急性早幼粒细胞白血病细胞形态学与基因异质性关系的研究

经形态学诊断为急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）的５０例患者进行了细胞遗传学、分子生物学以及用全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）治疗反应的观察，其中４５例有典型的染色体易位ｔ（１５；１７）及早幼粒细胞白血病基因／维甲酸受体α（ＰＭＬ／ＲＡＲα）融合基因（ＰＭＬ＋ＲＡＲα＋型ＡＰＬ），用ＡＴＲＡ治疗有显效；另有三种基因异质型，分别为早幼粒细胞锌指蛋白基因（ＰＬＺＦ）＋ＲＡＲα＋型ＡＰＬ、ＰＭＬ－ＲＡＲα＋型ＡＰＬ和ＰＭＬ－ＲＡＲα－型ＡＰＬ，对ＡＴＲＡ治疗均无反应。由此可见，ＡＰＬ是一种不均一性疾病。其余２例经形态学仔细复核分别实属Ｍ＿２α和Ｍ＿５ｂ，用ＡＴＲＡ治疗前者有效，后者无效。形态学是确诊ＡＰＬ的重要依据，少数患者应依赖细胞遗传学甚至分子生物学肯定诊断。ＡＴＲＡ治疗的反应可对ＡＰＬ诊断有重要参考价值，但非ＡＰＬ的特异诊断标准。     

RT—PCR检测急性早幼粒细胞白血病微小残留病

用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，检测了２２列早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）缓解患者ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因。结果显示性率在缓解时间１年内（１１／１４）较１￣２年（２／５）及３年以上（０／３）明显高，持续阳性多预示着复发。认为检测ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因，可作为监测ＡＰＬ病情转归、评价疗效的重要指标。     

长期生存急性早幼粒细胞白血病患者微小残留病变的测定

目的探讨ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因在急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）患者中微小残留病变（ＭＲＤ）监测的作用。方法利用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），检测ＡＰＬ患者中ＭＲＤ特异标志的ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因。结果１０例ＡＰＬ患者生存期已达７７～１０７个月的ＲＴ－ＰＣＲ检测ＭＲＤ的结果均为阴性。结论ＲＴ－ＰＣＲ检测ＭＲＤ阴性结果与ＡＰＬ患者长期生存间关系肯定。     

急性早幼粒细胞白血病的细胞遗传及分子生物学研究进展

急性早幼粒细胞性白血病（ＡＰＬ）约占急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）的１０％～１５％,是ＡＮＬＬ的一个特殊亚型。白血病细胞具有特征性染色体易位,ｔ（１５;１７）（ｑ２２～２３;ｑ１２～２１）见于７０％～１００％ＡＰＬ及少数ＣＭＬ早幼粒细胞急变病人,尚未在其他ＡＮＬＬ中发现。该易位使１５ｑ２２中的ＰＭＬ基因与１７ｑ１２～２１中的ＲＡＲα基因融合,产生两个融合基因：ＰＭＬ／ＲＡＲα或ＲＡＲα／ＰＭＬ,因二者分别见于ｔ（１５;１７）阳性患者的１００％和６７％,故前者对于肿瘤的发生更为重要。自１９７６年…     

细胞遗传学和PT-PCR对APC诊断的临床意义

目的：探讨细胞遗传学及ＲＴ-ＰＣＲ检测对ＡＰＬ诊断的临床意义。方法：直接法或 ２４ ｈ培养法处理骨髓标本,采用Ｒ带或Ｇ带方法显带检测ｔ（１５;１７）易位,ＲＴ－ＰＣＲ检测ＰＭＬ－ＲＡＲａ融合基因。结果：形态诊断Ｍ３５５例,３例疑诊Ｍ３或Ｍ２;染色体检测５０例发现ｔ（１５;１７）,敏感率９０．９１％,３例形态不能肯定诊断者染色体发现ｔ（１５;１７）,诊断为Ｍ３Ｖ型;有ｔ（１５;１７）易位者均检测到ＰＭＬ－ＲＡＲａ融合基因,３例无ｔ（１５;１７）易位者,ＲＭＬ－ＲＡＲａ检测阳性。３例误诊者均经染色体及融合基因检测排除。结论：细胞遗传学ｔ（１５;１７）及融合基因ＲＭＬ－ＲＡＲａ检测是诊断ＡＰＬ的可靠指标,ＲＴ－ＰＣＲ融合基因检测更为敏感。     

近10年来我国血液病学的研究进展

建国50年来我国血液病学的临床和实验研究,取得了迅猛的发展和显著的成绩。尤其是近10年来,细胞生物学、分子生物学、细胞遗传学、分子免疫学等先进技术的应用,大大提高了血液病学临床和实验研究的水平。现就我国血液病学若干领域的主要研究成果作一介绍。基础研究一、白血病的研究上海血研所发现急性早幼粒细胞白血病(ＡＰＬ)的ｔ(15∶17)的结果是维甲酸受体α(ＲＡＲα)基因与ＰＭＬ基因的融合,还发现ＰＭＬＲＡＲα融合基因转录本存在长(Ｌ)、短(Ｓ)型及变异型三种异构体。而且在一小部分ＡＰＬ病人中克隆出了早幼粒细胞白血病锌指(ＰＬ…     

HLA—DR2,DRB1＊0301,DQA1＊0501基因频率与肌炎及其临床表现的 …

目的：观察人类白细胞相关抗原ＨＬＡ－ＤＲ２，ＤＲＢ１＊０３０１，ＤＱＡ１＊０５０１基因频率为多发性肌炎／皮肌炎（ＰＭ／ＤＭ）发病及其临床表现的关系，方法：特异性引物聚合酶链式反应（ＰＣＲ－ＳＳＰ）方法分别测定了３１例ＰＭ／ＤＭ患者及５０例正常人的ＨＬＡ－ＤＲ２，ＤＲＢ１＊０３０１及ＨＬＡ－ＤＡＱ１＊０５０１的基因频率，结果：三种基因型在３１例肌炎患得中基频率分别为：６．４５％，９．６８％和７７．４     

WT1基因在白血病患者中的表达

目的 研究急性白血病（ＡＬ）患者中ＷＴ１基因的表达情况及其与预后的关系。方法 用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）的方法,研究ＷＴ１基因在１０２例ＡＬ中的表达。结果 ＲＴ－ＰＣＲ检测ＷＴ１基因的敏感性为１０＾－４。ＷＴ１基因在ＡＬ所有亚型中都有表达,初治和复发的ＡＬ中阳性率为６６．７％,而在５年长期生存者中阳性率只有７．７％（４／５２）。随着完全缓解（ＣＲ）时间的延长,ＷＴ１基因阳性率有所下降,     

骨髓增生异常综合征预后因素分析

目的：探讨ＭＤＳ初诊时临床表现及实验室多参数对预后的影响。以利于采取有效的防治对策。方法：采用病例对照方法研究不同年龄、性别、初诊临床表现、ＦＡＢ分型、实验室检查的ＭＤＳ患者的转白率和中数生存期，并对ＭＤＳ死亡危险因素进行多元回归分析。结果：剧烈骨痛、Ｈｂ＜ ３０ｇ／Ｌ、外周血粒系发育异常、ＲＡＥＢ、ＲＡＥＢ－Ｔ ＭＤＳ亚型、骨髓或外周血原始细胞＞ ５％ 、伴发ＭＦ和ＡＬＩＰ（＋ ）、－ ７／７ｑ－ ，＋ ８ 染色体异常或复合染色体异常为ＭＤＳ预后不良因素。而Ｈｂ＞ ９０ ｇ／Ｌ、核型正常或单纯５ ｑ－ 、２０ ｑ－ 、１３ ｑ－ 则预后较好。结论：ＭＤＳ患者初诊时临床表现、实验室指标与预后有关。综合分析上述因素将可能提供ＭＤＳ有价值的预后信息。     

哮喘患者外周血单个核细胞白细胞介素—4和介素—5的基因表达

为进一步了解激素抵抗型哮喘的发病与细胞免疫功能紊乱的关系，应用地高辛标记ｃＤＮＡ探针、抗地高辛抗体－碱性磷酸酶检测系统行细胞涂片原位杂交，测定了１５例激素抵抗（ＳＲ）型和１５例激素敏感（ＳＳ）型哮喘患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）中白细胞介素（ＩＬ）－４和ＩＬ－５基因的ｍＲＮＡ表达。结果显示：（１）单独培养的ＳＲ型和ＳＳ型哮喘患者的外周血单个核细胞中ＩＬ－４ｍＲＮＡ和ＩＬ－５ｍＲＮＡ阳性细胞率差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。（２）与氟美松（１０－７ｍｏｌ／Ｌ）共同培养４８小时后，ＳＳ型哮喘患者的外周血单个核细胞中ＩＬ－４ｍＲＮＡ和ＩＬ－５ｍＲＮＡ阳性细胞率较单独培养时明显减少（Ｐ＜０．０１）；而在ＳＲ型患者中则无明显改变（Ｐ＞０．０５）。提示氟美松不能有效地抑制ＳＲ型哮喘患者的外周血单个核细胞中ＩＬ－４和ＩＬ－５基因的ｍＲＮＡ表达，这可能是发生激素抵抗的机制之一。     

系统性红斑狼疮多发家系与HLA致病单倍型研究

目的 探讨系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）的发病机制和分子遗传基础。方法 用聚合酶链反应结合顺序特异的寡核苷酸（ＰＣＲ／ＳＳＯ）探针杂交方法对５个ＳＬＥ多发家系和８０例无亲缘关系的ＳＬＥ患者ＨＬＡ－ＤＲ、ＤＱ亚区作ＤＮＡ分型。结果 发现ＳＬＥ中ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊１５０１，ＤＱＡ１＊０１０２等位基因频率及ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊１５０１，ＤＱＡ１＊０１０２，ＤＱＢ１＊０６０２单倍型频率均显著升高，提示该单倍型可能     

MDS患者白细胞介素2受体表达研究

本实验以２８例ＭＤＳ（ＲＡ１８例、ＲＡＥＢ和ＲＡＥＢ－Ｔ１０例）和１０例ＡＮＬＬ为研究对象，采用ＡＰＡＡＰ和ＥＬＩＳＡ法检测患者外周血单个核细胞（ＰＨＡ刺激前后）的ＭＩＬ－２Ｒ和培养血清中ＳＴＬ－ＩＲ，结果表明：经ＰＨＡ刺激培养４８ｈ后，ＭＤＳ和ＡＮＬＬ患者Ｔａｃ抗原阳性率明显低于正常人（Ｐ＜０．０１）ＲＡＥＢ和ＲＡＥＢ－ｔ组Ｔａｃ＋率比ＲＡ低，与ＡＮＬＬ差异无显著性（Ｐ＞０．０５）；血清中ＳＴＬ－２Ｒ在ＭＤＳ各亚型中均高于正常对照组（Ｐ＜０．０５），其中以ＲＡＥＢ及ＲＡＥＢ－ｔ为著。认为ＭＤＳ患者免疫反应及监视能减弱；ＳＴＲ－２Ｒ与ｍＩＬ－２Ｒ无相关；ＩＬ－２Ｒ表达异常可能与造血抑制有关。     

胃癌组织5q微卫星不稳定性与APC/MCC基因杂合性缺失的研究

目的探讨５ｑ微卫星不稳定性（ＭＳＩ）与ＡＰＣ／ＭＣＣ基因杂合缺失（ＬＯＨ）的关系。方法应用ＰＣＲ－ＳＳＬＰ及ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术分析５２例手术切除胃癌组织中ＭＳＩ及ＡＰＣ／ＭＭＣ基因ＬＯＨ。结果５ｑＭＳＩ检出率为３４．０％（１６／４７）,ＡＰＣ／ＭＣＣ基因ＬＯＨ率为３１．４％（１１／３５）。早期胃癌５ｑＭＳＩ阳性率为６６．７％（２／３）,ＡＰＣ／ＭＣＣＬＯＨ率为５０％（１／２）;进展期分别为３１．８（１４／４４）,３０．３％（１０／３３）。两组间无显著差别（Ｐ＞０．０５）。ＭＳＩ及杂合缺失与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移及临床分期无关。粘液（印戒）细胞癌ＡＰＣ／ＭＣＣＬＯＨ率（５５．６％）显著高于高、中分化管状腺癌（Ｐ＜０．０５）。胃、肠两型胃癌５ｑＭＳＩ及ＡＰＣ／ＭＣＣＬＯＨ差异无显著性及５ｑＭＳＩ与ＡＰＣ／ＭＣＣＬＯＨ无相关性（Ｐ＞０．０５）。结论染色体５ｑＭＳＩ有ＡＰＣ／ＭＣＣ基因ＬＯＨ在两型胃癌的早期发生及发展中起一定作用。染色体５ｑ可能是胃癌的易感部位。     

高血压患者血小板α＿2肾上腺素能受体改变的临床意义

采用放射性配基结合法及高压液相色谱法对原发性高血压（Ａ组，ｎ＝２４）继发性高血压（Ｂ组，ｎ＝１９）患者及正常对照组（Ｃ组，ｎ＝２６）的血小板α肾上腺素受体（ＰＬα_２－ＡＲ）及血浆儿茶酚胺（ＣＡ－去甲肾上腺素ＮＥ）水平进行测定，结果表明：Ａ组ＰＬα２－ＡＲ密度高于Ｃ组及Ｂ组，受体密度与血压及ＣＡ水平正相关。本研究表明ＰＬα２－ＡＲ密度的变化能反映原发性高血压病人的交感神经活性，并能反映家族遗传的特性，在高血压病的诊断与鉴别上有一定临床意义。     

HLA—DRB1等位基因与我国北方类风湿关节炎的关系

为了观察ＨＬＡ－ＤＲＢ１等位基因在类风湿关节炎（ＲＡ）临床及发病中的作用，对８６例ＲＡ患者和１０６名正常对照的ＨＬＡ－ＤＲＢ１等位基因进行分型。用序列特异性引物体外基因扩增法测定ＨＬＡ－ＤＲ特异性，用序列特异性寡核苷酸探针进行ＨＬＡ－ＤＲ４亚型的测定。并根据ＨＬＡ－ＤＲＢ１等位基因的分型结果分析ＲＡ的临床表现和血清学特点及其与ＲＡ患者预后的关系。结果表明：同对照组相比，ＲＡ患者中ＨＬＡ－ＤＲ４基因频率明显增高（４８．８％比１７．９％，Ｐ＜０．００１），而ＨＬＡ－ＤＲ５基因频率降低（１６．３％比２７．４％，Ｐ＝０．０６）。ＤＲ４阳性ＲＡ中主要的ＤＲ４亚型为ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊０４０５（６１．９％比２１．１％，Ｐ＜０．０１）。在ＤＲ４阳性和ＤＲ４阴性两组患者中，其发病年龄、病程和关节外表现无明显差异，但ＤＲ４阳性组的类风湿因子阳性率高于ＤＲ４阴性组（Ｐ＜０．０５），并且ＤＲ４阳性的ＲＡ患者腕和（或）指关节Ｘ线片分期明显重于ＤＲ４阴性者（Ｐ＜０．０５）。本研究结果表明，我国北方ＲＡ患者和ＨＬＡ－ＤＲ４基因明显相关，其主要亚型为ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊０４０５。ＲＡ患者ＨＬＡ－ＤＲ４基因的检测可作为一项有用的预后判断指标。     

胃癌癌前病变相关基因表达及胃炎消治疗机制的初步探讨

目的；探讨胃癌癌前病变（ＰＬＧＣ）ｃ－ｅｒｂＢ－２、Ｐ５３基因蛋白的表达及胃炎消的治疗机制。方法；对胃炎消治疗１９例ＰＬＧＣ患者，采用ＬＳＡＢ免疫组化法观察治疗前后ＰＬＧＣ组织中ｃ－ｅｒｂＢ－２，Ｐ５３蛋白的表达，并与维酶素治疗的１５例ＰＬＧＣ患者作对照。     

哮喘患者痰液细胞因子和嗜酸细胞阳离子蛋白水平及意义

目的探讨痰中细胞因子、嗜酸细胞阳离子蛋白（ＥＣＰ）水平与哮喘严重程度的关系。方法采用酶联免疫法及荧光免疫法对轻（Ｍ组１０例）、中、重度（ＭＳ组１５例）哮喘患者痰液白细胞介素（ＩＬ）５、肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）、可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）、ＥＣＰ水平进行检测。结果中、重度哮喘患者痰液ＩＬ－５（３５ｎｇ／Ｌ以上）、ＴＮＦ－α（Ｍ组为１４９±５９ｎｇ／Ｌ，ＭＳ组为２６７±１４７ｎｇ／Ｌ）、ｓＩＬ－２Ｒ（Ｍ组为３４８±１０７ｋＵ／Ｌ，ＭＳ组为４８８±１２７ｋＵ／Ｌ）、ＥＣＰ（Ｍ组为１２７±９５μｇ／Ｌ，ＭＳ组为２７８±１５０μｇ／Ｌ）浓度均显著高于轻度哮喘患者。结论哮喘患者痰液中可检出有关的细胞因子及炎性介质，它们参与了哮喘的急性发作并反映哮喘的严重程度。     

HLA—DR—DQ连锁基因单倍体与成人缓慢进展型和速发型1型 …

目的 探讨ＨＬＡ－ＤＲ－ＤＱ连锁基因单倍体与成人缓慢进展型１型糖尿病（ＳＰＩＤＤＭ）和速发型１型糖尿病（ＦＰＩＤＤＭ）的相关性。方法 利用ＰＣＲ／ＳＳＰ技术检测了５２例ＳＰＩＤＤＭ患者、３０例ＦＰＩＤＤＭ患者和１３０例正常人的ＨＬＡ－ＤＲ－ＤＱ连锁基因频率。结果 ①ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０３０１－ＤＱＢ１＊０２０１和ＤＱＡ１＊０５０１－ＤＱＢ１＊０２０１连锁基因单倍体与ＳＰＩＤＤＭ（Ｐｃ〈０．００１）     

应用长片段PCR扩增全长HIV— 1DNA的研究

目的 探讨长征段ＰＣＲ（ＬＤ－ＰＣＲ）扩增特点,并将它用于对全长ＨＩＶ ＤＮＡ的研究。方法 应用ＬＴＤ（Ｕ５）／ＬＴＤ（Ｒ）,ＣＬ－ＮＳＣ／ＣＬ－ＮＥＦ和ｇａｇＡｌ／ｇａｇＡ２等不同引物,＾３２Ｐｇａｇ,ｐｏｌ,ｎｅｆ和ｔａｔ等为片段探针,对克隆有ＨＩＶ－１完整基因片段,部分基因片段的质粒和ＨＶＩ感染者外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）中的ＨＩＶ－１ ＤＮＡ进行扩增。结果 ＬＤ－ＰＣＲ对０．４－９ｋｂ的第     

LMP2与LMP7基因多态性及强直性脊柱炎并发虹睫炎易感性关？…

目的 研究ＬＭＰ基因多态性与强直性脊柱炎并发虹睫炎发病的关系。方法 应用ＰＣＲ对正常人和病人进行ＨＬＡ－Ｂ２７检测以及ＬＭＰ２和ＬＭＰ７扩增。ＣｆｏＩ进行限制性酶切图谱分析。结果 强直性脊柱炎有虹睫炎（ＡＳ＋ＡＡＵ）病史以及单纯虹睫炎（ＡＡＵ）患者ＬＭＰ２基因ＢＢ纯合型较正常人以及强直性脊柱炎（ＡＳ）患者明显增高（Ｐ〈０．０５）。ＡＳ＋ＡＡＵ患者ＬＭＰ２基因ＢＢ纯合型较正常人以及强直性脊柱炎（ＡＳ