慢性疲劳综合征患者外周血单个核细胞中转化生长因子β1 mRNA及雌二醇受体β野生型mRNA的表达水平

目的 探讨慢性疲劳综合征(CFS)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA及雌二醇受体p野生型(ERβwt)mRNA表达及其与CFS的发病关系.方法 用实时荧光定量逆转录(FQ-RT)-PCR检测63例CFS患者、50例其他疾病患者(疾病对照组)、50名健康体检者(健康对照组)外周血PBMCs中TGF-β1 mRNA和ERβwt mRNA的表达水平和含量.以△Ct=Ct(待测基因)-Ct(内参基因)来比较基因表达水平的变化.结果 CFS患者TGF-β1 mRNA表达水平(△Ct=3.27±0.58)明显高于健康对照组(△Ct=4.37±1.00,t=7.02,P<0.01)和疾病对照组(△Ct=4.54±1.05,t=8.11,P<0.01).CFS患者ERβwt mRNA表达水平(△Ct=9.34±0.92)明显低于健康对照组(△Ct=7.10±0.48,t=15.47,P<0.01)与疾病对照组(△Ct=7.12±0.47,t=15.44,P<0.01);结论CFS患者TGF-β1 mRNA表达水平显著高于健康人和疾病对照组;CFS患者ERβwtmRNA表达水平显著低于健康人和疾病对照组,TGF-β1 mRNA和ERβwt mRNA的表达可能参与了CFS的发病过程.     

PTEN和COX-2在髓系白血病中的表达及作用机制探讨

目的 探讨与张力蛋白同源的10号染色体缺失的磷酸酶基因(phosphatase and tensin hemology deleted on chromosome ten gene,PTEN)及环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在髓系白血病细胞中的表达及相互作用.方法 收集2007至2009年保定市第一医院及河北医科大学第二医院住院及门诊患者30例,其中10例慢性粒细胞白血病慢性期(chronic myeloid leukemia-chronic phase,CML-CP)患者、10例慢性粒细胞白血病急变期(chronic myeloid leukemia-blastic crisis,CML-BC)患者及10名健康人,分析所有研究对象骨髓单个核细胞内PTEN、COX-2信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid,mRNA)表达水平变化.将携带有野生型PTEN和绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-PTEN-GFP)及对照载体腺病毒(Ad-GFP)转染人慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)细胞系K562.流式细胞仪检测转染效率;四甲基偶氮唑蓝(3-[4,5-dimethyl-2-thiazolyl]-2,5-dip,MTT)法检测细胞增殖抑制率及黏附功能;荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测PTEN、COX-2 mRNA水平变化,蛋白质印迹(western blot,WB)检测PTEN、p-Akt蛋白表达水平的变化,细胞化学染色检测COX-2蛋白表达变化.结果 CML-BC患者中PTEN mRNA表达水平(0.022 ±0.021)低于CML-CP(1.134±1.124)及健康对照组(1.059±0.595,F=7.16,P＜0.01),而COX-2 mRNA在CML-BC(0.761 ±0.418)患者中均高于CML-CP(0.211 ±0.158)及健康对照组(0.165±0.152,F=12.58,P＜0.01).以MOI=200转染K562细胞后,Ad-PTEN-GFP组K562细胞最大增殖抑制率为38.67％ ±4.30％,明显高于Ad-GFP组抑制率(5.34％±0.31％,t=13.39,P＜0.01),转染3d后Ad-PTEN-GFP组K562细胞内COX-2 mRNA表达水平(0.013 ±0.001)均明显低于Ad-GPF组(0.199±0.018)及未转染组COX-2 mRNA(0.217 ±0.021,F=499.45,P＜0.01).p-Akt及COX-2蛋白表达水平亦明显减低.结论 PTEN可能通过抑制COX-2表达从而抑制白血病细胞增殖、黏附功能.     

慢性粒细胞白血病错配修复基因的研究

目的 探讨慢性粒细胞白血病（CML）错配修复（MMR）基因的表达水平及调控机制。方法 用半定量RT-PCR方法检测62例CML患者及K562细胞的5个MMR基因（hMSH2、hMSH3、hMSH6、hMLH1、hPMS2）mRNA的表达；用RT-PCR方法动态检测26例进行异基因外周血造血干细胞移植（allo-PBSCT）及4例使用伊马替尼治疗的CML患者ber-abl及MMR mRNA的表达水平；用伊马替尼体外作用于CML患者的单个核细胞（MNC）及K562细胞后，用Western blot方法检测BCR—ABL融合蛋白的酪氨酸磷酸化水平，RT-PCR方法检测MMR mRNA表达水平。结果 与正常人比较，CML患者及K562细胞的hMSH2、hMSH3、hMLH1 mRNA的表达明显降低（P〈0．05）；26例行allo—PBSCT及4例使用伊马替尼治疗的CML患者，其hMSH2、hMSH3、hMLH1 mRNA的表达随着bcr—abl mRNA的表达降低而升高；伊马替尼体外作用于CML患者MNC及K562细胞后，其hMSH2、hMSH3、hMLH1 mRNA的表达随着BCR—ABL融合蛋白酪氨酸磷酸化水平的降低而升高。结论 CML患者、K562细胞hMSH2、hMSH3、hMLH1 mRNA比正常人降低，bcr—abl融合基因抑制hMSH2、hMSH3、hMLH1 mRNA的表达。     

雷帕霉素对慢性髓性白血病细胞增殖的抑制作用及其机制

目的 探讨雷帕霉素对慢性髓性白血病(CML)细胞增殖的抑制作用及可能机制.方法 用不同浓度雷帕霉素处理CML细胞系K562细胞,用MTT法检测雷帕霉素对K562细胞的增殖抑制率;Western blot法及RT-PCR法检测不同浓度雷帕霉素作用后的K562细胞中mTOR、4E-BP1、p70S6K蛋白及mRNA表达水平,Western blot法检测CML慢性期患者骨髓原代细胞中mTOR、4E-BP1、p70S6K蛋白及磷酸化水平,并以健康人骨髓细胞为对照;数据采用x2检验、Fisher确切概率计算、单因素方差分析(ANOVA)方法进行分析.结果 CML慢性期患者骨髓中mTOR、4E-BP1、p70S6K蛋白磷酸化水平与正常对照相比明显增高(70.6％对30.0％,76.5％对40.0％,73.5％对20.0％,P值均＜0.05);20 nmol/L及更高浓度雷帕霉素对K562细胞增殖有明显抑制作用;雷帕霉素作用可降低K562细胞中mTOR磷酸化水平,及4E-BP1、p70S6K蛋白及mRNA表达水平(P值均＜0.05).结论 mTOR途径在CML的发病中发挥重要作用,其靶向抑制剂雷帕霉素可通过阻断mTOR途径抑制K562细胞增殖.     

桂皮醛体外诱导慢性髓系白血病细胞凋亡的机理研究

本研究探讨桂皮醛(cinnamic aldehyde,CA)对慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,CML)细胞的诱导凋亡作用及其机制。以不同浓度的桂皮醛作用于体外培养的K562细胞和骨髓CML原代细胞,流式细胞术检测细胞凋亡率,Real-time PCR技术检测K562细胞BCR-ABL融合基因表达变化,免疫印迹法检测K562细胞CrkL磷酸化水平和C-MYC蛋白表达。结果表明:桂皮醛可诱导K562和骨髓CML原代细胞凋亡。在K562细胞凋亡过程中,BCR-ABL融合基因mRNA的表达、CrkL蛋白磷酸化及C-MYC蛋白表达均明显受抑。结论 :桂皮醛体外诱导CML细胞凋亡,其机制与BCR-ABL融合基因表达和功能受抑有关。     

稳定下调K562细胞株FMI表达对其甲磺酸伊马替尼药物敏感性的影响

目的:探讨稳定下调K562细胞株FMI表达对其甲磺酸伊马替尼药物敏感性的影响及其可能的作用机制。方法:应用Western-blot方法分别检测K562细胞、慢性髓系白血病(CML)病人、慢性髓系急变病人及健康志愿者外周血单个核细胞FMI蛋白表达;设计靶向人FMI的特异性干扰序列,连接入慢病毒载体LV3;用三质粒系统包装慢病毒颗粒,感染K562细胞,筛选稳定下调FMI的K562细胞;应用CCK8法鉴定K562细胞对伊马替尼药物敏感性的变化,AnnexinⅤ/7-AAD双标记的流式细胞术检测细胞凋亡,荧光定量PCR检测白血病细胞FMI、Fz8的转录水平,Western-Blot方法检测白血病细胞FMI、Fz8、NFAT1、BCR-ABL、β-catenin的表达水平。结果:在CML急变病人外周血单个核细胞与K562细胞可检测到FMI蛋白表达,在CML缓解期病人及健康志愿者外周血单个核细胞未检测到FMI表达。成功构建重组慢病毒载体LV3/FMI,并包装慢病毒,筛选出稳定下调FMI蛋白的K562细胞株;稳定下调K562细胞FMI表达后,在相同药物浓度作用下白血病细胞增殖率降低、凋亡率升高,Fz8基因转录水平降低,Fz8蛋白表达水平下降,NFAT1总蛋白水平增高,核转位增加,BCR-ABL融合蛋白表达水平无明显变化,总β-catenin蛋白表达水平下降。结论:稳定下调FMI表达后,K562细胞对伊马替尼药物敏感性增高,凋亡增加,此作用可能是通过抑制FMI-Fz8信号通路而激活Ca2+-NFAT与Wnt/β-catenin信号通路实现的。     

BCR-ABL抑制剂STI571对慢性髓系白血病细胞株K562中SARI基因表达影响的研究

为了探讨抑癌基因SARI(suppressor of AP-1 regulated by IFN)在慢性髓系白血病(CML)中表达调控可能的分子机制,收集了46名CML患者和40名健康志愿者外周血样品,使用实时定量PCR技术检测2组人群中SARI基因的相对表达水平.在体外以CML细胞株K562为研究模型,使用BCR-ABL抑制剂STI571(imatinib)处理K562细胞,用实时定量PCR技术检测SARI基因的相对表达水平.结果表明,CML患者外周血中SARI mRNA相对表达量明显低于健康志愿者,2组间具有明显的统计学差异(P<0.001).使用STI571(2.5 μmol/L)处理K562细胞24小时后SARI mRNA相对表达量明显高于未处理K562细胞,两组间差异具有显著性(P<0.001).结论:CML患者外周血SARI mRNA表达水平降低可能与该疾病的发生发展过程相关联,而且SARI基因表达下调与BCR-ABL抑制作用有关.本研究为CML患者基因治疗的研究提供了新线索.     

慢性髓系白血病DNA依赖蛋白激酶催化亚基基因的研究

本研究旨在探讨髓系粒细胞白血病（CML）的DNA依赖蛋白激酶催化亚基（DNA-PKcs）基因表达水平、调控机制及其在CML急性变中的作用。用半定量RT-PCR、Western blot方法分别检测62例CML患者及K562细胞的DNA-PKcs mRNA和DNA-PKcs蛋白表达,并与23例正常人作对照;对26例接受同种异基因外周血干细胞移植（allo-PBSCT）及4例使用伊马替尼治疗的CML患者用RT-PCR、Western blot方法分别动态检测bcr-abl mRNA和DNA-PKcs蛋白表达水平;用伊马替尼体外作用CML患者的单个核细胞（MNC）及K562细胞后,用RT-PCR、Western blot方法分别检测DNA-PKcs mRNA和DNA-PKcs蛋白表达及bcr-abl融合蛋白的酪氨酸磷酸化水平。结果表明：与正常人比较,CML患者及K562细胞的DNA-PKcs蛋白表达量明显降低（P〈0.05）;26例allo-PBSCT及4例使用伊马替尼治疗的CML患者,DNA-PKcs蛋白表达量随着bcr-abl mRNA表达量的降低而升高;伊马替尼体外作用于CML患者MNC及K562细胞后,DNA-PKcs蛋白表达量随着bcr-abl融合蛋白酪氨酸磷酸化水平的降低而升高。结论：bcr-abl融合基因通过转录后机制下调DNA-PKcs蛋白的表达;DNA-PKcs蛋白表达下降可能是CML急性变的机制之一。     

白血病细胞PTEN表达与AKT磷酸化水平相关性研究

本研究探讨各型白血病pten mRNA及蛋白表达与AKT磷酸化水平的关系及其在白血病发病中的作用,为今后PI3K/AKT通路抑制剂的使用提供依据。128例初发的白血病患者纳入研究,其中AML 61例,ALL 27例,CML24例,CLL16例。正常对照21例。采用RT-PCR和Western blot分别检测Jurkat细胞株、白血病患者骨髓单个核细胞pten mRNA表达,PTEN蛋白及P-AKT蛋白的表达。结果表明:Jurkat细胞株pten mRNA表达和PTEN蛋白表达水平均较正常对照组低。AML组pten mRNA表达量虽低于正常对照组,但差异无统计学意义(p=0.274);ALL、CML、CLL各组患者pten mRNA表达量低于正常对照组,差异有统计学意义(p0.05)。AML、ALL、CML、CLL各组PTEN蛋白表达量均低于正常对照组,P-AKT蛋白表达量均高于正常对照组,差异有统计学意义(p0.05)。结论:PTEN的低表达及P-AKT高表达在白血病的发生中可能有重要的作用,PTEN的失活主要发生在蛋白质翻译水平。     

慢性粒细胞白血病细胞中Skp2的表达及其临床意义

目的研究慢性粒细胞白血病(CML)细胞中S期激酶相关蛋白2(Skp2)的表达及其与p27的关系.方法用免疫细胞化学染色和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测CML细胞中Skp2和p27蛋白水平及转录水平的表达.结果免疫细胞化学染色显示,CML细胞Skp2蛋白表达增高(14.3%±2.9%),与正常对照(8.6%±0.9%)相比有显著性差异(P＜0.05);CML细胞中Skp2蛋白和p27蛋白呈负相关(r=-0.75,P=0.001).但RT-PCR结果显示,Skp2蛋白过度表达的CML细胞中p27 mRNA未见明显变化.结论 Skp2在调控p27蛋白表达过程中起重要作用,Skp2表达异常可能与CML病程进展有关.     

心源性猝死病人心肌SOCS-1和C-JUN表达及法医学意义

目的探讨心源性猝死（SCD）病人细胞因子信号转导抑制分子-1（SOCS-1）和原癌基因蛋白（C-JUN）的表达及法医学意义。方法收集SCD尸检病理标本43例,其中冠心病猝死23例,肺动脉栓塞猝死12例,病毒性心肌炎猝死5例,扩张型心肌病猝死3例;选择因交通事故、外伤等所致死亡者标本10例为对照组。应用免疫组织化学方法检测两组心肌细胞中SOCS-1和C-JUN蛋白的表达。结果 SCD组心肌细胞中SOCS-1和C-JUN表达显著高于对照组（F=11.94、56.68,q=4.815～20.669,P〈0.01）。SCD组心肌细胞中SOCS-1与C-JUN表达呈正相关（r=0.316,P〈0.01）。结论 SCD病人心肌细胞内SOCS-1和C-JUN基因蛋白表达可能参与了SCD的发病,可作为法医鉴定SCD的重要指标。     

不同分子生物学方法快速鉴别非结核分枝杆菌的应用评价

目的 评价3种分子生物学方法快速鉴定非结核分枝杆菌的优缺点.方法 收集41株临床分离的非结核分枝杆菌,以16S rRNA基因测序方法为标准,同时以hsp65基因测序方法及PCR-RFLP方法鉴定菌株,与16S rRNA基因测序结果进行比较.结果 41株非结核分枝杆菌16SrRNA基因测序结果:9株龟分枝杆菌复合群,7株偶发分枝杆菌,7株胞内分枝杆菌,3株鸟分枝杆菌,3株堪萨斯分枝杆菌复合群,3株耻垢分枝杆菌,3株土分枝杆菌,2株草分枝杆菌,2株无色分枝杆菌,1株瘰疬分枝杆菌,1株M.arupense.与16S rRNA基因测序相比较,hs65 PCR-RFLP能鉴定9株龟分枝杆菌复合群至亚种脓肿分枝杆菌,3株堪萨斯分枝杆菌复合群鉴定至亚种堪萨斯分枝杆菌;1株偶发分枝杆菌及1株无色分枝杆菌与其不符;其余菌株鉴定结果一致,符合率为95.1%(39/41).hsp65基因测序结果显示,1株爱尔兰分枝杆菌与16S rRNA测序结果不符,其余菌株鉴定结果与其一致,符合率为97.6%(40/41),并且能进一步将9株龟分枝杆菌复合群鉴定至亚种脓肿分枝杆菌,3株堪萨斯分枝杆菌复合群鉴定至亚种堪萨斯分枝杆菌.结论 3种方法均能快速鉴定非结核分枝杆菌.与16S rRNA基因测序相比,hsp65基因测序及hsp65 PCR-RFLP更容易鉴定临床最常见非结核分枝杆菌(如堪萨斯分枝杆菌和脓肿分枝杆菌),可在临床推广使用.     

窒息新生儿尿视黄醇结合蛋白、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测的应用

目的探讨尿视黄醇结合蛋白（RBP）、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）在窒息新生儿肾功能损害的应用价值。方法选取轻度窒息足月儿37例,重度窒息足月儿26例,分别检测出生后首次和第24小时尿RBP／Cr、尿NAG／Cr,并同时测血尿素（Urea）和血肌酐（Cr）,比较4项检测结果,并分析其统计学差异。结果重复窒息组两次尿RBP／Cr、NAG／Cr均值均高于轻度窒息组,差异有统计学意义（P〈0．05）。在轻度窒息组,尿RBP／Cr异常率明显高于另3项指标,差异有统计学意义（P〈0．01）;尿NAG／Cr异常率比血Urea和血Cr高,差异有统计学意义（P〈0．05）。在重度窒息组,尿RBP／Cr异常率也最高,与尿NAG／Cr比较,差异有统计学意义（P〈0．05）,与血Urea、血Cr比较,差异有统计学意义（P〈0．01）;尿NAG／Cr异常率高于血Urea,差异有统计学意义（P〈0．05）,但与血Cr之间的异常率比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论尿RBP／Cr和尿NAG／Cr可作为早期监测窒息新生儿肾功能损害的敏感指标,其中尿RPP／Cr比尿NAG／Cr更敏感。     

Tim-3及Th-17在儿童急性ITP发病机制中的作用

目的 探讨Tim-3、Th17细胞及Treg细胞在ITP患者中的表达及其临床意义.方法 应用流式细胞术检测42例ITP患者与39名健康对照者Th17细胞及Treg细胞的表达;采用ELISA法检测外周血血浆中IL-17、IFN-γ和IL-4的表达;应用RT-PCR方法 检测Tim-3、IFN-γ、IL-4、T-bet等细胞因子和转录因子的mRNA表达.结果 ITP患者Th17细胞比例为(2.41±1.43)%,明显高于健康对照组的(1.08±0.59)%,差异有统计学意义(t=5.35,P<0.05);ITP患者Treg细胞比例为(1.64±0.74)%,明显低于健康对照组的(3.12±0.52)%,差异有统计学意义(t=10.33,P<0.05).IL-17在ITP患者血浆中的表达水平为(14.42±6.37)ng/L,健康对照组为(13.91±4.47)ng/L,差异无统计学意义(t=0.42,P>0.05);而ITP患者血浆IFN-γ含量为(55.74±15.25)ng/L,较健康对照组的(31.33±12.99)ng/L明显升高,IL-4含量为(7.42±1.50)ng/L,较健康对照组的(18.17±5.19)ng/L明显降低,差异均有统计学意义(t=7.72、2.87,P均<0.05).ITP患者的T-bet mRNA和IFN-γmRNA表达水平明显升高,分别为健康对照组的(3.34±1.32)倍和(8.57±3.44)倍,差异有统计学意义(t=6.41、13.21,P<0.05);而Tim-3 mRNA和IL-4 mRNA表达水平明显下降,分别为健康对照的(0.29±0.15)倍和(0.25±0.15)侪,差异均有统计学意义(t=9.61、10.02,P<0.05).结论 Th17/Treg细胞亚群比例失调和Tim-3的表达下降可能是ITP发生和发展的重要决定因素.     

干燥综合征患者血清卵泡抑素样蛋白1表达水平及临床意义

目的 探讨干燥综合征（Sjgren’s syndrome,SS）患者血清中卵泡抑素样蛋白1 （FSTL1）的表达水平及临床意义。方法 收集2016年12月至2017年10月苏州大学附属第三医院风湿免疫科41例SS患者及30例健康人血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清FSTL1表达。结果 SS患者组血清FSTL1表达水平（2.54±0.30） ng/ml高于健康对照组（2.08±0.82） ng/ml（P=0.0035）;血清FSTL1水平与IgG（r=0.332,P=0.039）、IgA水平（r=0.368,P=0.021）呈正相关;血清FSTL1水平与C3水平(r=-0.319,P=0.045)呈负相关。血清FSTL1水平与红细胞沉降率(ESR)、IgM、C4、外周血白细胞、外周血血小板、外周血血红蛋白、类风湿因子(RF)无相关性（P>0.05）。抗核抗体(ANA)滴度1∶160组与ANA滴度1∶320组及抗SSB阳性组与抗SSB阴性组FSTL1水平差异无统计学意义（P>0.05）。肺间质损害、血液系统、内分泌系统、关节炎与FSTL1无关（P>0.05）。结论 血清FSTL1可能成为提示SS疾病活动度的生物标志物。     

眼底动脉硬化与冠状动脉慢血流的关系

目的 探讨眼底动脉硬化(eyeground atherosclerosis, EA)与冠状动脉慢血流（coronary slow flow, CSF)的相关性。方法 回顾性分析2013年1月至2016年12月于北京市门头沟区医院住院行冠状动脉造影检查诊断CSF的患者146例,选取同期101例冠状动脉血流正常（normal coronary artery, NCA）人群作为对照组。所有病例均行眼底照相检查;同时收集病史、血常规、血生化、纤维蛋白原、尿微量白蛋白（UMA）、糖化血红蛋白、高敏C反应蛋白（high sensitive C reactive protein, hs CRP）、颈动脉硬化以及室壁运动等指标,评价EA与CSF的相关性。结果 ①CSF组动脉硬化阳性率明显高于NCA组(P<0.05);②随着EA程度的增加,CSF的发生率逐渐增加(P<0.05);③综合EA、性别、hs CRP水平以及其他危险因素后,发现EA≥Ⅱ级、女性、高血压、年龄>65岁以及hs CRP>5 mg/L是CSF的预测因子（P=0.009,0.032,0.036,0.015,0.013）。结论 随着EA程度的增加,CSF的发生率逐渐增加,EA和CSF现象具有一定的相关性,是CSF的独立预测因子。     

胶质细胞源性神经营养因子对中小型神经元痛温觉调控研究

目的:胶质细胞源性神经营养因子(glialcellline-derivedneurotrophicfactor,GDNF)在神经系统内较多的区域均有分布,并且发挥营养、促进再生等生物学作用。最近的研究证明它在调节靶细胞功能方面具有更广泛的功能。通过研究GDNF及其受体GDNFR-α和Ret在背根节内的分布特点,探讨其对中小型神经元痛温觉调控作用。方法:背根节冰冻切片,免疫组织化学ABC法染色,观测GDNF及其受体GDNFR-α和Ret在背根节的分布。结果:GDNF及其受体GDNFR-α和Ret在背根节均有分布,而且主要分布于中小型神经元。结论:GDNF对背根节内的中小型神经元有特异性的作用,可能参与了痛觉过程的调控。     

Evidence for the chronic in vivo production of human T cell leukemia virus type I Rof and Tof proteins from cytotoxic T lymphocytes directed against viral peptides

Human T cell leukemia virus type I (HTLV-I) is a persistent virus that causes adult T cell leukemia and tropical spastic paraparesis/HTLV-I-associated myelopathy. Studies on rabbits have shown that viral proteins encoded by the open reading frames pX-I and pX-II are required for the establishment of the persistent infection. To examine the in vivo production of these proteins in humans, we have investigated whether cytotoxic T lymphocytes isolated from HTLV-I-infected individuals recognized pX-I and pX-II peptides. CD8(+) T lymphocytes to pX-I and pX-II peptides were detected in HTLV-I-infected individuals, whatever their clinical status, and even in the absence of any antigenic restimulation. These findings indicate that the HTLV-I pX-I and pX-II proteins are chronically synthesized in vivo, and are targets of the natural immune response to the virus.     

△Np73基因沉默对结肠癌细胞5-氟尿嘧啶化疗敏感性的影响

目的 探讨小干扰RNA(siRNA)调节导致的△Np73抑制对结肠癌细胞SW620 5-氟尿嘧啶(5-FU)药物敏感性的影响,为结肠癌治疗提供新途径.方法 将△Np73 siRNA转染人SW620结肠癌细胞,观察其对结肠癌细胞△Np73表达的影响.并与5-FU联合使用,四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测细胞活力,流式细胞技术检测细胞凋亡.分别将转染△Np73 siRNA和阴性对照siRNA的SW620细胞注射裸鼠成瘤,瘤中注射5-FU观察体内肿瘤的生长情况.结果 △Np73 siRNA可显著抑制SW620结肠癌细胞△Np73的表达,但本身均不能抑制SW620结肠癌细胞的生长.同时应用△Np73 siRNA和5-FU共同处理的SW620细胞的凋亡率达到42.9%,显著高于单纯5-FU处理组(18.9%)和单纯△Np73处理组(8.8%).在转染△Np73 siRNA的成瘤小鼠的瘤中注射5-FU,能明显抑制癌细胞体外生长(t=15.32,P<0.05).结论 △Np73 siRNA可通过抑制△Np73的表达,从而增强对化疗药物的敏感性.