银屑病角质形成细胞凋亡与Fas／FasL表达的关系

目的探讨银屑病皮损中角质形成细胞（KC）凋亡与Fas／FasL表达的关系。方法免疫组化ABC法对银屑病患者皮损中Fas、FasL表达进行检测，TUNEL法检测皮损中KC凋亡情况。结果银屑病皮损中既可表达Fas，又可表达FasL，而在正常皮肤不表达；患者皮损中KC发生凋亡的比例明显高于正常对照组（P〈0．01），但病程的不同阶段其细胞凋亡指数（AI）不同，进行期高于静止期。结论KC凋亡参与了银屑病的发病过程，Fas、FasL对角质形成细胞凋亡有调节作用。     

HIF-1α mRNA在寻常型银屑病及脂溢角化病皮损表皮中的表达及意义

[目的]研究低氧诱导因子-1α（HIF-1α） mRNA在寻常型银屑病及脂溢性角化病皮损表皮中的表达,探讨其在银屑病及脂溢性角化病中的作用机制.[方法]应用原位杂交法检测HIF-1α mRNA在寻常型银屑病、脂溢性角化病及正常皮肤组织各25例皮损表皮中的表达和分布.[结果]在25例寻常型银屑病皮损表皮的中下层可见HIF-1α mRNA阳性表达,在25例脂溢性角化病皮损表皮的全层可见HIF-1α mRNA阳性表达,在正常皮肤的表皮未见HIF-1α mRNA的表达;银屑病、脂溢性角化病皮损表皮中HIF-1α mRNA的表达阳性率均为100%（25/25）,均显著高于正常对照组,其差异有统计学意义（P〈0.01）.[结论]HIF-1α mRNA在寻常型银屑病及脂溢性角化病皮损的表皮中表达均增高.     

miRNA-210在寻常型银屑病皮损中的表达研究

目的探讨miRNA-210在寻常型银屑病皮损中的表达情况及影响。方法收集临床银屑病患者的皮损组织和健康皮肤组织,经过速冻后提取miRNA。采用Stemp-loop技术反转录miRNA,采用Real time PCR技术检测miRNA的表达,采用绝对定量方法计算miRNA-210的拷贝浓度。免疫组化法对寻常型银屑病皮损组织及正常皮肤组织中RUNX3蛋白的表达结果进行对比分析,并分别记录。结果 Real time PCR显示miRNA-210在寻常型银屑病患者组皮损中表达量较健康组皮肤显著降低(P0.01);免疫组化结果显示RUNX3蛋白表达阳性率,寻常型银屑病患者皮损中显著高于健康组皮肤(P0.05)。结论寻常型银屑病患者皮损中miRNA-210显示为低表达,其可能通过调节靶基RUNX3,参与银屑病发病环节。     

银屑病患者CDKN2A甲基化状态研究

目的探讨银屑病患者表皮CDKN2A基因甲基化状态及其在疾病发生机制中的作用。方法采用甲基化特异性PCR技术对48例斑块状银屑病患者表皮（银屑病组）和18例外观正常皮肤表皮（对照组）进行CDKN2A基因甲基化的分析。结果银屑病组CDKN2A基因甲基化状态（37.5%）明显高于对照组（11.1%）,差异有统计学意义（P〈0.05）;斑块状银屑病患者表皮CDKN2A甲基化阳性者PASI积分与阴性者比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论斑块状银屑病患者CDKN2A基因呈高甲基化状态,可能参与斑块状银屑病的发病机制。     

低氧诱导因子-1α和环氧合酶-2在豚鼠银屑病样模型皮损中的表达及意义

目的 研究低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和环氧合酶-2(COX-2)在豚鼠银屑病样动物模型皮损表皮中的表达,探讨其在银屑病发病机制的作用.方法 用5%普萘洛尔乳剂外涂豚鼠耳背部皮肤诱导银屑病样动物模型,应用免疫组化法检测正常豚鼠表皮和豚鼠银屑病样动物模型皮损表皮中HIF-1α和COX-2表达.结果 5%普萘洛尔外涂所致豚鼠银屑病样动物模型皮损中HIF-1α和COX-2表达水平较正常对照组明显增高,有显著性差异(P均<0.05).结论 HIF-1α和COX-2在豚鼠银屑病样动物模型皮损的表皮中表达明显增高,不仅在组织病理学而且在分子水平上与人类银屑病皮损基本一致.     

纤维母细胞生长因子-7在不同发育阶段大鼠皮肤中的表达和意义

目的 研究纤维母细胞生长因子7（FGF7）、纤维母细胞生长因子2（FGF2）和表皮生长因子（EGF）在不同发育阶段大鼠皮肤中的表达情况。方法用免疫组化的方法检测FGF7，FGF2和EGF在10例胎鼠、10例幼鼠和10例成鼠皮肤细胞中的阳性表达率。结果FGF7，FGF2和EGF在30例标本中均有表达。EGF、FGF2阳性指数在各组间差异无统计学意义，而FGF7在胎鼠皮肤中的阳性指数高于其在幼鼠和成鼠皮肤中的表达，差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论FGF7在皮肤结构的维持和切口愈合中具有重要作用。它在不同发育阶段大鼠皮肤中的表达差异可能与胎儿皮肤伤口无瘢痕愈合有关。     

一步法实时荧光定量PCR检测大鼠胰腺组织中Insulin mRNA和PDX-1 mRNA的表达

目的通过检测大鼠胰腺组织中Insulin mRNA和PDX-1 mRNA的表达探讨EGF/Gastrin联用促进胰岛PDX-1表达增强可能的作用机制。方法采用一步法实时荧光定量PCR检测各组大鼠胰腺组织中Insulin基因和PDX-1基因在转录水平的表达。结果大鼠胰腺组织中Insulin mRNA在转录水平的表达情况正常对照组最高;糖尿病组最低,与正常对照组相比相差2.4倍（P〈0.05）;EGF/Gastrin组是糖尿病组的2.1倍（P〈0.05）。大鼠胰腺组织中PDX-1mRNA在转录水平的表达情况正常对照组最高,糖尿病组最低,与正常对照组相比相差2.8倍（P〈0.05）,EGF/Gastrin组是糖尿病组的2.2倍（P〈0.05）。结论 EGF/Gastrin联用促进胰岛PDX-1表达增强的作用机制可能通过其改善胰岛β细胞功能、降低血糖进而减弱糖毒性对PDX-1表达的不良影响,间接地使PDX-1的表达增强。而EGF/Gastrin联用促进胰岛新生、改善胰岛β细胞功能又有可能是通过提高PDX-1的表达而实现的。     

3种生长因子在子宫颈癌中的表达及意义

目的 对不同类型子宫颈癌组织中碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、表皮生长因子（EGF）、血管内皮生长因子（VEGF）的表达进行定量分析,以进一步探讨3种细胞因子在宫颈癌发病中的作用.方法 选取50例子宫颈癌组织石蜡和10例正常子宫颈组织作对照,通过流式细胞检测方法测定bFGF、EGF、VEGF的相对含量.结果 bFGF、EGF和 VEGF在子宫颈癌中的表达均高于正常宫颈组织（均P〈0.01）,VEGF、bFGF在腺癌中的表达明显高于在鳞癌中的表达（均P〈0.05）,VEGF在≥Ⅱ期癌组织中的表达明显高于在≤Ⅰ期癌组织中的表达（P〈0.01）.VEGF在淋巴结转移组和低分化肿瘤组的表达分别与无淋巴结转移组和高分化肿瘤组比较,有增高趋势,且随着年龄增长有增高趋势,但差异无显著性.bFGF在淋巴结转移组明显升高（P〈0.05）,EGF与淋巴结转移无关.结论 bFGF、EGF、 VEGF与子宫颈癌的发生有关,临床上可作为诊断和判断子宫颈癌恶性程度和预后的指标.     

淋巴细胞亚群功能状态的影响

目的：探讨黄芪注射液对银屑病患者辅助性T淋巴细胞（Th细胞）亚群功能状态的影响。方法：对20例银屑病患者的外周血淋巴细胞体外分别经植物血凝素（PHA）和PHA＋黄芪诱导：即病例对照组和病例黄芪组,同时对10例健康志愿者外周血淋巴细胞体外经PHA诱导（即正常对照组）,各组培养48h,用ELISA法检测培养上清液中Th类细胞因子IFN-γ和IL-4含量。结果：病例对照组IFN-γ水平高于正常对照组（P〈0.05）,而IL-4水平低于正常对照组（P〈0．05）。病例黄芪组IFN-γ水平低于病例对照组（P〈0．05）,而IL-4水平高于病例对照组（P〈0．05）。结论：黄芪注射液可显著下调银屑病患者Th1亚群优势状态。促进向Th2亚群转换,改善患者Th1／Th2失衡状态,对银屑病的治疗具有重要意义。     

不同妊娠期正常孕妇及产科早期DIC患者PT、APTT、TT、FIB、D-D、FM变化的探讨

目的研究正常孕妇妊娠各期及产科早期弥漫性血管内凝血（DIC）患者凝血酶原时间（PT）、部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白（FIB）、D-二聚体（D-D）及纤维蛋白单体（FM）水平的变化。方法分别检测30例正常对照组妇女、90例正常妊娠妇女（妊娠早期30例、妊娠中期30例、妊娠晚期30例）及10例产科早期DIC患者的PT、APTT、TT、FIB、D-D及FM水平。结果正常孕妇组妊娠早期的PT及妊娠中、晚期的APTT、TT、FIB、FM与正常对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0.001）;正常孕妇组妊娠各期D-D水平均高于正常对照组（P〈0.001）。产科早期DIC组与正常孕妇组妊娠各期及正常对照组比较,各项指标均有差异（P〈0.001）。正常孕妇组妊娠中、晚期PT、APTT较妊娠早期明显缩短（P〈0.001）,FM水平明显升高（P〈0.001）;TT、FIB、D-D水平在正常孕妇组妊娠各期中均有差异（P〈0.05、P〈0.001）。结论妊娠不同期,正常孕妇凝血机制会发生改变。一旦有早期DIC的发生FM水平会有较明显的升高,因此,FM指标的检测相对于D-D检测在确定早期DIC有着较明确的标识。对发现早期凝血异常有一定的帮助。     

HIF-1α与COX-2在银屑病皮损中的表达及相关性研究

目的检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和环氧合酶-2(COX-2)在寻常型银屑病皮损及正常人皮肤组织中的表达水平,探讨HIF-1α和COX-2在银屑病发病机制中的作用。方法收集30例寻常型银屑病和20例正常人的临床资料以及皮损和皮肤组织。(1)用半定量RT-PCR检测银屑病皮损和正常皮肤组织中HIF-1α和COX-2 m RNA表达情况;(2)用Western blot检测银屑病皮损和正常皮肤组织中HIF-1α和COX-2蛋白表达情况。结果 HIF-1α和COX-2 m RNA相对表达量在寻常型银屑病组(1.32±0.04和1.21±0.04)的表达显著高于正常对照组(0.49±0.03和0.31±0.03),两组相比差异有统计学意义(P<0.05);且HIF-1αm RNA相对表达量与COX-2 m RNA相对表达量呈正相关(r=0.664,P<0.05);HIF-1α和COX-2蛋白在寻常型银屑病组(0.76±0.03和0.62±0.03)的表达显著高于正常对照组(0.44±0.05和0.28±0.06),两组相比差异均有统计学意义(P<0.05);且HIF-1α蛋白表达量与COX-2蛋白表达量呈正相关(r=0.601,P<0.05)。结论 HIF-1α和COX-2在银屑病皮损中异常高表达且呈正相关,可能在银屑病的发生发展过程中起着重要作用。     

表皮生长因子受体在寻常型银屑病中的表达及其意义

目的探讨表皮生长因子受体(Epidermal growth factor reccepter,EGFR)在寻常型银屑病发病中的作用。方法采用免疫组化LDP法(labele ddextran polymermethod)检测48例寻常型银屑病皮损区及20例正常表皮中EGFR的表达及分布特点,采用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR方法)检测EGFR的mRNA表达水平。结果寻常型银屑病皮损区EGFR表达均较正常表皮中的表达明显增强,分布于除角质层以外的表皮各层,而正常表皮表达阴性或仅在基底层有弱阳性表达;RT-PCR检测结果表明寻常型银屑病组EGFR的表达水平亦显著高于正常表皮。结论 EGFR在寻常型银屑病皮损中过度表达,提示其与银屑病的表皮细胞过度增殖、分化异常有关。     

阿维A 对寻常型银屑病患者趋化因子RANTES 和MCP-1的影响

目的 观察阿维A 对寻常型银屑病患者血清中和外周血单一核细胞(PBMC)内RANTES 和 MCP-1 表达水平的影响.方法 分离并提取30 例健康对照者及48 例阿维A 治疗前、后银屑病患者的血清 及PBMC,血清采用ELISA 检测其中RANTES 和MCP-1 的分泌水平,PBMC 接受实时荧光定量PCR 法检测细 胞内RANTES 和MCP-1 的mRNA 的水平,并进行临床PASI 评分.结果 经ELISA 检测发现,寻常型银屑病 患者血清中RANTES 和MCP-1 水平明显高于健康对照组(P <0.01),应用阿维A 治疗后,两因子水平均显著 降低(P <0.01);QRT-PCR 检测发现,患者PBMC 中RANTES 和MCP-1 的mRNA 相对表达量均明显高于健 康对照组(P <0.01);治疗后PBMC 中RANTES 和MCP-1 均显著降低(P <0.01).治疗后患者PASI 评分明 显下降,且治疗前后银屑病患者PASI 评分差值与血清RANTES 和MCP-1 水平差值均呈正相关性(r1 ＝ 0.469,P <0.01;r2 ＝0.431,P <0.01),与PBMC 中RANTES mRNA 表达量差值呈正相关(r ＝0.484,P < 0.01).结论 阿维A 对寻常型银屑病的疗效显著,降低CC 型趋化因子RANTES 和MCP-1 的水平可能是阿 维A 治疗银屑病的机制之一.     

银屑病患者外周血中p16基因甲基化的检测

目的检测斑块型银屑病患者外周血单个核细胞（PMBCs）中p16基因启动子甲基化的状态，探讨p16基因甲基化的检测在斑块型银屑病发病中的作用和机制。方法收集2011年4月至2012年5月该院门诊和住院48例宽块型银屑病患者（实验组）和18例健康者（对照组）的外周血单个核细胞（PBMCs），采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测PBMCs中p16基因甲基化的状态，并分析p16基因甲基化与患者病程和银屑病皮损面积和严重程度指数（PASI）评分的关系。结果斑块型银屑病患者PBMCs中p16基因甲基化状态（31．3％）明显高于对照组（5．6％），差异具有统计学意义（Y。=4．71，P〈0．05），且与PASI评分之间差异具有统计学意义（t=2．63，P〈0．05），而与患病病程之间差异无统计学意义（t=0．55，P〉0．05）。结论斑块状银屑病患者PBMCs中p16基因呈高甲基化比例明显增高状态，可能参与斑块状银屑病的发病机制。     

The insulin-like growth factor I receptor is overexpressed in psoriatic epidermis, but is differentially regulated from the epidermal growth factor receptor

Insulin-like growth factor I (IGF-I)/somatomedin C is an important mediator of keratinocyte growth in vitro, and the expression of IGF-I receptors in the basal layer of normal epidermis suggests that this growth pathway may function in the regulation of keratinocyte growth in vivo as well. The pattern of IGF-I receptor expression in normal skin is distinct from that of the epidermal growth factor (EGF) receptor, suggesting that these receptors might be differentially regulated. The purpose of this study was to obtain a better understanding of IGF-I receptor function in the skin by examining IGF-I receptor expression in psoriatic epidermis and in cultured human keratinocytes. Our findings indicate that IGF-I receptor expression is increased in psoriasis as measured by protein tyrosine kinase assays of biopsy extracts and by immunohistochemical staining with an IGF-I receptor-specific monoclonal antibody. Unlike EGF receptor expression, which is also increased in psoriatic epidermis, the pattern of IGF-I receptor expression corresponds closely with the increased size of the keratinocyte proliferative compartment in psoriasis. Biochemical agents that diminish EGF receptor ligand binding (phorbol ester or calcium ionophore treatment) produce opposite effects on the IGF-I receptor. These results suggest that cellular expression and differential regulation of both growth factor receptor systems may control critical aspects of epidermal proliferation or function.     

EGF和TGF-a在子宫内膜癌中的表达

目的通过检测表皮生长因子(EGF)相关蛋白在正常子宫内膜、增生性子宫内膜及子宫内膜癌组织中的表达,进一步探讨其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测EGF、转换生长因子a(TGF-a)在正常子宫内膜、增生性子宫内膜及子宫内膜癌中的差异性表达;采用Real-time PCR方法检测上述因子的RNA水平。结果免疫组织化学结果示:EGF在正常子宫内膜组、增生性子宫内膜组及子宫内膜癌组中的阳性表达率分别为71.4%、72.2%和57.6%,子宫内膜癌组明显低于正常子宫内膜组及增生性子宫内膜组(均P<0.05);TGF-a在正常子宫内膜组、增生性子宫内膜组及子宫内膜癌组中的阳性表达率分别为42.9%、44.4%和66.7%,子宫内膜癌组的表达率明显高于正常子宫内膜组和增生性子宫内膜组(均P<0.05)。Real-time PCR方法检测正常子宫内膜组和子宫内膜癌组组织中EGF及TGF-a的表达,结果与免疫组织化学检测结果一致,EGF在子宫内膜癌中相对低表达,TGF-a呈相对高表达(均P<0.05)。结论 EGF及TGF-a的水平变化与子宫内膜癌的发病存在密切关系。     

寻常型银屑病患者外周血Th17／Treg细胞免疫失衡的研究

目的：探讨寻常型银屑病患者外周血Th17细胞与Treg细胞的数量以及相关细胞因子的表达水平,分析Th17/Treg细胞免疫失衡在银屑病发病机制中的作用及与疾病严重程度的相关性,进一步阐述银屑病的发病机制。方法选取92例寻常型银屑病患者作为试验组,同时选60例健康查体者作为正常对照组,采用流式细胞术检测患者及正常人外周血Th17细胞和Treg细胞比例,采用ELISA法检测患者及正常人血清中 IL-17、IL-23、TGF-β的含量,同时以皮损面积和严重程度（PASI）评分评价银屑病病情的严重程度。结果寻常型银屑病患者外周血Th17百分比、IL-17和IL-23水平均明显高于正常对照组,差异有统计学意义（P值均＜0.01）,Th17/Treg比值和IL-17/TGF-β比值也明显高于正常对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）;而银屑病患者外周血Treg百分比及血清中TGF-β水平显著低于正常对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）。进行期Th17/Treg比值高于稳定期,Treg百分比低于稳定期,差异有统计学意义（P＜0.01）。银屑病患者Th17细胞百分比、Th17/Treg比值、IL-17/TGF-β比值、 IL-17和IL-23水平与PASI评分呈显著正相关（P＜0.01）,而Treg细胞百分比、TGF-β水平与PASI评分呈显著负相关（P＜0.01）。Th17细胞、Treg细胞、Th17/Treg比值、IL-17/TGF-β比值、IL-17、IL-23和TGF-β与病程均无相关性（P＞0.05）。结论 Th17/Treg细胞免疫失衡可能在寻常型银屑病的发病机制中发挥重要作用,可望通过调节患者外周血Th17/Treg细胞失衡及相关细胞因子而达到治疗银屑病的目的。