DLL4在胰腺癌组织中的表达及其与肿瘤血管生成的关系

目的 检测delta-like ligand 4(DLL4)在胰腺癌中的表达,分析其与肿瘤血管生成及临床病理特征的关系.方法 采用免疫组化SP法检测60例胰腺癌组织及20例癌旁正常胰腺组织中DLL4的表达;观察微血管内皮细胞CD34表达,计算微血管密度(MVD);分析DLL4表达、MVD与胰腺癌临床病理特征之间的关系以及两者的相关性.结果 DLL4在胰腺癌组织中的表达明显高于正常胰腺组织(68.3％比20.0％,P＜0.01);胰腺癌组织DLL4的高表达与肿瘤分化程度、TNM分型、肿瘤转移及浸润等呈正相关(P值均＜0.05),而与肿瘤部位、大小、组织病理分型无关.胰腺癌组织MVD明显高于正常胰腺组织(34.9±13.2比18.9±2.2,P＜0.01);胰腺癌的MVD与肿瘤分化程度、TNM分期、肿瘤转移及浸润有关(P值均＜0.05),而与肿瘤部位、大小、组织病理分型等无明显相关性.DLL4表达阳性的胰腺癌组织MVD明显高于DLL4表达阴性者(38.8±10.7比29.0±15.2,P＜0.05),且DLL4表达与MVD呈显著正相关(r=0.669,P＜0.05).结论 DLL4表达可促进肿瘤血管生成,且与胰腺癌的转移、浸润相关.     

TMPRSS4在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的 检测Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶4( TMPRSS4)在胰腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系.方法 采用实时PCR法和蛋白质印迹法检测16例胰腺癌和配对癌旁组织TMPRSS4 mRNA和蛋白表达;采用免疫组织化学法检测61例胰腺癌标本、26例配对癌旁组织、4例正常胰腺组织TMPRSS4蛋白的表达,分析其与临床病理特征的相关性.结果 胰腺癌组织TMPRSS4mRNA和蛋白表达明显高于配对癌旁组织(9.09±7.01比1.27±0.72;1.223±0.125比0.667 ±0.106,P值均＜0.01),胰腺癌组织TMPRSS4蛋白阳性表达率为67.2％ (41/61),显著高于癌旁组织3.8％ (1/26)的阳性表达率(P＜0.01).正常胰腺组织未见TMPRSS4蛋白表达.胰腺癌TMPRSS4表达与患者年龄、性别及肿瘤部位、肿瘤大小无关,而与肿瘤分化程度、淋巴结转移、临床分期密切相关(P值均＜0.05).结论 胰腺癌组织高表达TMPRSS4,其表达与肿瘤的恶性程度相关.     

应用组织芯片技术研究Delta-like 4在胃癌组织中的表达及意义

目的:研究Delta-like 4(DLL4)在胃癌中的表达及其与血管生成的关系.方法:采用免疫组化EnVision法检测胃癌组织芯片中DLL4的表达,用CD34进行微血管内皮细胞染色,计算微血管密度(MVD),分析其相关性.结果:DLL4在胃癌中的表达明显高于正常胃黏膜(85.9% vs 35.3%.P＜0.01).DLL4的高表达与胃癌的转移(r=0.612,P＜0.01)和胃壁浸润深度(r=0.482,P＜0.01)呈正相关,与胃癌的组织病理及Borrmann分型无关.胃癌组织MVD明显高于正常胃黏膜组织(66.5±18.6 vs 34.2±16.4.P＜0.01).MVD值与胃癌的组织病理分型(r=0.506,P＜0.01)和转移有关(r=0.426,P＜0.01),与胃癌胃壁浸润深度和Borrmann分型无明显相关性.DLL4表达阳性组的MVD指数明显高于DLL4表达阴性组(70.5±16.2 vs 32.5±10.4,P7＜0.01),DLL4表达与MVD呈正相关(r=0.521.P＜0.01).结论:DLL4表达促进血管分化,对胃癌的转移、浸润起重要作用.     

Mucin4在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的研究胰腺癌组织中Mucin 4(MUC4)的表达及其与临床病理参数间的关系。方法(1)采用ABC免疫组织化学方法检测35例胰腺癌、12例胰腺良性肿瘤及5例慢性胰腺炎组织MUC4的表达。(2)通过RT-PCR方法检测12例胰腺癌组织、癌旁胰腺组织以及2株胰腺癌细胞株MUC4 mRNA的表达。结果 (1)35例胰腺癌组织中MUC4蛋白阳性表达24例,12例胰腺良性肿瘤中MUC4蛋白阳性表达2例,5例慢性胰腺炎组织中MUC4蛋白均为阴性。MUC4蛋白胰腺癌组织中阳性表达率显著高于胰腺良性肿瘤及慢性胰腺炎组织(P<0．05)。MUC4在胰腺癌组织中阳性表达率与肿瘤的部位、淋巴结转移、临床分期无关(P>0．05)。(2)12例胰腺癌组织中MUC4 mRNA表达阳性有6例,癌旁组织中无阳性表达,2株胰腺癌细胞株均呈阳性表达。MUC4 mRNA在胰腺癌组织中阳性表达率显著高于癌旁组织(P<0．05)。结论 MUC4在胰腺癌中有较高的表达率,检测其表达可能有助于胰腺癌的诊断,并可作为鉴别胰腺癌和慢性胰腺炎一个重要参考指标。     

Mucin4在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的研究胰腺癌组织中Mucin 4(MUC4)的表达及其与临床病理参数间的关系.方法 (1)采用ABC免疫组织化学方法检测35例胰腺癌、12例胰腺良性肿瘤及5例慢性胰腺炎组织MUC4的表达.(2)通过RT-PCR方法检测12例胰腺癌组织、癌旁胰腺组织以及2株胰腺癌细胞株MUC4 mRNA的表达.结果 (1)35例胰腺癌组织中MUC4蛋白阳性表达24例,12例胰腺良性肿瘤中MUC4蛋白阳性表达2例,5例慢性胰腺炎组织中MUC4蛋白均为阴性.MUC4蛋白胰腺癌组织中阳性表达率显著高于胰腺良性肿瘤及慢性胰腺炎组织(P ＜ 0.05).MUC 4在胰腺癌组织中阳性表达率与肿瘤的部位、淋巴结转移、临床分期无关(P ＞ 0.05).(2)12例胰腺癌组织中MUC4 mRNA表达阳性有6例,癌旁组织中无阳性表达,2株胰腺癌细胞株均呈阳性表达.MUC4 mRNA在胰腺癌组织中阳性表达率显著高于癌旁组织(P ＜ 0.05).结论 MUC4在胰腺癌中有较高的表达率,检测其表达可能有助于胰腺癌的诊断,并可作为鉴别胰腺癌和慢性胰腺炎一个重要参考指标.     

巨噬细胞移动抑制因子在胰腺癌组织中的表达及其与预后的关系

目的研究胰腺癌组织巨噬细胞移动抑制因子（MIF）的表达与肿瘤发生、发展、血管生成的意义及其对预后的影响。方法应用免疫组化方法检测31例胰腺癌组织、癌旁组织、14例正常胰腺组织中MIF表达水平,并进行微血管计数,并分析MIF表达与临床病理特点的关系及对胰腺癌预后的影响。结果胰腺癌组织MIF表达明显高于癌旁组织和正常胰腺组织（P〈0.01）,癌旁组织高于正常胰腺组织（P〈0.01）。MIF的表达与肿瘤分化程度及远处转移有关（P〈0.05）,MIF表达阳性胰腺癌组织和癌旁组织微血管密度高于MIF表达阴性癌组织及癌旁组织（P〈0.05）。MIF表达阳性患者生存期与MIF表达阴性患者无统计学差异。结论 MIF对胰腺癌的发生、发展及肿瘤血管生成起重要作用,直接或间接影响着肿瘤的生长、侵袭和转移。MIF的表达与患者预后无关。     

核因子-κB在胰腺癌中的表达及其意义

目的探讨核因子-κB（NF-κB）在胰腺癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学SABC法,检测NF-κB p65蛋白在胰腺癌组织、胰腺良性病变组织及正常胰腺组织中的表达,并分析其与胰腺癌临床病理及预后的关系。结果胰腺癌组织中NF-κB p65蛋白表达率（63．5％）显著高于胰腺良性病变组织（11．1％）及正常组织（0）;NF-κB p65蛋白表达与肿瘤直径、TNM分期、淋巴结转移有关,而与分化程度、病理类型无关,NF-κB p65蛋白表达阳性者生存期短于阴性者（P〈0．05）。结论NF-κB p65在胰腺癌的发生及发展中起重要作用;其可作为判断胰腺癌预后的一个独立相关因子。     

凋亡抑制蛋白XIAP在胰腺癌组织中的表达及意义

目的 通过检测XIAP在胰腺癌中的表达，探讨其对胰腺癌发生、发展的可能作用及临床意义。方法 应用免疫组化SP法检测10例正常胰腺组织、14例胰腺良性病变和42例胰腺癌组织中XIAP的表达，并分析其与胰腺癌临床病理参数的关系。结果 XIAP在正常胰腺组织、胰腺良性病变及胰腺癌中均有表达。正常胰腺组织中，高表达占20％，良性病变中占21．4％，而胰腺癌中，高表达占59．5％，较前二者均有显著性差异（P〈0．05）。42例胰腺癌组织中，XIAP表达强度与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、分化程度、临床分期及淋巴结转移均无显著相关。结论 XIAP在正常胰腺组织，胰腺的良性病变及胰腺癌中均有表达，但在胰腺癌中呈高表达，表明XIAP在胰腺癌的发生中起到一定作用；XIAP的表达与胰腺癌各项临床病理参数无相关性。     

凋亡抑制蛋白XIAP在胰腺癌组织中的表达及意义

目的 通过检测XIAP在胰腺癌中的表达,探讨其对胰腺癌发生、发展的可能作用及临床意义.方法 应用免疫组化SP法检测10例正常胰腺组织、14例胰腺良性病变和42例胰腺癌组织中XIAP的表达,并分析其与胰腺癌临床病理参数的关系.结果 XIAP在正常胰腺组织、胰腺良性病变及胰腺癌中均有表达.正常胰腺组织中,高表达占20%,良性病变中占21.4%,而胰腺癌中,高表达占59.5%,较前二者均有显著性差异(P ＜ 0.05).42例胰腺癌组织中,XIAP表达强度与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、分化程度、临床分期及淋巴结转移均无显著相关.结论 XIAP在正常胰腺组织、胰腺的良性病变及胰腺癌中均有表达,但在胰腺癌中呈高表达,表明XIAP在胰腺癌的发生中起到一定作用;XIAP的表达与胰腺癌各项临床病理参数无相关性.     

抑凋亡基因bcl-XL在胰腺癌组织中的表达及意义

目的　探讨抑凋亡基因 bcl- XL 在胰腺癌组织中的表达及其临床意义。方法　应用免疫组织化学链霉亲和素方法 (SABC) ,检测 5 2例份胰腺癌组织中凋亡抑制基因 bcl- XL 的基因蛋白产物 ,并与良性和正常胰腺组织作对照分析。结果　胰腺癌组织中 bcl- XL 的阳性表达率为 73.1% ,显著高于胰腺良性组织及正常组织 ,bcl-XL 的表达与肿瘤的 TNM分期有关 ,而与肿瘤直径、淋巴结转移、分化程度、病理类型等无关。结论　 bcl- XL 基因可能在胰腺癌的发生发展中起重要作用     

趋化性细胞因子受体CXCR4在大肠癌的表达及其临床意义

目的:探讨趋化性细胞因子受体CXCR4在大肠癌中的表达及其与预后的关系.方法:收集67例大肠癌患者手术标本,采用免疫组织化学方法检测肿瘤组织中CXCR4蛋白的表达和微血管密度,分析CXCR4的表达水平与临床病理特征和生存的关系.结果:大肠癌组织中CXCR4蛋白表达阳性率为56.7%(38/67),与患者的性别、年龄、肿瘤部位、T分期和病理类型无相关性(P＞0.05),与淋巴结转移、临床分期、微血管密及生存相关.NO,N1和N2期CXCR4的阳性率分别为40.6%,68.2%,76.9%(P＜0.05);Ⅰ Ⅱ期和Ⅲ期CXCR4的阳性率分别为39.4%.73.5%(P＜0.05).低MVD组CXCR4的阳性率显著低于高MVD组(36.4%vs 74.3%,P＜0.01);CXCR4阳性组较CXCR4阴性组有较高的复发/转移率(47.4%vs 24.1%,P＜0.05)和较低的3a无病生存率(32.6%vs 71.3%.P＜0.05).结论:CXCR4可促进大肠癌的侵袭和转移以及血管生成并影响其预后.     

CDK4在胃癌中的表达及临床意义

目的研究CDK4在胃癌组织中的表达与临床病理特征之间的关系。方法采用免疫组化方法检测CDK4在70例胃癌组织及部分相应癌旁组织中的表达,结合患者的性别、年龄、肿瘤大小、部位、分化程度、Borrmann分型、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期等临床病理参数进行综合分析。结果胃癌组织和癌旁组织中的CDK4蛋白阳性表达分别为65.71%、18.75%,差异有统计学意义(P0.05)。CDK4在低分化组阳性表达率为78.05%(32/41),中高分化组阳性表达率为48.28%(14/29),两组间比较差异有统计学差异(P0.05,χ2=6.693);CDK4在无淋巴结转移组中阳性表达率为44.83%(13/29),有淋巴结转移组中阳性表达率为80.49%(33/41),两者间比较有显著统计学差异(P0.01,χ2=9.587);CDK4在Ⅰ+Ⅱ期阳性表达率为53.13%(17/32),Ⅲ+Ⅳ期组阳性表达率为76.32%(29/38),两组间比较差异有统计学差异(P0.05,χ2=4.147);CDK4蛋白阳性表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、部位、Borrmann分型、浸润深度均无明显相关(P0.05)。结论 CDK4在胃癌组织中存在着过表达,在评估胃癌的发生、发展中有一定的临床价值。CDK4表达水平与肿瘤组织分化程度、淋巴结有无转移、TNM分期有关。     

DNA甲基转移酶3b在人胰腺癌组织中的表达及其意义

目的 检测人胰腺癌组织中DNA甲基化转移酶3b( DNMT3b)的表达,分析其与肿瘤临床病理特征的相关性.方法 应用蛋白质印迹法检测12例配对人胰腺癌和癌旁组织中DNMT3b的表达;免疫组织化学法检测59例胰腺癌组织中DNMT3b的表达,并分析其与肿瘤临床病理特征的相关性结果 蛋白质印迹法结果显示,胰腺癌及癌旁组织DNMT3b蛋白表达量分别为0.69 ±0.13和0.14 ±0.03,癌组织的表达量明显高于癌旁组织(t=4.464,P＜0.05).免疫组化结果显示,胰腺癌组织DNMT3b阳性高表达率为59％,癌旁组织阴性表达.肿瘤组织DNMT3b表达强度与TNM分期和淋巴结转移相关.结论 DNMT3b在胰腺癌组织中高表达,其表达与肿瘤的恶性生物行为有关.     

血管内皮生长因子和微血管密度在胰腺癌与壶腹部癌中的对比研究

目的分析血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和微血管密度(microvessel density,MVD)在胰腺癌和壶腹部癌中的表达,探讨血管生成在两种肿瘤发展过程中的差别及意义。方法选取43例胰腺癌和45例壶腹部癌标本,应用免疫组化方法检测VEGF表达和MVD计数。结果胰腺癌和壶腹部癌在患者性别、年龄、血液肿瘤标志物和肿瘤分化程度等方面无明显差别,但在首发症状、手术方式、术后并发症、肿块大小、病理类型、有无淋巴结转移、TNM分期、治疗结果及生存期等方面有显著性差异(P<0.05)。胰腺癌VEGF表达阳性率为76.7%,壶腹部癌为73.3%,两者之间无显著性差异(P>0.05);胰腺癌MVD为50.01±26.33,壶腹部癌MVD为30.91±15.75,两者之间具有显著性差异(P<0.05)。结论胰腺癌的恶性程度远高于壶腹部癌,胰腺癌的高血管生成活性可能是其原因之一。     

胚胎干细胞标志物Oct-4在胰腺癌的表达

目的分析胚胎干细胞标志物Oct-4在胰腺癌组织和胰腺癌细胞株中的表达状况。方法应用RT-PCR检测Oct-4mRNA在25例胰腺癌组织以及胰腺癌细胞株SW1990、PC3、JF305和BxPC3中的表达;应用Westernblot法检测胰腺癌组织及胰腺癌细胞株中Oct-4蛋白表达;应用异硫氰荧光素(FITC)标记的流式细胞仪分选法检测Oct-4在胰腺癌细胞株中的表达率。结果4株胰腺癌细胞株均表达Oct-4mRNA和Oct-4蛋白。88%(22/25)胰腺癌组织高表达Oct-4mRNA和Oct-4蛋白,其表达率与胰腺癌的分化程度无关。Oct-4在SW1990的表达率为50.21%、BxPC3为68.53%、PC3为66.27%、JF305为67.61%。结论Oct-4异常表达可能与胰腺癌始发有关,胰腺癌可能来源于胰腺干细胞。     

胰腺癌细胞TM4SF1的表达及其对细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的 检测5株人胰腺癌细胞株中TM4SF1 mRNA的表达,探讨TM4SF1基因对癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响.方法 采用实时PCR方法检测人胰腺癌细胞株MPanc96、MiaPaCa-2、HPAC、PANC1、AsPC-1的TM4SF1 mRNA表达,并与人正常胰腺导管上皮细胞（HPDE）的TM4SF1mRNA表达进行比较.应用RNA干扰方法将靶向TM4SF1的siRNA及阴性对照siRNA瞬时转染MPanc96、MiaPaCa-2细胞.采用MTS法检测转染细胞的增殖能力,Transwell小室法检测细胞的迁移及侵袭能力.结果 胰腺癌细胞株MPanc96、MiaPaCa-2、PANC1、AsPC-1、HPAC的TM4SF1 mRNA相对表达量分别为1.205±0.073、1.096±0.260、1.382±0.075、1.374±0.363、0.744±0.096,均显著高于HPDE的0.020±0.003（F =22.26,P＜0.01）.与转染阴性对照siRNA的细胞比较,TM4SF1基因表达沉默的MPanc96、MiaPaCa-2细胞的增殖无显著变化,但细胞的迁移力分别降低（62.5±7.6）％、（72.8±4.0）％,侵袭能力分别下降（69.5±5.7）％、（78.6±6.3）％.结论 TM4SF1在人胰腺癌细胞中高表达,并增强胰腺癌细胞的迁移和侵袭能力.     

Delta-like ligand 4 in hepatocellular carcinoma intrinsically promotes tumour growth and suppresses hepatitis B virus replication

AIM To investigate the role of Delta-like ligand 4(DLL4) on tumour growth in hepatitis B virus(HBV)-associated hepatocellular carcinoma(HCC) in vivo.METHODS We suppressed DLL4 expression in an HBV expressing HCC cell line, HepG2.2.15 and analysed the growth ability of cells as subcutaneous tumours in nude mice. The expression of tumour angiogenesis regulators, VEGF-A and VEGF-R2 in tumour xenografts were examined by western blotting. The tumour proliferation and neovasculature were examined by immunohistochemistry. The viral replication and viral protein expression were measured by quantitative PCR and western blotting, respectively.RESULTS Eighteen days after implantation, tumour volume in mice implanted with sh DLL4 HepG2.2.15 was significantly smaller than in mice implanted with control HepG2.2.15(P 0.0001). The levels of angiogenesis regulators, VEGF-A and VEGF-R2 were significantly decreased in implanted tumours with suppressed DLL4 compared with the control group(P 0.001 and P 0.05, respectively). Furthermore, the suppression of DLL4 expression in tumour cells reduced cell proliferation and the formation of new blood vessels in tumours. Unexpectedly, increased viral replication was observed after suppression of DLL4 in the tumours.CONCLUSION This study demonstrates that DLL4 is important in regulating the tumour growth of HBV-associated HCC as well as the neovascularization and suppression of HBV replication.