丹参对人胃癌阿霉素耐药性的逆转作用

[目的]探讨丹参对人胃癌多药耐药的逆转作用。[方法]以不同浓度的丹参处理胃癌SGC7901及耐药SGC7901/ADR细胞,MTT法检测丹参对两种细胞的毒性及半数抑制率（IC50）,流式细胞仪（FCM）检测两种细胞内阿霉素浓度和细胞周期。胃腺癌耐药患者24例,随机分为二组,术前分别用丹参12 g.d^-1与阿霉素10mg.m^-2和单用阿霉素10 mg.m^-2,术后光镜、电镜观察癌组织变化和高效液相色谱法（HPLC）测定细胞内阿霉素浓度。[结果]丹参浓度在500μg/mL以下无细胞毒性,使SGC7901/ADR细胞对阿霉素的IC50由6.01 mg/L增为3.17 mg/L,耐药性得到部分逆转,逆转倍数为1.89（P〈0.01）;细胞内阿霉素浓度由1.83增加到2.83,增加1.55倍（P〈0.05）;使细胞周期阻滞于G1、G2期;体内丹参12 g.d^-1与阿霉素合用时癌细胞损伤加重,线粒体肿胀嵴变短,数目减少,严重时内、外膜破裂,内质网扩张和囊泡化,伴有膜旁核蛋白体的脱落;癌细胞坏死增多;细胞内阿霉素浓度由45.76增加到133.07,增加2.90倍。[结论]丹参对SGC7901/ADR细胞和胃腺癌阿霉素多药耐药有逆转作用,逆转机制与丹参能增加耐药细胞内化疗药物浓度有关。     

贝母素乙逆转SGC7901/VCR细胞株多药耐药的初步研究

目的研究贝母素乙对胃癌耐药细胞SGC7901/VCR的逆转及诱导凋亡作用。方法采用四甲基唑蓝法(MTT)检测贝母素乙的细胞毒性及耐药逆转效果;采用流式细胞仪检测细胞内阿霉素(ADR)蓄积以及细胞凋亡率的变化。结果贝母素乙可剂量依赖性的的抑制亲本细胞系SGC7901和耐药细胞系SGC7901/VCR的细胞增殖,20μg/mL贝母素乙能够显著提高SGC7901/VCR细胞对化疗药(长春新碱、阿霉素、顺铂和5-氟尿嘧啶)的敏感性及细胞内ADR的浓度,贝母素乙和5-氟尿嘧啶(5-Fu)联合用药后能诱导细胞凋亡,细胞凋亡率随着药物浓度的增加而逐渐增加,处理48h后的凋亡率最高达44.5%。结论贝母素乙能够作为胃癌多药耐药逆转剂逆转MDR,其机制可能与减少药物外排和诱导细胞凋亡相关。     

环孢素A、维拉帕米、川芎嗪对胃癌多药耐药细胞株SGC-7901／ADR逆转作用的研究

目的：探讨环孢素A（CsA）、维拉帕米（VP）、川芎嗪（TMP）对胃癌多药耐药细胞株SGC-7901／ADR耐药性的逆转作用。方法：采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法观察SGC-7901／ADR对化疗药氟尿嘧啶（5-FU）的耐药性，选择CsA、VP、TMP的非细胞毒性剂量，并观察其与5-Fu联合对SGC-7901／ADR的逆转作用。结果：SGC-7901／ADR对化疗药5-FU具有耐药性，相对耐药性（RF）为97．49；CsA3．0mg／L、VP10．0mg／L、TMP300．0mg／L以下为SGC-7901／ADR细胞的非细胞毒性剂量，除CsA外，VP和TMP对SGC-7901／ADR的逆转作用呈剂量依赖关系；300．0mg／L TMP较10．0mg／LVP逆转作用强（P〈0．01），使SGC-7901／ADR相对耐药性降至12．89，将5-FU IC50由13．001mg／L下调到1．542mg／L，逆转倍数是8．43倍。结论：SGC-7901／ADR对5-Fu具有耐药性，300．0mg／L TMP是SGC-7901／ADR细胞多药耐药性最有效的逆转剂。     

5种生物碱胃癌多药耐药逆转剂的筛选及机制研究

目的 研究骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、贝母素甲、贝母素乙和氧化苦参碱对肿瘤细胞多药耐药性（MDR）的逆转作用及机制。方法 以胃癌亲本细胞系SGC-7901和MDR细胞系SGC-7901/VCR为细胞模型,采用MTT法检测上述5种生物碱的细胞毒活性及对MDR的逆转效果;用流式细胞仪检测MDR逆转效果最好的贝母素乙对肿瘤细胞内阿霉素（ADR）蓄积的影响;Western blotting法检测P-糖蛋白（P-gp）的表达;Hoechst荧光染色和细胞免疫荧光法检测贝母素乙诱导SGC-7901/VCR细胞凋亡情况。结果 骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、贝母素甲、贝母素乙和氧化苦参碱均能不同程度地抑制SGC-7901和SGC-7901/VCR细胞的增殖,在非毒剂量下贝母素乙能够显著提高SGC-7901/VCR细胞对ADR的敏感性及细胞内ADR的浓度,降低P-gp表达。贝母素乙联合5-氟尿嘧啶（5-FU）给药可诱导SGC-7901/VCR细胞凋亡,凋亡细胞cleaved caspase-3呈高表达。结论 贝母素乙具有作为胃癌MDR逆转剂的潜力,其逆转耐药的机制可能与下调P-gp表达和诱导细胞凋亡有关。     

雷帕霉素与环孢素A对人乳腺癌细胞的耐药逆转作用比较

目的比较雷帕霉素与环孢素A对人乳腺癌细胞的耐药逆转作用。方法 MTT法测定人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADR的耐药倍数。乳腺癌敏感细胞株MCF-7/S和耐药细胞株MCF-7/ADR各自分为:对照组:加入不同浓度阿霉素;实验组:加入不同浓度的阿霉素+不同浓度的雷帕霉素或者不同浓度的阿霉素+不同浓度的环孢素A;空白组。MTT法观察细胞抑制率,并算得半数抑制浓度,得出耐药逆转倍数。用免疫荧光法测得加入阿霉素的MCF-7/ADR细胞株在不同浓度的雷帕霉素或者环孢素A作用下,细胞内的阿霉素浓度。结果 (1)MCF-7/ADR细胞株的耐药倍数为12.13。(2)对于MCF-7/S细胞株,雷帕霉素和环孢素A的耐药逆转倍数均为1。(3)对于MCF-7/ADR细胞株,10μmol/L环孢素A使阿霉素的IC50显著降低(P<0.05),逆转倍数为1.6,并且随着浓度的增加,IC50逐渐降低,逆转倍数有逐渐增高的趋势;1μmol/L雷帕霉素使阿霉素的IC50显著降低(P<0.05),逆转倍数为1.6,并且随着浓度的增加,IC50逐渐降低,逆转倍数有逐渐增高的趋势。(4)10μmol/L的环孢素A和1μmol/L的雷帕霉素,开始增加乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADR细胞内的阿霉素浓度,并且随着浓度的增加,阿霉素浓度增加。相同浓度的药物作用下,雷帕霉素组的细胞内阿霉素浓度较环孢素A高。结论雷帕霉素能逆转MCF-7/ADR细胞株的耐药性,且效果较环孢素A好。     

水飞蓟素逆转人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM耐药性的实验研究

目的 明确水飞蓟素(Silymarin,Sily) 对人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM的逆转耐药作用。方法 以CCK-8法测定阿霉素（Adriamycin,Adm）对人乳腺癌敏感细胞株MCF-7/S和耐药细胞株MCF-7/ADM的毒性作用,计算出耐药倍数。以无细胞毒性的Sily（10μg/ml）作为逆转耐药剂,联合Adm观察其对耐药细胞株MCF-7/ADM的逆转耐药作用,计算得逆转倍数。结果 ①Adm对MCF-7/S和MCF-7/ADM的半数抑制浓度(IC50)分别为1.773 μg/ml和43.812 μg/ml,耐药倍数为24.7倍。②Sily能够增强ADM对MCF-7/ADM的细胞毒作用。以10μg/ml（抑制率为2.0%）的Sily联合Adm作用于MCF-7/ADM 48h后,耐药细胞株的IC50降至7.798 μg/ml,逆转倍数为5.6倍(P <0.01)。结论 Sily能够逆转人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM的耐药性。     

中西药结合对胃癌多药耐药的逆转和诱导凋亡作用

目的:探讨中西药结合对人胃癌多药耐药细胞SGC-7901/ADR的逆转和诱导凋亡作用.方法:以斑贞1号和/或氟尿嘧啶(5-FU)为阳性对照组,采用MTT法观察斑贞1号与5-FU,川芎嗪(TMP)联合对SGC-7901/ADR细胞的逆转及杀伤作用.采用流式细胞仪(FCM)测定各药物组细胞周期的变化.光镜和电镜观察药物联合前后SGC-7901/ADR细胞形态结构变化.结果:TMP明显提高SGC-7901/ADR细胞对斑贞1号 5-FU的敏感性,逆转倍数为10.39倍.细胞毒作用为:斑贞1号 5-FU TMP>斑贞1号 5-FU>斑贞1号>5-FU(P<0.01).FCM分析证明3种药物联合与对照组相比可将细胞阻滞在DNA合成前期和静息期-G0/G1期(P<0.05).光镜和电镜下观察到癌细胞体积变小,胞体全面变圆皱缩及典型的凋亡形态学改变.结论:中西药结合对SGC-7901/ADR细胞有较强的逆转和诱导凋亡作用,为当前肿瘤治疗提供了新思路.     

曲古菌素A对胃癌耐药细胞SGC-7901/ADR的作用

目的观察曲古菌素A(trichostatin A,TSA)抑制人胃癌SGC-7901/ADR细胞生长和促凋亡作用,研究TSA的抗胃癌作用及逆转胃癌SGC-7901/ADR细胞的耐药性。方法①体外培养人胃癌SGC-7901/ADR细胞,选择对数生长期细胞,按TSA终浓度0,50,100,200,300,400,500 nmol/L分为七组,依次作用24,48,72,96 h后,采用四唑盐(MTT)比色法检测细胞的生长情况。②TSA100,200,300 nmol/L干预SGC-7901/ADR细胞48 h后流式细胞仪观察细胞凋亡情况。结果①TSA对胃癌SGC-7901/ADR细胞的生长有明显的抑制作用,随药物浓度的增加,抑制率明显增加,组间两两比较均有显著性差异(P<0.05)。②流式细胞仪检测显示,TSA分别以100,200,300 nmol/L作用于SGC-7901/ADR细胞48 h后,凋亡率呈一定程度的剂量依赖性,与空白对照组比较各处理组均有显著性差异(P<0.05)。结论 TSA可抑制胃癌SGC-7901/ADR细胞的生长并有促凋亡作用,可逆转胃癌SGC-7901/ADR细胞的耐药性。     

地被菊提取液对人胃癌SGC-7901细胞的影响

目的:研究地被菊提取液中的各种成分对人胃癌SGC-7901细胞的影响,探讨其对人胃癌SGC-7901细胞抑制效果最好浓度梯度范围。方法:运用煎煮法制备地被菊提取液和细胞培养技术培养人胃癌SGC-7901细胞,MTT比色法和流式细胞术法检测人胃癌SGC-7901细胞的生长状况。结果:地被菊提取液促进人胃癌SGC-7901细胞的凋亡,浓度梯度为100～10 000μg/ml时诱导凋亡作用明显(P<0.05);地被菊提取液浓度在500～2 000μg/ml范围内能显著性地抑制人胃癌SGC-7901细胞生长繁殖(P<0.05)。结论:地被菊提取液能够促进细胞的凋亡,在500～2 000μg/ml内能抑制人胃癌SGC-7901细胞的生长繁殖,具剂量-效应关系。     

顺铂耐药人胃癌细胞SGC-7901的耐药特性的研究

目的：研究人胃癌细胞SGC-7901顺铂耐药后的细胞特性的变化。方法用彗星实验( SCGE)观察SGC-7901与胃癌细胞顺铂耐药细胞株( SGC-7901/DDP)的DNA损伤修复的能力,观察SCGE检测图像的尾长评定DNA的修复能力;通过观察胃腺癌 SGC-7901细胞和 SGC-7901/DDP的形态学不同,比较SGC-7901和SGC-7901/DDP自身变化;用细胞划痕的方法检测 SGC-7901/DDP 和 SGC-7901的迁移能力,通过对其迁移能力的观察,初步评价两株肿瘤细胞的侵袭能力;MTT法分别检测临床常用化疗药物5-氟尿嘧啶、依托泊苷、表阿霉素、多西紫杉醇、奥沙利铂对SGC-7901/DDP的敏感性和IC50,观察这些药物对SGC-7901/DDP的敏感性和交叉耐药性。结果人胃腺癌 SGC-7901/DDP 较 SGC-7901的SCGE图像的尾长短,SGC-7901/DDP的DNA损伤修复能力比SGC-7901强,表明顺铂耐药与其DNA损伤修复能力密切相关;SGC-7901/DDP和SGC-7901的形态不同, SGC-7901/DDP SGC-7901体积较小、核分裂较多;通过用细胞划痕的方法观测到SGC-7901/DDP较SGC-7901的迁移能力变差;SGC-7901/DDP对5-氟尿嘧啶、依托泊苷、表阿霉素、多西紫杉醇、奥沙利铂有不同程度的交叉耐药性,其 IC50较SGC-7901明显增加。结论人胃癌细胞 SGC-7901对顺铂耐药可使DNA损伤修复能力增强,并具有多重耐化疗药性,但其细胞的迁移能力减弱。