三七醇回流法与超声法提取工艺比较研究

目的:优选三七药粉醇回流法提取与醇超声法提取最优工艺参数;探讨三七药粉超声提取的可行性,为工业化生产提供依据.方法:以三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1及三种皂苷总和的含量为评价指标,首先采用正交设计试验法筛选三七药粉醇超声提取与醇回流提取各自的最优工艺条件,再用配对t检验法对比分析试验数据.结果:三七醇超声提取最优工艺参数为:三七药材超微粉加入30%的乙醇浸泡30 min,30%乙醇体积为药材量的6倍,超声时间30 min.三七醇回流提取最优工艺参数为:三七药材超微粉加入50%的乙醇浸泡30 min,50%乙醇体积为药材量的10倍,水浴回流时间30 min.三七药粉醇回流与超声提取差别有统计意义,比较均值回流提取优于超声提取.结论:三七采用回流提取为佳,按最优工艺条件提取,三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1及三种皂苷总和的含量较高.     

三七-西洋参药物配伍中皂苷类提取工艺优化

摘要：目的:优化三七-西洋参药物配伍中皂苷类成分的提取工艺,分析提取物的HPLC特征图谱。方法:采用正交试验,以浸膏得率、总皂苷含量、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1为评价指标,研究三七-西洋参药物配伍中皂苷类成分的最佳醇提工艺,分别对三七-西洋参药物配伍的醇提物和水提物中皂苷类成分含量进行分析。结果:三七-西洋参药物配伍的最佳醇提工艺为加12倍量60%乙醇,水浴回流0.5 h,提取3次;醇提物中总皂苷含量较高,三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1含量明显高于水提物;三七-西洋参药物配伍与单味药相比,醇提物中主要皂苷类成分含量具有一定配伍特点;通过对比三七-西洋参药物配伍及单味药材醇提物、水提物的HPLC色谱图,分析归属6个共有峰,3个西洋参特征性成分及1个三七特征性成分,三七-西洋参药物配伍的醇提物较单味药醇提物,共有峰及特征峰峰面积均降低,各提取物中共有皂苷类成分比例各有其特点。结论:优选出的三七-西洋参药物配伍醇提工艺简便易行、重复性良好;建立的含量测定方法稳定可行,为三七-西洋参药物配伍的药效物质分析研究提供一定参考。     

菊三七多糖的提取工艺优选及体外抗氧化活性考察

摘要：目的:优化菊三七多糖的提取工艺,并考察其体外抗氧化活性。方法:以多糖得率为指标,首先通过单因素试验考察提取温度、提取时间、料液比、提取次数、初膏浓度及醇沉终浓度对多糖提取的影响,在此基础上采用L9（34）正交试验优选菊三七多糖提取工艺,并进行验证试验。通过体积分数为50%和80%的乙醇,将多糖提取物分级纯化得到两种不同的组分,以维生素C（VC）为阳性对照,考察其对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基的清除能力和总还原力。结果:菊三七多糖最佳提取工艺条件为:以水为提取溶剂,提取温度80℃,提取时间2 h,料液比为1∶36（g/ml）,提取次数2次。在此条件下,菊三七多糖得率为34.21%±0.61%（n=3）。两种分级多糖对DPPH自由基的清除率及总还原力均呈一定的量效关系,其中80%组分活性较强。结论:菊三七多糖的优化提取工艺合理、可行,得率高;菊三七多糖具有一定的体外抗氧化活性,可为其进一步研究提供参考。     

三七总皂苷含量测定及提取工艺优选

目的 比较不同对照品对三七总皂苷含量测定的影响和优选提取工艺.方法 分别以人参二醇和三七皂苷R1作对照品,比色法测定均匀设计法安排的各组试验的三七总皂苷含量,同时优选溶剂种类、溶剂用量、乙醇浓度、回流时间、三七药材粒度的三七总皂苷提取工艺条件.结果 以人参二醇和三七皂苷R1为对照品,比色法测定三七皂苷总含量相近,组间无明显差异.结论 比色法测定三七总皂苷含量,可以用人参二醇或三七皂苷R1作对照品,优选的三七总皂苷提取工艺,对大生产工艺参数的选择提供较为可靠的实验数据.     

正交试验法优选三七止血贴中三七的提取工艺研究

目的 优选三七止血贴中三七药材的最佳提取工艺.方法 采用正交试验法,以提取液中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1的总含量为指标,优选药材的提取工艺.结果 药材较优的提取工艺为加70%的乙醇8倍,提取3次,每次0.5 h.结论 优选的提取工艺三七总皂苷提取率高,操作简便,适用于生产.     

三七有效成分提取工艺的比较研究

目的：研究三七有效成分的最佳提取工艺。方法：采用水煎煮法、乙醇回流法、超声提取法提取,用超滤法和大孔吸附树脂进行分离,以不同提取方法得到提取物中三七总皂苷、人参皂苷Rb1、Rg1的含量为考察指标。结果：最佳提取工艺为：75％的乙醇超声提取3次,每次2h。结论：经优选得到最佳提取工艺,有效成分含量高,工艺简便。     

大孔吸附树脂富集三七总皂苷的工艺研究

目的:建立三七总皂苷的大孔吸附树脂吸附纯化的工艺条件及参数.方法:以三七总皂苷的含量为考察指标,对树脂吸附容量、洗脱溶酶及其用量进行了考察.结果:通过大孔吸附树脂富集与纯化后三七总皂苷洗脱率达80%以上,70%乙醇洗脱液干燥后的总固形物中三七总皂苷纯度可达81.6%.结果:三七提取物上D101大孔吸附树脂,以水洗脱后,以70%乙醇洗脱可以达到理想的结果.     

复方仙草胶囊生产工艺中三七提取工艺的优化

目的 优选复方仙草胶囊生产工艺中三七的最佳提取工艺.方法HT6K采用紫外分光光度法测得提取液中三七总皂苷的含量为考察指标,对提取方法、提取溶剂、提取前浸泡时间进行了单因素考察,再通过正交试验考察提取溶剂浓度、提取时间、提取次数、提取溶剂用量对三七提取工艺的影响.结果 最佳提取工艺条件为:选用70%乙醇,乙醇用量为药材的10倍,浸泡30min,加热回流3次,1次1.5h.HT5"H结论 优选的工艺稳定可行,得率高,操作简便,适合工业生产,为复方仙草胶囊的进一步开发生产提供依据.     

三七与三七药渣中游离氨基酸的含量比较及氨基酸提取工艺的研究

目的：比较三七药材与复方血栓通胶囊三七药渣中十八种氨基酸的含量,探讨三七药渣入药的合理性,并对三七氨基酸提取工艺进行考察。方法：采用高效液相色谱法进行含量测定,色谱柱为岛津Shim-pack XR-ODS色谱柱（3.0mm×75mm,2.2μm）;流动相以乙腈-0.05mol/L醋酸钠溶液梯度洗脱,0～8min,乙腈为5%;8～42min,乙腈为5%→28%;42～45min,乙腈为28%→40%;45～70min,乙腈为40%→60%;70～80min,乙腈为60%→5%;80～90min,乙腈为5%;柱温：室温;检测波长：254nm;流速：1mL×min-1;进样量：5μL。记录时间：70min。提取工艺优选采用单因素试验法考察提取次数、提取时间和溶媒倍量3个影响因素。结果：三七药渣中十八种氨基酸含量为0.092%～0.149%;最佳提取工艺为12倍量的0.1mol·L-1盐酸超声提取3次,每次1h。结论：三七药渣中仍含有大量氨基酸,建议三七原药材直接入药。     

超临界CO2萃取三七脂溶性成分及其GC-MS分析

目的:用超临界CO2萃取三七的脂溶性化学成分,分析并测定提取物的主要成分及其含量。方法:使用均匀设计对影响超临界CO2萃取的各因素进行考察优化;萃取物用气相色谱-质谱联用法进行分析鉴定,使用面积归一法测定各成分相对含量,并与乙醚溶剂直接提取法进行对比。结果:萃取最佳条件为:萃取釜压力30MPa,萃取温度48℃,分离釜Ⅰ压力8MPa、分离温度30℃,分离釜Ⅱ压力5MPa、分离温度30℃,萃取时间2.0h,CO2流量35kg.h-1,三七颗粒度60目;经气相色谱-质谱联用法分析,超临界CO2萃取物与乙醚溶剂直接提取物的组成有显著不同,检出多种炔醇类成分,包括人参炔醇(5.95%)。结论:用超临界CO2萃取三七,可以较好的获得其脂溶性成分,提取物可以供进一步深入研究。     

三相静态萃取高效液相色谱法鉴别人参、三七及西洋参

目的建立人参、三七和西洋参的高效液相色谱（HPLC）鉴别方法，对其进行鉴别和质量控制。方法利用一种新的样品处理方法，即液-液-液三相静态萃取法对药材样品进行预处理，然后对三相萃取物分别以不同的流动相梯度进行反相高效液相色谱（RP-HPLC）法测定，记录色谱图和三维图谱。结果3种药材的HPLC图均具有良好的分离度和重现性，鉴别特征差异显著。结论三相静态萃取能够对参类药材的复杂成分进行有效的分离。药材各相萃取物的HPLC图均具有良好的鉴别特征，其中中间相较轻相和重相萃取物的色谱信息量大、专属性强，因此可以将中间相的特征色谱作为人参、三七和西洋参鉴别及质量指标量化的依据。     

中药三七高效液相色谱特征研究

目的建立中药三七的高效液相色谱特征谱。方法运用加压溶剂提取、HPLC-DAD分析28个不同产地的三七药材,所得的图谱采用中国药典委员会开发的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统（Version 2004A）”软件进行分析。结果28个三七样品色谱图中各色谱峰分离良好,从中确定了13个特征峰,其中8个主要色谱峰经对照品确认,所有药材色谱图与软件生成的对照谱相似度为0.982±0.008(RSD=0.78%)。结论该方法简便、重现性好、具可操作性,可科学评价及有效控制三七药材质量。     

三七中黄酮类成分的研究进展

查阅近年有关文献,对三七中黄酮类化学成分及其提取、药理作用进行综述。三七中黄酮类成分为黄酮醇及其苷类;药理研究证明其具有扩张动脉血管、增强心肌收缩力、稳定心率、改善血循环及防治血栓等作用,而且三七总黄酮对人肝癌细胞SMMC-7721增殖有抑制作用。这对三七黄酮类成分的进一步研究和开发具有重要意义。     

均匀设计优化三七总皂苷提取工艺

目的优选三七总皂苷提取工艺的最佳条件。方法通过均匀设计试验。结果提取溶剂用量为药材重量的 1 3倍 ,乙醇浓度为 30 % ,提取温度为 70℃ ,加热时间 4 0min,同法提取 2次 ,三七总皂苷平均提取率为 94 92 %。结论三七总皂苷提取率高、生产成本低 ,适合工业生产。     

中药三七对大鼠心肌缺血保护作用的谱效学研究

目的 以大鼠心肌缺血模型为对象,研究中药三七对大鼠心肌缺血保护作用谱效关系及药效物质基础。方法 在建立中药三七液相指纹图谱分析方法的基础上,研究药物治疗心肌缺血作用的物质基础及谱效关系。结果 人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁、三七皂苷R₁是中药三七治疗心肌缺血的主要有效成分。结论 通过谱效关系研究直接获得药效活性物质,建立了三七药材谱效关系评价的新方法,客观反映了药物的内在质量,为该类中药的进一步研究提供了新的思路。     

三七总皂苷治疗急性脑梗死及对血清血管内皮生长因子的影响

目的 :观察三七总皂苷对急性脑梗死(ACI)的疗效及治疗前后血清血管内皮生长因子(VEGF)水平的变化。方法 :4 0例ACI病人 ,随机分为 2组。三七总皂苷组 2 0例 ,以曲克芦丁、胞磷胆碱和三七总皂苷 (5 0 0mg ,iv ,gtt ,qd)治疗 2wk ;对照组 2 0例 ,仅用曲克芦丁、胞磷胆碱治疗。采用双抗体ELISA法分别检测治疗前后病人血清VEGF水平的变化。结果 :三七总皂苷组总有效率95 % ,对照组 6 5 %。 2组疗效比较经Ridit分析 ,P <0 .0 1。 2组病人治疗后VEGF浓度均较治疗前显著升高 (P <0 .0 1) ;三七总皂苷组较对照组升高明显 (P <0 .0 5 )。结论 :三七总皂苷可使ACI病人的VEGF浓度升高 ,有利于ACI病人的治疗恢复     

毛细管区带电泳法测定三七药材中的三七素

目的测定三七中三七素的含量。方法采用毛细管区带电泳定量;用未涂层石英玻璃毛细管(65 cm×50μm,有效长度50 cm),检测波长200 nm,电压进样10 kV×5 s,运行电压30 kV,温度25℃,背景电解质为50 mmol·L-1NaH2PO4溶液(用0.1 mol·L-1氢氧化钠液调pH2.5)。结果方法的平均回收率为98.6%,RSD=2.3%(n=9)。结论所用方法简便快捷、灵敏度高、重复性好。     

三七主要皂苷类药效成分含量的近红外光谱测定法

目的 建立基于近红外光谱的快速测定三七药材中五种主要皂苷类药效成分含量的方法。方法 取173批三七不同部位、不同产地、不同大小规格的药材,采用HPLC定量分析方法测定三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re、Rb1和Rd的含量,作为参考值。药材粉碎后在4000~10000 cm-1波数范围内采集光谱,对光谱预处理方法、建模波段及主成分数进行优选,采用偏最小二乘回归算法建立近红外光谱与三七药材中五种主要药效成分含量HPLC分析结果之间的多元校正模型。结果 三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re、Rb1和Rd在校正模型中的预测相关系数（r）分别为0.9596、0.9785、0.9026、0.9660和0.9929。结论 该方法测定的五种皂苷是三七的主要药效成分,且为三七总皂苷类制剂的质量检测指标。本方法操作简便快速,结果准确,可用于三七药材质量的快速检测。     

LC/MS鉴定中药三七及其复方制剂

目的建立中药三七及其在复方丹参制剂中的特征图谱。方法用LC/MS分析方法,采集三七、人参和西洋参的LC/MS总离子流色谱,从总离子流色谱中提取三七主要化学组分的提取离子流色谱,选择相对稳定、3种药材间差异显著的提取离子流色谱作为三七药材的特征图谱。在相同条件下对比复方丹参的提取离子流色谱与三七的特征图谱;同时用LC/MS/MS对三七中的主要组分进行定性分析。结果与人参皂苷Rg1(m/z 800)和Re(m/z 946)具有相同m/z的提取离子流色谱在3种药材间差异显著,稳定可靠,在复方中有较好的重现性,复方丹参中其他共有成分对其无显著影响。结论三七的LC/MS特征图谱可作为鉴定复方丹参中三七的特征,也可作为鉴别三七和同属其他药材的特征。     

三七皂苷Rg1、Rb1对大鼠局灶性脑缺血后c-fos、c-jun表达的抑制作用分析

目的探讨三七皂苷Rg1、Rb1对大鼠局灶性脑缺血后c-fos、c-jun的表达与细胞凋亡的关系。方法将雄性Wistar大鼠60只随机分为单纯缺血30min再灌流0、0.5、1、3、6、12、24、48天8个时点组和正常对照组、假手术组,每组6只大鼠。用线栓法造成大鼠局灶性脑梗死模型。用Tunel法检测脑细胞凋亡,用免疫组化法测定转录因子c-fos、c-jun在肝内的表达。结果 Tunel法检测出细胞凋亡在缺血再灌后24～48h达高峰,c-fos在3h达高峰,c-jun持续增加,24h达高峰。三七皂苷Rg1、Rb1显著抑制c-fos、c-jun的表达。结论 c-fos、c-jun的表达与细胞凋亡有关,提示三七皂苷Rg1、Rb1可通过抑制c-fos、c-jun的表达降低脑细胞凋亡。