青春期大鼠升高咬合后髁突软骨细胞中TGF-β1的表达变化

目的 探讨青春期大鼠咬合升高后髁突软骨中转化生长因子β1( TGF-β1)表达的变化.方法 选取40只5周龄Wistar雄性大鼠,随机分为实验组和对照组,每组20只.实验组双侧上颌磨牙用树脂(牙合)板升高咬合.分别于术后7、14、21及28 d,取其左侧髁突,用免疫组织化学SABC法检测大鼠髁突软骨中TGF-β1的...     

升高咬合对青春期大鼠髁突软骨改建的影响

目的:探讨升高咬合对青春期大鼠髁突软骨改建的影响.方法:5周龄雄性SD大鼠40只,随机分为对照组和实验组(双侧后牙((牙合))板升高咬合). 实验组与对照组动物分别在 7,14,21及28 d时各取5只大鼠处死. 取其右侧髁突作组织学HE染色观察,并采用计算机辅助图像分析系统对其软骨厚度进行定量分析.结果:实验7, 14 d时,实验组髁突软骨厚度相比对照组变薄,28 d时髁突软骨后部明显增厚(P＜0.05).结论:咬合升高可以引起大鼠髁突软骨的适应性改建.     

血管内皮细胞生长因子在咬合创伤大鼠髁突软骨的表达

目的观察血管内皮细胞生长因子(VEGF)在咬合创伤大鼠颞下颌关节髁突软骨的表达,探讨VEGF在髁突软骨破坏和改建中的作用。方法通过在大鼠右上第一磨牙合面粘接调改好的正畸用不锈钢舌侧扣的方法,使右侧抬高咬合约0.5 mm,建立咬合创伤动物模型,并于建模后7、14、21、28 d采取髁突标本,采用石蜡切片免疫组织化学方法检测VEGF在咬合创伤不同时期髁突软骨的表达,计算VEGF阳性细胞率。结果咬合创伤7 d VEGF的表达开始升高,21 d时降低。结论 VEGF可能在咬合创伤髁突软骨的破坏和修复过程中起重要作用。     

功能矫形后退大鼠下颌后髁突软骨改建的分子机制

目的：探讨功能矫形后退大鼠下颌后髁突软骨改建的分子调控机制.方法：SD大鼠40只,实验组配戴模拟临床功能矫治器,强制大鼠下颌后退,对照组不戴模拟矫治器,实验后3天、1、2、3周处死大鼠取髁突,HE染色观察组织学变化,免疫组织化学方法结合图像分析检测TGF-β1、TGF-β R1、IGF-1在髁突中的表达及分布.结果：实验组大鼠下颌后退1～2 mm,镜下见颞下颌关节髁突软骨厚度增加,以生发层和过渡层增加明显,细胞数增多,细胞体积增大,核肥大深染.髁突各层软骨细胞均有TGF-β1、TGF-β R1和IGF-1的表达,免疫组织化学阳性染色相对面积和积分灰度的比较显示：在功能矫形后退下颌后,实验组TGF-β1、TGF-β R1和IGF-1的表达较对照组明显增强,其差异具有统计学意义（P＜0.05）.结论：功能矫形后髁突软骨表现为增生改建、分化功能增强,其发生与TGF-β1、TGF-β R1和IGF-1的表达密切相关.     

兔关节盘前移位后髁突软骨TGF-β1的表达及意义

目的探讨关节盘移位后髁突软骨中转化生长因子-beta1（transforming growth factor-beta 1,TGF-β1）表达与分布的变化规律及可能意义。方法22只日本大耳白兔,16只用于建立关节盘前移位的动物模型,分别于术后1、2、4、8周处死。4只行模拟手术作为手术对照组。另2只不行手术作为空白对照。免疫组化法检测髁突软骨中TGF-β1的表达与分布。结果实验组关节盘成功前移位。对照组TGF-β1主要表达于髁突肥大层及钙化软骨层,实验组关节盘移位后,过渡层及增殖层中TGF-β1表达逐渐增强。8周时髁突软骨全层细胞几乎都表达TGF-β1。结论关节盘移位后TGF-β1的分布及含量发生了改变。这种改变与关节盘前移位病程进展一致。提示TGF-β1可能介导了关节盘移位后疾病发展过程中机械刺激对髁突的改建作用。     

咬合垂直距离升高对大鼠颞下颌关节组织形态学的影响

目的观察咬合垂直距离升高后成年大鼠颞下颌关节的组织形态学改变。方法将12只成年雄性Wistar大鼠随机等分为对照组和咬合升高组（光固化复合树脂合垫升高后牙咬合）,7 d后处死大鼠,取所有动物的颞下颌关节行HE染色光镜观察,并采用计算机辅助图像分析系统测量关节盘和髁突软骨前、中、后部的厚度。结果实验7 d后,两组动物的体重无明显差异,关节盘各部的厚度亦无明显改变（P〉0.05）;而咬合升高组大鼠髁突前、中、后部软骨全层的厚度均大于对照组（P〈0.05）;中带髁突软骨排列紊乱。结论 7 d的咬合升高可以影响成年大鼠髁突软骨的组织形态,局部出现关节炎样改变。     

咬合创伤对大鼠髁突软骨内PCNA表达的影响

目的 本研究以大鼠为实验对象,建立了咬合创伤模型,采用组织学和免疫组织化学染色等方法,观察在咬合咬合创伤以及去除咬合创伤过程中髁突软骨组织形态及软骨中PCNA的表达变化情况,探讨咬合创伤对髁突软骨内细胞的增殖与分化等活动的影响,进一步增加对咬合创伤致髁突软骨改建的认识.方法 选用成年雄性Wlster大鼠14只,分别随机分为4个实验组及1个对照组.咬合创伤组:左侧上颌第一磨牙配戴改良带环,玻璃离子黏固剂黏固,造成咬合面高点,形成该牙与对颌牙尖窝不吻合的咬合接触关系.去除咬合创伤组:在造成咬合创伤2周后,去除改良带环.对照组:不作任何处理,同环境饲养.咬合创伤组中大鼠分别干放入带环后2、4周处死;去除咬合创伤组大鼠于休息2,4周后处死;对照组大鼠干实验结束后期处死.取大鼠双侧颞下颌关节作HE染色,以及PCNA的免疫组织化学染色.结果 1、咬合创伤可以影响雄性大鼠髁突软骨的改建活动,去除咬合创伤可以改善这种变化. 2、咬合创伤组大鼠髁突软骨中PCNA的表达均出现逐渐增高的趋势,咬合创伤2周时高于对照组,但差异不显着(P>0.05),咬合创伤4周时高于对照组(P<0.05),去除咬合创伤后,与咬合创伤组相比PCNA表达,去除创伤2周组无显着变化(P>0.05),去除创伤4周组明显低于创伤2周组(P<0.05),去除创伤4周组明显低干去除创伤2周组(P<0.05),并出现逐渐减少的趋势,与对照组相比,无显著差异,并恢复到对照组水平(P>0.05).结论 本实验结果提示,大鼠咬合创伤后,髁突软骨发生了的适应性改建,髁突软骨增生,软骨细胞增殖,髁突建立新的平衡以维持其正常的生理功能,咬合创伤去除后,髁突软骨增生减弱,软骨细胞增殖不明显, PCNA含量的改变与髁突软骨的增生与改建密切相关,显示髁突有很强的适应与改建能力,为临床的咬合治疗骨关节病提供了组织学参考及理论参考.     

Herbst矫治器前移下颌对成年大鼠髁状突中Ⅲ型胶原表达的影响

目的探讨Herbst功能矫治器引导成年大鼠下颌前伸,对其髁状突组织中Ⅲ型胶原表达水平的影响,进一步明确Herbst矫治器对成年大鼠髁状突组织改建的作用.方法 60只14周龄雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组;实验组大鼠全天佩戴自制Herbst矫治器引导下颌前伸,对照组不佩戴矫治器.于时间点3、7、14、21和30 d分别处死各组大鼠,取右侧髁状突组织,使用免疫组化方法检测髁状突中Ⅲ型胶原蛋白的表达情况.结果对照组髁突软骨Ⅲ型胶原表达较低;3 d实验组髁突后部Ⅲ型胶原表达较相应对照组强（P〈0.05）,其余各实验组均明显强于相应对照组（P〈0.01）.实验组Ⅲ型胶原在30 d时表达最强.结论 Herbst矫治器能够诱导成年大鼠髁状突发生适应性改建.     

功能性下颌偏斜对髁突软骨增殖活动影响的初步研究

目的：探讨功能性下颌偏斜对青春期大鼠下颌髁突软骨增殖活动的影响。方法：选用4周龄雄性SD大鼠80只,使用随机数字表法随机分成3组：偏斜组40只,偏斜恢复组20只,对照组20只。偏斜组及偏斜恢复组大鼠上前牙黏结冠套模拟功能性下颌偏斜。偏斜恢复组在安放冠套14 d后全部拆除,对照组不作任何处理。偏斜组及对照组分别在7、14、21 d及28 d各取10只与5只大鼠处死,偏斜恢复组在拆除冠套后的第7、14天各取10只大鼠处死。免疫组织化学SABC法检测下颌髁突软骨细胞增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）的表达。结果：（1）PCNA阳性细胞主要分布于髁突软骨增殖层和浅肥大层。（2）实验第7天时,偏斜组非偏斜侧髁突软骨中、后、外区域PCNA表达较对照组增强（中部P=0.022,后部P=0.019,外部P=0.024）,偏斜侧髁突软骨后、外区域PCNA表达较对照组减弱（后部P=0.015,外部P=0.017）,实验第14天差异更加显著（非偏斜侧中部P=0.0023,后部P=0.01,外部P=0.0097,偏斜侧后部P=0.0005,外部P=0.006）,且差异性一直持续到第28天（非偏斜侧中部P=0.0001,后部P=0.0001,外部P=0.0001,偏斜侧后部P=0.0001,外部P=0.0001）。当拆除冠套后,偏斜恢复组两侧髁突软骨PCNA表达的差异逐渐减小,至实验28 d时恢复至对照组水平。结论：功能性下颌偏斜使青春期大鼠下颌骨双侧髁突软骨发生不对称适应性改建,而进行早期矫治后,双侧髁突软骨的生长改建活动逐渐趋于一致。     

异常咬合对成年大鼠颞颌关节影响的初步研究

目的：探讨异常咬合关系对成年大鼠颞下颌关节的影响。方法：选用19周龄雄性Wistar大鼠50只作为研究对象,按实验目的将大鼠随机分为实验组（30只）、操作对照组（10只）和空白对照组（10只）。应用螺旋拉簧以60g力作用于实验组大鼠的上颌第一磨牙,使其近中移动,形成异常咬合关系。加力后2周、3周、4周、5周、6周分别处死6只实验组大鼠,2只操作对照组大鼠和2只空白对照组大鼠。取其颞下颌关节做HE染色、Masson染色,观测髁状突的变化。结果：1.实验组髁状突纤维层表层的胶原纤维间水肿,组织松解,形成细小的裂隙;胶原纤维从表面剥离;肥大层变薄;初期骨小梁出现轻度的排列紊乱,其后骨小梁排列趋于恢复;2.髁状突软骨厚度变化：实验组可见髁状突软骨厚度下降,由后向前依次变薄。前带厚度随时间变化不明显,后带的变化程度最大;3.Masson染色结果：在实验组中髁状突软骨和软骨下骨出现红染增加。结论：异常咬合将导致大鼠颞下颌关节出现退行性变,主要表现为髁状突软骨变薄和纤维层的轻度破坏。     

明胶-白芨胶/丹参材料对大鼠损伤皮肤转化生长因子-β1表达的影响

目的:将明胶-白芨胶/丹参材料植入大鼠损伤皮肤下,讨论丹参对创面修复中转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响.方法:将30只大鼠随机为对照组(15只)和实验组(15只).大鼠皮下切除真皮组织造模,实验组皮下植入明胶-白芨胶/丹参材料,对照组植入单纯明胶-白芨胶多孔材料.术后1、3、7、14d和28 d,每组随机选3只大鼠处死.将含周围组织的材料取出,制成病理切片,常规HE染色,镜下观察组织恢复程度.将术后1、3、7、14 d的切片标本行TGF-β1抗体免疫组化染色,利用ImageJ软件分析,镜下观察比较.结果:组织切片未显示异常反应.免疫组化染色结果显示,实验组TGF-β1表达强于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:明胶-白芨胶/丹参多孔材料能增强大鼠损伤皮肤TGF-β1表达,进而可能促进真皮组织恢复.     

TGF-β1在高氧致慢性肺疾病早产鼠模型中的表达及意义

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)基因及蛋白在高氧致早产鼠慢性肺疾病(CLD)中表达及意义.方法:建立高氧诱导早产鼠CLD模型,60只早产鼠被随机分为实验组及对照组,分别应用免疫组化及RT-PCR技术测定肺组织TGF-β1mRNA及蛋白表达.结果:实验组肺组织TGF-β1mRNA水平3 d增加,14 d达高峰,21 d仍高于对照组.实验组TGF-β1蛋白表达水平7 d增加,21 d达高峰.结论:TGF-β1的过度表达可能在高氧诱导CLD的肺发育障碍及间质纤维化中发挥重要作用.     

大鼠生长早期改变食物负荷对颞下颌关节软骨可聚蛋白聚糖酶-1和金属蛋白酶组织抑制因子-3表达的影响

目的观察大鼠生长早期改变食物硬度造成颞下颌关节负荷改变后颞下颌关节软骨内可聚蛋白聚糖酶-1和金属蛋白酶组织抑制因子-3（TIMP-3）的表达变化,并探讨其变化机制。方法 100只15 d龄雌性大鼠,21 d龄断奶后随机分为两组,实验组50只改喂极硬块状食物,对照组50只喂粉末样食物,改变食物后6 h、12 h、24 h、48 h及9 d每组分别各处死10只大鼠,采用免疫组化法及蛋白免疫印迹法半定量分别检测可聚蛋白聚糖酶-1和TIMP-3在髁突软骨细胞的表达情况。结果免疫组化发现,在所有时间段,可聚蛋白聚糖酶-1和TIMP-3主要表达在两组髁突软骨增殖层和上层肥大层的软骨细胞,可聚蛋白聚糖酶-1在两组髁突软骨下肥大层以及基质中亦有弱表达;蛋白免疫印迹结果显示,在12 h、24 h实验组可聚蛋白聚糖酶-1相对灰度值明显高于对照组（P〈0.05）;在6 h时间点上,实验组TIMP-3相对灰度值明显低于对照组（P〈0.01）;其他时间段两组表达差异无统计学意义（P〉0.05）。结论改变食物硬度造成大鼠颞下颌关节负荷改变,可聚蛋白聚糖酶-1和TIMP-3参与髁状突软骨代谢,其表达变化属生理范围内,是改变食物负荷极早期的一种敏感、暂时、适应性改变。     

PDTC对癫痫大鼠脑组织IL-6及TGF-β1水平的影响

目的观察吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)的干预对慢性癫痫大鼠脑组织中白介素-6(IL-6)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响。方法 SD大鼠随机分为对照组24只、戊四氮(PTZ)模型组24只、PDTC干预组24只,PTZ模型组腹腔注射生理盐水稀释的PTZ 35 mg/kg,对照组腹腔注射等量生理盐水,PDTC干预组腹腔注射PTZ(35mg/kg)和PDTC(100mg/kg)。分别于14d、21d、28d、35d采血,用ELISA法测定大鼠血清IL-6、TGF-β1水平动态变化。结果与对照组相比,PTZ模型组IL-6含量14d、21d、28d、35d明显升高,TGF-β1含量相应时段均明显升高(P<0.01);与PTZ模型组相比,在各个时间段,PDTC干预组IL-6显著降低,而TGF-β1显著升高(P<0.01)。结论 NF-κB活化及细胞因子IL-6、TGF-β1的过度表达是参与慢性癫痫发病的重要机制;PDTC通过抑制NF-κB活化过程进而影响IL-6、TGF-β1的表达,以达到减轻慢性癫痫大鼠脑损伤的作用。     

改变食物硬度对大鼠生长期髁状突软骨中TIMP-3表达的影响

目的：通过改变食物硬度造成大鼠生长早期颞下颌关节软骨的负荷改变,检测金属蛋白酶组织抑制剂因子-3（TIMP-3）表达变化,探讨其在髁状突软骨发育中的意义。方法：40只21日龄SD雌性大鼠同时哺乳与喂食粉末样食物,第28天断奶,随机分为两组：对照组仍喂食粉末样食物,实验组改喂同种成分的硬块状食物,食物改变后,在第24 h,48 h,7 d,14 d时每组各处死5只大鼠。PCR半定量检测4个时段两组间TIMP-3表达。结果：半定量分析表明,在开始实验后,整个髁状突软骨TIMP-3在软、硬食物组中的表达,在最初24 h时间上有统计学差异,软食物组的高于硬食物组（P〈0.05）,而在随后的时间点无明显差异。TIMP-3的表达在软（硬）食物组中24 h与48 h、24 h与7 d、24 h与14 d的时间点上均有统计学意义（P〈0.05）。结论：改变食物负荷后,早期TIMP-3表达变化的时间和负荷依赖性,提示负荷的改变引起TIMP-3在髁状突软骨生长发育过程中的变化是一种在生理范围内的,敏感、暂时、适应性的改变。     

染矽尘大鼠早期肺组织中转化生长因子-β1的表达

【目的】探讨染矽尘大鼠肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白水平的改变在矽肺发病中的意义。【方法】将96只大鼠随机分为对照组、染矽尘组,采用一次性气管内注入矽尘法建立矽肺动物模型。染尘后按不同时间点取大鼠肺组织制作组织芯片,链菌素-过氧化物酶法检测TGF-β1在肺组织中的表达,用Image-ProPlus图像分析系统对TGF-β1表达作定量分析。【结果】对照组大鼠有极少量TGF-β1在肺组织内表达;染矽尘组大鼠肺组织TGF-β1表达明显增强,TGF-β1阳性细胞积分光密度增加,7 d时达高峰,与对照组比较有显著性差异(P<0.05),14 d时开始下降,至28 d时两组差异无显著性(P>0.05)。【结论】矽尘可以诱导肺组织过度表达TGF-β1,TGF-β1可能与早期矽肺纤维化病变有关。     

单侧咬合创伤建立大鼠颞下颌关节骨关节炎模型的 组织病理学观察

目的：通过单侧咬合创伤方法建立大鼠颞下颌关节骨关节炎（temporomandibular joint osteoarthritis,TMJ-OA）模型,并观察髁突软骨的组织病理学变化。方法：将大鼠随机分为对照组和实验组,再分为4个亚组,即4、8、12、16周组,每组6只大鼠。用树脂将方弓丝粘接于实验组大鼠右侧上颌第一磨牙（牙合）面,垫高约0.5 mm。称量并记录各组大鼠第1、2、3、4、8、12、16周体质量,并于第4、8、12、16周分别取材,通过苏木精-伊红及番红O-固绿染色,检查、分析大鼠颞下颌关节髁突软骨的组织病理学变化,并测量各组大鼠髁突软骨各层厚度变化。结果：①在实验早期,咬合创伤对大鼠体质量增长影响较大（t1=4.757,P1=0.000;t2=3.096,P2=0.003）。②8周时,实验侧髁突软骨发生较明显组织病理学变化[组织学评分为（8.67±1.37）,t=-7.267,P=0.000],纤维层软骨出现水平裂隙,增殖层软骨细胞排列紊乱,呈早期骨关节炎样软骨病损。③咬合创伤对髁突软骨造成的病理损害程度与其作用时间相关,时间越长,病损越重。结论：采用单侧咬合创伤方法成功建立了大鼠颞下颌关节骨关节炎模型,且造模8周后可观察到早期的骨关节炎样病损表现,此模型可作为研究TMJ-OA早期病理机制的理想模型。     

TGF-β/Smad与Wnt/β-catenin在博莱霉素致大鼠肺纤维化中的表达及相互作用

目的观察TGF-β/Smad和Wnt/β-catenin通路相关基因在肺纤维化大鼠模型肺组织中的表达,探讨两条通路对肺纤维化的影响及其相互作用。方法取Wistar大鼠36只,随机分为正常对照组和肺纤维化模型组,每组18只。采用气管内注入博来霉素(BLM)建立Wistar大鼠肺纤维化模型,每组分别于第14、21和28天处死大鼠各6只;取肺组织称重,测定肺组织中HYP、IL-1β水平,观察肺组织Col-I、IL-1β、TGF-β1、Smad3、α-SMA、Wnt1、β-catenin、LEF-1 mRNA的表达,并进行HE染色和Masson胶原染色。结果 (1)与正常对照组比,造模后14~28 d大鼠肺指数均明显升高(P0.01);肺组织HE染色呈现明显的肺纤维化病理改变,Masson染色结果可见造模后14~28 d肺间质蓝色胶原呈渐进性增加。(2)造模后第14天,肺组织IL-1β含量、IL-1βmRNA相对含量均显著升高(P0.01),随后逐渐降低,至造模后第28天IL-1β表达量接近正常水平(P0.05)。(3)造模后14~28d大鼠肺组织HYP含量、Col-I mRNA相对表达量均明显升高(P0.01)。(4)与正常组相比,模型组中TGFβ1、Smad3、α-SMA、Wnt1、β-Catenin、LEF-1 mRNA表达显著增加(P0.01),且TGFβ1、Smad3 mRNA分别与Wnt1、LEF-1、β-catenin mRNA的表达呈显著正相关。结论 TGF-β/Smad和Wnt/β-catenin通路相关基因在博来霉素致大鼠肺纤维化中表达上调,两条通路对肺纤维化可能有促进作用且它们间可能存在一定联系。     

咬合创伤对大鼠髁突生长发育影响的实验研究

目的 探讨咬合创伤是否会影响髁突的发育.方法 采用4周龄SD大鼠18只, 随机分为2组, 实验组在左侧上颌磨牙粘结直径为1 mm的钢丝, 对照组不做处理, 于1, 3, 5周处死大鼠, 取实验组双侧及对照组左侧髁突做组织切片.组织学观察髁突形态变化, 免疫组化和TUNEL检测髁突形态及软骨细胞增殖和凋亡情况.结果 组织学显示1, 3, 5周实验组双侧关节与对照组无明显差异.免疫组化和TUNEL显示1, 5周时, 实验组创伤侧与非创伤侧及对照组软骨细胞增殖与凋亡差异无统计学意义 (P>0.05) ;3周时, 创伤侧软骨细胞增殖数减少, 与非创伤侧及对照组相比差异有统计学意义 (P<0.05) .创伤侧软骨细胞凋亡数增加, 与非创伤侧及对照组相比差异有统计学意义 (P<0.05) .结论 一侧咬合创伤对同侧髁突从形态上没有明显影响, 但在细胞生长方面有一定影响, 提示一定程度的咬合创伤不足以对生长发育期的髁突产生明显的影响.     

慢性睡眠剥夺对大鼠髁突软骨TGF-β1表达的影响

目的 探讨慢性睡眠剥夺对大鼠髁突内转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达的影响.方法 将60只Wistar大鼠随机分为3组,分别为实验组、对照组和恢复组.利用改良多平台法(modified multiple platform method,MMPM)对实验组和恢...