芳香烃受体在细胞免疫调节中的研究进展

近年来,芳香烃受体在细胞免疫调节中的作用越来越受到重视。芳香烃受体通过配体依赖的方式调节Th17和Treg细胞分化,从而为自身免疫系统疾病和肿瘤提供了新的潜在治疗靶点。     

芳香烃受体及芳香烃基因串在氧化应激和细胞凋亡中的作用

目前已发现至少有 6个受芳香烃受体 (arylhydrocarbonreceptor,AHR)调控的下游靶基因 ,这 6个基因统称为芳香烃基因串。芳香烃基因串在哺乳动物细胞的表达产物能通过互相对话 ,调节细胞氧化应激反应和细胞调亡过程 ,是芳香烃受体介导芳香烃化合物产生多种生物效应的分子机理     

类风湿性关节炎患者外周血芳香烃受体表达与Th17细胞相关性研究

目的 检测类风湿性关节炎患者(RA)外周血单个核细胞芳香烃受体(AhR)的表达情况,分析其表达与Th17细胞相关性并初步探讨AhR在RA发病中的作用机制.方法 Ficoll密度梯度法分离75例RA患者(其中活动期RA患者40例,缓解期RA患者35例)及70例健康对照者外周血单个核细胞(PBMC),酶联免疫吸附实验(EUSA)检测细胞裂解上清中AhR蛋白表达.流式细胞术检测75例RA患者Th17细胞表达比例.分析RA患者AhR蛋白表达与Th17细胞比例及其他临床指标的相关性.结果 RA患者PBMC内AhR表达[(91.25±15.27) ng/L]高于健康对照组[(41.81 ±9.72) ng/L],差异有统计学意义(t=3.191,P＜0.01).活动期RA患者AhR表达与缓解期RA患者表达差异无统计学意义(P＞0.05).RA患者PBMC中AhR水平与Th17细胞表达呈正相关(r=0.361,P=0.0015).RA患者PBMC中AhR表达与血清IL-17水平呈正相关,与其他临床指标无相关性(r=0.324,P=0.006).结论 RA患者PBMC中AhR表达升高,且与Th17细胞和血清中IL-17水平呈正相关,推测RA中AhR可能正向调控Th17细胞分化,促进IL-17表达.     

芳香烃受体在心房颤动患者心房组织中的表达及意义

目的:检测芳香烃受体(AhR)在风湿性心脏病(风心病)心房颤动患者右心耳组织中的表达,探讨其在心房纤维化中的作用及意义。方法:取风心病换瓣手术患者的右心耳组织为实验组,其中风心病窦性心律组25例和风心病慢性房颤组11例;取先天性心脏病(先心病)心脏手术患者的右心耳组织12例作为对照组。采用Masson染色法检测右心耳组织胶原含量,采用免疫组化技术检测AhR、AhR核转位蛋白(ARNT)和CYP1A1蛋白的表达和分布,采用实时荧光定量PCR检测AhR、ARNT和CYP1A1的mRNA表达,采用Western blot检测AhR、ARNT和CYP1A1的蛋白表达。结果:与先心病组相比,风心病窦律组和风心病慢性房颤组胶原含量和AhR、ARNT、CYP1A1的表达明显增高;与风心病窦律组相比,风心病慢性房颤组胶原含量和AhR、ARNT、CYP1A1的表达明显增高(P0.05)。结论:风心病患者心房组织中AhR的表达与纤维化程度相关;AhR/ARNT/CYP1A1在风心病患者中表达增加,可能参与风心病心房纤维化的发生发展。     

趋化因子受体CCR5在急性移植物抗宿主病防治中的研究

趋化因子受体CCR5(CC chemokine receptor 5)属于β趋化因子受体,表达于人体多种免疫细胞表面,与配体特异性结合发挥募集趋化免疫细胞定向迁移的作用,在急性移植物抗宿主病(acute graft versus host disease,aGVHD)的发生过程中发挥关键作用,逐渐成为移植免疫研究的热点...     

C5aR在慢性移植物抗宿主病中的表达及其作用机制

目的:探讨补体5a(C5a)及其受体(C5aR)在慢性移植物抗宿主病(cGVHD)中的表达及其作用机制。方法:用流式细胞术检测20例cGVHD患者及9例健康供者外周血淋巴细胞中C5aR的表达及CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞(Tregs)在CD4~+T细胞中的比例,并分析两者的相关性;将体外分离培养小鼠脾细胞分为对照组及重组小鼠C5a蛋白(rmC 5a)刺激组,用流式细胞术检测2组Tregs在CD4~+T细胞中的表达比例;另外,提取患者外周血单个核细胞进行体外培养,分为空白对照组及C5aR拮抗剂(C5aRA)组,用流式细胞术检测2组Tregs在CD4~+T细胞中的表达比例。结果:cGVHD患者外周血淋巴细胞表面C5aR的表达明显增多,而Tregs在CD4~+T细胞中的比例明显减少,两者呈显著负性相关(P0.05);体外培养小鼠脾细胞结果显示C5a下调Tregs在CD4~+T细胞中的比例;而体外培养患者外周血单个核细胞显示阻断C5aR可上调Tregs在CD4~+T细胞中的比例。结论:C5a/C5aR可能通过抑制Tregs的分化来介导cGVHD的发生发展。     

Th17和 Treg 细胞及其相关细胞因子在结核性胸膜炎患者中的变化及意义

目的检测健康人和结核性胸膜炎患者外周血Th17细胞和调节性T细胞（ Treg细胞）（ CD4＋CD25＋Foxp3＋）在CD4＋T细胞中的表达率以及IL-17、IL-23、IL-6、TGF-β血清水平和患者胸水中的IL-17、IL-23、IL-6、TGF-β水平,研究Th17细胞和调节性T细胞以及IL-17、IL-23、IL-6、TGF-β在结核性胸膜炎发病机制中的作用。方法使用流式细胞术检测患者以及健康对照人群外周血Th17细胞和调节性T细胞表达率,ELSIA方法定量检测血清以及胸水中IL-17、IL-23、IL-6、TGF-β水平,使用SPSS17．0统计学软件,分析健康人和结核性胸膜炎患者上述指标之间的差异以及各指标间的相关性。结果结核性胸膜炎患者外周血Th17细胞表达率（1．02％±0．20％）明显高于健康人外周血Th17细胞表达率（0．89％±0．13％,P＝0．002＜0．05）;结核性胸膜炎患者外周血调节性T细胞表达率（4．64％±0．77％）明显低于健康人外周血调节性T细胞表达率（5．10％±0．90％,P＝0．000＜0．05）;结核性胸膜炎患者Th17/Treg细胞的比率（0．25±0．07）明显高于健康人（0．17±0．05,P＝0．000＜0．05）;结核性胸膜炎患者外周血IL-17（17．49 ng/L±3．94 ng/L）和IL-23（90．42 ng/L±23．06 ng/L）水平和胸水中IL-17（26．13 ng/L±5．98 ng/L）和IL-23（122．26 ng/L±31．71 ng/L）水平显著高于对照组外周血IL-17（14．45 ng/L±3．81 ng/L）和IL-23（77．55 ng/L±20．26 ng/L）的水平,P值分别为0．022、0．039、0．000、0．000;患者胸水中IL-17和IL-23浓度也显著高于本人血液中的IL-17和IL-23浓度,P值为0．000和0．000;患者胸水中IL-6的浓度（5．31 ng/L±0．74 ng/L）显著高于患者血液中IL-6的浓度（4．54 ng/L±1．02 ng/L）和对照组血液中IL-6的浓度（4．26 ng/L±0．91 ng/L）,P值分别为0．003和0．000,患者血液与对照组血液中IL-6的浓度没有显著差别（P＝0．274）;对照组外周血液TGF-β浓度（3．95 ng/L±0．79 ng/L）显著高于患者外周血液TGF-β浓度（3．32 ng/L±0．80 ng/L）及胸水中TGF-β浓度（3．12±0．77）,P值分别为0．005和0．000,患者血液及胸水中TGF-β水平之间没有显著差别（P＝0．365）;结核性胸膜炎患者外周血Th17细胞的表达率与其Treg细胞在外周血的表达率呈显著负相关（r＝-0．684, P＝0．000＜0．05）,结核性胸膜炎患者外周血Th17细胞的表达率与其外周血中的IL-17、IL-23、IL-6水平呈明显的正相关（r＝0．479,0．441,0．326,P＝0．013,0．015,0．017）;患者血液中TGF-β水平与Treg细胞在外周血的表达率呈明显的正相关（r＝0．297,P＝0．024）,与Th17细胞表达率没有明显相关性（r＝0．091,P＝0．659）。结论 Th17和Treg细胞可能参与了结核性胸膜炎的免疫病理机制,有关细胞因子的变化可能参与了Th17和Treg细胞变化的调控以及炎症反应, Th17和Treg细胞以及有关细胞因子的变化可能是结核性胸膜炎重要的免疫病理机制。     

移植物抗宿主病小鼠肝脏及异体CD8+ T细胞趋化因子和趋化因子受体表达分析

为探讨趋化因子及其受体介导的效应性细胞迁移在移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD)发生发展中的重要作用,采用次要组织相容性抗原异配的GVHD小鼠模型,应用流式细胞分选术(FACS)、实时荧光定量聚合酶链反应等方法,分析GVHD靶器官和异体CD8+T细胞趋化因子及受体的表达。肝脏高表达干扰素诱导蛋白-10(IP-10)、干扰素诱导的T细胞趋化因子(ITAC)、γ干扰素诱生单核因子(MIG)、巨噬细胞炎症蛋白(MIP)-1α/β等趋化因子。异体CD8+T细胞上则高表达CXC趋化因子受体(CXCR)3和CC趋化因子受体(CCR)5。随着肝脏趋化因子的表达增加,异体CD8+T细胞迁移浸润的数量也增高。因而趋化因子及异体CD8+T细胞上趋化因子受体的特异对应关系,促使大量异体CD8+T细胞迁移浸润并造成肝脏损伤。     

NK细胞在异基因造血干细胞移植中对移植物抗白血病效应及移植物抗宿主病作用的影响

白血病复发和移植物抗宿主病（GVHD）是异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后影响病人生存的主要障碍。自然杀伤细胞（NK）独特的受体表达使其具有不同于一般免疫细胞的“同种反应性”效应,这种作用使NK细胞在增强移植物抗白血病效应（GVL）的同时抑制GVHD的发生,从而达到两者的分离。NK细胞在异基因造血干细胞移植中产生GVL及GVHD作用的机制以及影响因素的深入研究可能为探讨如何改善异基因造血干细胞移植预后提供有益的参考。     

Igf2基因差异性甲基化区域在二(口恶)英致畸中的作用

目的研究2,3,7,8-四氯二苯并-对-二口恶英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)对胎鼠生长发育的影响,探讨TCDD致畸与胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor2,Igf2)基因的表达和差异性甲基化区域(differentially methylated regions,DMRs)甲基化状态的关系。方法经灌胃给予孕10d大鼠10μg/kgTCDD,孕20天剖宫取胎,比较实验组和对照组孕鼠妊娠结局,测量两组活胎的顶臀长、体重和胎盘重;用实时定量-逆转录PCR检测孕20天胎鼠肝脏组织Igf2基因mRNA的表达;用蛋白印迹方法检测蛋白的表达水平;用甲基化限制酶HpaⅡ酶切-PCR法(HpaⅡ-PCR assay)检测两组胎鼠肝脏Igf2基因DMR1的甲基化程度,用亚硫酸氢盐测序方法检测Igf2基因DMR2的甲基化程度。结果对照组胎鼠均正常;实验组出现死胎及吸收胎,发生率为12.2%,畸形胎发生率为11.6%,活胎顶臀长、体重及胎盘重均明显低于对照组;对两组胎鼠肝脏组织Igf2基因表达的检测结果显示,实验组Igf2mRNA表达的相对量为0.77±0.11,对照组为0.27±0.15,两者差异有统计学意义(P<0.01);同时实验组肝脏组织Igf2蛋白的表达量也明显高于对照组;两组胎鼠肝脏Igf2基因DMR1的甲基化程度无差异,DMR2甲基化程度实验组明显低于对照组。结论孕期暴露于TCDD可导致大鼠发生死胎、吸收胎、畸形胎和胎儿宫内发育迟缓,TCDD所致胎鼠发育异常可能与胎鼠肝脏组织Igf2基因DMR2甲基化程度降低引起的Igf2高表达有关。     

T细胞受体(TCR)组库多样性及其在肺癌防治中的应用进展

免疫检查点抑制剂已成为晚期肺癌的标准治疗,但在转移防治中尚无明确突破。T细胞受体(TCR)是识别癌细胞表面新生抗原的关键“信号感受器”,我们从TCR组库多样性及其识别肿瘤抗原机制的角度,总结了基因工程编辑的T细胞受体T(TCR-T)细胞疗法在肺癌防治中的研究进展,以期提高肺癌转移防治疗效。     

大麻素Ⅱ型受体(CB2)在人皮肤及皮肤恶性肿瘤的组织分布

目的:研究大麻CB2受体在人皮肤及皮肤恶性肿瘤的组织分布.方法:用兔抗人CB2受体抗体做免疫组化,检测人类皮肤及皮肤恶性肿瘤组织CB2受体表达分布情况.结果:CB2受体在人类皮肤及皮肤恶性肿瘤均有表达分布,且皮肤恶性肿瘤的CB2受体过度表达.结论:大麻素受体CB2的表达与皮肤恶性黑素瘤、基底细胞癌、鳞状细胞癌关系密切.     

促甲状腺激素释放激素受体1和2在二甲磺酸乙烷处理大鼠睾丸中的表达及意义

目的 探讨促甲状腺激素释放激素受体1,2（TRH-R1,TRH-R2)在二甲磺酸乙烷（EDS）处理大鼠睾丸中的表达及其在Leydig细胞中表达的意义。 方法 构建30只EDS处理大鼠模型,应用蛋白质免疫印迹杂交技术、免疫组织化学ABC法以及免疫荧光双标法,检测TRH-R1和TRH-R2在EDS处理后2d、7d、14 d、21d和28d大鼠睾丸中的表达和定位。 结果 免疫印迹杂交发现,EDS处理后2d至14d,大鼠睾丸组织未见TRH-R1和TRH-R2表达,在EDS处理后21d、28d再次检测到了TRH-R1和TRH-R2的表达;免疫组织化学染色显示,TRH-R1和TRH-R2表达于EDS处理后21d、28d大鼠睾丸生精小管周围的长梭形细胞,免疫荧光双标证实此类细胞为再生的Leydig祖细胞。 结论 TRH-R1和TRH-R2参与了Leydig细胞的再生过程,可能对成年型Leydig细胞的发育、分化具有调节作用。     

核苷酸结合寡聚结构域样受体家族成员X1(NLRX1)在抗病毒固有免疫应答中的研究进展

NOD样受体家族成员X1(NLRX1)与机体抗病毒固有免疫反应密切相关.NLRX1对病毒感染宿主的免疫应答具有抑制作用,能通过多种机制削弱机体应对病毒感染的免疫应答反应,导致病毒复制增强并影响抗病毒治疗的效果.我们首先对NLRX1的结构、定位及功能进行详细概括,阐明定位于线粒体的NLRX1发挥着负性调节因子的作用,通过...