鼻腔滴入IFN-γ对AR大鼠鼻腔黏膜中GATA-3表达的影响及意义

目的 探讨鼻腔吸入IFN-γ对大鼠变应性鼻炎(AR)的治疗作用及其机制. 方法将32只大鼠随机分为四组,各8只.A组为阴性对照组.B、C、D组采用卵清蛋白、氢氧化铝建立大鼠AR模型,B组为阳性对照组、C组为IFN-γ治疗组、D组为丙酸倍氯米松治疗对照组.B、C、D组于模型建立后第31～38天,每只每日每侧鼻腔分别滴入PBS 50 μl、IFN-γ 1μg和丙酸倍氯米松3.5 μg.第39 天取鼻腔黏膜,观察鼻腔组织病理学改变,用免疫组化SP法检测转录因子GATA3. 结果与A组相比,B组鼻黏膜充血、水肿,黏膜层增厚,有嗜酸细胞为主的炎性细胞浸润,GATA3表达增加;C、D组上述炎性改变明显减轻,鼻黏膜中GATA3表达减少. 结论鼻腔滴入IFN-γ治疗AR可能与阻断GATA3表达,从而继发抑制Th2型反应有关.     

益生菌VSL#3对实验性结肠炎大鼠结肠黏膜IFN-γ、IL-12表达的影响

目的评价益生菌VSL#3对三硝基苯磺酸钠(TNBS)诱导的大鼠结肠炎的疗效,并探讨其作用机制。方法成年SD大鼠(n=18),随机分为正常对照组(C)、TNBS模型组(D)、VSL#3治疗组(E)。观察大鼠的一般情况,比较结肠组织炎症程度。HE染色和免疫组化染色观察大鼠结肠黏膜组织形态学变化和IFN-γ、IL-12免疫阳性细胞的表达。结果与正常对照组相比,模型组大鼠结肠黏膜IFN-γ、IL-12免疫组化阳性细胞表达显著升高(P0.05),VSL#3治疗组IFN-γ、IL-12表达则有不同程度的降低(P0.05);同时,VSL#3治疗对大鼠结肠黏膜组织及大体变化均有一定程度的改善。肠组织IFN-γ、IL-12的表达与结肠炎病情轻重呈正相关。结论 VSL#3能有效治疗TNBS诱导的大鼠结肠炎,其作用机制可能与益生菌VSL#3通过有效抑制大鼠结肠黏膜IFN-γ、IL-12的表达有关。     

过敏性因素在老龄大鼠支气管哮喘模型中的实验研究

目的 探讨过敏性因素在晚发老年哮喘发生中的作用。方法 24只SPF级老年SD大鼠随机分为老年正常对照组（A组）和老年哮喘模型组（B组），每组12只；24只SPF级青年sD大鼠随机分为青年正常对照组（C组）和青年哮喘模型组（D组），每组12只。予卵蛋白腹腔注射并雾化吸入制作SD大鼠支气管哮喘模型；予乙酰胆碱（Ach）行支气管激发试验；以动物呼吸机测定呼气相气道阻力（Re）；测定支气管壁厚度、支气管平滑肌厚度和支气管黏膜和黏膜下炎性细胞数。结果 分别比较2组哮喘大鼠Re，以及2组哮喘大鼠支气管壁厚度、支气管平滑肌厚度和支气管黏膜和黏膜下炎性细胞数，结果显示造模成功；在10—40μg/kg浓度梯度的Ach激发后，B组和D组的Re差异有统计学意义（P〈0．05），在80—160μg／kg浓度梯度的Ach激发后，B组Re增加更明显（P〈0.01），与D组比较，B组支气管壁厚度、支气管平滑肌厚度和支气管黏膜和黏膜下炎性细胞数均明显增加（P〈0．01）。结论 本方法能制备老龄支气管哮喘大鼠模型；变应原对于晚发老年哮喘的发生同样重要。     

抗TNF-α IgY滴鼻对老年大鼠过敏性鼻炎的治疗作用

目的探讨抗肿瘤坏死因子(TNF)-α免疫球蛋白(Ig)Y滴鼻对老年大鼠过敏性鼻炎的治疗效果。方法将28只老年大鼠随机分为A组(正常对照组)、B组(模型组)、C组(非特异性Ig Y治疗组)和D组(抗TNF-αIg Y治疗组),观察各组老年大鼠治疗前后症状积分、鼻黏膜苏木素-伊红(HE)染色情况、鼻黏膜嗜酸性粒细胞含量和鼻灌洗液中炎症细胞含量。结果 B组和C组治疗后症状积分高于A组和D组(P<0.05),D组治疗后症状积分低于治疗前(P<0.05)。A组鼻黏膜偶见淋巴细胞浸润;B组和C组鼻黏膜水肿,固有层和上皮层有大量淋巴细胞和嗜酸性粒细胞,血管中见炎性细胞浸润;D组鼻黏膜轻度水肿,上皮层和固有层有少量淋巴细胞和嗜酸性粒细胞浸润,上皮比较完整。与A组比较,B、C、D组鼻黏膜中嗜酸性粒细胞所占比例均升高(P<0.05);与B组和C组比较,D组鼻黏膜中嗜酸性粒细胞所占比例下降(P<0.05)。与A组比较,B、C、D组鼻灌洗液中淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞含量升高(P<0.05),巨噬细胞含量降低(P<0.05);与B组和C组比较,D组鼻灌洗液中嗜酸性粒细胞含量降低(P<0.05),巨噬细胞含量升高(P<0.05)。结果抗TNF-αIg Y滴鼻能够改善过敏性鼻炎老年大鼠的临床症状,减轻炎症反应。     

γ干扰素转基因表达对过敏小鼠模型的治疗作用及其机制研究

目的通过腺病毒载体介导小鼠γ干扰素(mIFNγ)在小鼠肺脏转基因表达,探讨其对卵白蛋白(OVA)诱导过敏小鼠模型的治疗作用及其机制。方法48只BALB/c小鼠,按随机数字表法分为7组,即阴性对照组(A组)、过敏模型组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(B、D和F组)、转基因治疗组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(C、E和G组)。除A组外,B、C、D、E、F、G各组在第0天和第5天经腹腔给予OVA(每只15μg)致敏,第12～14天经气道吸入0.5%的OVA雾化液激发(20ml/次),建立过敏模型。第15天C、E、G组小鼠经鼻滴入50μl带有mIFNγ基因的复制缺陷型腺病毒(AdCMVmIFNγ)悬液[每只5×109/空斑形成单位(PFU)],A、B、D、F组小鼠经鼻滴入50μl生理盐水作为对照。第18天处死A、B、C组小鼠,第21天处死D和E组小鼠,第25天处死F和G组小鼠,获取支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞分类计数,其上清液用酶联免疫吸附法测定mIFNγ的浓度,右肺用4%多聚甲醛固定及苏木精伊红(HE)染色,左肺组织提取总RNA,用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)了解肺组织中白细胞介素4(IL4)、IL-5、IL-6、IL-10、IL1-2、IL13和IL18的表达。结果(1)经鼻给予AdCMVmIFN-γ后,BALF中可测得mIFNγ的高效表达,C组第3天为(729.0±104.7)pg/ml,E组第6天为(984.5±119.1)pg/ml,G组第10天为(310.6±59.7)pg/ml。(2)B、C、D、     

长效干扰素对克罗恩病患者肠黏膜白细胞介素-12、白细胞介素-17、肿瘤坏死因子-α和γ干扰素的影响

目的探讨长效干扰素治疗克罗恩病(Crohn’s disease, CD)的免疫学机制,为其治疗CD提供一定的实验基础及理论依据。方法选取中南大学湘雅医院2015年6月至2016年6月门诊和病房确诊的16例CD患者的内镜活检标本,实验设CD治疗前、CD治疗后(长效干扰素10μg,肌注,2次/周,治疗4周)及正常对照组。正常对照组选取16例为结肠息肉患者,用免疫组织化学方法检测局部肠黏膜细胞因子白细胞介素(interleukin, IL)-12、IL-17、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)的表达。结果治疗前CD患者结肠组织中IL-12、IL-17、TNF-α和IFN-γ表达显著增多,结肠组织中IL-12、IL-17呈弥散性分布,在黏膜上皮均有表达,主要分布于黏膜腺体内及间质炎性细胞胞质;TNF-α仅在黏膜层间质表达,围绕炎性细胞核呈团块状的胞质表达;IFN-γ分布于肠黏膜固有层,腺体周围淋巴细胞膜表面。长效干扰素可降低CD患者结肠黏膜中IL-12、IL-17、TNF-α、IFN-γ。结论 IL-12、IL-17、TNF-α和IFN-γ等促炎性细胞因子在CD黏膜免疫发生过程中发挥重要作用;长效干扰素能下调CD患者肠黏膜中IL-12、IL-17、TNF-α、IFN-γ的表达,具有治疗作用。     

加味定喘汤对支气管哮喘模型小鼠的治疗作用研究

目的:探讨中药加味定喘汤对支气管哮喘小鼠的治疗作用及可能的机制。方法:30只BALB/c小鼠随机分为3组:正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)和加味定喘汤治疗组(C组)。A组和B组每只小鼠均予以20ml/kg体重生理盐水胃饲,C组每只小鼠予以20ml/kg体重加味定喘汤(每1ml相当于1g生药)胃饲,每天1次,7d后观察小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数、嗜酸性粒细胞(Eos)百分比及IL-4和IFN-γ含量的变化。结果:B组与A组比较,BALF中细胞总数、Eos百分比明显增多(P<0.05),IL-4含量明显升高(P<0.01),IFN-γ含量明显降低(P<0.05);C组与B组比较,细胞总数、Eos百分比明显降低(P<0.05),IL-4的含量明显降低(P<0.01),IFN-γ表达升高(P<0.05)。结论:加味定喘汤能降低支气管哮喘小鼠BALF细胞总数、Eos百分比和IL-4的含量,提高IFN-γ的分泌,对支气管哮喘有治疗作用。     

不同潮气量通气对内毒素肺损伤大鼠Th1/Th2平衡的影响

目的 探讨内毒素肺损伤Thl/Th2平衡变化及不同潮气量通气对内毒素肺损伤大鼠Thl/Th2平衡的影响。方法 健康大鼠32只随机分成4组：生理盐水正常对照A组、内毒素肺损伤非机械通气B组、内毒素肺损伤＋小潮气量C组、内毒素肺损伤＋传统潮气量D组。监测平均动脉压(MAP)、心率(HR)，计算氧合指数（OI），检测PBMC中IFN-γ、IL-4浓度水平并计算IFN-γ/IL-4。取右肺中叶计算肺组织湿干比值(W/D)；观察右肺下叶肺组织病理变化；分析支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞(WBC)与中性粒细胞(PMN)。结果 1. B、C、D组OI、W/D及病理学变化符合急性肺损伤表现；2. B组IFN-γ/IL-4比值明显高于A组；C组IFN-γ/IL-4比值明显低于B组；D组IFN-γ/IL-4比值明显高于B组；3. B组肺W/D及BALF中WBC、PMN计数明显高于A组；C组肺W/D及BALF中WBC、PMN计数明显低于B组；D组肺W/D及BALF中WBC、PMN计数明显高于B组。结论 1.注射LPS可成功复制大鼠急性肺损伤动物模型；2.内毒素致大鼠肺损伤早期，其PBMC中IFN-γ和IL-4浓度增加，IFN-γ/IL-4升高，Thl/Th2失衡；3.传统潮气量机械通气可加重内毒素肺损伤大鼠炎症反应，使肺损伤早期大鼠Th1/Th2失衡加剧；4.保护性通气策略的小潮气量机械通气可减轻内毒素肺损伤大鼠PMN在肺内“扣押”，改善Th1/Th2失衡状态。     

细粒棘球蚴囊液蛋白对卵清蛋白诱导的小鼠变应性鼻炎效果

目的　观察细粒棘球蚴囊液蛋白（hydatid cyst fluid protein,HCFP）对卵清蛋白（ovalbumin,OVA）诱导的小鼠变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）的保护作用。方法　将24 只BALB/c小鼠（8～10周龄,体质量约20 g）随机分成A（空白对照组）、B（空白干预组）、C（AR模型组）、D （AR + HCFP干预组）4组,每组6只。在基础致敏阶段（实验第0、2、4、6、8、10、12天）,A、B、C、D组小鼠分别腹腔注射200 μL无菌磷酸盐缓冲液（phosphate buffered saline, PBS）,含20 μg HCFP的无菌PBS溶液,含50 μg OVA 和5 mg Al(OH)3凝胶的无菌PBS溶液,含50 μg OVA、5 mg Al(OH)3凝胶和20 μg HCFP 的无菌PBS溶液。在局部激发阶段（实验第14～20 天）,A、B、C、D组小鼠分别鼻腔滴注体积为40 μL的无菌PBS、含20 μg HCFP的无菌PBS、含2 mg OVA的无菌PBS、含2 mg OVA和20 μL HCFP的无菌PBS。观察各组小鼠行为学改变并进行行为学评分,采用酶联免疫吸附试验（enzyme⁃linked immunosorbent assay,ELISA）检测各组小鼠血清γ干扰素（interferon⁃γ, IFN⁃γ）、白细胞介素4（interleukin⁃4, IL⁃4）、IL⁃5、IL⁃10、转化生长因子⁃β（transforming growth factor⁃β, TGF⁃β）和OVA特异性IgE抗体（OVA⁃sIgE）水平,采用苏木精⁃伊红（HE）染色观察各组小鼠鼻黏膜病理学改变。结果　C组小鼠行为学评分[（6.83 ± 0.50）分]显著高于A组[（1.17 ± 0.52）分]和B组[（1.33 ± 0.52）分],D组小鼠行为学评分[（3.50 ± 0.50）分]较C组降低（P均 < 0.05）。4组小鼠血清IFN⁃γ（F = 4.08, P < 0.05）、IL⁃4（F = 275.90, P < 0.05）、IL⁃5（F = 96.82, P < 0.05）、IL⁃10（F = 77.67, P < 0.05）、TGF⁃β（F = 9.98, P < 0.05）及OVA⁃sIgE水平（F = 44.69, P < 0.05）差异均有统计学意义。C组小鼠血清IFN⁃γ水平低于A、B组和C组,且血清IL⁃4、IL⁃5、OVA⁃sIgE水平均高于A、B组和C组（P均 < 0.05）;D组小鼠血清IL⁃10、TGF⁃β水平高于C组（P均 < 0.05）。镜下观察显示,C组小鼠鼻黏膜纤毛脱落缺损明显,杯状细胞数量增多且体积增大,间质水肿,黏膜下见小血管扩张;D组小鼠鼻黏膜病变较C组轻。结论　HCFP对OVA诱导的小鼠AR具有保护效果。     

流式细胞术检测小鼠脾细胞内细胞因子刺激方案的筛选

目的建立流式细胞术检测小鼠细胞内细胞因子的方法。方法取5只BALB/c小鼠建立哮喘模型,4周后处死,制备脾脏单个核淋巴细胞悬液,分别按A、B、C3个刺激方案培养。A方案组:用25ng/mlPMA、1μg/mlIonomy-cin以及10μg/mlBFA刺激4h;B方案组用50ng/mlPMA、1μg/mlIonomycin以及10μg/mlBFA刺激4h;C方案组用3μg/mlConA刺激2d,加入10μg/mlanti-CD3、2μg/mlanti-CD28和10μg/mlBFA后继续刺激5h。培养后各组细胞悬液根据检测目的分成若干检测管,结合固定破膜处理技术,进行细胞表面抗原CD4及细胞内因子IL-4、IL-5、IL-10和IFN-γ染色,用流式细胞仪分析,比较不同刺激条件下各种细胞内因子的表达情况。实验设未刺激对照、激活对照、胞内染色对照及同型对照。结果 A方案组中5只鼠的细胞内因子表达率IL-4为(5.96±1.199)%,IFN-γ为(7.98±3.939)%,IL-10为(4.78±2.366)%,IL-5表达率均低于1%;B方案组中5只鼠的细胞内因子表达率IL-4为(5.76±1.108)%,IFN-γ为(7.44±2.269)%,IL-10为(4.50±1.560)%,IL-5表达率均低于1%;C方案组5只鼠IL-10、IL-5表达率分别为(3.14±0.288)%和(6.82±1.996)%。结论 25ng/mlPMA、1μg/mlIonomycin及10μg/mlBFA刺激4h的方案较适合小鼠淋巴细胞IL-4、IFN-γ的检测;3μg/mlConA刺激2d,加入10μg/mlanti-CD3、2μg/mlanti-CD28和10μg/mlBFA继续刺激5h的方案适合IL-5、IL-10的检测,并且均是从单个核细胞水平对细胞内因子进行检测。     

慢性乙型肝炎患者外周血CD8＋CD28＋T细胞、血清IFN-γ水平变化及意义

目的 观察慢性乙型肝炎患者外周血CD8＋ CD28＋T细胞、血清γ干扰素（IFN-γ）水平变化,并讨论其临床意义.方法 慢性乙型肝炎45例为观察组,健康体检者20例为对照组.采用双抗体夹心时间分辨荧光免疫分析法测定HBeAg,应用实时荧光定量PCR法检测外周血HBV-DNA,流式细胞术检测外周血CD8 CD28＋T细胞水平,ELISA法检测血清IFN-y水平.结果 对照组、观察组外周血CD8＋ CD28＋T细胞比例分别为12.86％±2.57％、10.74％±3.59％,两组比较P＜0.05;血清IFN-γ水平分别为（5.79±1.28）、（311.00±80.40） pg/mL,两组比较P均＜0.01.观察组Child-Pugh A、B、C级外周血CD8＋ CD28＋T细胞比例分别为7.98％±2.62％、12.37％±1.73％、13.05％±3.38％,各级间比较P均＜0.01;血清IFN-y水平分别为（320.10±86.55）、（299.95±60.84）、（307.57±88.43） pg/mL,各级间比较P均＞0.05.CD8＋ CD28＋T细胞与HBeAg、HBV-DNA相关系数分别为-0.33、-0.44,P均＜0.05;IFN-γ与CD8＋T细胞相关系数为-0.33,P＜0.05;CD28＋T细胞与IFN-γ相关系数为0.34,P＜0.05.结论 IFN-γ水平可反映HBV慢性感染者的免疫状态,CD8＋ CD28＋T细胞有助于病毒的清除.     

低剂量辐射对小鼠骨髓移植后血清Th1/Th2相关细胞因子和aGVHD的影响

目的探讨低剂量辐射（LDR）预处理对小鼠异基因骨髓移植（allo-BMT）后急性移植物抗宿主病（aGVHD）和血清Th1/Th2相关细胞因子的影响。方法建立小鼠allo-BMT模型,根据LDR干预与否将30只BALB/c小鼠随机分为A组[6MV-X全身照射（TBI）]、B组（LDR＋TBI）、C组（空白对照组）。移植后观察A、B两组的aGVHD症状和肝、小肠、皮肤的病理学变化;移植后第8天取血检测IFN-γ和IL-4的水平。结果与A组比较,B组的aGVHD症状积分高,aGVHD的发生程度较轻,且生存期长（P〈0.05）;与C组比较,A、B两组的IFN-γ水平均高、IL-4水平均低（P〈0.05）、但以B组为著（P〈0.05）。结论 LDR预处理可减轻aGVHD的严重程度,与LDR预处理可以减少肠道损伤,调节Th1/Th2相关细胞因子趋于平衡的作用有关。     

嗜酸乳杆菌改善DSS诱导的小鼠实验性结肠炎的黏膜炎症及对STAT1、STAT4的影响

目的观察嗜酸乳杆菌治疗小鼠实验性结肠炎的疗效及对STAT1、STAT4、IL-12、IFN-γ的影响,以便阐明嗜酸乳杆菌治疗UC的作用机制。方法采用2.5％DSS诱导小鼠结肠炎模型,70只Balb／c小鼠随机分为7组：模型组、阴性对照组（菌粉保护剂组）、阳性对照组（美沙拉嗪组）、嗜酸乳杆菌低剂量组（1×10^6 CFU／mL）、中剂量组（1×10^7 CFU／mL）、高剂量组（1×10^8 CFU／mL）、正常组。以组织病理学积分评价疗效,同时观察嗜酸乳杆菌不同浓度干预后肠组织中STAT1、STAT4、IFN-γ和IL-12的表达水平。结果嗜酸乳杆菌可明显改善小鼠结肠组织损伤,降低IFN-γ、IL-12、STAT1、STAT4的表达。与美沙拉嗪组比较,高浓度组嗜酸乳杆菌可明显抑制IFN-γ、STAT1表达（P〈0.05）,中低剂量组与美沙拉嗪组抑制作用接近（P〉0.05）,嗜酸乳杆菌各个浓度组对IL-12、STAT4的抑制作用与美沙拉嗪组相当（P〉0.05）。结论嗜酸乳杆菌对小鼠实验性结肠炎有治疗作用,可抑制炎症因子的表达,其部分作用机制可能为通过抑制STAT1、STAT4信号分子的表达来减少致炎因子的分泌而发挥治疗作用。     

实验性过敏性鼻炎大鼠血浆细胞因子IL-4和IFN-γ时相的变化

目的研究大鼠过敏性鼻炎（allergic rhintis,AR）模型外周血T辅助细胞（T helper cell,Th细胞）1/Th2细胞因子—干扰素-γ（interferon-γ,INF-γ）和白细胞介素-4（interleukin-4,IL-4）水平在不同阶段的变化,探索AR的发病机制。方法健康雌性SD大鼠20只,随机等分成实验组和对照组。实验组用卵蛋白辅以氢氧化铝和灭活百日咳杆菌佐剂致敏,用1%的卵蛋白生理盐水溶液滴鼻激发,建立AR模型。对照组用实验组等量氢氧化铝和灭活百日咳杆菌生理盐水溶液腹腔注射,等量生理盐水滴鼻。激发后2、4、8、12、24、36和72小时及第6、8和10天,自尾静脉采血,每次0.5ml,分离血浆,用ELISA法检测血浆IL-4和INF-γ的量。结果实验组10只大鼠中8只被激发为AR模型,激发后4小时血浆IL-4水平（8.7±7.2pg/ml）较对照组（6.1±4.7pg/ml）明显升高（P〈0.05）;第8天达到（14.2±9.5）pg/ml,与对照组（5.7±4.6）pg/ml比较差异有显著性意义（P〈0.05）,此后始终维持在此水平。实验组血浆INF-γ在激发后4小时亦升高,12小时达到最高水平（10.6±8.1pg/ml）,较对照组（7.4±6.3pg/ml）明显升高（P〈0.05）,然后逐渐下降。结论外周血淋巴细胞产生的细胞因子IL-4和INF-γ在AR炎症发生发展中起重要作用,INF-γ在炎症早期可能起主导作用,而IL-4在AR炎症晚期可能发挥主要作用,IL-4和INF-γ在炎症的整个过程中存在时相变化。     

IFN-γ诱导的供体脾脏DC对受体小鼠小肠移植排斥反应的影响及其机制探讨

目的观察IFN-γ诱导的供体脾脏树突状细胞（DC）对受体小鼠小肠移植排斥反应的影响,并探讨其机制。方法将供体、受体小鼠各36只分为A、B、C组各12对（供体、受体各12只）,均制作小肠移植模型。A组造模前后不予任何处理;B、C组受体小鼠造模前5 d经尾静脉分别注射未诱导的和IFN-γ诱导的供体小鼠脾脏DC 2×106个。造模后,观察移植肠存活时间,HE染色观察移植肠排斥反应,采用RT-PCR、Western blot法检测肠组织中的吲哚胺2,3双加氧酶（IDO）mRNA及其蛋白。结果与A、B组比较,C组移植肠平均存活时间显著延长（P〈0.01）,排斥反应程度显著降低（P〈0.05）,IDO mRNA及其蛋白表达水平显著增高（P均〈0.05）。结论 IFN-γ诱导的供体脾脏DC对受体小鼠小肠移植排斥反应有抑制作用,与其增加移植肠组织局部IDO表达有关。     

周期蛋白D1在香烟提取物促进支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用

目的观察支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）周期蛋白D1（cyclinD1）的表达变化,探讨cyclinD1在香烟提取物（CSE）促进哮喘大鼠ASMCs增殖中所起的作用。方法 16只SD大鼠随机分为对照组（n=8）和哮喘组（n=8）。原代培养大鼠ASMCs,分为对照组（A组）、对照＋CSE组（B组）、哮喘组（C组）、哮喘＋CSE组（D组）、哮喘＋CSE＋pcDNA3.1组（E组）和哮喘＋CSE＋pcDNA3.1-ascyclinD1组（F组）。检测ASMCs增殖及cyclinD1 mR-NA、蛋白表达情况。结果 ASMCs增殖水平及cyclinD1 mRNA、蛋白表达水平比较,A组与C组,C组与D组,D组与F组间均有统计学差异（P均〈0.01）。结论正常与哮喘大鼠ASMCs在CSE干预后增殖明显加快,cyclinD1表达明显增加。CSE可能是通过cyclinD1参与调控哮喘大鼠ASMCs的增殖。     

Augmented regeneration of partial liver allograft induced by nuclear factor-κB decoy oligodeoxynucleotides-modified dendritic cells

AIM: To investigate the effect of NF-κB decoy oligodeoxynuleotides (ODNs) - modified dendritic cells (DCs)on regeneration of partial liver allograft.METHODS: Bone marrow (BM)- derived DCs from SD rats were propagated in the presence of GM-CSF or GM-CSF+IL4 to obtain immature DCs or mature DCs, respectively. GMCSF-propagated DCs were treated with double-strand NF-κB decoy ODNs containing two NF-κB binding sites or scrambled ODNs. Allogeneic (SD rat to LEW rat) 50% partial liver transplantation was performed. Normal saline (group A),GM-CSF -propagated DCs (group B), GM-CSF+IL-4 -propagated DCs (group C), and GM-CSF+NF-κB decoy ODNs (group D) or scrambled ODNs -propagated DCs (group E)were injected intravenously into recipient LEW rats 7 days prior to liver transplantation and immediately after transplantation. DNA synthesis (BrdU labeling) and apoptosis of hepatocytes were detected with immunostaining and TUNEL staining postoperative 24 h, 48 h, 72 h and 84 h,respectively. Liver graft-resident NK cell activity, hepatic IFN-y mRNA expression and recipient serum IFN-γ level at the time of the maximal liver allograft regeneration were measured with 51Cr release assay, semiquantitative RT-PCR and ELISA, respectively.RESULTS: Regeneration of liver allograft was markedly promoted by NF-κB decoy ODNs-modified immature DCs but was significantly suppressed by mature DCs, the DNA synthesis of hepatocytes peaked at postoperative 72 h in group A, group B and group E rats, whereas the DNA synthesis of hepatocytes peaked at postoperative 84 h in group C rats and 48 h in group D rats, respectively. The maximal BrdU labeling index of hepatocytes in group D rats was significantly higher than that in the other groups rats.NF-κB decoy ODNs-modified immature DCs markedly suppressed but mature DCs markedly promoted apoptosis of hepatocytes, liver-resident NK cell activity, hepatic IFN-γmRNA expression and recipient serum IFN-γ production. At the time of the maximal regeneration of liver allograft, the minimal apoptosis of hepatocytes, the minimal activity of liver-resident NK cells, the minimal hepatic IFN-γ mRNA expression and serum IFN-γ production were detected in group D rats. The apoptotic index of hepatocytes, the activity of liver- resident NK cells, the hepatic IFN-γ mRNA expression level and the serum IFN-γlevel in group D rats were significantly lower than that in the other groups rats at the time of the maximal regeneration of liver allograft.CONCLUSION: The data suggest that the augmented regeneration of partial liver allograft induced by NF-κB decoy ODNs-modified DCs may be attributable to the reduced apoptotic hepatocytes, the suppressed activity of liverresident NK cells and the reduced IFN-γ production.     

Simultaneous treatment of asthma and allergic rhinitis

Asthma and allergic rhinitis (AR) form a well-recognized comorbidity. This study aims at assessing the efficacy of nasally inhaled beclomethasone dipropionate (BDP) in their simultaneous treatment. A randomized controlled trial was conducted with 78 allergic rhinitis and asthma patients aged 5-17 years. Seventy-five individuals completed the study. During 8 weeks, 38 subjects received BDP-CFC aerosol (>or= 500 mcg/day) exclusively via nasal inhalation through a facemask attached to a plastic valved spacer. The control group (37 patients) received 200 mcg/day of aqueous intranasal beclomethasone plus oral inhalation of BDP-CFC (>or= 500 mcg/day) through a mouthpiece connected to the same spacer. Primary outcomes analyzed in order to assess the response to treatment were clinical scoring for allergic rhinitis and measurements of nasal inspiratory peak flow (NIPF). AR clinical scoring and NIPF did not differ in the two groups at admission or at nearly all follow-up visits. Nasal inhalation of beclomethasone dipropionate provides AR symptom relief while maintaining control of asthma by delivering it to the lungs. Therefore, this therapeutic strategy might be considered for patients suffering from this comorbidity, especially in low-resource countries, since it is less expensive than the conventional treatment.     

病毒性心肌炎患者血清sB7-H4、IFN-γ水平变化及意义

目的 观察病毒性心肌炎（VMC）患者血清可溶性B7-H4（sB7-H4）和γ-干扰素（IFN-γ）水平变化,并探讨其临床意义.方法 VMC患者46例（VMC组）,健康志愿献血者50例（对照组）,采用ELISA法检测两组血清sB7-H4、IFN-γ水平,并分析VMC组两项指标的相关性.结果 VMC组急性期B7-H4、IFN-γ水平分别为（43.41±3.58） μg/L、（1 673.47±493.66） ng/L,迁延期分别为（35.72±3.26） μg/L、（1283.51 ±441.53） ng/L,对照组分别为（33.23±2.56） μg/L、（1156.35 ±346.35） ng/L,VMC组急性期血清sB7-H4和IFN-γ水平均高于对照组（P均＜0.05）；VMC组血清sB7-H4和IFN-γ水平呈正相关（r=0.353,P=0.006）.结论 VMC患者sB7-H4、IFN-γ水平升高,sB7-H4表达下调可能参与了VMC的发病.     

幽门螺杆菌CagA对慢性胃炎患者血清IFN-γ、IL-4、TGF-β和IL-17A表达的影响

目的 探讨幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H.pylori） CagA蛋白对慢性胃炎患者外周血IFN-γ、IL-4、TGF-β和IL-17A表达的影响.方法 检测80例慢性胃炎患者血清中抗CagA抗体,取胃黏膜行病理检查,采用ELISA法检测血清中IFN-γ、IL-4、TGF-β和IL-17A的浓度.结果 CagA抗体阳性组中中性粒细胞的浸润程度显著高于阴性组,两组间H.pylori的菌密度差异无统计学意义,性别对上述因素无显著影响.CagA抗体阳性组血清IFN-γ、IL-17A的表达显著下降,而IL-4、TGF-β的表达显著上升.结论 慢性胃炎CagA 阳性患者的胃黏膜炎症程度更重,机体无法有效清除H.pylori在胃黏膜中的定植,其原因可能与CagA 阳性患者外周血中细胞因子IFN-γ、IL-17A表达水平下降,而IL-4、TGF-β表达水平上升有关.