HCMV早期抗原均为阴性表达；4例HSV-Ⅱ阳性病例ICC标记生精细胞3例阳性表达，1例弱阳性。12例病毒阳性病例均发现较多未成熟生精细胞，并有不同程度的核染色质固缩、出现空泡、核膜破损、核崩解、凋亡小体等凋亡现象，但未能找到病毒感染的特异性形态学改变（如病毒包涵体）。病毒感染阳性组精子密度明显低于阴性组（P〈0．05）。结论：生精细胞HCMV、HSV-Ⅱ感染时可出现不同程度的病理性损害，影响生精功能，感染的生精细胞形态学表现为出现凋亡现象等病理性改变；不育男性患者精液中出现病理性生精细胞，其生精细胞HCMV感染率可能较高。     

Relative Positions of the Spermatogenic Stages in the Mouse Testis: Morphological Evidences for their Non-Randomized Adjacencies

The topographical distribution pattern of the stages of the murine seminiferous epithelium cycle was investigated. PAS-hematoxylin stained testicular sections from adult mice representative of the apical, equatorial and caudal region of both testes, were used. The relative frequencies (RF) of the stages of the seminiferous epithelium cycle was estimated on the basis of more than 10,000 cross-sectioned seminiferous tubules identified according to the criteria of Leblond and Clermont (1952). It was found that in the testicular sections the stages of adjacent seminiferous tubules are not distributed randomly. The comparison of the RF of the stages (calculated over all the testicular sections) with the RF of the stages that are adjacent to a given seminiferous tubule stage suggests a clustered occurrence of numerically identical stages. These comparisons very often show statistically significant differences. The finding of such associations among adjacent segments of seminiferous tubules (stages) suggest the existence of an ordered distribution of the seminiferous tubules inside the testis possibly controlled by substances with local control capacity of spermatogenesis. On the basis of the findings here presented, it is suggested an interpretation of the phenomenon of modulations of the waves of the seminiferous epithelium.     

Spermatogenesis‐associated 48 is essential for spermatogenesis in mice

Azoospermia, oligospermia and teratozoospermia all seriously impact male reproductive health. Spermatogenesis is a complex and precisely regulated process in which germ cells proliferate and differentiate and involves the regulation of multiple testis‐specific genes. Here, we identified testis‐specific gene spermatogenesis‐associated 48 (SPATA48), the expression of which was age‐dependent, indicating that it is involved in spermatogenesis. In humans and mice with azoospermia, expression of SPATA48 disappeared in the testis. Spata48?/? knockout male mice had smaller testis and defective spermatogenesis compared to wild‐type (WT) mice. This study can help in the exploration of the genetic basis of male infertility and identify new targets for the diagnosis and treatment of male infertility.