PCR—SSP方法作HLA—DR亚区的基因分型

采用序列特异性物－聚合酶链反应（ＰＣＲ－ＳＳＰ）技术对ＨＬＡ－ＤＲ亚区进行基因分型，使用鉴定ＤＲ１～ＤＲｗ１８的序列特异性引物和阳性对照引物，双盲检测了２２例已知ＤＲ血清型的标本，二者完全一致。并对未知血清型的标本作ＤＲ的基因分型。本法具有较高分辨度，高特异性和简便快速的特点，为临床器官组织移植配型，疾病相关性分析，法医学鉴定和人类学研究提供了新的技术方法。     

PCR—SSP快速HLA—DR基因分型法的建立及临床初步应用

采用序列特异性引物聚合酶链反应（ＰＣＲ－ＳＳＰ）方法，对２２份国际标准细胞株ＤＮＡ及２３例临床血标本ＤＮＡ进行了ＨＬＡ－ＤＲ基因分型，扩增条件为９４℃，３０ｓ，５８℃３０ｓ共３０个循环，对各个标准ＤＮＡ的分型结果显示，符合率为１００％，无假阳性及假阴性，提示本方法快速，准确，适合于临床应用。     

外周血白细胞HLA—B27的检测及临床意义

我科自 1999年以来 ,用川芎嗪治疗老年脑梗死疾病 ,并对其血液动力学指标进行监测 ,现报告如下。1　临床资料与方法1 1　一般资料本组 82例老年脑梗死均为我院老年病科住院患者 ,均经头部ＣＴ及ＭＲＩ证实。男 6 2例 ,女 2 0例 ,年龄 6 0～ 82岁 ,平均6 5 2岁。其复发性脑梗死 5 3例 ,单发性脑梗死 2 9例。1 2　治疗方法盐酸川芎嗪注射液 (无锡第七制药厂生产 ,每支 4 0ｍｇ)12 0ｍｇ加入生理盐水 2 0 0ｍｌ,1次 /ｄ,静滴。 14ｄ为 1个疗程 ,用1～ 3个疗程。治疗期间停用其它影响血液动力学改变的药物 ,治疗前后对血液动力学各指标进行监测…     

脐血HLA—I类抗原PCR—SSP分型的研究

目的 探讨PCR－SSP（聚合酶链反应－序列特异性引物）分型方法在脐血HLA－I类抗原分型中的应用价值。方法 53例脐血用免疫磁珠分离T淋巴细胞，单克隆抗体配型板作血清学分型，其中38例脐血用DNA快速抽提技术提取DNA后进行PCR－SSP基因分型，对两种方法分型结果进行对比研究。结果 38例脐血中，HLA－A位点PCR－SSP方法与血清学分型方法结果符合率100％，HLA－B位点血清学方法分型误差率为13．2％，其中1个抗原错误（占1．3％），9个抗原漏检（占11．8％）。脐血采集后24小时内作血清学分型较理想，超过24小时则半数以上不能进行血清学分型。抽提脐血DNA一次成功率100％，不受时间限制。结论 在脐血HLA－I类抗原分型中，PCR－SSP方法准确、省血、标本限制少，明显优于血清学方法，适用于脐血库。     

HLA—B27检测对强直性脊柱炎的诊断价值

ＨＬＡ－Ｂ２７检测对强直性脊柱炎的诊断价值孟庆宝潘雅军（徐州市红十字中心血站２２１００６）关键词强直性脊柱炎ＨＬＡ－Ｂ２７中图法分类号Ｒ５９３．２３人类白细胞抗原（ＨＬＡ）是迄今所知最为复杂的一个人类遗传多态性系统，ＨＬＡ－Ｂ２７是其中Ｂ座位上的一个...     

HLA—B27检测在脊柱关节病中的应用价值

人类白细胞抗原 (ＨＬＡ)Ｂ2 7是ＨＬＡ -Ｂ位点上的一个重要等位基因。在脊柱关节病中均有不同程度的表达 ,尤其是与强直性脊椎炎 (ＡＳ)有高度的相关性[1] 。本文利用流式细胞仪对 1 74例病人进行了ＨＬＡ -Ｂ2 7的检测 ,现总结报道如下 :1　材料与方法1 1　一般资料　 1 74例均为我院门诊及住院病人。其中诊断为ＡＳ的 62例 ,男 49例 ,女 1 3例 ,年龄 1 5～ 63岁 ,临床表现以两骶髂关节、腰背部反复疼痛为主 ,Ｘ线示骶髂关节间隙模糊或呈锯齿样改变、脊柱呈竹节样改变 ;诊断为类风湿关节炎 (ＲＡ)的2 3例 ,男 7例 ,女 1 6例 ,年龄 2 3～…     

PCR-SSP HLA-B27亚型检测及意义

目的对HLA-B27进行亚型检测并探讨其临床意义.方法对38例(AS样本24例;非AS样本14例)血清学确定为HLA-B27阳性的样本采用PCR-SSP方法进行HLA-B27亚型分型.结果38例样本,PCR-SSP分型36例B27阳性,2例B27阴性,误差率为5.26%.36例B27阳性中,B*2704占77.78%(28/36例);24例AS样本与14例非AS样本B*2704所占比例统计学分析无显著差异(x2=0.321,P＞0.05).结论中国汉族人HLA-B27亚型以B*2704为主,AS与HLA-B27各亚型的特异基因可能无关.PCR方法准确、实用、快捷、可靠.     

HLA-DR快速基因分型PCR-SSP方法的建立

目的：探讨应用于器官移植配型及疾病相关性分析的方法及基本数据,建立一种高分辨率、高特异性、简单、快速、方便的ＨＬＡＤＲ基因分析方法。方法：利用ＤＲ１～ＤＲ１８序列特异性引物及１对内对照引物,采用序列特异性引物聚合酶链式反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｓｐｅｃｉｆｉｃｐｒｉｍｅｒｓ,ＰＣＰＳＳＰ）技术对２２份国际标准细胞株ＤＮＡ及２０例未知ＤＲ型别的临床血液标本进行ＨＬＡＤＲ基因分析,扩增条件为：变性９４℃,６０ｓ;退火６５℃,６０ｓ;延伸７２℃,６０ｓ。２５个循环后,７２℃保温７ｍｉｎ。结果：对各个标准ＤＮＡ的分型结果显示,准确率及重复率均为１００％,无假阳性及假阴性。结论：该方法快速、简便、灵敏、重复性好,结果易于判断,适合临床器官移植组织配型、疾病相关性分析、法医鉴定及人类学研究等。     

HLA-B27阳性与阴性未分化脊柱关节病的临床比较

目的:探讨血清人类白细胞抗原-B27(HLA-B27)阳性与阴性未分化脊柱关节病(undifferentiated spondyloarthropathy,uSpA)患者临床表现及预后的差异,为临床诊疗提供借鉴。方法:根据血清HLA-B27是否阳性将120例uSpA患者分为两组,阳性组78例,阴性组42例。分析HLA-B27阳性组与阴性组的临床表现及相关实验室检查结果,比较两组间的差异;并对部分患者进行3年以上随访观察,了解其病情变化。结果:HLA-B27阳性组患者发病年龄显著早于HLA-B27阴性组(P<0.05);发热、消瘦、疲倦等全身症状表现HLA-B27阳性组显著多于HLA-B27阴性组,且较严重(P<0.05);实验室检查中血沉以HLA-B27阳性组显著为高(P<0.05);骶髂关节X线表现亦以HLA-B27阳性组显著为高(P<0.05)。而两组性别及外周关节炎等表现差异无统计学意义(P>0.05)。随访发现HLA-B27阳性组3年后发展为强直性脊柱炎者显著多于HLA-B27阴性组(P<0.05)。结论:HLA-B27阳性组uSpA患者发病年龄较早,临床症状较重,更有可能发展为强直性脊柱炎。Back     

采用PCR-SSP方法检测强直性脊柱炎患者HLA-B27亚型

目的 建立序列特异性引物-聚合酶链方法(PCR-SSP)检测湖北地区人白细胞抗原B27(Human leueocyte antigen-B27，HLA-B27)阳性强直性脊柱炎患者的HLA-B27亚型组成。方法 盐析法提取100例HLA-B27阳性的强直性脊柱炎患者外周血基因组DNA，采用PCR-SSP技术分别进行HLA-B位点基因型检测和HLA-B27基因亚型分析。结果 100例标本PCR-SSF，扩增均获成功，历时3h。共检出4种亚型：HLA-B*2704、HLA-B*2711、HLA-B*2715、HLA-B*2’722。其中HLA-B*2704纯合子25例、HLA-B*2704杂合子63例；HLA-B*2711杂合子5例；HLA-B*2715杂合子6例；HLA-B*2722杂合子l例。四种亚型所占构成比分别为90．4％、4％、4．8％和0．8％。结论 PCR-SSP方法进行HLA-B27亚型分析，快速、经济、简单；HLA-B*2704是湖北地区强直性脊柱炎患者HLA-B27基因主要亚型。     

三种不同方法检测HLA-B27的比较

目的:比较强直性脊柱炎患者HLA-B27常用的三种检测方法的特点,探讨不同检测方法之间差异及各自优缺点,为临床检验提供参考。方法:采用ELISA法、RT-PCR法和流式细胞法,对120例强直性脊柱炎患者和100例正常对照人群进行HLA-B27检测,并对结果进行分析。结果:ELISA法、RT-PCR法和流式细胞法三种检测方法的敏感性、特异性和阳性、阴性预测值分别为83.3%、94.0%、94.3%、82.5%;95.8%、93.0%、94.3%、94.8%;93.3%、95.0%、95.7%、92.2%。结论:三种血清HLA-B27检测方法诊断AS的特异度均较高;PCR法和流式细胞法的敏感度均显著高于ELISA法,其中PCR法略高于流式细胞术。     

强直性脊柱炎患者HLA-B27的检测

目的　探讨强直性脊柱炎 (AS)患者HLA B2 7检测方法的特点。方法　采用补体依赖性微量淋巴细胞毒法、聚合酶链反应 -序列特异性引物法、流式细胞仪法 ,对 4 3例AS患者与 4 5例健康体检者的HLA B2 7抗原进行检测。结果　三种方法AS组的HLA B2 7阳性率均高 ,且均极显著高于对照组 (P <0 .0 1) ,三种方法之间的阳性率无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　AS与HLA B2 7存在相关性 ;三种方法均可用于检测HLA B 2 7,但各有其特点。     

流式细胞术检测98例献血者外周血HLA-B27的临床意义

目的 通过对98例献血者外周血HLA—B27的检测，建立并优化测定HLA-B27的流式细胞术，并评价B7在早期辅助临床诊断以强直性脊柱炎为代表的脊柱关节病中的应用价值。方法 分别采用EDTA和肝素钠两种不同的抗凝剂，以及加单抗不同的量(7～30μl)检测2个B27阳性和9个B27阴性个体的全血，采用EDTA抗凝和15μl的单抗剂量检测献血者外周血，探寻流式细胞术检测HLA-B27的最佳实验条件；另以微量淋巴细胞毒实验分别对2例阳性标本和9例阴性标本进行验证。结果 通过微量淋巴细胞毒和流式细胞术两种方法检测98例献血者外周HLA-B27中2例为阳性，96例为阴性，且EDTA和肝素钠两种不同的抗凝剂，以及加单抗不同的量(7～30μl)对流式细胞术检测HLA-B7无任何影响。结论 优化并建立了一种简便省时、稳定性和重复性皆好的流式细胞仪用于检测HLA-B27的方法；HLA-B27与强直性脊柱炎高度相关，HLA-B27检测已成为临床支持以强直性脊柱炎为首的脊柱关节病的诊断与鉴别诊断的重要依据，具有重要的临床意义。     

HLA-B27和强直性脊柱炎

HLA-B 27与强直性脊柱炎呈强相关,但它在强直性脊柱炎中作用仍不详。近年来人群中HLA-B 27基因亚型的研究和人类B 27转基因动物模型的建立都有力地证实了HLA-B 27分子是强直性脊柱炎原发关联成分。     

HLA-B27检测在强直性脊柱炎临床诊断中的应用(附120例报告)

目的 :评价HLA B2 7检测在强直性脊柱炎 (AS)临床诊断中的作用。方法 :对怀疑患有AS及其相关疾病的 12 0人作HLA B2 7检测 ,采用纽约标准改良的AS诊断标准作为本研究的AS诊断标准。结果 :本组受检 12 0例中 ,HLA B2 7( )5 6例 ,占受检总数的 4 6 .6 7% ,按本研究改良标准诊断为AS 5 3例 ,其中HLA B2 7( ) 4 8例。本组 16周岁以下 13例受检者 ,HLA B2 7( ) 7例均符合JAS诊断标准。结论 :HLA B2 7检测对提高AS的诊断率和对轻型、早期AS病例的发现具有临床诊断价值     

HLA等位基因DRB1*0301和DQB1*0602与自身免疫性甲状腺疾病的关系

①目的　探讨山东沿海地区自身免疫性甲状腺疾病 (AITDs)的发病与HLA DRB1 0 30 1、DQB1 0 6 0 2等位基因的相关性。②方法　应用多聚酶链反应 序列特异性引物 (PCR SSP)技术 ,对已确诊的Graves病(GD) 90例、桥本甲状腺炎 (HT) 4 3例和正常对照 90例 ,扩增其HLA等位基因DRB1 0 30 1、DQB1 0 6 0 2的目的DNA片段 ,分析两对等位基因在不同人群中表达频率的差异。③结果　山东沿海地区GD和HT病人DRB1 0 30 1等位基因频率均显著高于对照组 (χ2 =4 .6 2 4、5 .0 0 3,P <0 .0 5 ) ;而DQB1 0 6 0 2等位基因频率均显著低于对照组 (χ2 =1 1 .2 0 4、6 .970 ,P <0 .0 1 )。④结论　HLA DRB1 0 30 1可能是山东沿海地区GD和HT的易感基因 ,而DQB1 0 6 0 2可能是山东沿海地区GD和HT的保护基因