Her-2/neu和乳腺癌

1981年,Shih从胚胎大鼠的神经母细胞瘤中克隆了一个新的癌基因,命名为neu。数年后,两个研究小组先后从人cDNA文库中分离出与表皮生长因子受体Her鄄1的基因高度同源的Her鄄2,并与逆转录病毒基因v鄄erb鄄B2同源的c鄄erb鄄B2。随后的序列分析和染色体谱分析发现neu、Her鄄2和c鄄erb鄄B2其实是一个基因。原癌基因Her鄄2/neu(c鄄erb鄄B2)是表皮生长因子受体家族成员之一[1]。人Her鄄2/neu基因位于染色体17q21,编码相对分子质量为185000的跨膜蛋白P185,其胞内区有酪氨酸激酶活性。该蛋白在多种正常组织中有低表达,包括乳腺、胃肠道、呼吸道…     

乳腺癌Her-2/neu蛋白表达与基因扩增的相关性分析

目的:应用免疫组织化学(IHC)法和荧光原位杂交(FISH)法分析乳腺癌相关蛋白Her-2/neu表达情况及其与基因状态间的相关性,并探讨其临床价值。方法:采用PathVysionTM探针试剂盒中基因识别位点探针(LSI)Her-2/neu基因探针和着丝粒17探针(CEP 17),以FISH法分析96例浸润性乳腺癌患者的石蜡切片病理标本中17号染色体和Her-2/neu基因状态,并分析已经IHC证实的Her-2/neu不同表达水平与FISH结果间的一致性,同时分析Her-2/neu基因状态与相应蛋白表达水平间的关系。结果:96例浸润性乳腺癌患者的病理标本中,FISH法检测的Her-2/neu阳性率为26.0%。IHC检测结果为(-)或(+)者的FISH阳性率为13.2%(7/53),IHC(++)者的FISH阳性率为31.4%(11/35),IHC(+++)者的FISH阳性率为87.5%(7/8),三者都以Her-2/neu高度扩增(Her-2/neu/CEP17﹥10)为主。所有患者中17号染色体为非整体性者占45.8%(44/96),其中亚二体性(CEP17﹤2)占7.3%(7/96),多体性占38.5%(CEP17﹥2)(37/96)[包括低多体性(2     

荧光原位杂交技术检测乳腺癌Her-2/neu基因与免疫组化法检测C-erbB2蛋白的相关性研究

目的探讨荧光原位杂交技术(FISH)检测石蜡标本乳腺癌Her-2基因和免疫组化法(IHC)检测C-erbB2蛋白表达结果的相关性。方法采用荧光原位杂交技术(FISH)和免疫组化技术(IHC)分别检测203例乳腺癌患者手术切除标本的Her-2基因和C-erbB2蛋白表达,分析两种方法检测结果的相关性。结果203例中C-erbB2免疫组化阳性110例(54%),阴性93例;FISH结果阳性60例(阳性率29%),阴性143例。93例C-erbB2蛋白为阴性的患者中,Her-2基因表达阴性的87例,符合率93.6%(87/93);58例C-erbB2蛋白为+的患者中,Her-2基因表达为阳性的11例,符合率为19.0%(11/58);29例C-erbB2蛋白为++的患者中,Her-2基因表达为阳性的22例,符合率75.9%(22/29);23例C-erbB2蛋白为+++的患者中,Her-2基因表达为阳性的21例,符合率91.3%(21/23)。结论对于IHC法初筛为阴性(-)或强阳性(+++)的患者符合率(≥91.3%)较高,可选择性的进行FISH实验,尤其对于50岁以上年龄组的患者可基本确诊,对于IHC法初筛为阳性(+～++)的患者应再进行FISH实验以确定Her-2基因的状态。     

荧光原位杂交与免疫组织化学技术检测乳腺癌人表皮生长因子受体2基因扩增及蛋白表达研究

目的 探讨荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)和免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)检测乳腺癌人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)基因表达及扩增状态的临床意义.方法 采用FISH和IHC技术分别检测35例乳腺癌患者手术切除标本的HER2基因和蛋白表达情况及17号染色体倍体性,分析HER2基因扩增和蛋白表达状态的差异与17号染色体倍体性的相关性.结果 IHC与FISH检测的总符合率为82.8％;FISH检测HER2基因扩增情况与IHC检查HER2蛋白表达为(卅)、(++)和(-/+)者的符合率分别为93.3％,60.0％和90.0％; HER2基因绝对拷贝数阳性和阴性的患者中分别存在26.7％和10.0％的17号染色体多体扩增.结论 IHC是初步筛查HER2基因状态的首选方法;IHC检测HER2蛋白阳性的乳腺癌标本存在假阳性,FISH可准确、稳定地检测乳腺癌组织中HER2的基因状态及17号染色体倍体性.     

Her-2／neu和CD138在乳腺癌中表达及意义

目的检测乳腺癌组织中Her-2／neu和CD138的表达情况,探讨二者在乳腺癌中表达的意义和相互关系。方法应用免疫组化方法（S-P法）观察102例乳腺癌,30例乳腺良性病变组织（15例乳腺良性肿瘤与15例正常乳腺组织）Her-2／neu和CD138的表达。结果①102例乳腺癌组织和30例乳腺良性病变组织中Her-2／neu阳性表达率分别为58％和0％,CD138阳性表达率分别为41％-42％和100％。乳腺癌组织中Her-2／neu阳性表达率显著高于其在良性病变组织的阳性表达率（P〈0．01）,良性病变组织中CD138阳性表达率显著高于乳腺癌组织（P〈0．015）。②Her-2／neu的表达与乳腺癌的淋巴结转移、临床分期密切相关（P〈o．05）。③CD138表达与乳腺癌的淋巴结转移、临床分期呈负相关（P〈0．05）。结论乳腺癌组织中Her-2／neu阳性表达与CD138的阴性表达显著相关（P〈O．01）。     

双色荧光原位杂交技术检测乳腺癌石蜡切片人类表皮生长因子受体2基因扩增

目的:应用荧光原位杂交技术检测乳腺癌组织人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,Her-2)基因扩增情况.并对操作方法进行优化.方法:收集2008年4月至2008年10月期间我院乳甲科进行手术治疗的乳腺癌患者的癌组织病理切片,采用荧光原位杂交(FISH)技术检测Her-2基因扩增情况,并与免疫组化结果相比较,分析两者的相关性,同时优化操作方法.结果:收集的40例乳腺癌石蜡切片中,免疫组化检测Her-2蛋白表达(+++)有6例,(++)有22例,(+)有7例,(-)有5例.其中Her-2蛋白表达(+++)的标本FISH检测结果均为阳性,基因扩增与蛋白表达的符合率为100%;Her-2蛋白表达(++)的标本FISH结果有6例阳性,16例阴性,基因扩增与蛋白表达的符合率为27.3%.Her-2蛋白表达(+)及(-)的标本FISH结果均为阴性.Her-2蛋白表达(++)及以上的标本基因扩增与蛋白表达的符合率达到42.9%(r=0.584,P＜0.01).结论:FISH检测乳腺癌Her-2基因扩增的结果与IHC检测的蛋白表达结果符合率较好,可作为乳腺癌Her-2基因检测的一项新技术;在具体操作时,应注意严格控制切片厚度、消化时间及变性杂交温度等因素.     

显色原位杂交(CISH)技术在检测乳腺癌HER-2/neu基因状态中的应用

目的 显色原位杂交(CISH)在检测乳腺癌患者组织中HER2基因状态的临床应用,比较CISH与免疫组化(IHC)检测HER2状态的差异性.方法 采用试剂盒,以cIsH方法对216例IHC EnVision法染色阳性和阴性的浸润非特异性乳腺癌石蜡切片标本进行HER2基因状态的检测.同时进行雌激素(ER)、孕激素(PR)表达的检测.结果 HER2表达IHC(+++)的111例标本中,IHC 3+者中CISH显示扩增者102例(扩增率91.1%),58例IHC 2+者中CISH显示扩增者33例(扩增率56.9%),17例I-HC 1+者中CIsH显示扩增者4例(扩增率23.5%),30例IHC 0者中CISH显示扩增者2例(扩增率6.6%),两种方法总符合率77.3%(167/216),两者明显相关(P<0.01).另外,216例标本中,CISH检测的HER2基因扩增例数142例,无扩增者74例;ER阳性者为88例,阴性者128例;PR阳性者为94例,阴性者122例.基因扩增表达与ER、PR蛋白表达呈负相关性性(0.01).结论 IHC是HER2表达初步筛查的首选方法,由于蛋白表达和基因扩增检测结果存在明显相关性,符合率高,CISH检测方法一定程度上可替代FISH检测法.建议IHC(+++～+1)患者可进一步作CISH法检测HER2基因扩增来确诊,同时进行ER、PR的检测,更有利于临床治疗方案的选择.     

乳腺癌Her-2/neu不同的评分标准与ER、PR及Ki-67的关系

目的　观察DakoHercepttest免疫组化试剂盒在乳腺癌中不同的评分标准对Her 2 /neu阳性率的影响及与ER、PR及Ki 6 7的关系。方法　 4 9例浸润性乳腺癌用Hercepttest试剂盒分析 ,按美国食物和药物管理局 (FDA)推荐的评分标准进行评分 ,( )或 ( )被认为是阳性 ;修改法评分则肿瘤性上皮染色减去肿瘤周围正常上皮染色后仍为 ( )或 ( )被认为是阳性。结果　 4 9例浸润性乳癌中Her 2 /neu的阳性率为 4 2 9% ,与激素受体及淋巴结转移无明显相关性 ;但在记分系统中考虑到非肿瘤性上皮染色后阳性率下降为 32 7% ,且与激素受体及淋巴结转移有明显的相关性 (P <0 0 5 ) ;与PI值无明显相关性 (P >0 0 5 )。死亡患者ER/PR阴性、Her 2 /neu阳性多见、PI值较高。结论　修改法评分判别Her 2 /neu与ER、PR及Ki 6 7表达对预后的相关性比FDA推荐的评分法更好     

荧光原位杂交法与免疫组织化学法检测乳腺癌HER-2基因扩增及蛋白表达的对比研究

目的比较桂林市荧光原位杂交法（FISH）和免疫组织化学法（IHC）检测乳腺癌组织中人表皮生长因子受体（HER-2）基因扩增及其蛋白表达情况的一致性．探讨FISH与IHC检测乳腺癌HER-2基因状态的临床意义。方法应用IHC和FISH对50例乳腺癌患者HER-2蛋白表达、基因扩增情况及17号染色体倍体性进行检测,分析IHC与FISH检测HER-2基因状态的差异以及HER-2蛋白状态与17号染色体倍体性的相关性。结果FISH与IHC结果总的符合率为82．0％．两者之间存在较好的一致性fkappa=0．6401,FISH检测IHC结果为3＋、2＋和0／1＋者的符合率分别为92．9％、70．0％和80．8％;IHC3＋及2＋者出现17号染色体多体性的几率比IHC0／1＋者高（P〈0．05）。结论FISH可以准确和稳定地检测乳腺癌组织中HER-2的基因状态及17号染色体倍体性：FISH检测IHC3＋者符合率较高,FISH与IHC的差异主要在于IHC2＋和IHC0／＋组,IHC仅作为检测HER-2基因状态的初筛方法．而IHC结果为2＋或0／1＋者的HER-2基因状态必须应用FISH进一步确定。     

荧光原位杂交(FISH)技术与免疫组织化学(IHC)技术应用于乳腺癌患者Her2基因检测的评价

目的探讨采用荧光原住杂交（FISH）技术检测乳腺癌患者中的Her2基因与免疫组织化学（IHC）检测Her2基因的结果的一致性以及导致两者差异的可能原因;了解荆州地区乳腺癌患者中Her2基因的分布。方法以FISH方法,对55例免疫组织化学分别为（3＋）,（2＋）,（1＋）和阴性（-）的乳腺癌新鲜石蜡切片标本进行Her2基因的检测。结果55例标本中,有16例采用FISH方法检测出Her2基因的表达;12例Her2基因表达（3＋）的标本中11例检测出Her2基因;7例Her2基因表达（2＋）的标本中5例检测出Her2基因;10例Her2基因表达（1＋）的标本中未检测出Her2基因;26例Her2基因表达（-）的标本中未栓测出Her2基因。结论初步筛查Her2基因状态可以首选免疫组织化学方法,对于IHC（2＋）的标本,应该行FISH确诊。     

中国人群胰腺癌与胃癌HER2/neu基因表达

  目的  探讨胰腺癌与胃癌组织中HER2/neu基因表达状态及其在治疗与评估临床结局中的作用。  方法  应用免疫组织化学和多色荧光原位杂交技术, 检测北京协和医院手术切除的81例胰腺导管癌及癌旁胰腺组织和100例胃癌及癌旁胃组织标本中HER2/neu蛋白表达及基因状态的变化, 分析HER2/neu蛋白表达与基因状态间的关系及其与胰腺癌和胃癌临床病理改变间的关系。  结果  免疫组织化学显示, 81例胰腺癌组织中9例(11.1%)HER2/neu蛋白表达阳性(2+及3+), 100例胃癌组织中13例(13%)HER2/neu蛋白表达阳性(2+及3+); 荧光原位杂交结果显示, 81例胰腺癌组织中15例(18.5%)HER2/neu基因扩增, 100例胃癌组织中11例(11%)HER2/neu基因扩增。胰腺癌HER2/neu基因扩增与淋巴结转移有显著相关性(P=0.001)。胃癌组织中6例HER2/neu蛋白3+病例均显示HER2/neu基因扩增, 且胃癌组织HER2/neu蛋白表达与其基因扩增有显著相关性(P < 0.0001)。无论是癌旁胰腺组织还是癌旁胃组织均未检测到HER2/neu蛋白表达及基因扩增。  结论  胰腺癌组织HER2/neu蛋白表达与基因扩增不一致, 而胃癌组织HER2/neu蛋白表达与基因扩增有显著相关性。HER2/neu基因异常可能在胰腺癌及胃癌的发生发展中起着重要作用, 对胰腺癌及胃癌患者进行HER2/neu基因状态检测可能对其靶向治疗具有一定的指导意义。     

双色双融合荧光原位杂交方法检测bcr／ab1融合基因

本研究总结分析1295份双色双融合荧光原位杂交方法（DC—DF—FISH）检测的bcr／abl融合基因结果并与常规细胞遗传学结果对比,进一步证实双色双融合荧光原位杂交方法检测bcr／abl融合基因的敏感性及临床应用价值。应用bcr／abl双色双融合DNA探针对骨髓间期细胞行荧光原位杂交,回顾分析FISH和核型检测结果。结果表明：在所检测的539例患者的1295份骨髓标本中FISH阳性结果456份,涉及患者310例,核型正常的18例。核型分析失败的5例。310例FISH阳性病例中典型的DC—DF—FISH信号（2Y1G1R）234例,占75．5％（234／310）。非典型信号患者76例,其中变异信号66例,占FISH阳性病例的21．3％（66／310）。典型变异信号（1Y2G2R）16例,abl／和／或bcr缺失50例。213例多次DC—DF—FISH结果中,治疗后总转阴率为60％（128／213）,治疗过程中阴性阳性多次反复的达12例。结论：双色双融合FISH技术可以检测隐匿核型、变异核型、基因序列缺失、微小残留病（MRD）,是一个敏感、精确的白血病的诊断和治疗监测工具,有必要同细胞遗传学检查一样作为常规项目,尤其对于治疗后的病例,它在监测微小残留病及监测复发方面更优于常规细胞遗传学。     

荧光原位杂交技术在膀胱癌诊断中的应用

目的 探讨荧光原位杂交(FISH)检测尿脱落细胞染色体畸变在膀胱癌诊断中的临床应用价值。方法 采用3、7及17号染色体着丝粒特异性探针及9号染色体p16位点特异性探针对20名健康人(正常组)新鲜晨尿进行FISH检测,建立阈值。留取75例膀胱癌(膀胱癌组)患者和25例非膀胱癌对照(非膀胱癌对照组)患者晨尿分别进行FISH检测及尿脱落细胞学检查。以至少两种探针检测结果超过阈值或一种探针检测结果存在至少两种异常为诊断阳性。结果 四种探针单一应用诊断膀胱癌的灵敏度分别为73.3％ (55/75)、76.0％ (57/75)、62.7％ (47/75)和62.7％ (47/75),联合应用的灵敏度为85.3％ (64/75),特异度为96.0％ (24/25)。尿脱落细胞学检查的灵敏度和特异度则分别为9.3％(7/75)和100.0％ (25/25)。FISH检测诊断膀胱癌的灵敏度明显高于尿脱落细胞学检查(85.3％与9.3％,x2= 57.00,P＜0.001)。FISH检测诊断膀胱癌的灵敏度与膀胱癌病理分级(低级别为84.2％,高级别为86.5％,x2=0.08,P＞0.05)及临床分期(Ta～T1为82.9％,T2～T4为87.5％,x2=0.32,P＞0.05)均无关。结论 荧光原位杂交技术检测尿脱落细胞染色体畸变诊断膀胱癌灵敏度高、特异性强、无创伤性,可作为膀胱癌早期诊断的一项重要方法,并可在预测肿瘤生物学行为及预后方面具有重要的临床意义。     

荧光原位杂交技术在R-显带后玻片上的应用

目的探讨荧光原位杂交技术(F ISH)在R-显带后玻片上的应用。方法对17例初诊为M 3患者,应用PM L/RAR a探针在R显带标本玻片上直接进行荧光原位杂交检测。结果6例显带质量差的标本中5例确认为PM L/RAR a阳性,1例阴性;2例疑似复杂易位的标本均确证为累及第三条染色体的t(15;17)复杂易位,并精确定位;9例核型检出t(15;17)的标本均证实分子水平上存在PM L/RAR a融合基因。结论R显带联合F ISH方法在复杂变异易位的鉴定方面与传统的核型分析和直接F ISH检测相比具有明显的优势。对于未知异常染色体的检出将具有更广泛的应用前景。     

乳腺癌HER-2基因荧光原位杂交检测的临床应用

目的研究荧光原位杂交(FISH)用于乳腺癌HER-2检测的临床应用及HER-2基因扩增与乳腺癌临床病理的相关性。方法应用FISH技术和免疫组化(IHC)技术检测40例乳腺浸润性导管癌石蜡包埋标本,对比分析。结果IHC检测CerbB-2(3+)/(2+)/(1+或0),其FISH阳性率分别为85.7%、50%、5.9%。24例腋窝淋巴结阳性者,其FISH检测HER-2基因扩增10例(P=0.0399)。ER/PR阴性8例,其HER-2基因扩增6例(P0.05)。结论IHC检测HER-2蛋白有很高的假阳性及假阴性,FISH有效性及准确性显著高于IHC,可在临床广泛推广应用。HER-2基因扩增与腋窝淋巴结阳性相关。     

双色荧光原位杂交技术检测浆细胞白血病13号染色体缺失

为了解浆细胞白血病（PCL）中13号染色体缺失情况及其与临床特征的相关性，运用双色荧光原位杂交（FISH）技术及位于13q14和13q31的序列特异性DNA探针，对21例初发PCL患者的间期细胞进行13号染色体缺失的检测。结果显示，21例PCL中13例（61．9％）具有del（13q14）异常，其阳性细胞率在52％-98％之间；12例（57．4％）有del（13q31）异常，其阳性细胞率在50％-98％之间。13例del（13q14）异常患者中，12例伴有del（13q31），仅1例阴性。结论：PCL中13号染色体缺失发生率较高，大部分PCL患者13号染色体缺失片段可能涉及由13q14到13q31的整个区间。FISH技术是一种在分析PCL13号染色体缺失异常方面较为快速、准确和敏感的方法。     

荧光原位杂交和基因组半定量法检测乳腺癌组织中c—erbB-2基因扩增

目的利用荧光原位杂交（FISH）与基因组半定量法检测乳腺正常良性和恶性组织中原癌基因c-erbB-2的扩增情况。方法收集50例临床切除的乳腺肿瘤组织，抽提收集样品基因组DNA并扩增c—erbB-2的特异序列构建转化子，以c-erbB-2的特异序列为探针进行间期核FISH检测乳腺肿瘤组织中c-erbB-2基因的扩增，并采用基因组半定量法比较不同组别乳腺组织中c-erbB-2基因的扩增。结果FISH检测发现正常乳腺组织中未出现c-erbB-2扩增，而良性与恶性组织中有不同程度的扩增，基因组半定量分析显示恶性肿瘤组织中c-erbB-2扩增程度高于良性与正常组织。结论c-erbB-2扩增是乳腺癌变的可靠的分子指标。可用荧光原位杂交与基因组半定量法对乳腺癌进行分子生物学诊断，且前者的敏感性与稳定性优于后者。     

荧光原位杂交和基因组半定量法检测乳腺癌组织中c-erbB-2基因扩增

目的利用荧光原位杂交(FISH)与基因组半定量法检测乳腺正常良性和恶性组织中原癌基因c-erbB-2的扩增情况。方法收集50例临床切除的乳腺肿瘤组织,抽提收集样品基因组DNA并扩增c-erbB-2的特异序列构建转化子,以c-erbB-2的特异序列为探针进行间期核FISH检测乳腺肿瘤组织中c-erbB-2基因的扩增,并采用基因组半定量法比较不同组别乳腺组织中c-erbB-2基因的扩增。结果FISH检测发现正常乳腺组织中未出现c-erbB-2扩增,而良性与恶性组织中有不同程度的扩增,基因组半定量分析显示恶性肿瘤组织中c-erbB-2扩增程度高于良性与正常组织。结论c-erbB-2扩增是乳腺癌变的可靠的分子指标。可用荧光原位杂交与基因组半定量法对乳腺癌进行分子生物学诊断,且前者的敏感性与稳定性优于后者。