人类外周血基因组DNA提取方法的比较分析

目的:对2种提取外周血基因组DNA的实验方法进行了比较,建立一种本实验室有效的外周血基因组DNA的提取方法.方法:采用常规试剂盒和本实验室设计的2种外周血液DNA提取法.结果:本实验室使用的外周血基因组DNA提取方法与试剂盒提取外周血基因组DNA的纯度比较无明显差异.结论:本实验室使用的外周血液DNA提取方法简便、有效、经济,满足于基因组的研究.     

全血基因组DNA的提取和纯化方法比较

目的探讨全血基因组DNA的快速纯化方法。方法分别采用表面活性剂裂解法、传统酚抽提法、加热法分别制备DNA，分析各种方法提取DNA的产量、纯度，以及方法本身的优缺点、费用等，同时我们进行RAPD标记实验以比较纯化的DNA在PCR上应用的效果。结果表面活性剂裂解法简单快速，其制备的DNA产率、纯度明显高于传统酚抽提法，但其完整性不如后者。加热法快速制备的全血基因组DNA作为模板虽然纯度差，但仍可用于PCR，并得到满意的检测结果。同一份标本采用不同方法提取的DNA作为模板进行的RAPD标记实验，其多重PCR产物进行分离产生的DNA图谱基本一致。结论3种全血DNA纯化方法均可满足不同的实验要求。     

一种有效的寄蝇基因组DNA的提取方法

目的提出了一种有效的酒精浸泡的双翅目寄蝇科昆虫基因组DNA的提取方法,通过对实验结果的分析,表明该方法可行。     

两种血凝块基因组DNA提取方法的比较

分子生物学实验常常涉及到血液中基因组DNA的提取,通常用于实验的DNA主要是从抗凝血中提取,但抗凝血保存的时间过长,也会形成血块,给提取带来不便,造成许多珍贵的血液标本遗弃。为此,本实验对比研究了两种不同的血凝块基因组DNA提取方法,以探索血凝块基因组DNA提取的有效方法,现报道如下。     

外周血基因组DNA提取方法比较

目的建立快速经济有效提取微量外周血基因组DNA的方法。方法采用酚/氯仿提取法、NaCL沉淀法和试剂盒法,直接从人外周血中提取基因组DNA,并以此为模板,进行肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因片段的扩增及鉴定。结果酚/氯仿法和试剂盒法提取的DNA量大,需血量少,用于PCR扩增结果稳定。结论酚/氯仿提取外周血DNA稳定、高效、经济,可用于批量临床标本的制备。     

一种快速高效提取全血基因组DNA的实验方法

目的 建立一种快速的从少量全血中高效提取基因组DNA的实验方法 .方法 首先低渗处理红细胞,收集白细胞,然后裂解白细胞释放核蛋白,在去污剂及乙酸钾的作用下使核酸与蛋白分离,最后沉淀、纯化DNA.扩增管家基因(β-globin)观察提取效果.结果 该法收集的DNA纯度(OD360/OD280)为(1.82±0.4);每毫升外用血可得DNA19.0～37.0μg,片段大小10～13kb;β-giobin基因扩增电泳带清晰.结论 该法提取DNA简便、高效和经济,易于各级分子生物学实验室使用.     

提取陈旧血液标本中DNA的三种方法比较

目的寻找适合从陈旧全血中提取基因组DNA建立基因组库的方法。方法分别用改良的酚-氯仿法、SDS法、试剂盒法从陈旧全血中提取基因组DNA,采用聚合酶链反应（PCR）对提取的基因组DNA进行评估。结果提取的基因组DNA经统计学分析,3种提取基因组DNA的方法之间差异有统计学意义（P〈0.01）,以改良的酚-氯仿法提取的基因组DNA效率最高,试剂盒法次之,SDS法较差。结论建基因组库推荐改良的酚-氯仿法。     

外周血DNA提取方法的比较及改良

目的 对3种提取外周血的实验方法进行了比较，并建立一种简便、快速、有效的外周血基因组DNA的提取方法。方法 采用常规酚／氯仿提取法、碘化钾法和外周血液DNA提取法。结果 外周血液DNA提取方法提取外周血基因组DNA的纯度高，通过电泳图明显可见。结论 外周血液DNA提取简便、快速、有效适用于临床标本的研究。     

血液基因组DNA提取方法的改良简

目的 探讨改良血液样品基因组DNA的提取方法,制备纯化的高分子量DNA。方法 将312份新鲜血液样品随机分为2组:A组(90份)和B组(222份)。A组采用常规基因组DNA提取方法。B组采用改良的基因组DNA提取方法,其基因组DNA提取方法改良之处:1)在血液样品中加入细胞裂解液CL后采用手工震荡,并离心2min 40s;2)震荡混匀后将样品分装成3管,然后将缓冲液GS加入第1管吹打溶解后吸取上清,并加入第2管,再吹打溶解后吸取上清加入第3管,继续吹打溶解;3)加入缓冲液GB后再58℃水浴过夜16h。结果 改良的血液样品DNA提取方法能够提高产率,提高纯度,获取更多高分子量的DNA,相对于常规基因组DNA提取方法有显著提高。结论 改良的血液基因组DNA提取方法操作简便,能有效地避免操作导致DNA链断裂,提高DNA的完整性及纯度。     

三种DNA抽提方法对新鲜血细胞及冻血细胞DNA抽提效能的比较

目的 比较3种血细胞DNA提取方法（进口试剂盒、国产试剂盒和改良苯酚抽提方法）对新鲜血细胞及冻血细胞DNA的提取效率及差异。 方法 收集20例胰腺癌患者5 mL外周血标本,经低速离心获得血细胞沉淀后分装,根据保存方式分为新鲜血细胞和冻血细胞。新鲜血细胞不经冻存,在12 h内迅速抽提DNA;冻血细胞在-40℃保存72 h后,室温解冻后抽提DNA。抽提方法分别采用进口试剂盒（Qiagen公司）、国产试剂盒（天根生化科技有限公司）和改良苯酚方法。琼脂糖电泳检测DNA片段的完整性,核酸蛋白检测仪测定DNA纯度和浓度,计算不同抽提方法的DNA得率。 结果 在获得的DNA完整性方面,改良苯酚方法抽提的基因组DNA断裂和降解较少,而进口和国产试剂盒抽提的DNA均有一定程度的降解小片段。在获得DNA的纯度方面,部分冻存血细胞无论应用进口试剂盒、国产试剂盒和改良苯酚方法,均表现出一定的污染杂峰。在DNA得率方面,无论新鲜血细胞和冻存血细胞,均是进口试剂盒得率最高,其次为国产试剂盒;冻血细胞的改良苯酚法DNA得率与国产试剂盒相当,新鲜血细胞的改良苯酚法DNA得率最低。在耗时和成本分析中,试剂盒较快但成本较高。 结论 改良苯酚抽提法可获得较进口和国产试剂盒片段更长、更完整的基因组DNA,虽然在得率和耗时方面稍逊色,但其成本较低,可推荐用于大规模、分批次、低成本冻存血细胞的基因组DNA抽提。     

经典酚/氯仿抽提法和纯化试剂盒法提取全血基因组DNA的比较

目的 比较经典酚/氯仿法和纯化试剂盒法抽提全血基因组DNA的差异.方法 分别对两种方法抽提的全血DNA产物进行紫外分光光度仪、琼脂糖凝胶电泳和体外聚合酶链锁反应（PCR）扩增.结果 两种方法DNA的提取效率相似,TaKaBa试剂盒法提取的纯度[光密度（OD）260nm/280nm]较常规酚/氯仿法明显提高.结论 TaKaBa试剂盒法较传统酚/氯仿提取基因组DNA法快速、简便、经济,可用于PCR模板DNA的制备.     

血凝块DNA提取方法探讨

目的:探讨血凝块DNA提取的方法.方法:利用血凝块融化液直接进行DNA提取,并通过血凝块融化液涂片、血凝块冰冻切片以及琼脂糖电泳鉴定所提DNA的质和量.并与常规研磨法提取DNA进行比较.结果:利用血凝块融化液直接提取DNA浓度可高达(13.9±10.4)mg/L,A(260 nm)/A(280 nm)为1.85±0.11;高于研磨法的(9.70±4.1)mg/L和1.74±0.08(P＜0.05).血凝块融化液中以及血凝块冰冻切片中均含有较多的有核细胞.结论:利用血凝块的融化液直接进行DNA提取是一种简便、实用的DNA提取方法.     

应用改良法从冷冻血凝块中提取基因组DNA

[目的]建立从冷冻血凝块中提取基因组DNA的改良方法.[方法]取冷冻血凝块在4℃条件下解冻,经高盐及高EDTA提取液处理,消化液消化,异丙醇抽提.[结果]用改良异丙醇法成功地从人血凝块中提取基因组DNA,其质量浓度为(22.5±7.2)mg/L,光吸收比值A260/A280为1.63~2.00.[结论]应用改良法提取的基因组DNA的总量较多,提取率高,PCR扩增效果较好,可用于血凝块基因组DNA的提取.     

用样本工作站批量提取全血中DNA方法的建立

目的 建立一种用斯达尔样本工作站提取全血中DNA的方法,并评价DNA的纯度和产量.方法 使用斯达尔样本工作站提取全血DNA;DNA的纯度和含量用紫外分光光度法测定,并与手工提取方法进行比较.结果 斯达尔样本工作站与手工提取的DNA相比,在纯度与得率方面无差异,但更快速、简单.结论 本方法可以快速、高效地从大批量全血中提取较高质量的DNA,所得DNA适用于HLA的分型实验.     

不同DNA抽提方法在乳腺癌血清循环DNA提取中的效果比较

目的:探讨不同DNA抽提方法在乳腺癌血清循环DNA提取中的效果。方法:选取86例乳腺癌患者为研究对象,比较QIAgene、OMEGA、磁珠法、酚/氯仿法对乳腺癌患者血清循环DNA的提取效果。结果:四种DNA提取方法中,磁珠法具有最高的提取效率(72.5%)和最低的CV值(23.1%)。结论:磁珠法对乳腺癌患者血清循环DNA的提取效果最好,尤其适用于小片断DNA的提取。     

一种快速微量外周血基因组DNA的提取方法

目的建立一种简便、快速、有效、微量外周血基因组DNA的提取方法.方法采用NaI作细胞裂解剂裂解细胞和细胞核,用氯仿:异戊醇(24:1)直接提取基因组DNA.结果该方法提取外周血基因组DNA的纯度高A260 nm/A280 nm=(1.87±0.11),提取效率每毫升外周血可得DNA(31±3.12)μg.结论该法简便、快速、有效,适应于批量临床标本的处理.     

简易膀胱冲洗法对膀胱内血块处理的临床应用

目的探讨简易膀胱冲洗法对膀胱内血块清除的临床疗效。方法回顾性分析52例反复膀胱内淤血患者的临床资料。肛管、前列腺电切镜、电动负压吸引器和Ellik联合使用,对膀胱内淤血患者进行血块清除,术后用恒温生理盐水进行持续膀胱冲洗。结果血块均顺利清除,前列腺电切镜检查均顺利进行,术后复发率低。结论简易膀胱冲洗法安全、可行,能够有效地清除膀胱内血块,且术前、术后差异具有统计学意义,P<0.05,术后的并发症更少。     

不同穿刺方法在桡动脉采血中的应用效果比较

目的：通过比较两种不同手法经桡动脉穿刺采血的临床效果,探讨临床动脉采血的最佳穿刺方法。方法将98例患者随机分为对照组和观察组,两组分别采用30°-45°角斜面进针和90°角进针,比较两组患者穿刺成功率、疼痛感及皮下淤血发生情况。结果观察组一次穿刺成功率明显高于对照组（χ2=7.961,P=0.005）;观察组疼痛发生情况明显低于对照组（χ2=9.56,P=0.023）;观察组皮下淤血情况明显低于对照组（χ2=4.356,P=0.037）;局部血肿发生率明显低于对照组（χ2=4.237,P=0.04）。结论垂直进针法对组织损伤小,可提高动脉穿刺采血的成功率、减轻患者疼痛感、降低皮下淤血的发生。