中国肺腺癌患者上皮生长因子受体基因突变的研究

目的:分析我国肺腺癌患者上皮生长因子受体(EGFR)基因突变的发生率和突变类型。方法:在上海、杭州和昆明等地收集61例肺腺癌及其正常肺组织,采用PCR扩增和基因测序方法对组织DNA中EGFR外显子19~21基因突变进行分析。结果:正常肺组织中EGFR基因均为野生型,肺腺癌组织中EGFR基因突变检测率为47.5%(29/61),其中外显子19和21突变分别占突变总数的55.2%(16/29)和44.8%(13/29),外显子20未检测到突变。外显子19突变发生在第746~752位密码子,均为碱基缺失突变,有6种不同类型。外显子21突变全部是第858位密码子碱基替换突变。EGFR基因突变与患者性别和年龄无显著相关性。但昆明和上海等地患者的基因突变存在明显差异。结论:EGFR基因突变是一种肿瘤特异性的体细胞遗传改变,突变发生率约占肺腺癌总数的一半,其中以外显子19和21突变为主。我国EGFR基因突变存在地域差异。     

147例肺腺癌EGFR基因19、21外显子突变与临床病理特征及预后的关系

摘 要：［目的］ 探讨肺腺癌患者表皮生长因子受体（epithelial growth factor receptor,EGFR）基因19外显子、21外显子突变,及其与临床病理特征和预后的关系。［方法］ 回顾性分析2016年1月至2017年10月我院收治的147例肺腺癌患者的临床资料,检测EGFR基因突变。采用单因素分析和多元Logistic回归模型分析肺腺癌患者EGFR基因19、21外显子突变与临床病理特征的关系。生存曲线分析肺腺癌患者EGFR基因19、21外显子突变与预后的关系。［结果］ 147例肺腺癌患者中发生EGFR基因突变68例（46.26%),其中19外显子突变35例（23.81%）,21外显子突变28例（19.05%）,其他类型突变5例（3.40%）。女性、无吸烟史、TNMⅠ~Ⅱ期、高分化者EGFR基因19、21外显子突变高于男性、有吸烟史,Ⅲ期~Ⅳ期和低分化患者。EGFR基因19、21外显子突变患者的中位生存时间为80周,高于19、21外显子未突变患者的中位生存时间66周（P<0.05）。EGFR基因19外显子突变患者的中位生存时间为82周,21外显子突变患者的中位生存时间为78周（P＞0.05）。 ［结论］ 肺腺癌EGFR基因19、21外显子突变发生率为46.26%。性别、吸烟史、肿瘤分化程度等临床病理特征均与EGFR基因19、21外显子突变有关。EGFR基因19、21外显子突变患者的预后好于19、21外显子未突变患者,EGFR基因19突变患者的预后与21外显子突变患者无明显差异。     

肺腺癌患者表皮生长因子受体基因突变与肿瘤标志物关系研究

目的  探讨肺腺癌患者表皮生长因子受体（EGFR）基因突变与血清肿瘤标志物之间的关系。 方法  选择2015年1月至2017年12月,中国医科大学附属第四医院胸外科肺腺癌患者资料97例。采用化学发光免疫法检测患者血清各肿瘤标志物水平,并对检测结果进行统计学分析。 结果  女性患者EGFR基因突变率高于男性患者,非吸烟患者高于吸烟患者,差异有统计学意义（均P＜0001）。而年龄、肿瘤分期对EGFR基因突变率无影响,差异无统计学意义（P＞005）。血清癌胚抗原（CEA）水平异常组EGFR基因突变率高于正常组,差异有统计学意义（P＜005）;当50 μg／L＜CEA＜100 μg／L时,EGFR基因突变率最高（77％）。血清细胞角蛋白19片段（CYFRA21 1）浓度,正常组患者EGFR基因突变发生率高于异常组,差异有统计学意义（P＜005）,而神经元特异性烯醇化酶（NSE）、CA125、CA153和CA19 9正常组与对应的异常组EGFR基因突变率差异无统计学意义（P＞005）。ROC曲线显示,血清CEA、CYFRA21 1水平预测EGFR基因突变的曲线下面积分别为0740、0609。 结论  肺腺癌患者女性、非吸烟患者更容易发生EGFR基因突变,血清肿瘤标志物CEA 、CYFRA21 1水平对预测EGFR基因突变有一定价值。     

肺腺癌EGFR、KRAS基因突变、ALK融合蛋白状态分析

目的 分析肺腺癌中EGFR、KRAS、ALK三种肿瘤驱动基因的突变状态及与其临床病理特征、肿瘤分期的关系.方法 85例肺腺癌EGFR,KRAS基因突变采用ARMS法检测,ALK融合蛋白用特异性抗ALK单克隆抗体(克隆号:D5F3)采取免疫组织化学法检测.结果 EGFR,KRAS,和ALK融合蛋白检测阳性率分别是62％,15％,和14％.EGFR基因突变更常见于女性.KRAS基因突变更常见于男性及有吸烟史患者.ALK融合蛋白更常见于年轻及肿瘤分期Ⅲ/Ⅳ患者.检测中发现了8例双突变病例.结论 结果 进一步证实了EGFR、KRAS基因突变与ALK融合蛋白并非完全互斥.对于肺腺癌患者进行全面的基因检测非常重要,在选择靶向治疗时更应考虑到多种变异同时存在的情况.     

晚期肺腺癌EGFR基因突变状态检测及分析

目的分析晚期肺腺癌表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）基因突变率及其与临床特征的相关性。方法收集2010-09-07-2011-07-21首都医科大学附属北京胸科医院收治的晚期初治肺腺癌患者102例,有可供检测的肿瘤组织标本。利用扩增受阻突变系统（amplification refractory mutation system,ARMS）进行EGFR基因突变检测,统计分析EGFR基因突变状态和临床特征的相关性。结果 102例晚期肺腺癌组织中,共检测到EGFR基因突变55例（53.9%）,其中18外显子突变1例（1.0%）,19外显子突变25例（24.5%）,20外显子突变2例（2.0%）,21外显子突变26例（25.5%）,同时存在19和20外显子突变1例（1.0%）。Ⅳ期患者EGFR基因突变率为57.6%（53/92）,高于ⅢB期患者20.0%（1/10）,差异有统计学意义,P=0.041;女性患者EGFR基因突变率56.9%（33/58）高于男性患者的50.0%（22/44）,不吸烟患者EGFR基因突变率58.1%（36/62）高于吸烟患者的36.0%（9/25）,〈65岁患者EGFR基因突变率56.8%（42/74）高于≥65岁患者的46.4%（13/28）,但差异均无统计学意义,P〉0.05。不同取材部位及取材方法之间EGFR基因突变率差异无统计学意义,P〉0.05。结论晚期肺腺癌EGFR基因突变率以Ⅳ期、女性和不吸烟患者较高,但性别及吸烟状态之间的差异无统计学意义。不同的肿瘤活检部位及活检方法之间EGFR基因突变率并无差异。     

早期肺腺癌EGFR基因突变的相关因素研究

目的：探讨早期（cT1N0M0期）肺腺癌EGFR突变的临床、病理及高分辨率CT（HRCT）相关因素,为早期肺腺癌患者术后行EGFR基因检测提供参考。方法回顾性分析行手术切除且术后采用DNA直接测序法完成EGFR基因突变状态检测的82例cT1N0M0期肺腺癌患者的病历资料。采用卡方检验、t检验、秩和检验分析临床、病理学及HRCT特征在EGFR有效突变组与非有效突变组中的差异;相关因素的界值采用ROC曲线确定;采用Logistic回归分析探寻EGFR突变的独立危险因素。结果82例肺腺癌中发生EGFR基因有效突变53例,非有效突变（包括野生型、无效突变）29例。EGFR有效突变组与非有效突变组在性别（P=0.017）,年龄（P=0.005）,吸烟与否（P=0.004）,是否为乳头为主型（P=0.048）,病灶大小（P=0.019）的差异具有统计学意义。患者年龄≥60岁（OR=6.852,95% CI 1.985~23.652,P=0.002）为cT1N0M0期肺腺癌EGFR基因有效突变的独立危险因素。结论cT1N0M0期肺腺癌中女性、年龄≥60岁、无吸烟、病理亚型为乳头为主型和病灶≥1.6 cm者出现EGFR有效突变概率较大。对于具有这些因素的cT1N0M0期肺腺癌患者,可考虑推荐于术后行EGFR基因检测。     

肺腺癌患者血清及胸水CEA与EGFR突变的相关性研究

目的 探讨肺腺癌患者癌胚抗原（CEA）的表达水平与表皮生长因子受体（EGFR）突变的相关性。方法 检测79例肺腺癌患者血清及胸水CEA水平,并分析其表达与EGFR突变的关系。结果 79例患者均行EGFR检测, 突变率为44.3％（35／79）。血清及胸水CEA水平预测EGFR突变的曲线下面积（AUC）分别为0.661（95％CI：0.536～0.785）、0.757（95％CI：0.653～0.862）。血清CEA≥19.5 ng／ml及胸水CEA≥55.5 ng／ml的患者EGFR基因突变率高（P＜0.05）。血清及胸水CEA均≥最佳截取值（Cut-off）、任一者≥Cut-off、两者均＜Cut-off 3组的EGFR突变率分别为64.3％、60.0％和16.1％,差异有统计学意义（P＜0.001）。Logistic回归分析发现胸水CEA水平是预测EGFR基因突变的独立因素（OR：1.002,95％ CI：1.001～1.004,P=0.003）。结论 胸水及血清CEA水平可能作为预测EGFR突变的指标,胸水CEA数值可能更优于血清CEA。     

EGFR不同突变亚型与肺腺癌脑转移预后的相关性分析

目的 探讨肺腺癌脑转移患者EGFR不同突变亚型与预后的相关性。方法 回顾分析2010—2015年本院收治的经EGFR基因突变检测的肺腺癌脑转移患者256例临床资料,筛选脑转移的预后影响因素。Kaplan-Meier法计算生存率Logrank法检验和单因素预后分析,Cox模型多因素预后分析。结果 全组患者中位生存期为10.13个月。单因素分析显示性别、EGFR突变状态、19外显子缺失突变、脑转移时KPS评分、靶向治疗与预后有关(P=0.006、0.001、0.010、0.000、0.003),多因素分析显示脑转移时KPS评分、19外显子缺失突变为脑转移患者预后影响因素(P=0.000、0.045)。将全组病例纳入RPA预后分级指数,检验显示差异有统计学意义(P=0.000)。结论 19外显子缺失突变是肺腺癌脑转移患者的预后影响因素,可以考虑将其纳入肺腺癌脑转移瘤预后评分系统。EGFR-TKI使EGFR基因突变肺腺癌脑转移患者生存获益,尤其是19外显子缺失突变患者。     

伴微乳头成分的肺腺癌EGFR KRAS基因突变和临床病理学特征相关研究

  目的   探讨伴微乳头成分的肺腺癌(pulmonary adenocarcinoma with a micropapillary pattern, MPPAC) EGFR、KRAS基因突变情况及其临床病理学特征。   方法   根据2011年的肺腺癌新分类诊断标准, 以是否伴有微小乳头状结构(micropapillary pat tern, MPP), 将144例肺腺癌病例分为MPP阳性组77例和MPP阴性组77例。MPP阳性组中又按MPP所占比例分为(+、++、+++) 三亚组。RT-PCR法检测两组EGFR、KRAS基因突变情况。   结果   在144例肺腺癌病例中EGFR突变62例(43.1%), KRAS突变9例(6.25%), EGFR突变与性别(P=0.018) 和肿瘤体积(P=0.016) 有关。MPP阳性组EGFR突变率高于MPP阴性组(P < 0.001);KRAS突变率低于MPP阴性组(P=0.016)。EGFR基因突变频率在MPP三亚组中无明显不同(P=0.932)。   结论   伴微乳头结构的肺腺癌EGFR突变频率高于肺腺癌其它亚型, KRAS突变频率低于肺腺癌其它亚型, 说明其有独特的分子生物学特点。      

EGFR突变型肺腺癌组织中VEGF-A蛋白的表达及其临床意义

目的：探讨肺腺癌患者中血管内皮生长因子-A(VEGF-A)蛋白表达与表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的关系，以及VEGF-A蛋白表达水平与患者临床病理指标及预后的关系。方法：收集经病理检查确诊为肺腺癌且经过EGFR基因检测并进行靶向治疗的患者72例，采用免疫组织化学法检测VEGF-A蛋白在EGFR突变型中晚期肺腺癌患者中的表达情况，采用门诊或者电话随访，统计患者无进展生存期。采用χ2检验、Kaplan-Meier生存分析、单因素、多因素Cox回归分析和评估VEGF-A蛋白表达与各病理指标间的关系，及与EGFR突变型肺腺癌患者预后的关系。结果：72例EGFR突变型肺腺癌组织中VEGF-A蛋白高表达率为70.83%(51/72)，主要位于肿瘤细胞的细胞质；VEGF-A蛋白高表达率在EGFR基因外显子19缺失和其他少见突变类型的肺腺癌患者间的差异无统计学意义(P>0.05)，而在不同临床分期及淋巴结转移情况患者间的差异具有统计学意义(P<0.05)；且与年龄、性别、吸烟史无明显相关(P>0.05)。Spearman秩相关分析显示，EGFR突变型肺腺癌患者的无进展生存期(...     

肺腺癌患者新鲜细胞学标本EGFR基因突变检测及意义

目的：研究采用新鲜细胞学标本检测肺腺癌患者表皮生长因子受体（EGFR）基因突变情况,用于辅助判断阳性患者服用酪氨酸激酶抑制剂（TKI）的预后。方法：收集河北医科大学第四医院癌检中心的肺腺癌患者淋巴结针吸标本和胸腔积液标本313例,经HE染色、免疫细胞化学染色后由两位细胞病理医师确诊为肺腺癌后,采用ARMS法进行EGFR基因外显子18~21突变的检测,观察突变情况;对比EGFR基因突变阳性患者采用口服TKI药物靶向治疗或化疗的客观有效率（ORR）和无进展生存期（PFS）。结果：313例标本中确诊为肺腺癌293例,其中288例提取DNA成功并得到检测,提取成功率为98.1%（288/293）,检测出130例突变,突变率为45.1%。肺腺癌患者的EGFR突变主要发生在女性、不吸烟患者中,与年龄无明显相关。EGFR基因外显子18~21突变阳性患者靶向治疗组和化疗组之间的ORR差异有统计学意义（P < 0.01）,靶向治疗组的疗效和生存期都优于化疗组。新鲜细胞学标本检测的EGFR基因突变结果以及所测阳性患者的预后与以往文献均一致。结论：新鲜细胞学标本检测的EGFR突变结果准确,可以作为肿瘤组织的代替标本。     

Reversed mutation rates of KRAS and EGFR genes in adenocarcinoma of the lung in Taiwan and their implications

BACKGROUND.

In western countries, the Kirsten ras oncogene homolog gene (KRAS) mutation rate is high in patients with nonsmall cell lung cancer (NSCLC), especially in those with adenocarcinoma (30%‐50%), but the epidermal growth factor receptor gene (EGFR) mutation rate is very low (3%‐8%). In addition, KRAS mutations reportedly were associated with EGFR tyrosine kinase inhibitor (EGFR‐TKI) resistance. In Taiwan, high EGFR mutation rates associated with high EGFR‐TKI response rates in patients with NSCLC have been reported; however, KRAS mutation data are limited and have not been correlated with TKI response.

METHODS.

KRAS mutation analysis was performed on 237 NSCLC specimens, and the results were correlated with clinicopathologic features. All but 2 tumors also underwent EGFR mutation analysis.

RESULTS.

KRAS mutations were identified in only 9 of 237 patients (3.80%). Five patients were women who were nonsmokers, and 4 patients were men who were ever‐smokers. The mutation rate was 5.03% in patients with adenocarcinoma (8 of 159 patients) and 1.56% in patients with squamous cell carcinoma (1 of 64 patients). Four mutations were G12V, 3 mutations were G12D, 1 mutation was L19F, and 1 was the duplication insertion mutation dupT50_M72. In contrast, EGFR mutations were detected in 96 of 235 patients (40.8%) and in 90 of 157 adenocarcinomas (57.3%). None of the KRAS mutations coexisted with EGFR mutations. KRAS mutations were not associated significantly with any clinicopathologic characteristics, including smoking status. Among the 53 patients who had received TKI monotreatment, only 1 patient had a KRAS mutation and had progressive disease.

CONCLUSIONS.

The KRAS mutation rate was too low to play a significant role in TKI resistance or tumorigenesis among Taiwanese patients with NSCLC, which was the complete reverse of the results reported in western countries. Cancer 2008. © 2008 American Cancer Society.     

NSCLC中EGFR基因突变与表达关系研究

目的 研究非小细胞肺癌组织表皮生长因子受体(EGFR)基因突变和蛋白表达的相关性.方法 随机选择北京协和医院胸外科2009年6月至2011年5月收治的非小细胞肺癌(non- small cell lung cancer,NSCLC)患者的石蜡包埋肺癌组织标本71例,分别以直接测序法和免疫组织化学染色法取得表皮生长因子受...     

KRAS G>A mutation favors poor tumor differentiation but may not be associated with prognosis in patients with curatively resected duodenal adenocarcinoma

KRAS mutations have been found in duodenal adenocarcinomas and may have prognostic significance. The purpose of this study was to classify clinicopathological characteristics, microsatellite instability and KRAS mutations and identify possible prognostic role of KRAS mutations in duodenal adenocarcinomas. Demographics, tumor characteristics and survival were recorded for 78 patients with duodenal adenocarcinomas (Stages I–III). KRAS mutations were detected in 27 (34.6%) cases, of which the majority (74.1%) were G>A transitions. Multivariate logistic regression analysis showed that KRAS G>A mutation was significantly associated with late stage (p = 0.025) and poor tumor differentiation (p = 0.035), when compared with wild‐type and other than G>A mutations. KRAS G>A mutation carriers were at increased risk for distant relapse (p = 0.022) and had significantly shorter overall survival (OS; log‐rank p = 0.045) and a trend toward shorter relapse‐free survival (RFS; log‐rank p = 0.062) when compared with those who did not carry the KRAS G>A mutation. In multivariate analyses, there was a significant correlation between ≥ 3 positive lymph nodes and poor OS (p < 0.001) and RFS (p = 0.001) and KRAS G>A mutation carriers demonstrated no effect on clinical outcome. In conclusion, KRAS G>A mutation correlates significantly with late stage and poor tumor differentiation in duodenal adenocarcinoma. Among patients who undergo a curative resection of duodenal adenocarcinoma, KRAS G>A mutation carriers will more likely experience distant relapse but may not exhibit a poor prognosis. The number of positive lymph nodes should be incorporated in future staging systems.     

子宫内膜癌中EGFR蛋白的表达及EGFR基因突变

目的:研究表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在子宫内膜癌组织中的表达及其基因突变情况。方法:取江西省肿瘤医院及南昌大学第二附属医院2007年1月至2011年4月期间的子宫内膜石蜡包埋组织104例,其中子宫内膜癌组织56例、非典型增生子宫内膜组织18例、正常子宫内膜组织30例,利用免疫组化检测上述各组织中EGFR蛋白的表达,PCR法扩增子宫内膜癌或正常子宫内膜组织中EGFR基因外显子19、21序列并测序检测其突变情况。结果:子宫内膜癌组织中EGFR的阳性表达率高于正常子宫内膜[73.2%(41/56)vs 30.0%(9/30),P<0.01]及非典型增生子宫内膜[73.2%(41/56)vs 44.4%(8/18),P<0.05]。进一步分析表明:G3级子宫内膜癌中EGFR的阳性表达率明显高于G1级[81.8%(9/11)vs 66.7%(12/18),P<0.01]及G2级[81.8%(9/11)vs 74.1%(20/27),P<0.05],在肌层浸润>1/2组中的阳性表达率也明显高于肌层浸润≤1/2组[86.8%(33/38)vs 44.4%(8/18),P<0.01]。但EGFR的表达与子宫内膜癌的FIGO分期、有无淋巴结转移无明显相关性。发现1例子宫内膜癌组织中,EGFR基因外显子19有G2281A突变,而外显子21无突变。结论:EGFR的阳性表达率与子宫内膜癌的组织学分级及肌层浸润深度有关,子宫内膜癌组中存在EGFR外显子19的G2281A点突变。     

KRAS mutation status in primary nonsmall cell lung cancer and matched metastases

BACKGROUND:

The objective of this study was to determine whether the mutation status of the v‐Ki‐ras2 Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog (KRAS) and epidermal growth factor receptor (EGFR) differed between primary tumors and matched distant metastases in nonsmall cell lung cancer (NSCLC).

METHODS:

Patients who underwent resection for both primary NSCLC and matched distant metastases were included in the study. KRAS and EGFR mutation status were assessed by polymerase chain reaction (PCR) amplification and direct sequencing on both primary tumors and metastases. For KRAS analysis, mutant‐enriched PCR (ME‐PCR) was performed in case of discordance between a primary tumor and its matched metastasis.

RESULTS:

Twenty‐one patients were included. No EGFR mutations were detected. KRAS mutations were detected in 6 patients (28%). In all patients, the mutations identified by direct sequencing were discordant between the primary tumor and the matched metastasis. The use of ME‐PCR allowed a resolution of the discordance in 3 of the 6 cases by demonstrating the presence of low levels of mutant KRAS in lesions that were negative by direct sequencing.

CONCLUSIONS:

Highly sensitive tools are required to identify biomarkers. The KRAS mutation status mostly was concordant between primary tumors and matched distant metastases. In a few patients, KRAS mutation status differed between different tumor sites. Cancer 2010. © 2010 American Cancer Society.     

肺腺癌磨玻璃结节影像特征与EGFR基因突变的相关性分析

目的 磨玻璃结节(ground glass nodule,GGN)的疾病谱包括良性及恶性的病变,有关于GGN的自然生长史目前尚未完全清楚,本研究回顾性定量分析高分辨CT(high-resolution computed tomography,HRCT)表现为纯磨玻璃结节(pure ground glass nodule,pGGN)和实性成分＜5 mm部分实性结节的肺腺癌表皮生长因子受体(epidermal growthfactor receptor,EGFR)基因突变的特点及其与影像表现的关系.方法 2012-04-23 2015 10 30经中国医学科学院肿瘤医院病理确诊为肺腺癌的GGN患者79例.通过测序法检测EGFR基因突变.将患者分为EGFR突变型组及野生型组,分别记录各组患者性别、年龄、病灶位置、大小、相对CT值及薄层CT征象(分叶、毛刺、空泡征、空气支气管征、胸膜牵拉及凹陷征),观察两组GGN影像特征与EGFR基因突变的关系,并进行统计学分析.结果 79例GGN患者中,EGFR突变组41例(51.9％),EGFR野生型组38例(48.1％);EGFR突变组与野生型组之间患者年龄、性别、GGN的位置、分叶、毛刺、空泡及CT空气支气管征、相对CT值差异均无统计学意义,均P＞0.05.突变型组GGN胸膜牵拉或凹陷征发生率高于野生型组,P=0.037.EGFR突变型组的GGN大小、体积及质量均显著高于野生型组(P值分别＜0.001、0.002和0.001).GGN大小、体积、质量预测EGFR突变的最佳临界值分别为10.45 mm、540.6 mm3和0.255 g.结论 在pGGN和实性成分＜5 mm部分实性结节肺腺癌中,HRCT影像特征对于辅助预测EGFR基因突变状态具有一定价值.