α-亚麻酸在缺血性心衰中的保护作用及其对缺血早期炎症小体NLRP3的抑制作用

目的探讨α-亚麻酸(α-linolenic acid,ALA)在缺血性心衰中的保护作用及其对TNF-α、IL-6和炎症小体NLRP3(pyrin domain containing 3)等炎症介质的影响。方法通过结扎冠状动脉建立大鼠心肌梗死(myocardial infarction,MI)模型,给予ALA或其对照,监测MI后1周、2周和4周大鼠血清中TNF-α和IL-6炎症因子变化,检测MI后1周心肌组织中NLRP3相关蛋白及和MI后4周心脏功能的变化。结果与假手术组比较,血清中TNF-α和IL-6水平在MI后1周和2周均显著增加。MI后1周缺血区心肌组织中NLRP3表达显著增加,半胱氨酸蛋白酶1(cysteinyl aspartate specific protease-1,caspase-1)活性升高,IL-1β和TNF-α蛋白含量显著升高。补充ALA不仅显著降低大鼠MI后1周和2周血清中TNF-α和IL-6水平,而且减少MI后1周心肌组织中的NLRP3含量和caspase-1活性,进而降低了IL-1β和TNF-α含量,减少了中性粒细胞在心肌组织中的浸润,改善了MI 4周后的心脏功能。结论 MI前补充ALA可减少MI后1周炎症小体NLRP3相关蛋白表达,抑制TNF-α、IL-1β及IL-6炎症因子的生成,改善MI 4周后的心脏功能,延缓缺血性心衰的发生发展。     

慢性间歇性低氧激活NLRP1炎性小体引起小鼠肝损伤

目的 探讨慢性间歇性低氧(CIH)是否能激活含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白1(NLRP1)炎性小体引起肝损伤。方法 将C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、 CIH组。CIH组小鼠放入CIH仓进行造模(每天8 h,连续4周)。造模后,采用HE染色观察肝组织细胞形态、试剂盒检测小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平,二氢乙啶(DHE)标记检测肝组织活性氧(ROS)的水平,免疫组织化学染色法检测小鼠肝组织NLRP1、含胱天蛋白酶激活和募集结构域凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和胱天蛋白酶1(caspase-1)的表达和定位,Western blot法检测小鼠肝组织中NLRP1、 ASC、 caspase-1、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的蛋白表达,ELISA检测小鼠血清IL-1β、 TNF-α水平。结果与对照组相比,CIH组肝细胞病变明显,细胞出现破裂、坏死、炎症细胞聚集,ALT、 AST、 ROS、 IL-1β和TNF-α水平显著升高;NLRP1、 ASC、caspase-1、IL-1β和TNF-α的蛋白表达升高。结...     

山柰酚对重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障变化及免疫功能的影响北大核心CSCD

目的:探究山柰酚对重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障的变化及免疫功能的影响。方法:建立重症急性胰腺炎大鼠模型,将大鼠随机分为6组:假手术组、模型组、山柰醇低剂量组、山柰醇中剂量组、山柰醇高剂量组和地塞米松组。HE染色检测胰腺组织病理损伤并进行病理评分;ELISA检测血清二胺氧化酶(DAO)、血清D-乳酸、IL-6、TNF-α和IL-1β水平;全自动生物化学分析仪检测血清淀粉酶和脂肪酶;全自动图像分析仪测定黏膜厚度、绒毛高度;Western blot检测NLRP3、ASC和Cleaved caspase-1/Caspase-1、p-Nrf2、Nrf2、NQO1和HO-1表达。结果:与假手术组比较,模型组血清DAO、D-乳酸、淀粉酶和脂肪酶水平升高(P<0.05),黏膜厚度、绒毛高度降低(P<0.05),IL-6、TNF-α和IL-1β水平升高(P<0.05),NLRP3、ASC和Cleaved caspase-1/Caspase-1表达升高(P<0.05);与模型组比较,山柰酚中、高剂量组和地塞米松组胰腺组织病理损伤明显改善,胰腺组织病理学评分降低(P<0.05),血清DAO、D-乳酸、淀粉酶和脂肪酶水平降低(P<0.05),黏膜厚度、绒毛高度升高(P<0.05),IL-6、TNF-α和IL-1β水平降低(P<0.05),NLRP3、ASC和Cleaved caspase-1/Caspase-1表达降低(P<0.05),p-Nrf2/Nrf2和NQO1、HO-1蛋白表达升高(P<0.05)。结论:山柰酚可有效改善重症急症胰腺炎模型大鼠免疫功能,提高肠黏膜屏障功能的保护能力,抑制炎症因子释放,抑制NLRP3/ASC/Caspase-1通路活化,激活Nrf2/NQO1/HO-1通路。     

右美托咪定通过Akt/m TOR自噬通路介导NLRP3炎症小体失活而减轻脓毒症大鼠肠损伤

目的:探讨右美托咪定(DEX)是否通过蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)自噬通路介导核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体失活从而减轻脓毒症大鼠肠损伤。方法:随机数字法对50只大鼠分组:假手术组、模型组、DEX组(0、3和6 h腹腔注射10μg/kg DEX)、DEX+NVP-BEZ235组(在DEX组基础上腹腔注射30 mg/kg NVP-BEZ235)及DEX+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(在DEX组基础上腹腔注射15 mg/kg 3-MA),每组10只。除假手术组外,其余各组盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症大鼠模型,建模后给药。HE染色观察肠道组织形态,对结肠标本进行结肠大体形态损伤指数(CMDI)评分;ELISA检测血清中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;免疫组化检测肠道组织中自噬相关蛋白beclin-1和LC3-II蛋白水平;Western blot检测肠道组织中Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、NLRP3、含caspase募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、caspase-1及其前体pro-caspase-1的蛋白水平。结果:模型组大鼠肠道组织完整性被破坏,细胞脱落和炎症浸润现象明显;DEX组大鼠肠道组织完整,仅出现部分细胞脱落和炎症浸润现象;DEX+NVP-BEZ235组和DEX+3-MA组大鼠肠道完整性被破坏,细胞脱落和炎症浸润明显。与假手术组相比,模型组大鼠CMDI评分,血清中IL-1β和TNF-α水平,肠道组织中beclin-1和LC3-II蛋白阳性率,p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、NLRP3、ASC和caspase-1/pro-caspase-1蛋白水平升高(P0.05);与模型组相比,DEX组大鼠CMDI评分,血清中IL-1β和TNF-α水平,肠道组织中NLRP3、ASC和caspase-1/pro-caspase-1蛋白水平降低(P0.05),肠道组织中beclin-1和LC3-II蛋白阳性率及p-Akt/Akt和pmTOR/mTOR蛋白水平升高(P0.05);与DEX组相比,DEX+NVP-BEZ235组和DEX+3-MA组血清中IL-1β和TNF-α水平及肠道组织中NLRP3、ASC和caspase-1/pro-caspase-1蛋白水平升高(P0.05),肠道组织中beclin-1和LC3-II蛋白阳性率及p-Akt/Akt和p-mTOR/mTOR蛋白水平降低(P0.05)。结论:DEX能够通过激活Akt/mTOR通路促进自噬而介导NLRP3炎症小体失活,从而减轻脓毒症大鼠肠损伤。     

野百合碱致肺动脉高压大鼠肺组织中IL-1β和IL-18表达增加

目的探讨野百合碱致肺动脉高压(PAH)大鼠IL-1β和IL-18表达的变化。方法将雄性大鼠随机分为对照组和实验组(n=10),建立野百合碱致PAH大鼠实验模型,应用B超、心肌细胞HE染色和TUNNEL染色检测;ELISA检测血清NF-κB、COX2、IL-6、IL-1β、TNF-α和NO浓度;免疫组化法检测肺组织IL-1β和IL-18表达;Western blot检测肺组织NLRP3蛋白表达。结果 PAH大鼠血清中NF-κB、COX2、IL-6、IL-1β、TNF-α和NO均显著增加(P0.05);肺组织IL-1β和IL-18的表达明显增加(P0.05),PAH大鼠肺组织IL-1β和IL-18阳性细胞百分比显著增加,IL-1β的增加更明显;NLRP3蛋白表达实验组比对照组有明显增加(P0.05)。结论野百合碱致肺组织IL-1β和IL-18表达增加。     

C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白3对高尿酸大鼠血管内皮的保护作用研究

目的:探讨C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)对高尿酸大鼠血管内皮的保护作用及机制。方法:雄性SD大鼠饮用10%果糖水构建高尿酸大鼠模型,对照组饮用普通纯净水,每组10只。12周后,两组大鼠分别予以尾静脉一次性注射Ad-CTRP3或Ad-GFP,转染2周后结束实验。取血清,检测血尿酸和血清一氧化氮(NO)的水平,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)浓度。取胸主动脉,HE染色观察内膜形态改变,TUNEL法检测内皮细胞凋亡情况,RT-qPCR法检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、TNF-α和IL-6的mRNA水平,Western blot法检测CTRP3和Toll样受体4(TLR4)蛋白表达的变化。结果:与正常对照组比较,高尿酸大鼠主动脉CTRP3蛋白表达显著减少,TLR4蛋白表达显著升高(P<0.05)。与正常对照组比较,高尿酸大鼠血尿酸水平和血清TNF-α及IL-6水平显著升高(P<0.05),胸主动脉内膜结构紊乱,内皮细胞凋亡率显著增加(P<0.05),TNF-α和IL-6 mRNA表达显著升高(P<0.05),e...     

X线辐照激活NLRP3炎性体引起损伤肺组织细胞焦亡(pyroptosis)北大核心CSCD

目的建立放射性肺损伤模型,研究胱天蛋白酶1(caspase-1)依赖的程序性细胞死亡即细胞焦亡(pyroptosis)在放射性肺炎发病机制中的作用。方法 BALB/c小鼠胸腔15 Gy X线辐照5 d,处死小鼠。HE染色观察肺组织形态变化,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测辐照后肺组织细胞凋亡情况,Western blot法检测肺组织γ组蛋白2AX(γ-H2AX)、抗原KI-67(ki67)、含pyrin结构域NOD样受体家族3(NLRP3)、caspase-1和含CARD结构域凋亡相关斑点样蛋白(ASC/TMS-1)的表达情况,实时荧光定量PCR检测肺组织白细胞介素6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、含pyrin结构域NOD样受体家族3(NLRP3)、caspase-1、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18的m RNA水平,采用免疫组织化学染色检测肺组织NLRP3、caspase-1和TMS1的表达情况,使用caspase-1活性检测试剂盒检测caspase-1活性;ELISA检测血清IL-1β和IL-18水平。结果辐照后小鼠肺泡壁毛细血管扩张充血,炎性细胞浸润,肺泡壁增厚;肺组织细胞TUNEL染色阳性指数升高,γ-H2AX和ki67的表达增强,提示细胞DNA遭到破坏且细胞增殖活性降低;肺组织细胞中IL-6、IL-8、TNF-α和MCP-1 m RNA水平增加;血清IL-1β和IL-18水平增加,肺组织NLRP3、caspase-1、ASC/TMS-1表达水平增加,caspase-1活性增强。结论辐照后,激活小鼠肺组织NLRP3炎性体诱导肺组织的细胞发生pyroptosis。     

姜黄素对MRL/lpr狼疮性肾炎小鼠的作用及机制研究

目的:观察姜黄素(Cur)对狼疮性肾炎(LN)的作用及其可能的机制。方法:将30只10周龄的MRL/Lpr狼疮小鼠随机分为MRL/lpr组及Cur低、高剂量组(Cur-L和Cur-H组),对照组(NC组)为C57BL/6小鼠,每组10只。Cur-L组和Cur-H组分别给予100和200 mg/kg Cur灌胃处理,NC组和MRL/lpr组灌胃等体积的生理盐水,每天1次,连续12周。检测各组小鼠的尿蛋白变化,给药结束后HE染色观察肾组织形态学变化;检测血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)和血清抗双链DNA(dsDNA)水平,以及血清和肾组织中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;Western blot检测肾组织中p-IκB、NF-κB、NLRP3和caspase-1的蛋白水平。结果:与MRL/lpr组比较,Cur组处理后小鼠尿蛋白含量显著降低,肾损伤有一定缓解,SCr、BUN及血清抗dsDNA水平显著降低,血清和肾脏中IL-1β、IL-6及TNF-α水平显著降低,肾组织中p-IκB、NF-κB、NLRP3和caspase-1的蛋白水平也显著低于MR...     

青藤碱抑制NLRP3和下游致炎因子表达改善佐剂性关节炎大鼠关节炎症状

目的 探讨青藤碱对佐剂性关节炎(AA)大鼠的抗炎作用及含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3(NLRP3)的变化。方法 Wistar大鼠随机分为对照组、 AA模型组、(100、 200、 400)mg/kg青藤碱组和100 mg/kg雷公藤组，每组10只。除对照组外，其余均采用Freund完全佐剂建立AA模型。建模后12 d,对照组和模型组给予等量生理盐水，其余各组分别灌胃给予相应药物，每天1次，连续16 d。通过多发性关节炎和关节肿胀度评价AA大鼠关节情况，Western blot法检测滑膜组织NLRP3蛋白水平，免疫组织化学染色法检测滑膜组织NLRP3表达和分布；ELISA检测大鼠血清白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果 与对照组比较，模型组多发性关节炎明显，关节肿胀度增加，青藤碱各治疗组和雷公藤组大鼠多发性关节炎和关节肿胀度明显降低；青藤碱各治疗组滑膜组织NLRP3蛋白表达减弱，血清中IL-1β、 IL-6、 TNF-α水平显著下降。结论 青藤碱通过抑制NLRP3和下游致炎因子表达改善AA大鼠关节炎症。     

川芎嗪抑制CIRI大鼠小胶质细胞活化发挥抗炎作用机制的实验研究

目的观察川芎嗪对脑缺血再灌注(CIRI)大鼠脑组织中小胶质细胞活化的调控作用,阐述川芎嗪通过抑制小胶质细胞焦亡的发生而发挥其对CIRI大鼠的抗炎作用机制。方法用SD大鼠建立CIRI模型,分为假手术组、模型对照组、川芎嗪组、阳性对照组。对各组大鼠进行神经功能缺损评分;TTC染色测定梗死灶体积;酶联免疫吸附(ELISA)检测血清中IL-1β、IL-6及TNF-α的水平;免疫荧光法检测半暗带脑组织中Iba-1、NLRP3的共表达;Western blot检测半暗带脑组织中ASC、Caspase-1、Pro-Caspase-1、GSDMD的表达水平。结果与假手术组比较,其余3组神经功能缺损评分、梗死灶体积、血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量、Iba-1/NLRP3双阳细胞数、ASC、Caspase-1、Pro-Caspase-1、GSDMD的表达水平显著升高,差异有统计学意义(P0.05);与模型对照组比较,川芎嗪组、阳性对照组大鼠神经功能缺损评分、梗死灶体积、血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量、Iba-1/NLRP3双阳细胞数、ASC、Caspase-1、Pro-Caspase-1、GSDMD的表达水平显著降低,差异有统计学意义(P0.05)。与阳性对照组比较,川芎嗪组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量、Iba-1/NLRP3双阳细胞数、ASC、Caspase-1、GSDMD的表达水平显著降低,差异有统计学意义(P0.01)。结论川芎嗪具有改善CIRI大鼠神经功能缺损症状,控制梗死灶扩大,抑制炎症因子分泌的保护作用,该作用可能是通过抑制小胶质细胞内焦亡的发生来实现的。     

辛伐他汀对糖尿病脑病大鼠认知功能障碍的影响及其机制研究

目的 探讨辛伐他汀糖尿病脑病大鼠认知功能的改善作用及可能机制。方法 采用高糖高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法建立糖尿病脑病大鼠模型，选取模型制备成功的大鼠随机分为模型组与辛伐他汀组(20 mg/kg),每组8只，另取同龄8只SD大鼠作为对照组，连续灌胃5周。测定大鼠空腹血糖水平；Morris水迷宫测定大鼠认知功能；HE染色观察大鼠脑组织海马病理损伤；Nissl染色观察大鼠海马神经元；ELISA检测大鼠脑组织白介素-1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平；Western blot检测大鼠脑组织中SIRT1、NLRP3、Caspase-1、ASC及IL-18蛋白表达。结果 与模型组相比，辛伐他汀组大鼠空腹血糖水平显著降低，认知功能显著改善，海马区病理性损伤减轻，海马尼氏体数量增加，IL-1β、IL-6和TNF-α水平降低，SIRT1蛋白表达水平升高，而NLRP3、Caspase-1、ASC及IL-18蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论 辛伐他汀可通过调控SIRT1/NLRP3通路改善糖尿病脑病大鼠认知功能。     

胰岛素处理促进糖尿病大鼠肾皮质骨形成蛋白和激活蛋白膜结合抑制物(BAMBI)表达并抑制炎症反应

目的研究胰岛素控制糖尿病(DM)大鼠血糖后, DM大鼠肾皮质骨形成蛋白和激活蛋白膜结合抑制物(BAMBI)、含pyrin结构域NOD样受体家族3(NLRP3)、凋亡相关的斑点样蛋白2(ASC-2)、胱天蛋白酶1(caspase-1)及炎性介质和相关纤维化指标的表达情况。方法 SD大鼠随机分为正常对照组、 DM组及胰岛素处理组。链脲佐菌素(STZ)复制DM大鼠模型,每组8只, DM成模4周后,胰岛素处理组予以皮下注射胰岛素[8 U/(kg·次)],每天3次,连续注射6周后处死大鼠。免疫组织化学染色检测肾皮质BAMBI、 NLRP3、上皮钙黏素(E-cadherin)的表达, Western blot法检测肾皮质BAMBI、 NLRP3、 ASC-2、 caspase-1、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤连蛋白(FN)、Ⅳ型胶原蛋白(Col4)蛋白的表达,实时定量PCR检测肾皮质中BAMBI、 NLRP3的mRNA水平, ELISA检测肾皮质中白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-18的水平。采用Spearman秩相关检验对BAMBI和NLRP3蛋白表达进行相关性分析。结果与正常对照组相比, DM组肾皮质NLRP3的mRNA和蛋白水平及ASC-2、 caspase-1的蛋白水平升高,α-SMA、 FN、 Col4蛋白表达也升高,而BAMBI的mRNA和蛋白水平及E-cadherin的蛋白表达降低,胰岛素处理组NLRP3的蛋白和mRNA水平及ASC-2、 caspase-1的蛋白水平低于DM组,α-SMA、 FN、 Col4蛋白表达也低于DM组,而BAMBI的mRNA和蛋白水平及E-cadherin的蛋白表达高于DM组;胰岛素处理组IL-1β、 IL-18的水平较DM组降低,相关性分析显示在DM组以及胰岛素处理组中BAMBI和NLRP3的表达呈负相关。结论胰岛素处理可恢复DM大鼠肾皮质中BAMBI的表达,进而抑制NLRP3炎性体激活,减轻DM大鼠肾脏的炎症反应,阻止或延缓糖尿病肾病的病程进展。     

地奥司明对肾缺血/再灌注大鼠血清和肾组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和IL-10水平的影响

目的:观察地奥司明(DOSM)对肾缺血/再灌注(I/R)大鼠血清和肾组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和IL-10水平的影响,并探讨其对肾脏的保护机制。方法:180只SD大鼠随机分成3组:假手术组(sham)、肾缺血/再灌注模型组(I/R)和地奥司明+肾缺血/再灌注模型组(DOSM+I/R)。采用ELISA方法测定血清和肾脏组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和IL-10的水平,同时检测血肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平。结果:在1 h、3 h、6 h、12 h、24 h和48 h不同时点的血清和肾组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和IL-10水平在I/R和DOSM+I/R组均显著高于sham组(P<0.01或P<0.05),且在I/R和DOSM+I/R组TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8随病程进展而升高,在I/R组IL-10水平随病程进展降低,而在DOSM+I/R组IL-10水平随病程进展而升高,TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8水平在I/R组显著高于DOSM+I/R组(P<0.05或P<0.01,除血清TNF-α1 h组外),而IL-10水平在DOMS+I/R组显著高于I/R组(P<0.01或P<0.05)。血Cr和BUN水平在DOSM+I/R组显著低于I/R组(P<0.05或P<0.01)。结论:DOSM可减少肾I/R病理过程中促炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8的产生,促进抗炎细胞因子IL-10的产生,有助于减轻I/R时炎性细胞因子瀑布样级联反应,发挥抗炎作用,从而减轻缺血再灌注损伤,保护肾功能。     

右美托咪定通过调控TXNIP/NLRP3炎症小体途径减轻脂多糖诱导的小鼠肠道屏障损伤

目的:探讨右美托咪定(DEX)调控硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体途径减轻脂多糖(LPS)诱导的小鼠肠道屏障损伤的机制。方法:实验小鼠分为对照组、模型组、DEX组、DEX+pcDNA3.1组和DEX+TXNIP组,每组12只。除对照组外,其余各组小鼠腹腔注射15mg/kg LPS,对照组小鼠腹腔注射等体积生理盐水。在LPS诱导肠道屏障损伤前30 min,DEX组小鼠腹腔注射30μg/kg DEX,DEX+pcDNA3.1组和DEX+TXNIP组在DEX组基础上分别皮下注射5 nmol pcDNA3.1空载体及5 nmol pcDNA3.1-TXNIP过表达载体,对照组和模型组小鼠则皮下注射等体积生理盐水。收集小鼠血清及肠道组织样本,采用ELISA检测血清中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平,苏木精-伊红(HE)染色观察肠道组织形态,采用相应试剂盒检测肠道组织中氧化应激指标丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)水平,采用RT-qPCR和Western blot分别检测肠道组织中TXNIP、NLRP3、caspase-1和IL-1β的mRNA和蛋白水平。结果:模型组肠道组织完整性被破坏,出现明显的细胞脱落现象,炎症浸润明显,病理评分升高(P0.05);DEX组和DEX+pcDNA3.1组肠道组织完整,但出现明显的炎症浸润现象,与模型组相比病理评分降低(P0.05);DEX+TXNIP组肠道完整性被破坏,出现细胞脱落现象,炎症浸润明显,与DEX+pcDNA3.1组相比病理评分升高(P0.05)。与对照组相比,模型组血清中IL-1β和TNF-α水平升高,肠道组织中MDA含量、ROS水平及TXNIP、NLRP3、caspase-1和IL-1β的mRNA和蛋白水平升高(P0.05),肠道组织中SOD和GSH活性降低(P0.05);与模型组相比,DEX组和DEX+pcDNA3.1组血清中IL-1β和TNF-α水平降低,肠道组织中MDA含量、ROS水平及TXNIP、NLRP3、caspase-1和IL-1β的mRNA和蛋白水平降低(P0.05),肠道组织中SOD和GSH活性升高(P0.05);分别与DEX组和DEX+pcDNA3.1组相比,DEX+TXNIP组血清中IL-1β和TNF-α水平升高,肠道组织中MDA含量、ROS水平及TXNIP、NLRP3、caspase-1和IL-1β的mRNA和蛋白水平升高(P0.05),肠道组织中SOD和GSH活性降低(P0.05)。结论:DEX通过抑制TXNIP/NLRP3炎症小体途径减轻LPS诱导的小鼠肠道屏障损伤。     

基于NLRP3信号通路探讨活血通脉颗粒对急性心肌梗死大鼠免疫炎症紊乱的干预作用

目的探讨活血通脉颗粒对急性心肌梗死(AMI)大鼠在免疫炎症紊乱的干预作用。方法大鼠42只随机选6只为空白对照组,其余36只大鼠AMI造模。建模后存活大鼠30只随机分成5组,阳性药物对照组,AMI组,活血通脉颗粒低、中、高剂量组,每组6只。空白对照组、AMI组每天灌胃生理盐水,阳性药物对照组184 mg/(kg·d)灌胃辛伐他汀,活血通脉颗粒低、中、高剂量组按生药2.7、5.4、10.8 g/(kg·d)灌胃,每日1次,连续28d。同时建立人H9C2心肌细胞缺氧模型,缺氧处理21 h,加药处理。HE染色观察心肌组织形态学变化;MTS检测心肌细胞活力变化;ELISA检测心肌组织和心肌细胞中IL-1β、TNF-α水平;q RT-PCR检测心肌组织中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、接头蛋白ASC(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1(caspase-1)m RNA水平;蛋白免疫印迹检测心肌组织中NLRP3、ASC、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶酶原(pro-caspase-1)、caspase-1蛋白水平。结果大鼠和人心肌细胞模型中,AMI组心肌细胞破坏、死亡严重,形态及结构损害严重。随着活血通脉颗粒剂量的增加,心肌细胞坏死现象减弱,逐渐恢复形态。大鼠模型中,与空白对照组相比,AMI组心肌组织中IL-1β、TNF-α、NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA和蛋白、pro-caspase-1蛋白表达量升高(P 0.05)。与AMI组相比,活血通脉颗粒低剂量组心肌组织中ASC、pro-caspase-1、caspase-1蛋白表达量降低;活血通脉颗粒中、高剂量组心肌组织中IL-1β、NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA和蛋白、pro-caspase-1蛋白表达量降低,并呈剂量依赖效应(P 0.05)。人心肌细胞中加药6 h时IL-1β、TNF-α的变化与大鼠模型中类似。结论活血通脉颗粒可能通过减弱NLRP3信号通路、抑制促炎因子表达,实现对AMI大鼠的保护作用。     

TRIM31 过表达改善脂多糖诱导下神经细胞的炎症损伤

目的:探讨E3泛素连接酶31(TRIM31)对LPS诱导PC12细胞炎症性损伤的保护作用和机制。方法:用不同浓度LPS处理PC12细胞24 h,MTT法检测细胞增殖活性,Western blot检测LPS最佳浓度处理后PC12细胞TRIM蛋白表达水平。将TRIM31过表达质粒(pcDNA3.1-TRIM31)及其阴性对照质粒(pcDNA3.1-NC)转染至PC12细胞,qRT-PCR和Western blot检测细胞TRIM31 mRNA和蛋白表达水平。PC12细胞分为对照组(Control)、LPS组、LPS+NC组和LPS+TRIM31组,分组干预后,ELISA检测细胞上清IL-6、TNF-α、IL-1β和IL-18含量,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫荧光检测NLRP3蛋白表达,qRT-PCR检测NLRP3、caspase-1 mRNA表达,Western blot检测NLRP3、caspase-1、Cleaved-caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果:LPS剂量增加,PC12细胞增殖活性逐渐降低(P0.05),LPS处理可降低PC12细胞TRIM31蛋白表达水平(P0.01),TRIM31过表达,PC12细胞TRIM31 mRNA和蛋白表达水平显著提高(P0.05)。与Control组相比,LPS组细胞上清中IL-6、TNF-α、IL-1β和IL-18含量、细胞凋亡率及细胞Cleaved-caspase-3和Bax蛋白水平显著提高(P0.05),Bcl-2和TRIM31蛋白水平显著降低(P0.05),NLRP3蛋白荧光强度及NLRP3、caspase-1 mRNA和蛋白表达水平显著提高(P0.05);与LPS组相比,LPS+TRIM31组细胞上清中IL-6、TNF-α、IL-1β和IL-18含量、细胞凋亡率及细胞Cleaved-caspase-3和Bax蛋白水平显著降低(P0.05),Bcl-2蛋白水平显著提高(P0.05),NLRP3荧光强度及NLRP3、caspase-1 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P0.05)。结论:过表达TRIM31能通过抑制NLRP3炎症小体活化,改善LPS诱导的PC12细胞炎症损伤。     

NLRP3炎症小体在小鼠甲型流感病毒感染继发MRSA肺炎中的表达变化

目的:探索NLRP3炎症小体在小鼠甲型流感病毒(甲流病毒)HIN1感染继发耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)肺炎中的表达变化。方法:选取C57BL/6小鼠15只,分为空白对照组、MRSA组(MRSA滴鼻感染24 h)和H1N1+MRSA组(甲流病毒H1N1滴鼻预感染6 d后联合MRSA滴鼻感染24 h)。检测小鼠肺组织NLRP3和caspase-1的mRNA及蛋白表达水平,并检测白细胞介素1β(IL-1β)在肺组织中的mRNA水平及在血清中的浓度。观察小鼠肺组织病理并分析小鼠IL-1β血清浓度与体重下降率的相关性。结果:MRSA组NLRP3和caspase-1的mRNA及蛋白表达水平与空白对照组比均无明显差异(P>0.05),但IL-1β的mRNA表达水平及血清浓度均明显高于空白对照组(P <0.01)。H1N1+MRSA组NLRP3、caspase-1的mRNA及蛋白表达水平,及IL-1β的mRNA表达水平和血清浓度均明显高于空白对照组(P <0.01)。H1N1+MRSA组NLRP3和caspase-1的mRNA及蛋白表达水平均明显高于MRSA组(P <0...     

长托宁介导NLRP3炎性小体调控IKKβ/IKKα/NF-κB通路抑制脊髓损伤大鼠细胞焦亡

目的 探索长托宁对脊髓损伤大鼠细胞焦亡的影响及可能机制。方法 SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、脊髓损伤模型组（Allen’s法建立SCI大鼠模型）和长托宁治疗组（PHC组,腹腔注射长托宁2mg/kg,连续给药14 d）。各组大鼠进行运动功能（BBB）评分;HE、尼氏染色观察脊髓病理学变化;ELISA检测IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18的含量变化;TUNEL检测脊髓细胞凋亡;Western blot方法检测NLRP3、procaspase1、pro-IL1β、IKKβ、IKKα、P-IKKβ、P-IKKα、NF-κB的表达水平。结果 长托宁减轻SCI大鼠脊髓损伤,抑制炎症反应,抑制IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18释放,抑制细胞凋亡,下调炎症小体相关蛋白表达水平,降低NLRP3、pro-caspase1、pro-IL1β表达水平,抑制IKKβ/IKKα/NF-κB信号通路活性。结论 长托宁减轻SCI大鼠炎症反应,抑制NLRP3炎性小体,与调控IKKβ/IKKα/NF-κB通路有关。     

双氢青蒿素对CNP模型大鼠的治疗作用及对炎症小体NLRP3信号通路的影响北大核心CSCD

目的:探究双氢青蒿素(DHA)对慢性前列腺炎(CNP)模型大鼠的治疗作用及对炎症小体NLRP3信号通路的影响。方法:6周龄健康雄性SPF级SD大鼠分为5组:对照组、模型组、DHA低、高剂量组和前列康组,每组6只。除对照组外,其余组大鼠均建立CNP模型。对照组和模型组不采取治疗,DHA高、低剂量组每天灌胃给予40、20 mg/kg DHA,前列康组每天灌胃给予0.5 g/kg前列康片,连续治疗1个月。von Frey法检测大鼠痛觉敏感性,统计大鼠体质量和前列腺重量,HE染色观察大鼠前列腺组织病理损伤,ELISA检测大鼠前列腺组织TNF-α、IL-6和IL-10表达,Western blot检测大鼠前列腺组织NLRP3、caspase-1、IL-1β蛋白表达。结果:高、低剂量DHA和前列康片均显著降低了CNP大鼠痛觉敏感性和前列腺指数,增加了体质量,改善了前列腺组织病理损伤,并显著降低了前列腺组织TNF-α和IL-6含量,增加了IL-10含量,高剂量DHA和前列康片治疗效果优于低剂量DHA。高、低剂量DHA均显著降低了大鼠前列腺组织NLRP3、caspase-1、IL-1β蛋白表达。结论:DHA通过抑制NLRP3炎症小体通路减弱CNP大鼠炎症反应。     

欧前胡素通过抑制NLRP3炎性通路改善大鼠慢性子宫内膜炎症北大核心CSCD

目的 探讨欧前胡素(imperatorin, Imp)对慢性子宫内膜炎(chronic endometritis, CE)的治疗及可能的作用机制。方法 采用卵巢处注射苯酚胶浆法建立CE大鼠模型，分为对照组(CT组)、CE组、Imp低剂量组(ImpL组，5 mg·kg-1·d-1)、Imp高剂量组(ImpH组，10 mg·kg-1·d-1)、ImpH+脂多糖(LPS,10 mg/kg)组，称量质量检测子宫脏器指数；苏木精-伊红(HE)染色观察子宫组织病理变化；免疫组化检测子宫内膜血管内皮生长因子(VEGF)表达水平；ELISA测定血清白介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量；RT-qPCR和Western blot验证子宫组织IL-1β、核因子κB(NF-κB)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、基质金属蛋白酶(MMP)-9的表达。结果 与CT组相比，CE组大鼠子宫和阴道内肿胀、充血，子宫内膜VEGF的表达降低(P<0.05)，血清IL-6、TNF-α含量和子宫组织IL-1β、p-NF-κB/NF-κB、NLRP3、MMP-9表达增加(P<0.05)；与CE组比较，ImpL、ImpH组大鼠子宫和阴道内结节肿胀、充血均有所缓解，子宫内膜VEGF的表达增加，血清IL-6、TNF-α含量和子宫组织IL-1β、p-NF-κB/NF-κB、NLRP3、MMP-9表达减少(P<0.05);LPS可部分逆转ImpH对CE大鼠的改善作用。结论 Imp可能通过抑制NLRP3炎症通路的激活对CE有一定治疗作用。