肿瘤干细胞相关基因Bmi-1和POU5F1在子宫颈癌中的表达及临床意义

目的 探讨肿瘤干细胞相关基因Bmi-1、POU5F1在子宫颈癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法 采用实时荧光定量PCR（QRT-PCR）检测69例子宫颈癌组织和16例子宫颈癌组织及其配对的癌旁新鲜组织标本中Bmi-1 mRNA、POU5F1 mRNA的表达水平。结果子宫颈癌组织中Bmi-1 mRNA、POU5F1 mRNA相对表达量分别为1.51±0.05和1.75±0.17,高于配对癌旁组织的1.16±0.17和1.46±0.18,差异均有统计学意义（P＜0.05）。Bmi-1 mRNA、POU5F1 mRNA在宫颈癌组织与配对癌旁组织中表达的倍比关系分别为1.31±0.49和1.20±0.95。Bmi-1 mRNA表达与民族、淋巴结转移、临床分期及组织学分级有关（P＜0.05）,而与年龄、肿瘤大小及病理类型无关（P＞0.05）。POU5F1 mRNA表达与民族、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期及组织学分级有关（P＜0.05）,而与年龄及病理类型无关（P＞0.05）。结论 肿瘤干细胞相关基因Bmi-1、POU5F1在子宫颈癌组织中高表达,两者可能与子宫颈癌的不良生物学特性关系密切,可作为评估子宫颈癌生物学行为的潜在分子标志物。     

转录因子POU5F1在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨转录因子POU5F1在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法 收集2011年1月至2013年7月142例手术切除的结直肠癌组织及86例癌旁黏膜组织存档蜡块。采用免疫组化SP法检测以上组织中POU5F1的表达情况,并分析其与临床病理特征的关系;根据随访资料分析POU5F1表达与预后的关系,采用Cox比例风险模型分析影响预后的因素。结果 POU5F1阳性表达定位于细胞核和胞质。其在结直肠癌中的高表达率为47.2％（67／142）,高于癌旁黏膜组织的23.3％（20／86）,差异有统计学意义（P<0.05）;POU5F1表达与性别、年龄、肿瘤部位、远处转移、CEA、CA50及CA199均无关,与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期及分化程度有关（P＜0.05）;结直肠癌患者中POU5F1高表达者的中位总生存时间（OS）为26.4个月,低于低表达者的33.6个月,差异有统计学意义（P＜0.05）。Cox比例风险模型分析显示,浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期和POU5F1表达为影响OS的独立因素。结论 POU5F1在结直肠癌组织中表达增高,且与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、分化程度及OS有关,在结直肠癌诊断及预后预测中有一定价值。     

沉默长链非编码RNA POU5F1B抑制食管癌细胞增殖、侵袭和迁移

目的:探讨长链非编码RNA POU5F1B在食管癌细胞中的表达及临床意义。方法:采用实时定量PCR法比较POU5F1B在食管癌患者血浆和正常人血浆中的表达,检测POU5F1B在细胞系中的表达。敲除POU5F1B后,采用CCK-8和克隆形成试验评价沉默POU5F1B对细胞增殖的影响。采用Transwell和划痕实验检测POU5F1B对食管癌细胞侵袭和迁移的影响。结果:本研究中,我们发现POU5F1B在食管癌患者血浆中和细胞系中高表达。si-POU5F1B在体外能显著降低细胞增殖、侵袭和迁移能力。结论:本研究表明POU5F1B在食管癌中充当癌基因作用,为抗食管癌治疗提供了新的策略。     

新疆维吾尔族妇女子宫颈癌DBC1基因启动子甲基化分析

背景与目的：近年来,表观遗传学研究已经成为癌症研究的一个新方向。大量研究结果显示,表观遗传修饰的异常改变与癌症有着十分密切的联系,全基因组范围内的表观遗传修饰改变已经成为癌症的新标志。该研究旨在探讨膀胱癌缺失基因1(deleted in bladder cancer 1,DBC1)启动子甲基化与新疆维吾尔族妇女子宫颈癌的关系及与人类乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染的相关性,分析其能否作为高敏感性及特异性的工具用于子宫颈癌筛选。方法：用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)方法对43例正常子宫颈组织、35例子宫颈上皮内瘤样变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)组织以及54例子宫颈癌组织进行HPV16、HPV18感染的检测;运用甲基化特异性PCR方法检测上述组织DBC1基因启动子甲基化状况;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)方法检测10例甲基化阴性的正常子宫颈组织和10例甲基化阳性的子宫颈癌组织中DBC1基因mRNA表达情况。结果：正常子宫颈组织、CIN组织及子宫颈癌组织中HPV16的感染率分别为18.6%、34.3%和68.5%;HPV18的感染率分别为2.3%、8.6%和16.7%;DBC1基因发生甲基化率分别为23.3%、40.0%和87.0%;在79例高级别宫颈损伤及子宫颈癌样本中,其中50例HPV16/18感染阳性,29例HPV16/18感染阴性;阳性组中DBC1基因发生甲基化率88.0%,阴性组甲基化率为55.2%(P<0.05);10例甲基化阳性子宫颈癌组织中DBC1基因mRNA表达水平明显低于10例甲基化阴性正常子宫颈组织(P<0.05)。结论：DBC1基因甲基化可能作为新疆维吾尔族妇女子宫颈癌的分子标志物,结合HPV16/18感染检测有助于子宫颈癌的诊断。     

CEA和MUC-1mRNA在大肠癌中的表达及临床意义

[目的]探讨大肠癌患者外周血中CEA、MUC-1 m RNA的表达及临床意义。[方法]应用巢式RT-PCR技术检测20名健康人、20例大肠腺瘤疾病患者和90例大肠癌患者外周血CEA m RNA和MUC-1 m RNA的表达。[结果]大肠癌患者CEA m RNA和MUC-1 m RNA表达的阳性率分别为53.3%(48/90)和52.2%(47/90);健康人外周血中无CEA m RNA,有12名MUC-1 m RNA表达,表达率为60.0%(12/20);大肠腺瘤疾病患者无CEA m RNA表达,有10例MUC-1 m RNA表达,表达率为50.0%(10/20)。大肠癌患者中CEA、MUC-1 m RNA表达与肿瘤分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。[结论]CEA作为检测大肠癌患者外周血微转移的分子标志物具有良好的灵敏度和特异性,同时检测CEA和MUC-1可作为判断大肠癌病情进展的指标。     

DJ-1在肿瘤中表达的临床意义及作用的可能机制

DJ-1是一种广泛表达的多功能蛋白,参与肿瘤的生理病理过程.多数研究显示DJ-1为癌基因,在多种肿瘤中高表达,且在部分肿瘤中可能提示预后不良.DJ-1作为癌基因的机制可能是由于其抗氧化凋亡、抑制PTEN基因信号通路、增强雄激素信号转导等,但也有DJ-1在肿瘤组织中低表达的报道.     

宫颈癌组织中RASSF1A基因启动子甲基化对其表达水平的影响及临床意义

目的 研究宫颈癌组织中RAS相关区域家族1A基因(RASSF1A)启动子甲基化水平和RASSF1A基因mRNA表达水平,分析其与宫颈癌临床病理参数的关系及临床意义.方法 收集40例宫颈癌组织及相应癌旁组织,采用巢式特异性甲基化方法检测RASSF1A基因启动子甲基化水平,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测宫颈癌和癌旁组织中RASSF1A基因mRNA表达水平.结果 宫颈癌组织中RASSF1A基因mRNA表达水平(0.26±0.05)显著低于癌旁组织(0.28±0.03),差异有统计学意义(t=2.27,P=0.026);宫颈癌组织中RASSF1A基因启动子区的甲基化率(0.71%±0.04%)显著高于癌旁组织(0.66%±0.03%),差异有统计学意义(t=6.78,P=0.000);RASSF1A基因mRNA表达水平与病理分化程度(t=3.31,P=0.002)、国际妇产科联合会(FIGO)分期(t=2.13,P=0.040)、淋巴结转移(t=2.56,P=0.015)、浸润深度(t=2.93,P=0.006)有关;RASSF1A基因启动子区的甲基化水平与病理分化程度(t=2.08,P=0.045)、FIGO分期(t=2.66,P=0.011)、淋巴转移(t=2.22,P=0.033)、浸润深度(t=2.12,P=0.041)有关.结论 宫颈癌组织中RASSF1A基因启动子甲基化和RASSF1A基因mRNA的表达水平与宫颈癌的恶性程度相关,RASSF1A基因甲基化水平有望成为宫颈癌转移风险的重要指标.     

鼻咽癌组织中Gli1的表达及其对5-8F细胞增殖和迁移的影响

目的:研究神经胶质瘤相关癌基因1(Gli1)在鼻咽癌组织中的表达及其对鼻咽癌细胞5-8F增殖和迁移的影响。方法:采用荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测40例鼻咽癌组织和12例正常鼻咽组织中Gli1的表达;设计并合成针对Gli1基因的RNAi片段,将其感染5-8F细胞,蛋白质印迹法检测Gli1蛋白表达;MTT实验、平板克隆形成实验、细胞划痕实验和Boyden实验分别研究Gli1基因沉默后对5-8F细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果:Gli1在鼻咽癌组织中的表达明显高于正常鼻咽组织,将siRNA-Gli1-01和siRNA-Gli1-02转染入5-8F细胞后,5-8F细胞中Gli1蛋白表达水平明显降低,细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显减弱。结论:Gli1基因的表达异常与鼻咽癌的发生发展相关,有望成为鼻咽癌早期诊断和预测预后的生物分子标志物。     

膀胱移行细胞癌中KAI1基因mRNA的表达及其临床意义

目的　探讨膀胱移行细胞癌中KAI1基因mRNA的表达及其与肿瘤病理分级、临床分期及淋巴转移等的关系。方法　以β-actin为内参照,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测KAI1mRNA在膀胱移行细胞癌及癌旁正常组织中的表达。结果　癌旁正常组织中均有KAI1mRNA表达,水平为1. 35±0. 38,癌组织为0. 76±0. 25,部分癌组织表达缺失,前者表达水平显著高于后者(P< 0. 01)。且随着肿瘤病理分级、临床分期的增高及淋巴结转移的出现,KAI1mRNA表达水平逐渐降低,各组间差异具有显著性意义(P< 0.01)。结论　KAI1基因表达降低与膀胱移行细胞癌分化、浸润及淋巴转移有关,有可能成为评判肿瘤恶性程度、转移潜能及预后的新指标。     

CRISP3在宫颈癌分泌物与组织中的表达及临床意义

目的:筛选宫颈癌诊断标志物,检测其在宫颈癌组织中的表达及临床意义。方法:从基因表达数据库(gene expression omnibus,GEO)中下载宫颈癌相关数据集,利用R语言对差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)进行筛选,酶联免疫法检测其在宫颈癌血清中表达水平,PCR法检测其在宫颈癌分泌物中的表达情况,组织芯片上检测其在宫颈癌组织和正常组织中的表达情况,统计学分析其与临床特征的关系。结果:GEO数据库分析筛选出差异基因富含半胱氨酸分泌蛋白3(cystein-rich secretory protein 3,CRISP3),血清中CRISP3的表达,宫颈癌组与对照组相比无显著差异（P＞0.05）,宫颈分泌物中CRISP3表达在宫颈癌组显著降低（P＜0.01）,组织芯片中CRISP3在宫颈癌组中呈低表达（P＜0.01）,宫颈癌不同分期之间比较,Ⅰ期和Ⅱ-Ⅲ期差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:宫颈分泌物中CRISP3有可能作为宫颈癌诊断的潜在生物标志物之一。     

宫颈癌患者中神经钙黏素和转铁蛋白受体1的表达情况及临床意义

目的探讨宫颈癌患者中神经钙黏素(N-cad)和转铁蛋白受体1(TfR1)的表达情况及临床意义。方法选择65例宫颈癌患者、38例慢性宫颈炎患者、37例健康体检者分别作为宫颈癌组、慢性宫颈炎组、对照组。检测并比较3组研究对象的N-cad和TfR1表达情况,分析不同临床特征宫颈癌患者宫颈癌组织中N-cad和TfR1的表达情况。采用Logistic回归模型分析宫颈癌患者预后的影响因素。结果宫颈癌患者中N-cad和TfR1的阳性表达率均高于慢性宫颈炎组和对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。不同临床分期、淋巴结转移情况、病理分化程度的宫颈癌患者宫颈癌组织中N-cad和TfR1的阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。Spearman相关性分析结果显示,宫颈癌患者中N-cad、TfR1的表达与淋巴结转移和临床分期均呈正相关,与病理分化程度均呈负相关(P﹤0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,低分化、临床分期为Ⅱ期、有淋巴结转移、N-cad阳性、TfR1阳性均是宫颈癌患者预后的独立危险因素(P﹤0.05)。结论宫颈癌患者中N-cad和TfR1的阳性表达率较高,且其表达与宫颈癌患者的淋巴结转移情况、病理分化程度、临床分期有关。     

极光激酶A在宫颈鳞状细胞癌患者血清中的表达及其临床意义

目的:应用生物信息学技术分析和筛选影响宫颈癌(CC)预后的关键基因并探讨极光激酶A(AURKA)在宫颈鳞状细胞癌(CSCC)中的表达及其临床意义。方法:从基因表达综合(GEO)数据库下载并分析CC患者的mRNA表达谱及临床数据,利用生物信息学技术筛选出CC组织与正常宫颈组织间的差异表达基因(DEGs)。PPI网络和生存分析结果显示AURKA基因的表达和CC分期及患者预后相关。利用GEPIA2、HPA数据库分别验证AURKA mRNA及蛋白在正常宫颈组织和不同病理分期CC组织中的表达情况。采用Kaplan-Meier法分析CC患者的AURKA基因高、低表达(以中位数为截断值)与生存期是否相关。随后进一步通过实时荧光定量PCR(qPCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)技术分别检测在CSCC、宫颈上皮内瘤变(CIN)和女性健康体检者血清中AURKA mRNA及蛋白的表达。结果:GEPIA2数据库分析结果显示AURKA mRNA在CC组织中高表达(P<0.05),且AURKA mRNA在CC不同阶段的表达水平存在显著差异(P<0.05),随着肿瘤分期的进展AURKA mRNA的表达升高。HPA数据库分析结果显示,与正常宫颈组织相比,AURKA蛋白表达水平在CC组织中亦升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析结果显示,AURKA基因高表达的CC患者生存时间更短。qPCR和ELISA实验显示,CSCC和CIN患者血清AURKA mRNA的相对表达水平明显高于健康体检者(P<0.05)。CSCC患者血清AURKA蛋白的表达水平明显高于CIN及健康体检者(P<0.05)。AURKA mRNA及蛋白在CC血清中均高表达。ROC曲线及χ^(2)检验分析结果显示AURKA mRNA的诊断价值较高,血清AURKA mRNA高表达组患者FIGO分期、淋巴结转移、肿瘤体积及肌层浸润深度均分别高于AURKA mRNA低表达组(P<0.05)。结论:CSCC患者血清中AURKA mRNA及蛋白的表达水平升高,两者联合检测对CSCC的诊断及预后监测具有潜在应用价值。     

血清中长链非编码RNA-NEAT1在宫颈癌及宫颈上皮内瘤变中的临床 意义

目的:探讨长链非编码RNA-NEAT1(lncRNA-NEAT1)在宫颈癌、宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）及健康人群血清中的表达差异,并初步探讨其作为肿瘤标志物的临床应用价值。方法:收集31例首治的宫颈病变患者（包括宫颈上皮内瘤变19例,宫颈癌12例）和22例健康志愿者的外周血样本。采用荧光定量PCR方法检测各组血清lncRNA-NEAT1表达水平,探讨血清lncRNA-NEAT1表达水平与宫颈病变的关系,并绘制ROC曲线。同时,收集宫颈癌患者术后血清标本5例,分析术前、术后血清lncRNA-NEAT1的表达变化。结果:宫颈病变患者血清lncRNA-NEAT1表达水平低于健康对照组,差异有统计学意义（P=0.023）;宫颈癌患者血清lncRNA-NEAT1表达水平低于健康对照组,差异有统计学意义（P=0.022）;用血清lncRNA-NEAT1表达水平绘制ROC曲线,曲线下面积为 0.664,P=0.043(95％CI:0.511~0.818),灵敏度为63.6%,特异度为74.2%;lncRNA-NEAT1低表达与宫颈癌细胞分化差相关,差异有统计学意义（P=0.013）,与FIGO分期及淋巴结转移情况无关（P均＞0.05）;术后患者血清lncRNA-NEAT1的表达较术前显著升高,差异有统计学意义（P=0.043）。结论:血清lncRNA-NEAT1可作为宫颈癌潜在的肿瘤标志物,有望应用于宫颈病变（CIN及宫颈癌）的早期诊断、宫颈癌分化类型的判断及术后监测。     

CLC-3与GIRK1基因在宫颈癌中的表达及临床意义

目的:探讨容量调控性氯离子通道（CLC-3）与内向整流型钾离子通道（GIRK1）在宫颈癌中的表达及临床意义。方法:采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测60例宫颈癌组织,10例经放化疗前后的宫颈癌组织,10例正常宫颈组织中的CLC-3 mRNA 与GIRK1 mRNA的表达。结果:CLC-3 mRNA在正常宫颈组织中与宫颈癌组织中的灰度值的比值为0.691 2及2.393 7,差异有统计学意义（P<0.01）。CLC-3 mRNA在高分化癌、中分化癌及低分化癌中的表达分别为1.318 7、1.571 8及4.589 9,差异有统计学意义（P<0.01）。CLC-3 mRNA在宫颈癌Ⅰ-Ⅱ期中表达为1.084 2,在宫颈癌Ⅲ-Ⅳ期表达为3.568 8,差异有统计学意义（P<0.01）。CLC-3基因在放化疗前的宫颈癌组织中表达为1.519 8与放化疗后的0.223 7相比,有显著性差异(P<0.01）。GIRK1 mRNA在正常宫颈组织中与宫颈癌组织中的灰度值的比值为0.025 2及1.547 2,差异有统计学意义（P<0.01）。在高分化癌、中分化癌及低分化癌中的表达分别为0.985 5、0.856 4及1.862 7,差异有统计学意义（P<0.05）。GIRK1 mRNA在宫颈癌Ⅰ-Ⅱ期中表达为 0.989 6,在宫颈癌Ⅲ-Ⅳ期表达为1.974 2,差异有统计学意义（P<0.01）,GIRK1 mRNA在放化疗前的宫颈癌组织中表达为1.371 0与放化疗后的0.293 9相比,有显著性差异(P<0.01）。结论:CLC-3及GIRK1基因在宫颈癌中高表达,与宫颈癌的不良预后有关。放化疗可降低CLC-3及GIRK1基因的表达,与疗效相关。     

子宫颈癌患者循环HPV DNA检测及临床意义的研究进展

近来，癌症患者血浆／血清中肿瘤DNA的临床意义和生物学特忡引起了人们的广泛注意：同样，人们对宫颈癌患者血浆／血清中的人类乳头状瘤病毒（HPV）的DNA亦作了研究。研究采用不同的检测标本（血浆／血清）、不同的DNA抽提方式及不同的引物来检测循环游离HPV DNA，所得的阳性率从6．9％～50％不等。因为宫颈癌患者血浆／血清中的HPV DNA很可能来源于肿瘤本身，这给我们提供了一个新的宫颈癌治疗后的监测工具，特别是针对晚期的患者。可以预测，这一极具有应用前景的分子肿瘤标志物不久将会在临床上被广泛应用。     

Caveolin-1在宫颈癌组织中的表达及意义

目的：研究Caveolin-1在宫颈癌组织中的表达情况,探讨其在宫颈癌发生发展中的作用机制。方法：采用免疫组化法检测40例宫颈浸润癌、9例原位癌及20例癌旁正常组织中Caveolin-1的表达情况,并分析Caveolin-1的表达与宫颈癌临床病理学参数之间的关系。结果：Caveolin-1在宫颈癌旁正常组织及血管内皮细胞中广泛表达（100%）,9例宫颈原位癌组织中Caveolin-1阳性表达者8例（88.9%）,40例宫颈浸润癌组织中Caveolin-1阳性表达者29例（72.5%）, 三者比较,差别有统计学意义。在Ⅰ、Ⅱ期宫颈浸润癌中Caveolin-1阳性表达率分别为85．7％和41．7％,两者比较,差别有统计学意义。在宫颈高、中、低分化鳞癌中Caveofin-1阳性表达率分别为93．3％、66．7％、50．0％,三者比较,差别有统计学意义。Caveolin-1在淋巴结转移癌中阳性表达率为50．0％,淋巴结无转移癌中阳性表达率为90．9％,两者比较,差别有统计学意义。结论：Caveolin-1在宫颈癌中的表达降低,提示其表达的降低可能参与了宫颈癌的发生、发展过程。Caveolin-1的表达与宫颈癌的临床分期有关,随着分期的增高,Caveolin-1表达降低。Caveolin-1的表达与宫颈癌的病理分级有关,随着分级的降低,Caveolin～1的表达降低。Caveolin-1的表达与宫颈癌有无淋巴结转移有关,在有淋巴结转移组中Caveolin-1的表达降低。Caveolin-1在血管内皮细胞中广泛表达,可能参与了肿瘤血管的生成,对肿瘤的发生、发展、浸润和转移产生了一定的影响。