曲克芦丁脑蛋白水解物过敏反应1例

病例男,63岁,因血压偏高,伴头懵入院。入院查体：T 36℃,P 78次/min,R 18次/min,BP 130/80 mmHg。胸廓对称无畸形,双肺叩诊呈清音,听诊双肺呼吸音清晰,未闻及干湿性啰音。2003年8月以＂脑梗死＂住院治疗,目前无明显后遗症。患者既往无药物过敏史。入院诊断：     

脑蛋白水解物提取液—氨基酸及肽复合物的研究

肽类生长因子与多种状态如生长、分化、免疫、肿痛、造血、创伤愈合、胚胎发育、神经损伤修复等有关,在体内发挥着极其广泛的生物学作用,因而受到广泛重视。奥地利依比威药厂生产的脑活素就是一种具有器官特异性的天然生物制剂,其主要成分为约85％的游离氨基酸和约15％的氨基酸结合成的低分子肽。近年来我国大量进口此药,在临床上广泛应用于脑血管代偿不足所引起的功能失调、中风、脑动脉硬化、脑梗塞、小脑萎缩、老年性痴呆等疾病。为了充分利用我国丰富的动物脑资源,进一步探讨其临床作用和营养价值,我们研究了脑蛋白水解物提取液。     

脑蛋白水解物组份测定及对小鼠缺氧和东莨菪碱所致记忆障碍的影响

目的：研究脑蛋白水解物的组份测定及小鼠缺氧和记忆障碍的疗效。方法：用氨基酸分析仪，高效液相色谱仪，ＳＤＳ凝胶电泳和琥珀酸脱氢酶法测定脑蛋白水解物的组成与活性。用常压耐缺氧实验和记忆获得障碍法测定蛋白水解物的疗效。结果：脑蛋白水解物的氨基酸与小分子肽的比例分别为８０％与２０％左右，脑蛋白水解物能增强脑细胞琥珀酸脱氢酶活性并对动物缺氧及记忆再现障碍有明显的改善作用。结论：脑蛋白水解物富含人脑必须氨基酸及小分子肽，能改善脑细胞功能活性。     

猫多巴胺转运蛋白PET脑显像研究

目的:制备多巴胺转运蛋白显像剂~(18)F-FP-βCIT[~(18)F-N-(3-氟丙基)-2β-甲酯基-3β-(4’-碘苯基)去甲基托烷],并进行猫PET脑显像。材料和方法:~(18)F-FP-βCIT的制备应用一步法:用K_(222)催化发生亲核氟化反应,得到~(18)F-FP-βCIT。PET显像仪器为Siemens ECAT HR~+ PET仪,3只健康正常猫进行~(18)F-FP-βCIT PET脑动态显像,观察纹状体体区放射性计数随时间的变化,并进行半定量分析。结果:~(18)F-FP-βCIT总放化合成时间为60～90min,时间校正后放化产率为2％～10％,放化纯度平均为96.3％,tR=3.38±0.20min。PET显像示早期(15min内)猫脑皮质及纹状体可见显影,随显像时间延长,脑皮质放射性减退,而纹状体显影更为清晰,30min纹状体/小脑比值达2.59±0.16,60min、90min及120min时此比值分别为2.73±0.23、2.52±0.13、2.08±0.11。结论:~(18)F-FP-βCIT是一种理想的PET多巴胺转运蛋白显像剂,可利用PET进行猫的脑受体方面的研究。     

曲克芦丁脑蛋白水解物注射液治疗椎—基底动脉供血不足60例临床观察

目的观察曲克芦丁脑蛋白水解物注射液治疗椎—基底动脉供血不足的疗效。方法将120例椎—基底动脉供血不足患者随机分为治疗组与对照组各60例,治疗组(曲克芦丁脑蛋白水解物注射液联合复方丹参注射液)和对照组(胞二磷胆碱注射液加复方丹参注射液)。每天静脉滴注1次,治疗10天。结果治疗组起效快,总有效率93.3%,对照组起效慢,总有效率为70.0%,2组比较差异有非常显著意义(P<0.01)。结论曲克芦丁脑蛋白水解物注射液治疗椎—基底动脉供血不足疗效明显。     

脑红蛋白重组腺病毒表达载体的构建与鉴定

目的：为进一步研究脑红蛋白（NGB）的生理功能并为基因治疗缺血性脑损伤提供有效的表达载体，应用细菌内同源重组方法分别构建含NGB及绿色荧光蛋白（GFP）基因的重组腺病毒表达载体，并对其进行鉴定。方法：用电转方法将腺病毒基因组质粒pAdEasy-1导入BJ5183细菌，制备BJ5183-pAdEasy-l细菌，再以后者作为电感受态细菌，与线性化质粒pShuttle-CMV-NGB进行同源重组，获得重组腺病毒质粒pAdEasy-NGB，转染293细胞。制备含脑红蛋白基因的重组腺病毒。结果：通过PCR、序列测定和Western印迹杂交鉴定，确认该重组腺病毒表达载体可正确表达脑红蛋白。结论：成功地构建了表达NGB基因的重组腺病毒载体，为深入开展脑红蛋白的功能研究以及用于缺血性脑损伤疾病的基因治疗奠定了基础。     

急性脑静脉闭塞CT灌注成像的实验研究

目的观察脑静脉闭塞模型脑实质损害区CT灌注成像（CTP）变化规律,探讨该模型在该病研究中的价值。方法新西兰大白兔28只,随机分为2组（实验组24只,对照组4只）。一侧颈内静脉注入醋酸纤维素聚合物（CAP）合并双侧颈外静脉结扎术后1、3、6、12、24和48h行CTP检查对各组模型的脑血流动力学改变进行观察。结果实验组21只造模成功,其中3h及12h组各有1只在CTP上无明显异常表现,有19只CTP检查示脑血流灌注异常。术后1～3h,病变区脑血容量（CBV）轻度增加或正常,脑血流量（CBF）轻度降低,平均通过时间（MTT）稍延长;6～12h后病变中心区主要表现为CBV和CBF降低,MTT延长,而病变边缘区CBV增加或正常或轻度降低,CBF降低,MTT缩短;12～24h后病变中心区和边缘区CBV和CBF均明显降低,MTT明显延长。各时段病变中心区和边缘区的CBV%、CBF%、MTT%的差异均有统计学意义（P值均〈0.05）。对照组未见上述各种异常表现。结论 CT灌注成像可准确、敏感地反映急性脑静脉闭塞模型的血流动力学改变。     

对比剂铁羧葡胺在正常兔MR脑灌注的初步实验研究

目的 探讨铁羧葡胺(Resovist)应用于脑MR灌注加权成像(PWI)的可行性、给药方法以及最佳剂量.方法 健康新西兰大白兔30只,随机数字法平均分为A、B、C、D、E组.其中A、B、C、D 4组分别给予4、8、16、32 μmol Fe/kg;E组设为对照,给予0.2 mmol/kg的钆喷替酸葡甲胺(Gd-DTPA).所有动物均行MR PWI,获得相应信号强度一时间曲线图,并分别计算脑灰质、白质的最大信号下降百分比(SRRmax)、局部脑血容量(rCBV)和灰质与白质rCBV之比(QRCBV)、SRRmax之比(QRR max).所得数据,根据资料性质,行配对t检验和单因素方差分析.结果 Resovist能快速团注,4组均获得满意的信号强度一时间曲线图;4种剂量的Resovist对实验兔脑灰质和白质均有良好的分辨率.A、B、C、D、E 5组脑灰质和白质的rCBV分别为(50.48±3.84)、(25.57±2.10),(94.69±2.60)、(45.33±3.14),(141.13±6.26)、(67.67±4.65),(243.75±5.90)、(162.06±5.14),(84.60±3.60)、(41.36±2.18)ml/100 g;灰质和白质的SRRmax分别为:(13.70±1.50)%、(7.38±0.41)%,(31.01±4.06)%、(16.49±2.35)%,(43.81±3.42)%、(21.64±4.14)%,(64.49±5.35)%、(43.61±5.78)%,(27.78±2.98)%、(14.42±2.25)%;各组脑灰质与白质检测数据比较差异均有统计学意义(P值均<0.01).A、B、C、D、E 5组QrCBV分别为1.98±0.07、2.09±0.11、2.09±0.07、1.50±0.01、2.05±0.03;QSRRmax分别为:1.85±0.11、1.88±0.06、2.06±0.25、1.49±0.09、1.94±0.12;5组间差异均有统计学意义(QrCBV的F值为85.076,QSRR max的F值为13.915,P均<0.01).A、B、C 3组QrCBV值和QSRR max值差异无统计学意义(P>0.05);而D组QrCBV值和QSRR max值显著低于A组(P<0.01).结论 Resovist应用于MR脑灌注是可行的,适宜剂量4～16 μmol Fe/kg.     

恒河猴实验性变态反应性脑脊髓炎MR波谱与组织病理及超微结构改变的对照研究

目的　研究非人类灵长类实验性变态反应性脑脊髓炎 (EAE)磁共振波谱 (MRS)改变的组织病理学基础。方法　 9只恒河猴 ,用同源猴脑白质或纯牛髓鞘碱性蛋白 (MBP)与完全福氏佐剂(CFA)的混合剂皮下注射诱导EAE ,对其发病前后进行自身配对对照研究 ,定量分析N 乙酰天门冬氨酸 /肌酸 (NAA/Cr)、胆碱复合物 /肌酸 (Cho/Cr)的参数变化 ,通过光学显微镜及透射电镜观察相对应组织的病理及超微结构改变。结果　急、慢性EAE的MRS测定均有NAA/Cr下降 (t值分别为 68 66和5 69,P值均 <0 0 5) ,统计学上差异有显著性意义。两者超微结构均观察到了轴索的空泡样变性及脂褐素颗粒的增加 ;急性EAE组织学表现为明显的炎性反应、严重区域髓鞘破坏和消失。慢性EAE炎性反应较轻 ,以脱髓鞘改变为主。慢性EAE同时伴有Cho/Cr的增高 (t=3 48,P <0 0 5) ,统计学上差异也有显著性意义 ,超微结构具有明显的脱髓鞘改变。结论　MRS定量分析可用于判定EAE脑部病变分期及预测组织病理学改变特征     

脑蛋白水解物动物长期毒性实验

目的观察脑蛋白水解物对动物的毒性作用。方法按常规方法用犬和大鼠进行长期毒性实验。结果用药动物体重、主要器官重量、血液学指标均在正常范围内,血液生化学指标及组织病理学检查与对照组无明显差异。结论脑蛋白水解物无毒副作用。     

原发性脑淋巴瘤的影像学表现与病理学对照研究

目的:探讨原发性脑淋巴瘤的CT、MRI表现特征及病理基础。方法:回顾性分析9例经病理证实的原发性脑淋巴瘤的CT、MRI资料,并与病理资料进行对照分析。结果:9例中4例为单发,5例多发,共有15个病灶,幕上13例,幕下2例,其中位于脑室旁深部白质的病灶7个,占46.6%,位于脑表面及灰白质交界区4个,占26.6%,位于小脑部2个,占13.3%。原发性脑淋巴瘤的影像学形态多为类圆形肿块或结节,瘤周多为轻中度水肿。CT平扫表现为等或稍高密度,增强扫描呈团块状、结节状均匀强化;MR平扫T1WI等或稍低信号,T2WI呈高信号;增强扫描显示病灶呈团块状或结节状均匀性明显强化。病理上肿瘤细胞均呈弥漫密集分布,瘤细胞大小较一致,胞质及水分少,核大,染色质颗粒粗,可见瘤细胞围绕血管呈袖套样浸润,未见明显的出血及坏死,亦未见钙化。网状纤维染色显示纤维结构较丰富,此种病理组织学特点决定了淋巴瘤具有一定的影像学特点。结论:原发性脑淋巴瘤的病理学基础决定其CT、MRI表现特征,结合其影像学表现和临床资料多可做出正确诊断。     

复方曲肽对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:研究复方曲肽对大鼠缺血再灌注损伤的保护作用。方法:将雄性SD大鼠随机分为正常对照（normal control,NC）组、大脑中动脉闭塞再灌注（middle cerebral artery occlusion reperfusion,MCAO/R）组及MCAO/R+复方曲肽[MCAO/R+(troxerutin and cerebroprotein,TC)]组3组（每组10只）。缺血1 h再灌注23 h后,各组取6只动物接受神经功能评分后进行MRI检查,随后处死行2,3,5-三苯基氯化四氮唑染色检测脑梗死体积;各组另4只动物处死,免疫蛋白印迹检测缺血半暗带中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(cysteinyl aspartate specific proteinase 1,Caspase 1)、Caspase 3及Caspase 8的表达。结果:MCAO/R组术后动物均出现了脑梗死病灶及神经功能的损伤,复方曲肽治疗可减小脑梗死体积并改善神经功能。MCAO/R组缺血半暗带中Caspase 1、Caspase 3、Caspase 8表达显著高于NC组（P<0.05）,MCAO/R+TC组Caspase 1、Caspase 3、Caspase 8表达低于MCAO/R组（P<0.05）。结论:复方曲肽对缺血再灌注损伤具有明显的保护作用,其机制与复方曲肽抑制细胞凋亡相关基因表达从而达到抗凋亡作用有关。     

半乳糖基人生长激素的肝靶向机理研究

探讨半乳糖基人生长激素（ｈＧＨＧａｌ）作为受体介导肝靶向促生长介素（ＳＯＭ）分泌，以治疗侏儒症的可能性。利用双功能试剂亚氨基甲氧基乙基硫代半乳吡喃糖甙和人生长激素（ｈＧＨ）偶联合成ｈＧＨＧａｌ。以１３１Ｉ标记ｈＧｈＧａｌ和ｈＧＨ后，进行小鼠体内分布实验、家兔显像实验的对比研究及１３１ＩｈＧＨＧａｌ鸡显像和家兔体内竞争结合实验。结果：ｈＧＨＧａｌ具有明显的趋肝性，肝最大摄取率为７５２７％～７７４０％，是ｈＧＨ的２倍以上，与肝脏的结合具有受体介导特性。表明ｈＧＨＧａｌ是一种很有希望的受体介导肝靶向促ＳＯＭ分泌及治疗侏儒症的新药。     

Pharmacological studies on meprobamate incorporation in human beard hair

Summary The time course of appearance of meprobamate in beard hair after single oral administration (400, 800, or 1200mg) was monitored in 3 groups of 4 subjects by GC/MS. Meprobamate appeared in beard hair approximately 4–5 days after administration and peaked during the 7–9th day. Drug levels in beard hair appeared to be dose-related.     

无POU域八聚体结合蛋白基因的克隆及其在Hepa1-6细胞内的表达

目的构建小鼠无POU域八聚体结合蛋白(non-POU-domain-containing,octamer binding protein,NonO)真核表达载体并在小鼠Hepa 1-6肝癌细胞内表达,观察NonO胞内表达、定位及脂多糖(LPS)对其定位的影响。方法提取小鼠肝组织总RNA,RT-PCR扩增小鼠NonO基因的蛋白编码序列。采用基因重组技术将其亚克隆至pcDNA3-HA真核表达载体中,将该载体瞬时转染Hepa1-6细胞,通过细胞免疫荧光方法观察NonO的胞内表达及LPS对其定位的影响。结果酶切和DNA测序证明所构建质粒正确;细胞免疫荧光可见NonO在Hepa 1-6细胞内表达、分布于细胞核,LPS刺激后NonO分布无明显变化。结论成功构建NonO真核表达载体,为研究NonO在基因表达调控中作用及其生物功能提供了重要载体。进一步证实NonO为定位于细胞核的核蛋白。     

多巴胺转运蛋白显像剂^99Tc^m—TRODAT—1临床前药理研究

目的 研究多巴胺转运蛋白（DAT）显像剂^99Tc^m－2β-[N,N‘-双（2－巯乙基）乙撑二胺基]甲基,3β-（4-氯苯基）托烷（TRODAT－1）用于帕金森病（PD）早期诊断的价值。方法 制备^99Tc^m－TRODAT－1,用2β－羧甲基,3β-（4-碘苯基）托烷（β－CIT）阻断DAT后,观察大鼠脑内分布、兔血药清除动力学、异常毒性实验、正常及PD模型 的放射自显影图并对志愿者进行显像。结果 制备的^99Tc^m－TRODAT－1放化纯大于90％,室温下h稳定;用β－CIT阻断后大鼠纹状体的特异性摄取即纹状体与离放射性计数差除以小脑放射性计数为0.12（对照组为3.45）,表明β－CIT对^99Tc^m－TRODAT－1有明显的竞争抑制作用。血药清除动力学研究表明它的分布半衰期T1／2（α)=1.2min,消除半衰期T1／2（β）=368min。模型鼠的放射自显影结果表明纹状体的特异摄取随着给药（神经毒素）总量的增加而减少,并有良好的线性关系（r=-0.9792）。正常猴断层显像在3个断面上基底节均有明显高于周围组织的摄取,单侧PD模型猴显像示健侧纹状体与小脑的比值（1.56）明显高于损毁侧比值（0.94）。志愿者脑断层单侧PD模型猴显像示健侧纹状体与小脑的比值（1.56）明显高于损毁侧比值（0.94）。志愿者脑断层图像清晰,患侧纹状体对^99Tc^m－TRODAT－1摄取较正常侧减低,其显像结果分析与临床表现相吻合。结论 ^99Tc^m－TRODAT－1制备方便,体外稳定,毒性低,用于人非常安全;纹状体与小脑、大脑皮质的比值高,有利于获得清晰的图像。     

大鼠严重烧伤早期血浆TM/PC/PS的动态变化

目的　旨在初步探讨大鼠严重烧伤早期 (伤后 2 4小时 )血栓调节蛋白、蛋白C和蛋白S的动态变化。方法　采用大鼠TBSA 3 0 %III度烧伤模型 ,随机分为烧伤组和正常对照组 ,观察大鼠烧伤后 1,3 ,6,12 ,2 4小时血栓调节蛋白、蛋白C和蛋白S血浆水平的变化。结果　大鼠烧伤后 1小时血浆血栓调节蛋白水平开始升高 ,于伤后 3小时达到峰值 ,以后逐渐下降 ,至伤后 2 4小时仍高于正常对照组。大鼠烧伤后血浆蛋白C水平在伤后 3小时有一短暂上升过程 ,此后逐渐下降 ,至 2 4小时降至最低水平。大鼠烧伤后 2 4小时内总蛋白S血浆水平持续低于正常对照组。结论　大鼠严重烧伤早期血栓调节蛋白 蛋白C 蛋白S抗凝途径发生显著变化 ,它不仅是烧伤早期血管内皮受损的标志 ,而且可能参与了严重烧伤后血栓和DIC的形成。     

人源性抗食管癌细胞单链抗体的表达纯化及活性鉴定

目的研究噬菌体抗体库中筛选得到的抗食管癌细胞的单链抗体的功能,对单链抗体进行包涵体表达纯化。方法将从噬菌体抗体库中筛选到的2个单链抗体基因分别连接到pET-28a、pET-SUMO原核表达载体中,分别构建原核表达重组载体pET-NFC20b、pET-NFC70a,将其转化至大肠杆菌E.coli BL21(DE3)表达系统中进行融合表达,对诱导剂异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷（isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG）浓度、诱导时间和温度等诱导表达条件进行优化。采用盐酸胍稀释滴定复性方法对抗食管癌肿瘤细胞表面抗原的抗体进行复性,并用SDS-PAGE及质谱技术鉴定表达产物。结果成功构建了重组载体pET-NFC20b、pET-NFC70a,对重组菌株pET-NFC20b、pET NFC70a蛋白表达进行鉴定,诱导条件为0.5 mmol/L IPTG、时间3 h、温度18 ℃,重组蛋白均以包涵体形式表达,经滴定复性后均获得了相对分子量为30 kD和40 kD的重组蛋白。细胞ELISA实验鉴定2种蛋白NFC20b、NFC70a能与KYSE-170、KYSE-150、SMMC7721、A549等细胞结合,具有生物学活性。结论噬菌体抗体库中筛选得到的抗食管癌细胞的单链抗体NFC20b和NFC70a,可以成功地构建到pET28a和pET-SUMO载体内进行包涵体表达,纯化后具有蛋白活性,可为后续实验及检测试剂的研发奠定基础。     

鳀鱼蛋白酶水解物的营养成分分析及评价

目的 测定鳀鱼蛋白酶水解物的一般成分、氨基酸、脂肪酸、7种微量元素的含量,评价其化学成分,为进一步的功能研究提供参考.方法 采用化学分析,氨基酸、脂肪酸组成分析,微量元素分析等方法.结果 鳀鱼蛋白酶水解物粗蛋白含量为71.2%,粗脂肪含量为0.1%,总糖含量为1.5%,并含有17种氨基酸、5种脂肪酸及7种微量元素.结论 鳀鱼蛋白酶水解物氨基酸、微量元素含量丰富,是值得进一步研究的海洋生物制品.