高压氧对大鼠海马神经元Bcl-2蛋白表达的影响

背景：高压氧是治疗急性一氧化碳中毒的首选方法。但是，高压氧治疗急性一氧化碳中毒的机制，尤其是治疗一氧化碳中毒迟发性脑病的机制，目前还不清楚。目的：观察急性一氧化碳中毒大鼠海马区神经元病理改变，研究高压氧治疗对一氧化碳中毒大鼠海马区神经元Bcl-2蛋白表达的影响。设计：以实验动物为研究对象，完全随机设计，对照实验研究。单位：一所军医大学医院的急诊科、一所市级医院的检验科和一所军医大学的高压氧治疗中心。材料：实验在解放军第四军医大学航空航天医学系高压氧治疗中心实验室进行，选择60只雄性sD大鼠。干预：60只大鼠随机分成3个组(正常对照组、一氧化碳中毒组，一氧化碳中毒高压氧治疗组)，每组20只，各组大鼠分别暴露在空气或一氧化碳气体(体积分数为3．2&;#215;10。)中60min，对一氧化碳中毒高压氧治疗组大鼠行高压氧治疗。制备大鼠海马区脑组织病理切片行常规苏木精-伊红染色和Bcl-2染色，观察一氧化碳中毒后第1，3．5和7天大鼠海马区神经元损伤和Bcl-2蛋白表达变化的特点。主要观察指标：病理形态学改变和Bcl-2蛋白表达变化。结果：一氧化碳中毒组大鼠海马可见大量变性坏死神经元，高压氧治疗组海马区神经元变性坏死减少，Bcl-2蛋白表达增多，尤以染毒后3和5d明显(P&;lt;0．05)。结论：高压氧治疗可以促进急性一氧化碳中毒大鼠海马区神经元Bcl-2蛋白表达，具有保护神经元的作用。     

亚低温对缺血再灌注大鼠海马CA1区Bcl-2和Bax表达动态变化的影响

目的:研究脑缺血再灌注后全身亚低温的脑保护作用及其对Bcl-2和Bax表达的动态影响,探讨亚低温脑保护作用的机制。方法:实验于2002-01/12在江苏省麻醉医学研究所(省级重点实验室)完成。实验动物选择126只SD雄性大鼠随机分为假手术组、常温缺血组和亚低温缺血组。采用Pulsinelli四血管阻断法制作大鼠全脑缺血再灌注模型,即刻全身亚低温4h,分别在再灌注后4,8,24,48,72,96h,7d,7个时间点取脑标本,进行Bcl-2和Bax免疫组织化学及苏木精-伊红染色。结果:与常温组相比,全身亚低温组海马CA1区死亡细胞数明显减少[常温比亚低温24h:(195±18)比(214±20)个/mm,P<0.05;48h:(185±17)比(215±21)个/mm,P<0.01;72h:(130±20)比(200±17)个/mm,P<0.01)];Bcl-2蛋白免疫反应强度峰值增高,持续时间延长[灰度值:常温比低温:24h(40±8比57±8,P<0.01);48h(42±6比55±8,P<0.01);72h(38±4比41±6,P<0.01)]。Bax蛋白免疫反应强度峰值减低,持续时间缩短[灰度值:常温比低温24h(32±4比24±5,P<0.05);48h(30±7比24±6,P<0.05);72h(26±4比22±5,P<0.05)]。结论:全身亚低温对缺血性锥体细胞损害有较好的保护作用。可增强具有抗凋亡的Bcl-2蛋白的表达,延长其表达持续时间,而减弱具有促凋亡的Bax表达,同时缩短其表达持续时间,此可     

黄芪对脑缺血再灌注后神经细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨补气益血中药黄芪对脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响。方法:实验于2004-06/11在第四军医大学西京医院中医科实验室进行。取36只SD大鼠随机分为3组,每组12只。①模型组:以生理盐水10mL/(kg·d)灌胃,1次/d,7d后线栓法制备大鼠局灶性脑缺血2h再灌注模型,6只在再灌注6h麻醉状态下处死取脑,免疫组织化学法与医学图像分析结合的方法检测Bcl-2蛋白的表达;剩余6只在再灌注24h麻醉状态下处死取脑,TUNEL法检测大鼠脑组织神经细胞凋亡。②黄芪组:以黄芪煎剂6g/(kg·d)灌胃7d,其余处理同模型组。③假手术组:不阻塞大脑中动脉,其余处理同模型组。结果:36只大鼠全部进入结果分析。①TUNEL阳性神经细胞数目:模型组高于假手术组[(49.9±9.8),(1.6±0.6)个/视野,t=12.05,P<0.01],黄芪组低于模型组[(30.2±2.1)个/视野,t=4.81,P<0.01]。②Bcl-2阳性细胞数目:模型组显著高于假手术组([12.5±1.2),(1.7±0.6)个/视野,t=19.71,P<0.01],黄芪组显著高于模型组([16.4±2.2)个/视野,t=3.17,P<0.01]。③Bcl-2蛋白平均灰度:模型组明显低于假手术组(182.8±13.6,205.9±11.5,t=3.18,P<0.01),黄芪组显著低于模型组(160.8±10.2,t=3.82,P<0.01)。结论:黄芪通过上调Bcl-2蛋白的表达可抑制缺血再灌注脑组织神经细胞凋亡,对脑缺血再灌注损伤有明显的神经保护作用。     

高压氧对脑缺血再灌注海马神经元Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的观察高压氧(HBO)作用下脑缺血再灌注海马CA1区神经元Bcl-2和Bax蛋白表达的变化情况,进一步研讨高压氧治疗脑缺血再灌注损伤、减轻神经元凋亡从而发挥保护作用的机制。方法沙土鼠20只,采用随机数字法将实验动物分为正常对照组、缺血组、0.15MPaHBO治疗组、0.25MPaHBO治疗组,0.25MPa压力空气(hyperbaricair,HBA)对照组,每组4只动物。采用“双侧颈总动脉阻断法”前脑缺血模型,缺血20min后再灌注3d,并用0.15MPa和0.25MPa压力的高压氧治疗(60min/d,连续3d)后,应用免疫组化LSAB方法,观察高压氧对海马CA1区神经元凋亡相关基因Bcl-2和Bax的蛋白表达的影响。结果沙土鼠脑缺血再灌注3d组海马CA1区大量神经元表达Bax蛋白,并且神经元发生凋亡,未见神经元表达Bcl-2蛋白;高压氧治疗组则大量神经元表达Bcl-2蛋白,并且0.25MPa高压氧治疗组比0.15MPa高压氧治疗组变化更显著,而各组表达Bax蛋白的神经元数目无明显变化,但高压氧治疗组Bax蛋白阳性的神经元形态正常。结论HBO暴露可诱导大量神经元表达Bcl-2蛋白,对Bax蛋白表达则无明显作用,使Bcl-2和Bax蛋白表达的比值增高,从而起到保护神经元的作用,这可视为HBO治疗脑缺血性损伤减少神经元凋亡的机制之一。     

骨肉瘤中Bcl-2、Fas蛋白表达的相关性研究

【目的】研究细胞凋亡的两个调控因子Bcl-2和Fas蛋白在骨肉瘤中的不同表达情况,了解它们在骨肉瘤细胞中的相互关系。【方法】采用SABC免疫组织化学方法检测42例骨肉瘤中Bcl-2、Fas蛋白的染色强度评分,并进行相关分析。【结果】Bcl-2蛋白的染色强度评分为(1.18±0.45);Fas蛋白的染色强度评分为(0.93±0.17);Bcl-2和Fas蛋白在不同病理类型组骨肉瘤中的染色强度评分的差异均无显著性(均P>0.05);Bcl-2与Fas蛋白的染色强度评分之间呈负相关(r=-0.272,P<0.05)。【结论】Bcl-2可能通过抑制Fas蛋白的表达来引起骨肉瘤的发生。     

小鼠全脑缺血模型海马区Bcl-2和Bax的表达

背景：由C57black／6小鼠制成的全脑缺血模型在实验性脑缺血的研究中使用在明显增加，目前需要对这种模型的神经元损伤死亡在分子生物学方面的改变进行全面深入的研究，此项研究正是观察两种与缺血神经元死亡密切相关基因的表达水平。目的：在小鼠全脑缺血模型上观察缺血后海马区Bcl-2和Bax的表达，在蛋白分子表达水平对该模型进行研究，为这种模型在今后脑缺血研究中的应用提供实验依据。设计：以实验动物为研究对象，随机对照前瞻性研究。单位：一所大学生理学和病理解剖学教研室。对象：实验于2002-11／2003-05在首都医科大学生理系完成。选择C57black／6小鼠12只，随机分为假手术组和对照组，每组6只。干预：双侧颈总动脉夹闭15min诱发全脑缺血模型，24h后取脑组织。全脑缺血后应用免疫组织化学染色，观察海马Bcl-2和Bax的表达水平。主要观察指标：海马Bcl-2和Bax的表达水平。结果：缺血组海马CA1区Bax阳性反应神经元数目为(57．3&;#177;2．9个)个，假手术组Bax阳性细胞数目为(17．2&;#177;1．3)个，两组比较，差异有显著性意义(t=30．91，P&;lt;0．05)。缺血组CA3区和齿状回Bcl-2阳性反应神经元数目为(43．9&;#177;1．1)个，假手术组Bcl．2阳性细胞数目为(28．6&;#177;1．7)个，两组比较，差异有显著性意义(t=18．51，P&;lt;0．05)。阳性着色区灰度值测定结果显示：缺血组海马CA1区Bax阳性细胞染色灰度值为90．45&;#177;5．23，假手术组Bax阳性细胞染色灰度值为：168．39&;#177;4．55，两组比较，差异有显著性意义(t=27．54，P&;lt;0．05)；缺血组CA3区和齿状回Bcl-2阳性细胞染色灰度值为113．10&;#177;4．20，假手术组Bcl-2阳性细胞染色灰度值为157．25&;#177;7．68，两组比较，差异有显著性意义(t=12．35，P&;lt;0．05)。结论：小鼠全脑缺血模型在缺血24h后，Bcl-2和Bax表达发生改变，Bax表达增加在CA1区，Bcl-2表达增加在CA3区和齿状回。     

银杏平颤方对帕金森病鼠黑质半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶和Bcl-2蛋白表达的影响

目的：观察银杏平颤全方及其拆方对帕金森病鼠黑质半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3，9及B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)蛋白在不同时期表达的影响。方法：实验于2002-09／2003-12在北京中医药大学解剖教研室神经解剖实验室进行。动物随机分成6组：正常组、模型组、全方组、解毒组、平肝组和化瘀组，除正常组6只外，其余每组又分造模后14，28d两个时间点，每个时间点6只。除正常组外，其余5组动物腹腔注射1-甲基-4苯基-1，2，3，6四氢吡啶[30mg／(kg&;#183;d)，连续5d]建立帕金森病动物模型，从造模第1天开始每天分别灌胃中药0．5mL(全方含生药1．18g／L．拆方含生药0．6g／L)，模型组灌胃生理盐水0．5mL。动物存活到相应时间点处死，采用免疫组化技术观察黑质半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3.9和Bcl-2的表达。结果：66只动物全部进入结果分析。①帕金森病模型组鼠中脑黑质半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9．3的表达明显增加，14d较28d更强，而黑质内Bcl-2蛋白的表达下降，28d较14d更明显。②中药银杏平颤方及其拆方可不同程度地抑制半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3，9的表达，提高Bcl-2的表达。通过全方和3组拆方比较发现化瘀中药的作用基本同全方组，两个时间是均有效。③解毒中药在14d作用比28d显著，平肝中药在28d的作用一般大于14d。结论：银杏平颤方可能通过上调抑制凋亡蛋白Bcl-2的表达，和下调促凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3，9的表达，从而抑制了帕金森病大鼠中脑多巴胺神经元的凋亡。     

高压氧对脑缺血再灌注海马神经元Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的 观察高压氧(HB0)作用下脑缺血再灌注海马CA，区神经元Bcl-2和Bax蛋白表达的变化情况，进一步研讨高压氧治疗脑缺血再灌注损伤、减轻神经元凋亡从而发挥保护作用的机制。方法 沙土鼠20只，采用随机数字法将实验动物分为正常对照组、缺血组、0．15MPaHBO治疗组、0．25MPaHBO治疗组，0．25MPa压力空气(hyperbaric air，HBA)对照组，每组4只动物。采用“双侧颈总动脉阻断法”前脑缺血模型，缺血20min后再灌注3d，并用0．15MPa和0．25MPa压力的高压氧治疗(60min／d，连续3d)后，应用免疫组化LSAB方法，观察高压氧对海马CA1区神经元凋亡相关基因Bcl-2和Bax的蛋白表达的影响。结果 沙土鼠脑缺血再灌注3d组海马CA1区大量神经元表达Bax蛋白，并且神经元发生凋亡，未见神经元表达Bcl-2蛋白；高压氧治疗组则大量神经元表达Bcl-2蛋白。并且0．25MPa高压氧治疗组比0．15MPa高压氧治疗组变化更显，而各组表达Bax蛋白的神经元数目无明显变化。但高压氧治疗组Bax蛋白阳性的神经元形态正常。结论 HBO暴露可诱导大量神经元表达Bcl-2蛋白，对Bax蛋白表达则无明显作用，使Bcl-2和Bax蛋白表达的比值增高，从而起到保护神经元的作用，这可视为HBO治疗脑缺血性损伤减少神经元凋亡的机制之一。     

急性髓细胞白血病Bcl-2蛋白表达及其临床意义

目的：检测急性髓细胞白血病（AML）Bcl-2蛋白，并评价其与AML患者临床特征及多药耐药基因MDRl表达产物P170的关系。方法：免疫细胞化学ABC法检测白血病细胞中Bcl-2蛋白及P170表达。结果：AML中存在Bcl-2高水平表达，但复发的AML与初发AMLBcl-2表达无显著差异（P〉0．05）。初发AML中，Bcl-2阳性组患者完全缓解（CR）率显著低于Bcl-2阴性组（P〈O．01）。Bcl-2的阳性与阴性组中P170表达无显著差异（P〉0．05）。Bcl-2和P170间无相关表达（r1=0．171，P〉0．05），但Bcl-2／P170双阳性组化疗CR率显著低于双阴性组（P〈O．01）或P170／Bcl-2单阳性组（P〈O．05）。结论：初发AML中Bcl-2蛋白高水平表达与化疗耐药有关；Bcl-2与P170联合表达患者化疗反应更差。     

大鼠脑出血模型中神经细胞凋亡的特征及Bcl-2蛋白对细胞凋亡的调控

目的:研究大鼠脑出血灶周围是否存在细胞凋亡及Bcl-2蛋白的表达。方法:SD大鼠50只,随机分为5组,10只为对照组,其余40只建立大鼠脑出血模型,分别于模型制备后12,24,48,72h取脑组织,应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,免疫组化SP法检测Bcl-2蛋白。结果:正常细胞对照中未见TUNEL及Bcl-2阳性细胞,其余各组中TUNEL及Bcl-2阳性细胞均有不同程度表达。凋亡率随出血后时间不同而发生相应改变,在出血后48～72h达到高峰,TUNEL阳性细胞率峰值为(24.50±2.69)%,实验组与对照组间差异有显著性意义(P<0.05)。Bcl-2蛋白在出血灶周围细胞中亦有表达,其阳性表达率峰值为(20.76±1.97)%,且Bcl-2蛋白的表达与凋亡细胞之间并无明显线性关系。结论:细胞凋亡参与了脑出血后神经细胞的继发损伤过程,其在出血后的表达存在一个时间窗,对临床及时治疗有一定指导意义;Bcl-2蛋白在出血后一定时间内持续升高,但与细胞凋亡不同步,表明了bcl-2的抑制细胞凋亡的作用。     

高压氧对脑外伤大鼠海马神经元凋亡的影响

目的 研究高压氧对于脑外伤大鼠神经细胞凋亡的作用。方法 采用改进的Feency自Fh落体法建立脑外伤模型，72只大鼠随机分为正常对照组、脑外伤组、高压氧治疗组。在预定时间点采用TUNEL法和免疫组化法观察3组细胞的凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达情况。结果 高压氧治疗组伤后第1，7，24天细胞凋亡率均低于脑外伤组。各时间点Bcl-2染色阳性细胞率均高于脑外伤组，各时间点Bax染色阳性细胞率均低于脑外伤组。结论 高压氧可明显提高Bcl-2的表达，抑制Bax的表达，进而抑制细胞凋亡。     

不同压力高压氧对脑出血大鼠Bcl-2/Bax比值的影响

目的:观察不同压力高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)对脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)大鼠出血灶周围组织Bcl-2/Bax比值的影响。方法:应用胶原酶诱导法建立大鼠脑出血模型,将90只雄性脑出血SD大鼠随机分为对照组、高压氧治疗组:1.0ATA组、1.8ATA组、2.0ATA组、2.2ATA组,每组18只,按不同治疗压力于造模后24h进行治疗,1次/d,各组分别于造模成功后第1、3、5天断头取脑,每个时间点各6只。免疫组织化学染色法测定Bcl-2与Bax的表达,对Bcl-2/Bax比值进行统计分析。结果:Bcl-2/Bax比值:第1天时,高压氧治疗组较对照组升高,差异有显著性意义(P0.05),1.8ATA组、2.0ATA组、2.2ATA组较1.0ATA组升高,差异有显著性意义(P0.05),2.2ATA组、2.0ATA组、1.8ATA组依次升高,1.8ATA组、2.0ATA组与2.2ATA组比较差异有显著性意义(P0.05),1.8ATA组与2.0ATA组比较差异无显著性意义(P0.05);第3天时,高压氧治疗组较对照组升高,1.0ATA组与对照组比较差异无显著性意义(P0.05),1.8ATA组、2.0ATA组、2.2ATA组与对照组比较差异有显著性意义(P0.05),2.2ATA组、2.0ATA组、1.8ATA组依次升高,各组之间比较差异均有显著性意义(P0.05);第5天时,高压氧治疗组较对照组升高,差异均有显著性意义(P0.05),2.0ATA组、2.2ATA组低于1.0ATA组,差异无显著性意义(P0.05),1.8ATA组高于1.0ATA组、2.0ATA组、2.2ATA组,差异有显著性意义(P0.05)。结论:HBO治疗可提高出血灶周围脑组织Bcl-2/Bax的比值,抑制出血灶周围组织细胞凋亡,且1.8ATA在提高Bcl-2/Bax的比值上较优。     

高压氧对递增负荷训练大鼠腓肠肌P53、Bcl-2蛋白表达的影响

背景:研究显示高压氧疗法在运动损伤与疲劳恢复方面具有较好的应用效果,但其机制尚不清楚.目的:观察高压氧对递增负荷跑台运动后大鼠腓肠肌P53、Bcl-2蛋白表达及细胞凋亡的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验.于2008-03/05在苏州大学运动人体科学实验室完成.材料:2个月龄雄性SD大鼠24只,随机分为3组,安静对照组、递增负荷训练组、高压氧恢复组,每组8只.方法:递增负荷训练组:坡度10%,递增负荷训练,第1～4周,每天20 m/m.n运动10 min,25 m/min运动10 min,30 m/mIn运动10 min,35 m/min运动10 min.第5～8周,每天20 m/mIn运动10 min,25 m/min运动10 min,30 m,min运动20 min,35 m/min运动20 min.高雎氧恢复组:运动方案相同,运动后即刻用0.2 MPa压力的商压氧恢复60 min.安静对照组自由喂养,不进行训练.递增负荷训练组末次运动后1 h、高压氧舱恢复组恢复1 h及相应安静对照组分批麻醉处死,快速取腓肠肌立即用体积分数为0.1甲醛固定,制作切片.主要观察指标:①苏木精-伊红染色观察各组大鼠骨骼肌细胞凋亡情况.②免疫组织化学检测各组大鼠骨骼肌细胞P53与Bcl-2蛋白表达情况.结果:24只大鼠进入结果分析.①递增负荷训练组大鼠骨骼肌细胞凋亡数量增多,经高压氧恢复后细胞凋亡数量减少.②递增负荷训练组大鼠骨骼肌细胞P53蛋白表达增多,经高压氧恢复后表达显著减少.③递增负荷训练组大鼠骨骼肌细胞Bcl-2蛋白表达增多,高压氧恢复后未见减少.结论:高压氧能够抑制递增负荷训练大鼠骨骼肌P53蛋白的表达,减少运动导致的大鼠骨骼肌细胞凋亡的发生.     

氨基胍对癫痫大鼠海马区bcl-2、bax蛋白表达的影响

目的探讨氨基胍对癫痫大鼠海马区bcl-2、bax蛋白表达的影响。方法32只SD大鼠随机分为4组：空白对照组（Ns＋Ns组）,模型组（Ns＋KA组）,氨基胍预处理组（AG＋KA组）和单纯氨基胍组（AG＋Ns组）,每组8只。4组大鼠造模后存活24h、48h,免疫组织化学法显示bcl-2、bax的蛋白表达情况。结果bcl-2的免疫反应在Ns组和AG组最强,AG＋KA组次之,KA组最弱;bax的免疫反应在KA组最强,AG＋KA组次之,Ns组和AG组最弱。结论氨基胍预处理癫痫模型大鼠可以使bcl-2的表达增加、bax的表达降低。     

全脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经元凋亡调节蛋白Bel-2和Bax的表达

背景：脑缺血再灌注对中枢神经系统的影响，除了急性期的细胞坏死，还有迟发性的神经元凋亡。目的：观察大鼠全脑缺血不同再灌注阶段海马神经元凋亡率、坏死率及凋亡调节蛋白Bcl-2和Bax的表达情况，并探讨其对全脑缺血再灌注损伤的调节作用。设计：随机对照实验。单位：首都医科大学附属北京天坛医院的神经外科和麻醉科。材料：实验于2003-01／20014-01在首都医科大学附属北京神经外科研究所完成。选择清洁级成年雄性健康Wistar大鼠33只，随机分5组，缺血再灌注24h组7只、缺血再灌注48h组7只、缺血再灌注72h组7只、缺血再灌注7d组7只和假手术对照组5只。干预：制备大鼠全脑缺血再灌注模型。分别于再灌注24，48，72h和7d取脑海马组织，用流式细胞仪检测细胞凋亡率，坏死率，Bcl-2和Bax蛋白在大鼠脑海马神经元中的表达情况。主要观察指标：①流式细胞仪检测各组大鼠脑海马组织细胞凋亡率和坏死率。②Bcl-2和Bax蛋白表达百分率。结果：33只大鼠全部进入结果分析。①缺血再灌注7d组海马神经元的凋亡率最高[（24．59&;#177;0．97）％]，坏死率峰值出现在缺血再灌注24h组[（16．67&;#177;1．04）％]，明显高于假手术对照组[（1．28&;#177;0．50）％，（0．90&;#177;0．38）％]（P〈O．01）。②假手术对照组Bcl-2表达极低[（1．07&;#177;0．27）％]，但Bax有高表达[（46．09&;#177;5．37）％]。⑧Bcl-2蛋白峰值出现在缺血再灌注后48h[（14．41&;#177;0．67）％]，而Bax蛋白峰值出现在缺血再灌注之后72h[（77．38&;#177;1．52）％]。结论：全脑缺血再灌注损伤后海马神经元凋亡率逐渐增高，凋亡调控基因Bcl-2和Bax表达异常增高，提示Bcl-2和Bax蛋白参与了全脑缺血再灌注损伤的凋亡调节。     

全脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经元凋亡调节蛋白Bcl-2和Bax的表达

背景:脑缺血再灌注对中枢神经系统的影响,除了急性期的细胞坏死,还有迟发性的神经元凋亡.目的:观察大鼠全脑缺血不同再灌注阶段海马神经元凋亡率、坏死率及凋亡调节蛋白Bcl-2和Bax的表达情况,并探讨其对全脑缺血再灌注损伤的调节作用.设计:随机对照实验.单位:首都医科大学附属北京天坛医院的神经外科和麻醉科.材料:实验于2003-01/2004-01在首都医科大学附属北京神经外科研究所完成.选择清洁级成年雄性健康Wistar大鼠33只,随机分5组,缺血再灌注24 h组7只、缺血再灌注48 h组7只、缺血再灌注72 h组7只、缺血再灌注7 d组7只和假手术对照组5只.干预:制备大鼠全脑缺血再灌注模型.分别于再灌注24,48,72 h和7 d取脑海马组织,用流式细胞仪检测细胞凋亡率,坏死率,Bcl-2和Bax蛋白在大鼠脑海马神经元中的表达情况.主要观察指标:①流式细胞仪检测各组大鼠脑海马组织细胞凋亡率和坏死率.②Bcl-2和Bax蛋白表达百分率.结果:33只大鼠全部进入结果分析.①缺血再灌注7 d组海马神经元的凋亡率最高[(24.59±0.97)%],坏死率峰值出现在缺血再灌注24 h组[(16.67±1.04)%],明显高于假手术对照组[(1.28±0.50)%,(0.90±0.38)%](P＜0.01).②假手术对照组Bcl-2表达极低[(1.07±0.27)%],但Bax有高表达[(46.09±5.37)%].③Bcl-2蛋白峰值出现在缺血再灌注后48 h[(14.41±0.67)%],而Bax蛋白峰值出现在缺血再灌注之后72 h[(77.38±1.52)%].结论:全脑缺血再灌注损伤后海马神经元凋亡率逐渐增高,凋亡调控基因Bcl-2和Bax表达异常增高,提示Bcl-2和Bax蛋白参与了全脑缺血再灌注损伤的凋亡调节.     

睡眠剥夺引起大鼠海马神经元凋亡与丝裂素活化蛋白激酶表达的变化

背景:丝裂素活化蛋白激酶是一组与神经元的存活凋亡有关的蛋白激酶,睡眠剥夺可以引起神经元凋亡。目的:观察睡眠剥夺大鼠丝裂素活化蛋白激酶表达的变化并分析其可能的意义。设计:完全随机分组的前瞻性研究。单位:郑州大学生理学教研室神经研究室。材料:实验于2000-06/2002-10在郑州大学完成。选取成年健康SD大鼠24只。方法:24只大鼠随机分为快眼动睡眠剥夺组、快眼动睡眠剥夺对照组和正常对照组3组,每组8只。睡眠剥夺组从早晨8点始,连续剥夺睡眠72h。正常对照组则置饲养笼中饲养,维持正常的睡眠-觉醒周期。观察其形态学变化。另取24只大鼠分组同上用于丝裂素活化蛋白激酶的检测。采用TUNEL染色法观察睡眠剥夺大鼠的海马神经元形态学变化,观察细胞外信号调节激酶活性的变化和c-Jun氨基末端激酶蛋白表达量的变化。主要观察指标:①观察睡眠剥夺大鼠海马神经元的形态学变化。②观察海马神经元细胞外信号调节激酶和c-Jun氨基末端激酶表达的变化。结果:①海马神经元形态学变化:快眼动睡眠剥夺组大鼠CA1和CA3区可见较多的凋亡阳性细胞,主要分布在海马的锥体细胞层。CA2区仅见极少量凋亡细胞,CA4区偶见凋亡细胞。正常对照组和快眼动睡眠剥夺对照组海马组织切片中未见明显阳性细胞。②细胞外信号调节激酶活性的变化:快眼动睡眠剥夺组明显低于快眼动睡眠剥夺对照组和对照组(1764.00±941.56,6139.67±2863.62,566.700±2763.41,t=3.2111,0.9863,P<0.05)。③c-Jun氨基末端激酶的阳性表达:快眼动睡眠剥夺组明显高于快眼动睡眠剥夺对照组和对照组(87.5%,25%,75%,t=3.4121,P<0.05)。结论:睡眠剥夺可引起大鼠海马神经元丝裂素活化蛋白激酶活性的变化,可能与神经元的凋亡有关。     

雌激素对局灶性脑缺血大鼠脑梗死体积与Bcl-2蛋白表达的影响

目的:观察雌激素对局灶性脑缺血大鼠神经细胞凋亡及其Bel-2蛋白表达的影响,探讨雌激素的脑保护作用。方法:实验于2004-09在河南大学医学院形态实验室完成。选取健康级雌性Wistar大鼠30只,随机分为假手术组、手术对照组和雌激素用药组,每组10只。将手术对照组和雌激素用药组大鼠于造模前7 d切除双侧卵巢,手术对照组切除卵巢后给予生理盐水腹腔注射7 d,雌激素用药组给予雌二醇1 mg／(kg·d)腹腔注射7 d,假手术组只行开腹手术, 但不切除卵巢,并给予生理盐水腹腔注射7 d。采用大脑中动脉阻断制成局灶性脑缺血模型。缺血 2 h再灌注24 h,在麻醉状态下断头取脑, 应用免疫组织化学方法及10 ml／L四氮唑染色,观察脑梗死体积及 Bel-2蛋白的表达。结果:30只Wistar大鼠全部进入结果分析。假手术组未发现缺血性梗死灶,手术对照组脑梗死病灶体积明显大于雌激素用药组 [(96．93±11．63,59．32±8．95)mm3](t=8．104,P<0．05)。假手术组未见Bcl-2蛋白染色阳性细胞,雌激素用药组和手术对照组梗死病灶边缘出现大量Bcl-2阳性细胞,两组细胞数分别为(167±22,139±19)个／mm2, 差异有显著性意义(t=3．046,P<0.05)。结论:雌激素可缩小大鼠局灶性脑缺血梗死灶体积．增强Bcl-2蛋白的表达,具有脑保护作用。     

高压氧治疗糖尿病大鼠心肌病变的研究

目的研究高压氧治疗能否改善链脲佐菌素（STZ）大鼠糖尿病性心肌的病损程度。方法STZ大鼠造模成功3个月、电镜证实有心肌病变后，随机分为3组：①高压氧治疗组60只：每天接受0．15MPa高压氧治疗1h，连续20d；②糖尿病对照组64只：不做治疗；③正常对照组40只：腹腔注射生理盐水的无糖尿病正常大鼠。分别在疗程的5、10、20d后处死治疗组及同期对照组大鼠，取心脏组织进行HE染色病理学观察和电镜观察。结果高压氧治疗20d后STZ大鼠的糖尿病性心肌病变明显好于同期糖尿病对照组，电镜观察显示肌丝排列整齐、线粒体排列规则、结构紧凑。结论高压氧治疗可减轻STZ大鼠糖尿病性心肌组织的病损程度。     

雌激素对局灶性脑缺血大鼠脑梗死体积与Bcl—2蛋白表达的影响

目的：观察雌激素对局灶性脑缺血大鼠神经细胞凋亡及其Bcl-2蛋白表达的影响，探讨雌激素的脑保护作用。方法：实验于2004—09在河南大学医学院形态实验室完成。选取健康级雌性Wistar大鼠30只，随机分为假手术组，手术对照组和雌激素用药组，每组10只．将手术对照组和雌激素用药组大鼠于造模前7d切除双侧卵巢，手术对照组切除卵巢后给予生理盐水腹腔注射7d，雌激素用药组给予雌二醇1mg／（kg&;#183;d）腹腔注射7d，假手术组只行开腹手术，但不切除卵巢，并给予生理盐水腹腔注射7d。采用大脑中动脉阻断制成局灶性脑缺血模型。缺血2h再灌注24h，在麻醉状态下断头取脑，应用免疫组织化学方法及10mL/L几四氮唑染色，观察脑梗死体积及Bcl-2蛋白的表达。结果：30只Wistar大鼠全部进入结果分析。假手术组未发现缺血性梗死灶，手术对照组脑梗死病灶体积明显大于雌激素用药组[（96．93&;#177;11．63，59．32&;#177;8．95）mm^3]（t=8．104，P〈0．05）。假手术组未见Bcl-2蛋白染色阳性细胞，雌激素用药组和手术对照组梗死病灶边缘出现大量Bcl-2阳性细胞，两组细胞数分别为（167&;#177;22，139&;#177;19）个／mm^2．差异有显著性意义（t=3．046，P〈0．05）。结论：雌激素可缩小大鼠局灶性脑缺血梗死灶体积，增强Bcl-2蛋白的表达，具有脑保护作用。