硒蛋氨酸对胃癌细胞BGC-803的影响

目的 探讨硒蛋氨酸对胃癌细胞BGC-803增殖及硒蛋白P表达变化的影响.方法 用不同浓度硒蛋氨酸处理胃癌细胞BGC-803,分别于24、48、72、96小时4个时间点用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测其对细胞增殖的影响,用免疫组织化学SP法观察胃癌细胞BGC-803中硒蛋白P表达的变化.结果 各浓度硒蛋氨酸处理的胃癌细胞BGC-803增殖速度较空白对照组明显减慢(P＜0.05),呈浓度、时间依赖性,当硒蛋氨酸浓度为20 mmol/L作用96小时,胃癌细胞BGC-803的生长速度最慢;随着硒蛋氨酸浓度增加,硒蛋白P的阳性表达逐渐增强,且阳性细胞表达率逐渐升高.结论 硒蛋氨酸对胃癌细胞BGC-803增殖具有一定的抑制作用,硒蛋氨酸能增强胃癌细胞BGC-803中硒蛋白P的表达.     

ERK通路对胃癌细胞顺铂敏感性的调节作用

目的:研究在人胃癌细胞中,细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)通路对人胃癌细胞顺铂敏感性的影响.方法:采用MTT法测定顺铂对两种胃癌细胞MGC-803、BGC-823的增殖抑制影响,测定PD98059作用BGC-823细胞后顺铂对细胞的增殖抑制影响.Western blot方法检测MGC-803、BGC-823细胞中谷胱甘肽-S-转移酶π(glutathione S-transferases π,GGST-π)蛋白的表达;及PD98059作用BGC-823细胞24 h后BGC-823细胞中p-ERK、GsT-π蛋白的表达.结果:顺铂作用两种胃癌细胞7 2 h后.MGC-803,BGC-823细胞的IC50值分别为0.71和1.21 mg/L,且MGC-803细胞的增殖率明显低于BGC-823细胞的增殖率(P<0.05).MGC-803细胞顺铂的敏感性高于BGC-823细胞.MGC-803细胞不表达GST-π蛋白,BGC-823细胞强表达GST-兀蛋白.20 μmol/LPD98059作用BGC-823细胞24 h后,p-ERK蛋白表达明显下调,GST-π蛋白表达亦明显下调.20 μmol/L PD98059作用BGC-823细胞24 h后,加入顺铂培养48 h,BGC-823+PD98059组增殖率明显低于对照组,BGC-823细胞对顺铂的敏感性明显增强.结论:下调胃癌细胞GST-π蛋白的表达可增强其对顺铂的敏感性;抑制胃癌细胞中ERK通路的活化,可以降低其细胞内GST-π蛋白表达;ERK通路通过调节人胃癌细胞GST-π基因表达影响其对顺铂的敏感性.     

联合应用活性氧抑制剂对降低胃癌顺铂耐药性的影响

目的探讨活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)通过Akt(蛋白激酶B)有关的信号途径在胃癌细胞中对顺铂化疗敏感性的影响。方法应用化疗药物顺铂以一系列梯度浓度处理对数期生长的胃癌BGC-823细胞,通过MIT法检测顺铂对BGC-823细胞增殖抑制率的影响,应用顺铂和活性氧抑制剂NAC单独及联合应用处理胃癌BGC细胞后测定细胞的活性氧水平以及Akt及磷酸化Akt的表达水平。结果顺铂对胃癌细胞有明显的抑制作用,呈浓度依赖性。单用顺铂组活性氧水平高于联合用药组;顺铂联合应用活性氧抑制剂NAC组与单用顺铂或活性氧抑制剂组的Akt表达无统计学意义(P>0.05),而磷酸化Akt的表达下调(P<0.05)。结论活性氧抑制剂NAC可能通过阻断P13K/Akt信号途径或其他有关Akt的信号通路以提高癌细胞对顺铂化疗的敏感性。     

顺铂对胃癌细胞Bax和Bcl-2表达的影响

目的通过研究顺铂对人胃癌BGC-823细胞Bax和Bcl-2的影响,探讨顺铂对人胃癌BGC-823细胞增殖和凋亡的影响及可能的机制。方法用化疗药物顺铂以不同浓度、不同时间处理对数期生长的人胃癌BGC-823细胞,采用MTT法检测顺铂对BGC-823细胞增殖抑制率的影响,采用免疫印迹和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测Bax及Bcl-2蛋白和mRNA的表达。结果顺铂对人胃癌细胞BGC-823生长增殖具有明显抑制作用,其效应成浓度和时间依赖性（P〈0．05）。不同浓度的顺铂处理BGC-823细胞24小时后,Bax蛋白和mRNA水平成浓度依赖性增加（P〈0．05）,而Bcl-2蛋白和mRNA水平成浓度依赖性减少。结论经顺铂处理的人胃癌BGC一823细胞,不论是在转录水平还是在翻译水平均上调了Bax的表达,同时使Bcl-2表达下调,此途径可能为顺铂所诱导肿瘤细胞凋亡的机制之一。     

姜黄素联合奥沙利铂对人胃癌BGC-823细胞的作用

目的观察姜黄素联合奥沙利铂增强对人胃癌BGC823细胞生长抑制及杀伤作用,并探讨其与Fas蛋白的关系。方法采用不同浓度姜黄素和奥沙利铂单独或联合作用于BGC-823胃癌细胞,分别应用CCK-8法检测细胞生长抑制率,Annexin V-FITC/PI双染色检测BGC-823细胞凋亡率,流式细胞术检测Fas蛋白表达及采用分光光度法检测Caspase-3酶活性变化。结果姜黄素和奥沙利铂明显抑制细胞的增殖,呈剂量依赖性,联合作用组显著高于单独用药组;两药均可增强胃癌BGC-823细胞凋亡率,联合作用组显著高于单独用药组;两药均可增强Fas蛋白表达。联合作用组显著高于单独用药组;两药均可增强Caspase-3酶活性,联合作用组显著高于单独用药组。结论姜黄素联合奥沙利铂可显著增强对BGC823胃癌细胞的增殖抑制作用,并可增强诱导细胞凋亡作用,其机制可能与上调Fas蛋白的表达、增强Caspase-3活性有关。     

钼对人食管癌细胞ECA-109的化疗增敏作用及对食管癌干细胞p75NTR的影响

目的:探讨钼对食管癌细胞ECA-109化疗敏感性的影响及对食管癌干细胞p75NTR作用.方法:本实验选用人食管癌细胞(esophageal cancer cells,ECCs)ECA-109.设计分为4组:空白对照组、顺铂组、单纯加钼组、顺铂加钼组,后3组均采用不同的浓度进行试验.用MTT法检测各组对人食管癌细胞ECA-109的生长抑制作用;流式细胞仪检测各组p75NTR百分率的变化.结果:顺铂组各浓度对食管癌细胞ECA-109有一定的抑制作用,且对食管癌干细胞也有不同程度的抑制作用,并且随着给药浓度和时间的增加均呈增强趋势;单纯加钼组对食管癌细胞ECA-109和对食管癌干细胞的抑制作用均不明显;顺铂加钼组对食管癌细胞ECA-109和食管癌干细胞的抑制作用则明显增强,与单用同浓度顺铂组及空白对照组比较有差异性(P<0.05),且呈一定的浓度、时间依赖性.结论:钼可明显增强顺铂对食管癌细胞ECA-109和食管癌干细胞的抑制作用,而单用钼则达不到理想的效果,说明钼可作为化疗增敏剂,为其作为食管癌化疗的辅助剂提供了实验依据.     

Smac基因过表达联合顺铂对SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨Smac基因过表达联合顺铂对肝癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 采用脂质体介导的转染方法 ,将重组质粒pcDNA3.1+hSmac导入人肝癌细胞株SMMC-7721中,采用Western blot和流式细胞术检测转染前后Smac蛋白表达情况.转染24 h后分别加入终浓度为5、15、25 μg/ml的顺铂诱导细胞凋亡.采用四甲基偶氮唑盐比色法检测癌细胞的增殖抑制作用,吖啶橙-溴化乙锭荧光染色法和膜联蛋白V/碘化丙啶双染标记流式细胞术检测细胞凋亡. 结果 Westernblot和流式细胞术检测结果证实转染后Smac蛋白表达明显增加(P＜0.01).与空白对照相比,Smac基因过表达可抑制癌细胞增殖,促进凋亡(P＜0.01).而且给予顺铂处理后,与空白对照组相比,细胞生长抑制率随剂量增加而显著上升,且转染Smac的细胞生长抑制率较相应未转染Smac的细胞明显升高(P＜0.01).吖啶橙-溴化乙锭荧光染色法和流式细胞术检测显示,转染Smac加顺铂处理组较单纯顺铂处理组细胞凋亡明显增加,差异具有统计学意义(P＜0.01).这表明Smac基因过表达可增强顺铂对肝癌细胞的增殖抑制和凋亡促进作用. 结论 促凋亡基因Smac可在肝癌细胞中过表达,抑制癌细胞的增殖和促进凋亡;而且过表达的Smac基因可增强癌细胞对化疗药物顺铂的敏感性,这为研究Smac在癌细胞凋亡过程中的调控作用以及肝癌化学治疗效果的改善提供了实验基础.     

PI3K/Akt抑制剂LY294002对胃癌细胞化疗增敏作用的探讨

目的 探讨PI3K/Akt特异性抑制剂LY294002与化疗药物5-Fu及奥沙利铂联合使用对3种胃癌细胞系(MGC803、BGC823和SGC7901)化疗效果的影响.方法 将PI3K/Akt特异性抑制剂LY294002联合化疗药物5-Fu及奥沙利铂作用于3种胃癌细胞系,MTT法检测单独使用5-Fu、奥沙利铂及联合LY294002对体外培养的3种胃癌细胞系的增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡.结果 联合LY294002作用后,5-Fu、奥沙利铂对3种胃癌细胞系的增殖抑制作用明显增强(P<0.05),且凋亡率显著提高(P<0.05).结论结果 LY294002能有效提高化疗药物5-Fu、奥沙利铂体外对胃癌细胞的增殖抑制作用,抑制PI3K/Akt信号转导通路可显著提高胃癌的化疗疗效.     

异硫氰酸苯乙酯对胃癌细胞体外抑制作用相关研究

[目的]研究异硫氰酸苯乙酯（PEITC）体外实验中对人胃癌BGC-823细胞的增殖抑制作用及诱导其凋亡相关分子机制.[方法]应用MTT法、Annexin V/PI双染法检测PEITC人胃癌BGC-823细胞增值以及凋亡的影响;应用RT-PCR以及Western Bolt检测PEITC诱导胃癌细胞凋亡相关基因蛋白的表达情况.[结果]PEITC作用人胃癌细胞BGC-823给药24 h后,与空白组比较,能显著抑制胃癌细胞的增殖,抑制作用与浓度和时间成依赖关系,诱导胃癌细胞的凋亡,能上调Bax表达,下调Bcl-2、Bcl-xl、Survivin等基因表达,激活Caspase-3、Caspase-9、PARP活性.[结论]PEITC能有效抑制人胃癌BGC-823细胞的增殖,其机制可能是通过激活Caspase家族蛋白酶活性而诱导胃癌细胞凋亡.     

蟾蜍灵联合奥沙利铂对胃癌MGC803细胞增殖抑制及凋亡的影响

目的 研究蟾蜍灵联合奥沙利铂诱导人胃癌细胞株MG C803凋亡及对凋亡因子Bax、Bcl-2的影响.方法 应用MTr法检测不同浓度蟾蜍灵及奥沙利铂单药及联合对胃癌细胞MGC803增殖抑制作用;流式细胞术分析细胞凋亡和周期阻滞;Western印迹法检测Bax、Bcl-2蛋白的表达.结果 (1)蟾蜍灵及奥沙利铂单药均抑制MGC803细胞增殖,呈剂量时间依赖效应,且联合用药的细胞增殖抑制率高于单药组,差异有统计学意义.24、48 h及72 h联合指数(CI)分别为0.693、0.596、0.481;(2)药物作用细胞24h,流式细胞仪检测10 nmol/L蟾蜍灵及10 μg/ml奥沙利铂凋亡率分别为2.9％及4.3％,联合用药组为14.13％,与单药组对比有统计学差异;(3)Western印迹结果显示,蟾蜍灵、奥沙利铂单用于胃癌细胞24h后,Bax及Bcl-2表达无明显变化,而联合组Bax蛋白表达上调到对照组145.94％,Bcl-2蛋白下调到对照组57.14％.结论 蟾蜍灵联合奥沙利铂协同诱导胃癌MGC803细胞凋亡,且可能与下调Bcl-2、上调Bax蛋白有关.