新型pH敏感性材料及其给药系统在现代药剂学中的应用进展

<正>pH敏感性材料是指随着外界pH的变化而产生自身体积、形态改变或发生化学键断裂的一类材料,其分子内部都含有对H~+或OH~-敏感的基团,使其能够随着外界pH的变化而产生聚合物分子内或分子间作用力的变化,从而表现出宏观上各种性质的改变。机体的许多生理或者病理过程都会涉及pH的变化,如胃肠道的pH变化呈逐渐升高的     

缺氧诱导因子-1α在结直肠腺癌中的表达及意义

目的　观察低氧培养条件下人结肠腺癌SW4 80细胞及人结直肠腺癌组织中缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)mRNA、蛋白表达 ,探讨HIF 1α在结直肠腺癌中的表达及在肿瘤血管形成中的作用。方法　免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白 过氧化物酶法 (SP法 )检测SW4 80细胞及结直肠腺瘤、腺癌组织中HIF 1α、血管内皮生长因子 (VEGF)蛋白表达 ;采用CD34标记血管内皮细胞计数微血管密度 (MVD)。用蛋白印迹法检测SW4 80细胞HIF 1α蛋白表达 ;原位杂交检测HIF 1αmRNA。结果　RT PCR结果显示 :低氧组SW4 80细胞HIF 1αmRNA表达显著升高 ,为常氧组的 2 33倍。低氧 genistein组HIF 1αmRNA表达为常氧组的 5 0 7%。原位杂交结果表明 :HIF 1αmRNA表达低氧组 (0 16 2 8± 0 0 0 85 )显著高于常氧组 (0 12 0 1± 0 0 0 38)和低氧 genistein组 (0 115 4± 0 0 0 5 6 ,P <0 0 5 )。免疫细胞化学染色显示 ,低氧组细胞HIF 1α、VEGF蛋白表达水平显著高于常氧组 (P <0 0 1,P <0 0 5 )和低氧 genistein组 (P <0 0 1,P <0 0 5 )。蛋白印迹结果显示 :低氧组HIF 1α蛋白表达显著高于常氧组 ,为常氧组 3 5 4倍。低氧 genistein组HIF 1α蛋白约为常氧组的 5 8 9%。结直肠腺瘤和腺癌HIF 1αmRNA阳性表达率分别为 38 9% (7/     

血管内皮生长因子C及血管内皮生长因子受体3在人直肠腺癌中的表达及其意义

目的:检测血管内皮生长因子C(VEGF-C)及血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)在人直肠癌组织和淋巴结中的表达,探讨VEGF-C在人直肠癌发生、发展和淋巴结转移中的作用.方法:选用31例手术切除并经病理切片确诊为直肠腺癌的癌组织石蜡标本,采用免疫组织化学方法检测VEGF-C及VEGFR-3在癌组织和淋巴结内的表达.结果:在31例直肠腺癌组织的癌细胞质中,VEGF-C显色阳性者54.8%;VEGFR-3显色阳性者64.5%;在14例淋巴结中,VEGF-C显色阳性者71.4%;VEGFR-3显色阳性者64.3%.结论:VEGF-C和VEGFR-3在直肠癌组织和淋巴结中均有较高表达,VEGF-C通过与VEGFR-3结合,促使淋巴管内皮细胞增殖、迁移并形成新的淋巴管,导致癌细胞转移.     

VEGF及其受体在肿瘤抗血管治疗中的应用

血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体 (VEGFR)在肿瘤治疗中的研究日渐深入 ,通过抑制VEGF及其受体的表达 ;阻止VEGF与其受体的结合 ;阻断VEGF与其受体结合后的信号传递等可抑制肿瘤生长 ,为肿瘤的治疗提供了新的方法和方向     

人核糖体蛋白S15a在大肠癌组织中的表达及其意义

 目的 研究人核糖体蛋白S15a（RPS15a）在大肠癌组织中的表达情况及其与大肠癌发生发展的关系。方法 大肠癌及癌旁正常组织取自82例术前未经放疗、化疗患者的手术切除标本。利用RPS15a多克隆抗体进行免疫组织化学 SP染色，检测RPS15a在大肠癌及正常组织中的表达。结果 RPS15a阳性表达率在大肠癌组织中为72.0%（59/82），在癌旁正常组织中为40.2%（33/82），二者间差异有统计学意义（χ2 = 17.76，P < 0.05）；在浆膜浸润大肠癌组织中为80.8%（42/52），在无浆膜浸润大肠癌组织中为56.7%（17/30），二者间差异有统计学意义（χ2 = 5.47，P < 0.05）；在无淋巴结转移者为58.3%（21/36），在有淋巴结转移者为82.6%（38/46），二者间差异有统计学意义（χ2 = 5.89，P < 0.05）。结论 RPS15a在大肠癌组织中呈高表达状态，RPS15a基因可能在大肠癌的发生、发展中起重要作用。     

VEGF-TrFIA及其在结直肠癌中的应用

目的:研制VEGF时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)试剂盒。方法:采用双抗体夹心法建立VEGF-TrFIA试剂盒,并对试剂盒的各项指标进行评价。结果:试剂盒的线性范围为1pg/m l~400pg/m l,灵敏度为0.21pg/m l,准确度高,批内和批间变异系数分别为1.1%~8.4%,2.97%~11.7%。与CA199,CA215,AFP,CEA和白蛋白无交叉反应。收集30例结直肠癌患者和37例健康人血清,用本试剂盒测得结直肠癌患者血清VEGF浓度(357.3±22.1)pg/m l显著高于健康人(71.5±9.1)pg/m l(P<0.0001)。本试剂盒检测结果与商用ELISA试剂盒检测结果相关系数为0.993。结论:试剂盒各项指标达到规定的要求,可用于临床血清VEGF检测。     

结直肠腺癌中HIF-1α、VEGF的表达及其相关性

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)在结直肠正常组织、腺瘤及腺癌组织中的表达及其之间的相关性.方法 采用免疫组织化学SP法检测64例原发性结直肠腺癌、20例腺瘤及20例正常结直肠组织中HIF-1α、VEGF蛋白的表达,分析其与临床病理特征之间的关系.结果 结直肠正常组织、腺瘤及腺癌组织中HIF-1α的阳性表达率分别为15%、25%和51.6%,正常组织与腺瘤之间的差异无统计学意义(P>0.05),正常组织与腺癌、腺瘤与腺癌之间的差异具有统计学意义(P<0.05);VEGF在正常组织、腺瘤及腺癌组织中的阳性表达率分别为20%、30%和62.6%,VEGF在正常组织与腺瘤之间的差异无统计学意义(P>0.05),正常组织与腺癌、腺瘤与腺癌之间的差异具有统计学意义(P<0.05).HIF-1α与结直肠腺癌Dukes分期、浸润深度、淋巴结转移及组织学分级明显相关(P<0.05);VEGF的表达与Dukes分期及淋巴结转移密切相关(P<0.05),与浸润深度及组织学分级无关(P>0.05).HIF-1α与VEGF的表达呈显著正相关(r=0.577,P<0.01).结论 HIF-1α及VEGF蛋白可以作为检测结直肠腺瘤癌变的指标,HIF-1α及VEGF蛋白的高表达可能在结直肠癌侵袭转移过程中发挥重要作用.     

血管内皮生长因子在肝癌中的表达及其与肝癌转移的关系

肿瘤的生长和转移是一个多步骤的复杂过程，其中肿瘤血管的生成起重要的作用。迄今为止，血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）被认为是肿瘤组织中促血管生成的最主要的血管生长因子。我们应用免疫组化和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交技术从蛋白质水平和ＲＮＡ水平对ＶＥＧＦ在人原发...     

DCC、P53及VEGF在结直肠腺癌癌组织中的表达

目的检测DCC、P53及VEGF在41例结直肠癌中的表达情况，以探讨三者表达的相关性。方法应用免疫组化二步法检测。结果41例结直肠癌的组织中，DCC表达阳性10例，阳性率为24．4％，而P53与VEGF的阳性率分别为63．4％及65．9％。DCC基因表达与P53、VEGF无明显相关性。结论P53与VEGF表达存在明显相关关系（P〈0．05）。     

血管内皮生长因子及其受体在子宫内膜癌中的表达

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)及其受体fms样酪氨酸受体-1 (flt-1)和含插入区的激酶受体(KDR)在子宫内膜癌血管生成中的作用及其与内膜癌分化程度的关系.方法采用免疫组织化学及原位杂交方法对23例子宫内膜癌及6例正常绝经期子宫内膜中VEGF、flt-1、KDR蛋白质及其mRNA进行检测,并对少数病例行Western印迹分析,以检测VEGF亚型在内膜癌组织的分布,用内皮细胞标志Ⅷ因子标记内膜癌组织中的微血管密度.结果 VEGF、flt-1、KDR蛋白质及其mRNA主要分布在子宫内膜癌组织血管内皮细胞及癌细胞胞质内.VEGF蛋白质在中分化(G2)、低分化(G3)内膜癌血管内皮细胞及癌细胞上的表达高于高分化内膜癌(G1)及正常绝经期子宫内膜(P<0.05), VEGF mRNA在不同分化程度内膜癌组织的表达差异无显著性意义(P>0.05),但均大于正常绝经期子宫内膜(P<0.05);flt-1蛋白质及flt-1mRNA在G3内膜癌血管内皮细胞的表达高于G1、G2及正常绝经期子宫内膜(P<0.05),在癌细胞的表达差异无显著性意义(P>0.05) ,但均高于正常绝经期子宫内膜(P<0.05);KDR蛋白质在子宫内膜癌组织血管内皮细胞及癌细胞上的表达较强,但不随分化程度发生变化,其mRNA在中分化(G2)、低分化(G3)内膜癌血管内皮细胞及癌细胞上的表达高于正常绝经期子宫内膜(P<0.05).G3子宫内膜癌组织的血管密度(48个±12个)高于G1(27个±14个)、G2(26个±16个)及正常绝经期子宫内膜(26个±11个,P<0.05).结论 VEGF、flt-1、KDR及mRNA在子宫内膜癌中的表达形式提示其与癌组织血管生成及血管通透性相关,VEGF及其受体是与子宫内膜癌旺盛生长相关的因子之一.     

多发性浅表膀胱移行细胞癌中VEGF的表达及意义

目的:探讨单发性和多发性浅表膀胱移行细胞癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达及意义。方法:采用免疫组化方法对60例浅表膀胱移行细胞癌组织及10例正常膀胱组织进行血管内皮生长因子(VEGF)的检测,观察单发性和多发性浅表膀胱移行细胞癌组织中VEGF表达的关系。结果:多发性浅表膀胱移行细胞癌VEGF的高表达明显高于单发者的高表达;VEGF高表达的浅表膀胱移行细胞癌的患者的复发率明显高于低表达者的复发率。结论:VEGF表达的高低与浅表膀胱移行细胞癌的生物学行为有关。     

血管内皮细胞生长因子与大肠癌治疗

血管内皮细胞生长因子（VEGF）在大肠癌组织中高表达，与肿瘤血管生成，肿瘤细胞增殖、转移，肿瘤预后关系密切。目前各种针对VEGF及其受体开展的抑制肿瘤血管生成的药物研究广泛开展，有的已经批准上市，用于大肠癌的临床治疗，为大肠癌的治疗开辟了新的途径。     

靶向血管内皮生长因子C短发夹式RNA对人乳腺癌MCF-7细胞生物学特性的影响

目的 研究重组质粒表达载体介导的短发夹式RNA(shRNA)对乳腺癌MCF-7细胞株中血管内皮生长因子C(VEGF-C)的表达及乳腺癌细胞增殖、侵袭能力的影响.方法 脂质体介导重组质粒pSIREN-VEGF-C转染乳腺癌MCF-7细胞株,嘌呤酶素筛选阳性克隆;荧光定量PCR及Western blot检测转染前后乳腺癌MCF-7细胞中VEGF-C基因的表达;MTT法及Transwell体外侵袭实验检测转染前后乳腺癌MCF-7细胞的增殖及侵袭能力.结果 转染重组质粒后乳腺癌MCF-7细胞中VEGF-C mRNA及蛋白表达均明显下调,抑制率分别为95%及100%(P<0.05);MTT法和 Transwell体外侵袭实验显示,与阴性质粒组和空白对照组比较,转染重组质粒后各时间段乳腺癌MCF-7细胞增殖均明显受抑制(P<0.05),同时穿膜的肿瘤细胞数也明显减少[(29.0±1.9)个与(59.0±2.1)个和(61.0±2.2)个相比,P<0.05].结论 表达VEGF-C shRNA的重组质粒载体pSIREN-VEGF-C在乳腺癌MCF-7细胞中能高效、特异地发挥靶基因沉默作用,并对乳腺癌细胞的增殖及侵袭能力有显著抑制作用.     

Increased angiogenesis in chronic idiopathic myelofibrosis: vascular endothelial growth factor as a prominent angiogenic factor

Increased angiogenesis has been suggested to be implicated in the pathogenesis of chronic idiopathic myelofibrosis (CIMF). We hypothesized that vascular endothelial growth factor (VEGF) drives CIMF-associated angiogenesis, and thus, we aimed to determine its expression and biologic impact in newly diagnosed patients. All patients with CIMF diagnosed between 1990 and 2001, for whom adequate bone marrow specimens and clinical data were available, were deemed eligible. Each case was reclassified according to World Health Organization criteria. Microvessel density (MVD), as assessed by CD34 staining, and VEGF expression were examined by standard immunohistochemistry on paraffin-embedded trephine bone marrow biopsy specimens. The cytogenetic phenotype was determined by fluorescence in situ hybridization. Appropriate summary statistics were used for comparisons between groups; survival was calculated using Kaplan-Meier estimates. Parameters found to be of prognostic significance in univariate analysis were verified in a multivariate Cox regression model. Fifty-five patients with CIMF were investigated. With a median of 43 vascular lumina per 0.747 mm(2), patients with CIMF displayed significantly greater MVD than did age-matched controls (n = 10; median MVD, 19; P < .001) with equal distribution between the various fibrosis stages. Moreover, VEGF expression was significantly increased in CIMF (median, 12 cells/0.747 mm(2) versus 1.4 cells/0.747 mm(2); P = .01) and correlated with MVD (P = .001). However, neither MVD nor VEGF expression correlated with cytogenetics or clinical outcome. We conclude that in CIMF, increased MVD is detectable even in early (pre-)fibrotic stages. Moreover, we found significantly elevated VEGF expression correlating with MVD, thus suggesting VEGF to play a prominent angiogenic role and representing a novel potential therapeutic target in CIMF.     

血管内皮生长因子的免疫学测定法

目的：检测肿瘤细胞条件培养液中ＶＥＧＦ的表达量。方法：在表达及分离纯化ＶＥＧＦ的基础上,成功地制备了ＶＥＧＦ抗体,以夹心法测定ＶＥＧＦ,ＶＥＧＦ测定范围为０．０２～２００．００ｎｇ／ｍｌ,灵敏度可达０．０２ｎｇ／ｍｌ,批内及批间变异均小于１０％,回收率平均为１０２．４％。其中人胃癌细胞ＭＧＣ８０３、ＢＧＣ８２３、乳癌ＮＭＣＦ－７及肝癌ＢＥＬ－７４０２分泌上清中ＶＥＧＦ的含量分别为６．５０、０．４５     

血管内皮生长因子的检测在冠心病患者中的意义

目的:为了探讨血管内皮生长因子(VEGF)的检测在冠心病患者中的意义。方法:应用双抗夹心ELISA法检测了55例冠心病(CHD)患者和34例正常对照者的血清VEGF水平。结果:CHD患者血清VEGF水平(498.98±304.50)pg/ml明显高于正常对照组(121.49±30.29)pg/ml,P<0.01;其中急性心肌梗塞(AMI)患者组血清VEGF水平(809.21±191.16)pg/ml明显高于心绞痛患者组(292.14±148.56)pg/ml,P<0.01,而且两者均高于正常对照组。结论:提示VEGF可能是反映心肌缺血的敏感指标。     

膀胱尿路上皮癌中巨噬细胞移动抑制因子表达的临床意义

目的检测巨噬细胞移动抑制因子在膀胱尿路上皮癌中的表达及临床意义。方法采用Western bolt方法检测40对膀胱癌与手术切缘非癌组织中巨噬细胞移动抑制因子蛋白表达并分析其变化规律;再应用免疫组织化学法检测75对术后固定的膀胱癌与切缘组织中巨噬细胞移动抑制因子的表达并分析其与膀胱尿路上皮癌生物学行为的关系。结果膀胱尿路上皮癌中巨噬细胞移动抑制因子的表达与TNM分期呈正相关(P<0.05),并且在淋巴结转移阳性的膀胱尿路上皮癌中巨噬细胞移动抑制因子的表达显著高于淋巴结转移阴性患者,巨噬细胞移动抑制因子表达与膀胱尿路上皮癌患者生存期呈负相关(P=0.0341)。结论巨噬细胞移动抑制因子可能是膀胱尿路上皮癌变多阶段演进过程中的重要变化分子之一,可能成为膀胱尿路上皮癌分子诊断的生物标志。     

甲状腺癌组织中VEGF和VEGF-C的表达及意义

目的　探讨血管内皮生长因子(VEGF)、VEGF- C在甲状腺癌中的表达及其意义。方法　应用免疫组化S P法检测44例甲状腺癌中VEGF、VEGF C的表达情况,并以17例癌旁正常甲状腺组织作对照。结果　VEGF、VEGF- C在甲状腺癌中呈高水平表达(88. 6%、81. 8% )。VEGF表达随癌组织分化程度的减低而增高, 9例死亡病例均为阳性表达;VEGF- C表达随癌组织分化程度的减低而减低,乳头状癌阳性表达(88 .9% )高于其它类型,VEGF- C阳性率在有淋巴结转移组(92. 0% )明显高于无淋巴结转移组(68. 4% ) (P<0. 05)。9例死亡病例中7例为阳性表达,且7例同时VEGF呈阳性表达。结论　VEGF、VEGF- C表达与甲状腺癌病理分型及预后可能有一定关系,VEGF- C与甲状腺癌淋巴结转移密切相关。     

RNAi沉默Cripto基因对结肠癌细胞血管内皮生长因子的抑制

目的：研究Cripto基因对结肠癌细胞血管内皮生长因子的影响。方法:设计合成针对Cripto基因的小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)，转染结肠癌LS-174T细胞。细胞分4组：空载对照组（对照组）和不同浓度（3.125、6.25和12.5 nmol/L）的siRNA组。分别于转染24、48、72 h后收集细胞，以实时定量PCR检测结肠癌细胞Cripto mRNA，分别采用Northern blotting和免疫荧光标记法检测癌细胞VEGF mRNA和蛋白表达。分别收集转染72 h的12.5 nmol/L组和对照组细胞，接种于裸鼠背部。30 d后处死裸鼠，收集裸鼠肿瘤组织，对组织VEGF进行免疫组化染色，计算染色平均强度。结果:实时定量PCR检测显示，转染组Cripto mRNA被有效地抑制，且呈浓度和时间依赖性。转染组细胞VEGF 蛋白和mRNA明显低于对照组。裸鼠肿瘤免疫组化分析显示，转染组VEGF平均染色强度明显低于对照组。结论:Cripto基因参与了结肠癌组织血管生成的调控。采用siRNA下调Cripto基因表达，可抑制结肠癌组织血管生成。     

Vascular endothelial growth factor expression in rat skin incision wound

Vascular endothelial growth factor (VEGF) is a glycoprotein that enhances vascular permeability, induces chemotaxis and activation of monocytes/macrophages, and promotes growth of vascular endothelial cells. We report that infiltrating polymorphonuclear leukocytes in an incision wound in rat skin express VEGF from 1 day after the injury, as shown by immunohistochemistry. VEGF is also present in macrophages, fibroblast-like cells, and endothelial cells 3 and 7 days after the injury. mRNA for VEGF is statistically significantly increased in the wound area in the tissue 1 day after the skin incision compared with 3 and 7 days after the incision. The VEGF protein content in the wound tissue is statistically significantly higher in the wound than in control skin at 1 and 3 days after skin incision. Our results indicate that VEGF is produced by inflammatory cells to induce vascularization in the early stage of the wound healing process.