硅胶柱色谱／RP—HPLC／LC—ESI—MS分离纯化鉴定拳卷地钱中芹菜素-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷

目的：建立分离纯化鉴定拳卷地钱中芹菜素-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷的硅胶柱色谱／RP—HPLc／LC—ESI—MS方法。方法：拳卷地钱叶经过80％乙醇提取后，减压蒸馏，得粗提物。拳卷地钱叶粗提物用甲醇溶解后上硅胶柱，用甲醇-氯仿配比为25：1，25：2，25：3……2：25，1：25混合溶液洗脱，各洗脱液进行RP—HPLC分析，较纯的洗脱液进行LC—ESI—MS分析，为制备分离黄酮类化合物单体提供指导。结果：氯仿与甲醇配比为25：15、25：16、25：17、25：18的洗脱液经过RP—HPLC分析为单一组分，tR为12．1min，与对照品芹菜素-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷共注射进行RP—HPLC实验，发现峰高增加，tR为12．1min，UV[λmax为336／296(sh)／267nm]和IR光谱与芹菜素-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷基本一致。LC—ESI—MS测定结果表明，与对照品芹菜素-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷的分子量相同为446。结论：由此可以鉴定该洗脱组分为芹菜素-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷。     

HPLC-DAD法测定苦碟子中木犀草素7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷和芹菜素7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷

目的利用HPLC—DAD法建立苦碟子中木犀草素7-O-β-D-葡萄糖苷（LGCOP）、木犀草素7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷（LGCRP）和芹菜素7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷（AGCRP）的测定方法。方法Diamonsil C18色谱柱（200mm×4．6mm,5μm）;流动相为（0．05％甲酸-水）-（0．05％甲酸-乙腈）;二元梯度洗脱：检测波长340nm;体积流量1．0mL／min;柱温35℃;进样量10μL。结果在选定色谱条件下线性关系良好（r≥0．9999）。平均回收率分别为100．5％、100．1％、100．8％,RSD值分别为O．4％、0．3％、0．7％。结论该分析方法能简便、快速地测定苦碟子中黄酮类成分,可为评价不同产地、药用部位及采收期的药材提供科学依据。     

HPLC测定苗药半截烂中芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的含量

目的:建立高效液相色谱法测定半截烂中芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷含量的方法。方法:采用色谱柱:phenomenex-C18(4.6×150mm,10μm),流动相:0.05%磷酸水:乙腈(80:20,V/V),流速:1.0m L/min,柱温:35℃,检测波长λ=350nm。结果:芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的回归方程为Y=3058927.58X+61.97,r=0.99951,表明芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷在0.2-0.14μg范围内线性关系良好。结论:所建立的方法简便、准确、重现性好可做为的测定方法。     

大鼠口服棉花皮素-8-O-β-D-葡萄糖醛酸苷后尿液中代谢产物研究

目的:研究大鼠口服棉花皮素-8-O-β-D-葡萄糖醛酸苷后尿液中的代谢产物。方法:健康大鼠口服250mg·kg-1棉花皮素-8-O-β-D-葡萄糖醛酸苷后,收集0～48h的尿样,经HPD-600大孔吸附树脂分离纯化后采用HPLC-DAD-MSn方法对尿样中的原形药物及其代谢产物进行分析及结构推测。结果:在大鼠尿液中检测到棉花皮素-8-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的6个主要代谢产物,根据负离子模式下电喷雾质谱的裂解规律、紫外光谱特征以及与标准品对照的方法,鉴定了其中1个代谢产物的结构,推测了其他5个代谢产物的结构,其代谢过程主要是葡萄糖醛酸化、脱葡萄糖醛酸以及甲基化等。结论:本文建立的方法快速、灵敏,可用于棉花皮素-8-O-β-D-葡萄糖醛酸苷及其体内外代谢产物的研究。     

HPLC-DAD同时测定洋甘菊中木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷和芹菜素-7-O-β-D葡萄糖苷的含量

目的建立同时测定洋甘菊中木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷和芹菜素7-O-β-D葡萄糖苷含量测定的HPLC方法。方法色谱柱:Agilent Zorbax SB-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:甲醇-0.2%磷酸(34∶66);流速:1.0 ml/min;柱温25℃;进样量10μl;检测波长:350 nm。结果木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷和芹菜素-7-0-β-D葡萄糖苷的线性范围分别为5.11~409.00、12.56~1 005.00μg/ml,相关系数r>0.999 3,具有良好的线性。精密度、稳定性符合要求,木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷和芹菜素-7-0-β-D葡萄糖苷加样回收率分别为96.44%~103.55%、95.12%~101.52%,RSD均为0.03%。结论该方法简便、准确、重复性好,适用于洋甘菊中木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷和芹菜素7-O-β-D葡萄糖苷含量测定。     

咖啡酸在大鼠体内两个葡萄糖醛酸结合物的分离与鉴定

目的研究咖啡酸在大鼠体内的代谢,并对咖啡酸在大鼠尿中两个葡萄糖醛酸结合物进行分离及结构鉴定。方法大鼠按100 mg/kg ig给予咖啡酸后收集尿样,以LC-MS/MS方法分析追踪代谢产物,采用大孔树脂、ODS开放柱、Sephadex LH-20和制备型高效液相色谱分离代谢产物。结果给药后尿样中检测到4种二相代谢产物,分别为2个咖啡酸葡萄糖醛酸结合物和2个咖啡酸硫酸结合物。结论咖啡酸在大鼠体内广泛代谢,首次采用分离方法获得2个咖啡酸葡萄糖醛酸结合物,并对其结构进行了鉴定。     

RP-HPLC法测定不同时期垂柳中木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷

垂柳Salix babylonica L．为杨柳科柳属植物，《中药大辞典》将垂柳的叶、枝和柳絮收载为中药。《本草纲目》中有记载：柳为本经下品，其性寒、味微苦，具有祛风、利尿、止痛、消肿的功能，可用于治疗风湿痹痛、淋病、白浊、水肿等症。现代临床上用于治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病、慢性气管炎、烧烫伤。据报道，柳叶中含有丰富的黄酮类化合物，其次是酚糖苷类化合物，还有多糖、有机酸等其他化合物，其中大多数柳树中均含有木犀草素及其糖苷，其中木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷具有多种药理活性，如抗生物氧化、抗炎、止痉、抗组胺的作用，以及抗癌、抗辐射等诸多生物活性。     

不同季节的葎草中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷和大波斯菊苷的含量测定

[目的】同时测定蓰草中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷和大波斯菊苷的含量。【方法】采用高效液相色谱法（HPLC）测定蓰草中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷和大波斯菊苷的含量,色谱柱kromasilC。以甲醇-0．2％磷酸溶液（45：55）为流动相,流速为1．0mL／min,柱温35℃,检测波长为350nm。【结果]木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷在0．072-0．36μg的范围内与峰面积积分值成良好的线性关系（r=0．9999）,精密度相对平均标准差（RSD）=2．06％,平均加样回收率为99．3％,RSD为2．8％;大波斯菊苷在0．05-0．40I．Lg的范围内与峰面积积分值成良好的线性关系（r=9997）,精密度RSD=1．73％,平均加样回收率为100．2％,RSD％为2．7％。捧草中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷的含量在7、8月份含量最高,大波斯菊苷在6月份含量最高。[结论】该方法简单、灵敏、稳定、可靠,可用于蓰草中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷和大波斯菊苷的含量测定。蓰草适宜的采收季节应在6～8月份。     

大鼠灌胃棉花皮素-8-O-葡萄糖醛酸苷后血清中药物的分析

目的 研究大鼠灌胃棉花皮素-8-O-葡萄糖醛酸苷后血清中药物的分析检测方法.方法 大鼠灌胃250mg/kg棉花皮素-8-O-葡萄糖醛酸苷,收集血样,进行适当的前处理,采用HPLC-DAD、LC-MSc法对血清样品进行检测.结果 HPLC-DAD和LC-MSn两种方法均能检测到血清中的棉花皮素-8-O-葡萄糖醛酸苷,但未能检测到其代谢产物.血清样品前处理中的离心转速、pH值、纯化方法对血清中棉花皮素-8-O-葡萄糖醛酸苷的分析检测有明显影响.结论 建立了大鼠灌胃棉花皮素-8-O-葡萄糖醛酸苷后血清中药物的快速灵敏的分析检测方法,为棉花皮索-8-O-葡萄糖醛酸苷的进一步药动学研究提供参考依据.     

HPLC测定南葶苈子中槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷的含量

目的:研究南葶苈子中槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷的含量测定方法,建立南葶苈子药材质量标准.方法:采用反相高效液相色谱法,以自制标准品作对照,对南葶苈子药材中主要有效成分槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷进行了含量测定.结果:回收率为99.78%,RSD为2.4%.结论:该方法可用于南葶苈子药材的质量控制.     

黄芩中黄酮类成分的分离鉴定及其体外对凝血系统的影响

目的 研究黄芩Scutellaria baicalensis中的黄酮类成分及其对体外凝血系统的影响.方法 使用反复硅胶柱色谱进行分离纯化,并根据其理化性质和波谱数据鉴定结构.通过测定黄酮类成分对凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、纤维蛋白量(FIB)的影响研究其体外凝血活性.结果 从黄芩的乙醇提取物中分离得到12个黄酮类化合物,分别鉴定为黄芩素(1)、汉黄芩素(2)、千层纸素A(3)、韧黄芩素-Ⅰ (4)、黄芩黄酮-Ⅱ (5)、5,7,2′,5′-四羟基-8,6′-二甲基黄酮(6)、5,7-二羟基-6-甲氧基二氢黄酮(7)、5-甲氧基-7-羟基二氢黄酮(8)、黄芩苷(9)、汉黄芩素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯(10)、汉黄芩素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸丁酯(11)、木蝴蝶素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸丁酯(12).所有化合物均对FIB没有影响,部分化合物能显著缩短TT、PT,同时能显著延长APTT.结论 化合物11和12为新化合物.黄芩中黄酮类化合物体外对凝血系统有双向调节作用,其对凝血系统的不同作用体现在凝血过程的不同环节.     

春柴胡中槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷的单体制备与含量测定研究

目的 分离制备春柴胡中特征化学成分并建立含量测定方法.方法 采用聚酰胺柱色谱,制备薄层色谱,Sephadex LH - 20柱色谱分离纯化,利用波谱技术(LC-MS,UV,1H-NMR)进行结构鉴定;采用高效液相色谱法分析,色谱柱 Kromasil C18(4.6 mm ×250 mm, 5 μm),流动相甲醇- 0.5%醋酸(43∶57,V/V),检测波长365 nm.结果 从春柴胡正丁醇萃取部位分离得到一化合物,鉴定为槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷;槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷的线性范围为4.375～140 μg·ml-1,r= 0.999 8;平均回收率为98.43%,RSD为2.26% (n=6).结论 槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷化合物系首次从该柴胡属植物中分离得到,建立的春柴胡中槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷高效液相色谱含量测定方法,简便、准确可靠,可用于春柴胡药材的质量控制.     

HPLC法测定板蓝根中落叶松脂素-4,4′-二-O-β-D-二葡萄糖苷

目的 建立板蓝根药材抗病毒活性成分落叶松脂素-4,4'-二-O-β-D-二葡萄糖苷(直铁线莲宁B,clemastanin B)的定量测定方法.方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为Lichrospher-C18柱,流动相:甲醇-乙腈-水(24;1:75),体积流量:1.0mL/min;紫外检测波长:280 nm.结果 测定了板蓝根主要产地药材中落叶松脂素-4,4'-二-O-β-D-二葡萄糖苷的量,平均质量分数为0.041%,加样回收率为98.8%,RSD为0.60%.结论 本方法简便、灵敏、结果可靠,可作为板蓝根药材质量控制的定量方法.     

蓝刺头及蓝红胶囊中芹菜素-7-O-葡萄糖苷的测定

目的建立蓝刺头及其制剂蓝红胶囊(蓝刺头、三七、杜仲、红花和珍珠)中蓝刺头的质量控制方法。方法采用HPLC法对蓝刺头和蓝红胶囊中芹菜素-7-O-葡萄糖苷进行定量测定。色谱柱为C18柱,以乙腈-醋酸铵缓冲盐水溶液(21∶79)为流动相;柱温25℃;体积流量1 mL/min;检测波长为340 nm。结果芹菜素-7-O-葡萄糖苷在0.228²2.8μg/mL范围内线性关系良好,蓝刺头药材的平均回收率为100.8%,RSD为1.4%;蓝红胶囊的平均回收率为99.0%,RSD为1.0%。芹菜素-7-O-葡萄糖苷从蓝刺头药材至蓝红胶囊的转移率均值为72.4%。结论蓝刺头及蓝红胶囊均以80%甲醇为提取溶剂,回流4 h时得到的提取物分析效果最佳。     

藏紫菀化学成分的研究(Ⅱ)

目的研究藏紫菀的化学成分。方法采用硅胶、大孔树脂和Sephadex LH-20柱等进行分离纯化,用物理、化学和光谱学方法鉴定化合物的结构。结果分离并鉴定出10个化合物,分别为齐墩果酸(1)、香草酸(2)、异鼠李素(3)、山柰酚(4)、槲皮素(5)、大波斯菊苷(6)、槲皮素3-O-(6″-O-E-咖啡酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、芦丁(8)、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸正丁酯(9)、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷(10)。结论除化合物8以外,其余均为首次从该种植物中分离得到。     

不同产地及采收期的葎草中木犀草苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素定量比较研究

目的建立HPLC法同时测定葎草中木犀草苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素量,并测定不同产地、不同采收月份、雌株和雄株葎草中木犀草苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素的量,为葎草质量标准研究提供科学依据。方法 HPLC法同时测定葎草中木犀草苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素的量。系统适用性条件,色谱柱为Agilent 5 TC-C_(18)(250 mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱;体积流量1.0mL/min;检测波长340nm;柱温25℃;进样量10μL。结果木犀草苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素的检测质量浓度分别在4.640~74.24、1.510~30.20、0.796 3~12.74μg/mL与各自峰面积值呈良好线性关系(r=0.999 2、0.999 9、0.999 5),精密度、稳定性、重复性试验的RSD均≤1.99%,平均回收率分别为102.69%、100.49%、100.39%,RSD分别为1.64%、1.93%、1.65%(n=9)。结论在河北省不同产地、不同采收月份、雌株、雄株葎草药材中,木犀草苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素的量存在较大差异。     

杏香兔耳风化学成分研究

目的 研究兔耳风属植物杏香兔耳风Ainsliaea fragrans的化学成分。方法 采用溶剂萃取、大孔吸附树脂、硅胶、ODS柱色谱以及HPLC等技术进行化学成分分离纯化,运用核磁共振等波谱数据分析鉴定化合物结构。结果 从杏香兔耳风乙醇提取物中分离得到20个化合物,分别鉴定为3β-O-β-D-glucopyranosyl-8α-hydroxy-11α,13-dihydrozaluzanin C(1)、岩白菜素（2）、glucozaluzanin C(3)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯（4）、costunolide-15-β-D-glucopyranoside(5)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷（6）、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷（7）、芹菜素-6,8-二-C-葡萄糖苷（8）、绿原酸（9）、1,3-O-二咖啡酰奎宁酸（10）、3-O-反式对羟基香豆酰奎宁酸（11）、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷（12）、木犀草素（13）、原儿茶酸（14）、5-O-顺式对羟基香豆酰奎宁酸（15）、1-O-咖啡酰奎宁酸（16）、隐绿原酸（17）、5-O-反式对羟基香豆酰奎宁酸...     

HPLC法测定板蓝根中落叶松脂素-4,4′-二-O-β-D-二葡萄糖苷

目的建立板蓝根药材抗病毒活性成分落叶松脂素-4,4′-二-O-β-D-二葡萄糖苷(直铁线莲宁B,clemas-tanin B)的定量测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Lichrospher-C18柱,流动相:甲醇-乙腈-水(24∶1∶75),体积流量:1.0 mL/min;紫外检测波长:280 nm。结果测定了板蓝根主要产地药材中落叶松脂素-4,4′-二-O-β-D-二葡萄糖苷的量,平均质量分数为0.041%,加样回收率为98.8%,RSD为0.60%。结论本方法简便、灵敏、结果可靠,可作为板蓝根药材质量控制的定量方法。     

何首乌中大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的分离纯化与抗癌活性研究

目的:建立对何首乌中大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷分离纯化的方法,以及研究其抗癌活性。方法:何首乌中药材粉末先经乙醇回流提取、氯仿回流提取、乙酸乙酯回流提取后,再经D101大孔吸附树脂柱,70%Me OH洗脱,得到化合物I,经1H-NMR、13C-NMR确定该化合物的结构。采用MTT比色法抗癌活性筛选试验对化合物I作抗苯并芘等致癌活性的筛选。结果:经1H-NMR、13C-NMR谱图分析,确定化合物I为大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷,该化合物对苯并芘致癌具有抑制活性。结论:该分离纯化方法准确、可靠;大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷抗癌活性的证实,对其药理活性研究具有重要意义。 更多还原     

PR-HPLC法测定甘肃蚤缀中苜蓿素、苜蓿素愈创木基甘油基酯、异牡荆素、异金雀花素和苜蓿素-7-O-β-D-葡萄糖苷

建立HPLC法对甘肃蚤缀中苜蓿素、苜蓿素-4′-O-β-愈创木甘油基酯、异牡荆素、异金雀花素和苜蓿素-7-O-β-D-葡萄糖苷同时定量的方法。方法采用反相高效液相色谱法。色谱柱为DiamonsilTMC18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0。5%磷酸梯度洗脱,体积流量为1.0mL/min,柱温为30℃,检测波长为350nm,进样量为10μL。结果苜蓿素、苜蓿素-4′-O-β-愈创木基甘油基酯、异牡荆素、异金雀花素和苜蓿素-7-O-β-D-葡萄糖苷5个化合物达到基线分离且线性关系良好,线性范围分别为5。44～97.92μg/mL(r=0.9992)、4.76～85.68μg/mL(r=0.9992)、6.52～117.36μg/mL(r=0.9996)、4.92～88.56μg/mL(r=0.9998)、1.60～29.34μg/mL(r=0.9991),平均加样回收率分别为100.21%(RSD=1.94%)、7.50%(RSD=2.50%)、100.38%(RSD=2.46%)、98.54%(RSD=2.40%)、97.45%(RSD=3.14%)。结论测定了4种来源的甘肃蚤缀样品中5个化合物的量,该方法分离度好、快速、简便,重现性佳。