一氧化氮对慢性病贫血大鼠贫血及肝脏顺乌头酸酶活性的影响及其意义

目的探讨一氧化氮(NO)在慢性病贫血(ACD)发病中的作用及对肝脏顺乌头酸酶(aconitase)活性的影响,为ACD的防治提供实验依据。方法通过反复注射福氏完全佐剂在传统的类风湿性关节炎动物模型基础上建立了ACD大鼠动物模型。由于铁调节蛋白1(IRP-1)与aconitase有高度的同源性,aconitase又是NO主要靶酶,故利用此模型观察了不同处理组NO浓度的改变与贫血及肝脏aconitase活性的关系。结果炎症组NO浓度显著增高,贫血明显,aconitase活性降低,用一氧化氮合酶(NOS)抑制剂后,NO水平降低,贫血改善,aconitase活性介于炎症组与正常对照组之间。统计学处理有显著性差异P<0.01。结论NO参与了ACD的发病,为从NO角度进一步认识ACD的发病机制提供了实验依据。为ACD的治疗提供了一条新途径。     

一氧化氮在慢性病贫血发病中的作用

目的 探讨一氧化氮(NO)在慢性病贫血(ACD)发病中的作用,为ACD的防治提供实验依据。方法 用福氏完全佐剂建立ACD的大鼠动物模型,分组给予生理盐水及一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NAME,观察大鼠后足的肿胀程度,测定血NO、NOS、血红蛋白(Hb)的水平。结果 用L-MAME后关节的炎症反应显著减轻;Hb明显升高,血NO及NOS水平明显降低,经单因素方差分析P<0.01。结论 NO在ACD发病中发挥了重要作用;全身调控NO水平对贫血和关节炎症的改善确有作用。提示研制特异性阻断病理性iNOS和NO的药物应用于临床是治疗ACD的一条新途径。     

转铁蛋白受体在慢性病贫血大鼠骨髓血细胞中的表达

为了探讨慢性病贫血 (ACD)的发病机理之一 ,为ACD的防治提供实验依据。方法 :用福氏完全佐剂建立大鼠的ACD动物模型 ,用S P法 (链菌素亲生素 过氧化酶连接法 )检测大鼠骨髓血细胞的转铁蛋白受体 (TfR)的表达。结果 :正常对照组的TfR为 38 10± 2 77(% ) ,ACD组为 2 4 4 0± 2 13(% ) ,两组比较差异显著P <0 0 1。结论 :骨髓幼红细胞TfR表达降低与ACD的发病密切相关     

一氧化氮在慢性病贫血发病中的作用

目的：在建立慢性病贫血（ACD）大鼠动物模型的基础上，探讨一氧化氮（NO）与关节炎及贫血的关系。方法：在传统佐剂性关节炎大鼠模型基础上，通过追加注射福氏佐剂两次，增强其免疫反应，从而诱发贫血的发生；检测不同处理组大鼠血清铁（SI）、总铁结合力（TIBC）、转铁蛋白饱和度（TS）及血清NO、一氧化氮合酶（NOS）水平。结果：佐剂性关节炎大鼠经追加福氏佐剂，均出现不同程度的贫血，其SI、TIBC、TS水平下降，血清铁蛋白（Fn) 水平升高（P＜0．05），与ACD铁代谢改变特征一致，应用NOS抑制剂大鼠关节肿胀和贫血程度较ACD大鼠减轻，SI、TIBC、TS升高（P＜0．001）。结论：成功建立慢性病贫血大鼠模型，NO在ACD大鼠关节炎及铁代谢紊乱中起重要作用。     

一氧化氮和一氧化氮合酶与慢性病贫血

目的测定慢性病贫血(anemia of chronic disease,ACD)患儿血清中一氧化氮(NO,ni-tric oxide)、可诱导型一氧化氮合酶(iNOS,inducible nitric oxide synthase)及血清铁蛋白(Fn,ferritin)浓度,以探讨三种物质的变化及它们在ACD中的作用机制,为ACD的防治提供实验依据。方法采用硝酸还原酶法和酶联免疫吸附法分别测定ACD患儿30例、健康对照组儿童21例血清中NO、iNOS及血清铁蛋白含量。结果①ACD组血清中NO浓度为157.13±28.75(μmol/L),健康对照组儿童血清中NO浓度为33.97±6.79(μmol/L),ACD组明显高于健康对照组(P<0.01),且与贫血程度呈正相关、与Hb含量成负相关(r=-0.66);②ACD组和健康对照组儿童血清中iNOS活力分别为30.66±8.70(U/ml)和9.58±3.72(U/ml),ACD组高于健康对照组,两者比较有显著性差异(P<0.01);③ACD组血清中iNOS活力与N0含量成正相关,相关系数为0.873;④ACD组血清中Fn均值为311.77±73.56(ng/ml),健康对照组儿童血清中Fn均值为31.82±13.80(ng/ml),ACD组高于健康对照组(P<0.01)。结论NO在ACD的发病中可能起重要作用,而NO主要是在iNOS的诱导下产生。ACD组中N0及诱导型一氧化氮合酶与血红蛋白含量成负相关,与贫血程度呈正相关,从而提示使用iNOS抑制剂或可抑制NO的产生,为临床治疗ACD提供新的途径。     

一氧化碳和一氧化氮对热性惊厥大鼠海马神经元凋亡的影响

目的：热性惊厥(FS)是小儿时期最常见的惊厥性疾病,反复FS可造成海马神经元的损伤,同时血红素氧合酶(HO)/一氧化碳(CO)系统和一氧化氮合酶(NOS)/一氧化氮(NO)系统明显上调并相互影响。该研究使用HO的抑制剂锌原卟啉Ⅸ(ZnPP-Ⅸ)和NOS的抑制剂Nω硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对FS时两个系统进行干预,探讨此两个系统对反复FS大鼠海马神经元凋亡的影响。方法：采用热水浴诱导大鼠FS,隔日诱导1次,共诱导10次。21日龄SD大鼠随机分为4组对照组,FS组,FS+ZnPP-Ⅸ组,FS+L-NAME组。TUNEL法对各组大鼠海马CA1区神经元进行凋亡检测。结果：FS组大鼠海马CA1区凋亡细胞数较对照组多225%,两组比较,差异有显著性(P<0.01),FS+ZnPP-Ⅸ组大鼠海马CA1区凋亡细胞数较FS组和对照组分别多62%和425%(均P<0.01),FS+L-NAME组大鼠海马CA1区凋亡细胞数较FS组低38%(P<0.01),较对照组多100%(P<0.05)。结论：反复FS时,外源性给予HO抑制剂ZnPP-Ⅸ可导致海马神经元的凋亡增多,而NOS的抑制剂L-NAME可致海马神经元的凋亡减少,提示HO/CO系统可保护FS神经元的损伤,NOS/NO系统可加重FS神经元的损伤。     

慢性病贫血大鼠肝脏铁代谢紊乱的调节

目的 在建立慢性病贫血（ACD）大鼠动脉模型的基础上，探讨一氧化氮（NO）、铁调节蛋白（IRP）在ACD大鼠肝组织铁代谢紊乱中的调节作用。方法 在传统佐剂性关节炎大鼠模型基础上，通过追加注射辐氏佐剂两次，增强其免疫反应，从而诱发贫血的发生；对不同处理组大鼠肝脏铁含量、铁蛋白（Fn）、NO、IRP－2mRNA水平及IRP结合活性进行检测。 结果 ACD大鼠肝组织IRP结合活性较正常对照组升高，IRP－2mRNA水平及IRP结合活性进行检测。结果 ACD大鼠肝组织IRP结合活性较正常对照组升高，IRP－2mRNA表达下调，硝基精氨酸甲酯（NAME）组大鼠则位于两者之间，NO水平与IRP结合活性呈正相关。结论 NO、IRP在ACD大鼠肝脏铁代谢紊乱中起重要作用。     

L-Arg和L-NAME对窒息新生鼠血浆ET及NO的影响

探讨一氧化氮(NO)的前体L-精氨酸(L-Arg)和NO合成酶(NOS)抑制剂L-硝基-精氨酸甲酯(L-NAME)对围产期窒息新生大鼠血浆内皮素(ET)及NO的影响.应用方法检测窒息新生大鼠及窒息前应用L-Arg或L-NAME预处理的新生鼠血浆ET及NO的水平,并设正常对照.结果显示窒息组血浆ET水平较对照组显著升高(P＜0.01),血浆NO虽较正常对照组升高,但无统计学意义(P＞0.05);L-Arg组血浆ET水平较窒息组显著下降(P＜0.01);而血浆NO则显著升高(P＜0.01);L-NAME组血浆ET水平较对照组和L-Arg组显著上升(P＜0.01),NO浓度较窒息组无显著下降(P＞0.05).可以认为,L-Arg不仅使内源性NO水平显著升高,而且能有效地降低窒息新生大鼠血浆ET的水平;L-NAME则作用相反,NO合成抑制可增加ET水平.     

一氧化碳对热性惊厥大鼠海马一氧化氮合酶/一氧化氮体系的影响

目的：反复热性惊厥(FS)后血红素氧合酶(HO)/一氧化碳(CO)系统和一氧化氮合酶(nNOS)/一氧化氮(NO)系统上调,但二者相互关系不清。本研究观察HO抑制剂锌原卟啉Ⅸ(ZnPPⅨ)对FS大鼠海马神经元型NOS(nNOS)mRNA和蛋白表达及NO含量的影响,以探讨CO对NOS/NO体系的调节作用。方法：采用热水浴诱导大鼠FS,隔日诱导1次,共诱导10次。发育期大鼠随机分为3组:对照组,FS组,FS+ZnPPⅨ组(均n=16)。分光光度计间接测定血浆CO和NO含量;核酸原位杂交法检测海马nNOSmRNA表达;Westernblot方法检测海马nNOS蛋白含量。结果：反复FS后海马nNOSmRNA和蛋白表达增高。用ZnPPⅨ进行干预后,血浆CO含量下降,海马nNOSmRNA和蛋白表达及血浆NO含量呈现一致性的显著。结论：反复FS时,外源性给予HO抑制剂ZnPPⅨ可可抑制HO/CO系统,降低血浆CO,增加神经元NOS的基因表达及NO含量,提示CO可能下调NOS/NO系统活性。     

不同孕期大鼠铅暴露胎盘一氧化氮/一氧化氮合酶系统与其超微结构改变的相关性

目的探讨不同孕期大鼠血铅水平与胎盘一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)与胎盘绒毛超微结构的关系。方法用硝酸还原酶法、NOS测定试剂盒测定46例(分为A、B、C组)不同孕期铅暴露和17例对照组孕鼠胎盘匀浆NO、NOS水平,并对受试胎盘组织切片进行电镜检查。结果A、B组NO及NOS高于正常对照组(P均<0.01);C组NO及NOS与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05)。阶段铅暴露组,电镜显示胎盘结构代偿增生或轻度损伤表现。全程铅暴露组血铅水平最高,胎盘结构呈现失代偿改变。结论孕期铅暴露血铅水平、胎盘局部NO/NOS水平变化与胎盘发生病理改变间关系密切,可能在围生期铅毒性发生发展中起重要作用。     

小儿慢性病贫血红系祖细胞与肿瘤坏死因子α、白介素6的关系研究

目的研究检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6(白介素-6)两种慢性病发生有关的细胞因子水平,以及红系造血祖细胞集落培养生长探讨它们在慢性病贫血(ACD)发病中的作用方法检测病例组为慢性病贫血组(ACD组)患儿,对照组为慢性病无贫血组(NA组)和缺铁性贫血组(IDA组)患儿的血清肿瘤坏死因子α(TNF浕)、白介素-6(IL-6)水平,以及骨髓的红系祖细胞水平(BFU-E、CFU-E)。结果三组BFU-E有差异(F=3.56,P<0.05;三组CFU-E有显著差异(F=8.87,P<0.01)。ACD组与NA组相比,血清TNF-α前者高于后者(t=2.25,P<0.05),两组血清IL-6无差异(t=1.91,P>0.05)。在20例行骨髓培养的慢性病患儿中,血清TNFα与骨髓BFU-E之间无显著相关性(r=-0.37,P>0.05);血清TNF-α与CFU-E之间有负相关(r=-0.57,P<0.05);IL-6与BFU-E、CFU-E无相关性。结论ACD患儿骨髓红系祖细胞BFU-ECFU-E生成受抑制;血清TNF-α、IL-6的升高参与贫血发生;TNFα可能抑制慢性病患儿骨髓CFU-E形成而导致贫血。     

Effect of unilateral testicular torsion on contralateral testis in a rat model

The aim of this study was to investigate the function of the contralateral testis after unilateral testicular torsion (UTT) and its possible mechanism. 56 rats were randomly divided into four groups: Group A: Sham operation, Group B: Testicular torsion (TT)+normal saline (NS), Group C: Testicular torsion (TT)+cyclosporine, Group D: Testicular torsion (TT)+NG-Monomethyl-l-arginine (l-NMMA). The right testes were removed 1 week and 8 weeks after surgery, respectively. Biochemistry and histopathologic evaluations were used to evaluate the germ cell damage. Compared with Group A, the levels of malondialchehyche (MDA) and nitric oxide (NO)/nitricoxide synthase (NOS) were increased remarkably in Group B. Significant differences were shown between histopathological damages and density and motility of sperm in two groups. Compared with Group B, the levels of MDA and NO/NOS in Group D decreased significantly while mean seminiferous tubule diameter (MSTD) and mean testicular biopsy scoring (MTBS) maintained in a better condition. The levels of major histocompatibility complex (MHC) peptide-tetramer complex in Group C and Group D decreased significantly than Group B, while sperm density and motility were significantly higher than Group B. It was also known that the histopathological damages in Group C and Group D were less than those in Group B in the 8 weeks after operation. UTT can cause impairment of contralateral testicular function and decrease of spermatogenic function. The mechanism may be related to ischemia–reperfusion (IR) in early stage and autoimmune response in late stage.     

内毒素诱导新生大鼠肝损伤及地塞米松的保护作用

目的 动态观测大肠杆菌内毒素(LPS)诱导新生大鼠肝损伤时NO，SOD，MDA的变化及地塞米松(Dex)对肝脏的保护作用。方法 取7日龄新生Wistar大鼠120只，分为正常对照组(A)、内毒素组(B)和地塞米松组(C)。B组为腹腔注射LPS 5 mg/kg制成内毒素血症模型，C组为LPS 5 mg/kg+Dex 5 mg/kg共同腹腔注射，A组用等体积生理盐水腹腔注射。观测3组新生鼠2 h，4 h，6 h，24 h时肝组织匀浆NO，SOD，MDA改变，同时对肝脏结构行光镜和电镜检查。结果 ①与A组相比，B组LPS作用后随时间延长引起SOD下降，其中24 h降至最低值［(118.96±12.81) NU/mg.pro］(P<0.01)；而NO，MDA升高，6 h NO达最高值［(2.58±0.31) μmol/g.pro］(P<0.01)，4 h MDA达最高值［(2.61±0.50) nmol/mg.pro］(P<0.05)。C组应用Dex处理后4 h和6 h SOD明显上升，而NO与MDA明显下降，与B组比较，差异有显著性(P<0.05或0.01)。②B组光镜下可见肝组织大量炎性细胞浸润，肝细胞点状坏死及出血；电镜下可见线粒体嵴明显减少，内质网扩张，出现凋亡小体及核固缩。C组上述病理变化明显减轻。结论 LPS诱导新生大鼠肝损伤，肝组织匀浆NO和MDA含量明显上升，SOD活性明显下降；Dex对急性肝损伤有保护作用，可能与抑制NO的过量产生及清除氧自由基有关。     

实验性糖尿病大鼠肾组织一氧化氮与肾小球高滤过的关系

目的　探讨一氧化氮 (NO)在糖尿病大鼠肾组织中的动态变化及其与肾小球高滤过的关系。方法　用链脲佐菌素(STZ)制造大鼠糖尿病模型 ,在模型成功后 4、8、1 2周分别采用硝酸还原酶间接法和吸光度比较法测定肾组织NO含量、一氧化氮合酶 (NOS)活性。同时取肾组织在光镜下镜检 ,并利用计算机图像分析仪测定肾小球截面积。以内生肌酐清除率 (Ccr) ,代表肾小球滤过率 (GFR)。结果　糖尿病大鼠肾组织NO含量、NOS活性 4周时升高 ,8、1 2周时渐下降 ,与对照组比较有显著差异 (P <0 .0 5)。与同期正常对照组比较 ,糖尿病组肾重 /体质量、2 4h尿蛋白排泄量、GFR和肾小球平均截面积均明显升高 (P<0 .0 5) ,且随病程延长 2 4h尿蛋白排泄量渐升高 ,GFR渐下降 ,但仍高于正常。经相关分析表明 ,肾组织中NO与GFR呈正相关 ,与尿蛋白排泄量呈负相关。结论　糖尿病大鼠存在血管内皮分泌功能紊乱 ,早期内皮舒张因子分泌增多 ,后期减少 ,内皮源性舒张因子NO水平变化与NOS活性变化一致 ,并与糖尿病早期肾小球高滤过相关。     

自发性高血压大鼠主动脉中一氧化氮/一氧化氮合酶体系的变化

目的 探讨自发性高血压大鼠主动脉中一氧化氮(NO)/一氧化氮合酶(NOS)体系的变化.方法 随机选取健康雄性4周龄Wistar大鼠7只和4周龄自发性高血压大鼠7只,分别作为正常对照组及高血压组.4周龄及12周龄时检测二组大鼠血压.8周龄时取2组大鼠主动脉组织,采用硝酸还原酶法测定其NO水平,Western blot法检查其内皮型NOS(eNOS)以及诱导型NOS(iNOS)蛋白水平.用SPSS 13.0软件对数据进行统计学分析.结果 12周龄时高血压组大鼠血压明显高于正常对照组[(24.1±0 5) kPa vs (15.9±0.3) kPa](P<0.05).12周龄时高血压组大鼠主动脉组织中NO水平较正常对照组主动脉中NO水平低[(7.2±1 7) μmol·(g prot)-1 vs (17.1±5.3) μmol·(g prot)-1](P<0.05).12周龄时高血压组大鼠主动脉中eNOS蛋白表达量与正常对照组大鼠比较差异无统计学意义[(0.5±0.2) vs (0.5±0.3)](P>0.05);12周龄时高血压组大鼠主动脉中iNOS蛋白表达量显著低于正常对照组大鼠[(0.9±0.3) vs (1.5±0.5)](P<0.05).结论 自发性高血压大鼠主动脉中NO/NOS体系下调参与高血压的形成过程.     

高浓度氧对早产鼠肺一氧化氮合酶表达的影响

目的：明确高浓度氧对早产大鼠肺一氧化氮(nitric oxide, NO)合成及一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)表达的影响,以探讨内源性NO在新生儿高氧肺损伤中的作用。方法：3日龄早产鼠随机分为空气组和高氧组,检测实验3 d及7 d时两组肺湿重/干重比值(W/D),肺组织病理学改变,支气管肺泡灌洗液中NO含量及诱导型NOS(iNOS),内皮细胞型NOS(eNOS)在肺内的分布和表达(免疫组织化学方法)。结果：3 d时高氧组表现为急性肺损伤：充血、出血、炎性渗出;7 d时,W/D值高于空气组(5.54±0.41) vs (5.00±0.15),(P<0.05),病理改变依然明显。与空气组相比,暴露3 d及7 d时,高氧组灌洗液中的NO含量(17.06±5.86)和(23.75±4.07) μmol/L较空气组(5.59±2.03)和(7.93±2.33) μmol/L明显上升(P均<0.01)。高氧组肺气道和肺泡上皮细胞、炎症细胞iNOS表达强阳性,强度高于空气组(P<0.01),且高氧7 d组高于3 d组(P<0.01)。与空气组比较,7 d时高氧组气道上皮细胞eNOS表达增加(P<0.05)。结论：高氧可上调早产大鼠肺炎症细胞、上皮细胞NOS的表达,促进NO合成,提示内源性NO介导参与了高氧诱导的肺损伤。